1、實驗一 顯微鏡的使用及微生物形態的觀察一、目的1學習普通光學顯微鏡的使用方法（本實驗學習低倍鏡和高倍鏡的使用）。2通過對教學生物標本玻片或曝氣池活性污泥的觀察，認識微生物的形態。二、實驗器材1教學生物標本玻片或曝氣池活性污泥。2顯微鏡、目測微尺、物測微尺、載玻片、蓋玻片等。三、實驗步驟(一)顯微鏡的結構和各部分的作用圖81所示，是微生物檢驗常用的顯微鏡，其構造分機械和光學兩部分。機械部分主要包括：1鏡筒 鏡筒長度一般是160mm。它的上端裝有接目鏡，下端有回轉板。回轉板上一般裝有3個接物鏡。2載物臺 載物臺是放置標本的平臺，中央有一圓孔。使下面的光線可以通過。兩旁有彈簧夾，用以固定標本或載玻片

2、。有的載物臺上裝有自動推物器。3調節器 鏡筒內旁有兩個螺旋，大的叫粗調節器，小的叫細調節器，用以升降鏡筒。調節接物鏡與所需觀察的物體之間的距離。光學部分主要包括：1 接目鏡 一般使用的顯微鏡具有23個接目鏡，其上常刻有“5”、“l0”或“15”等數字及符號，意即使用時可放大5倍、l0倍或15倍。觀察微生物時常用放大l0倍或15倍的接目鏡。2接物鏡 接物鏡裝在回轉板上可分低倍鏡、高倍鏡和油鏡3種，其相應的放大倍數常是10、40(或45)l00(或90)。通常顯微鏡的放大倍數等于接物鏡與接目鏡放大倍數的乘積。例如，用放大40倍的接物鏡(高倍鏡)與放大10倍的接目鏡時所得的物象的放大倍數為40104

3、00，如果用放大15倍的接目鏡則放大倍數為4015600。接目鏡裝在鏡筒上端，在使用過程中并不經常變動，所以通常所謂的低倍鏡、高倍鏡或油鏡的觀察主要是指使用不同的接物鏡而言的。油鏡的放大倍數最大(90或100)。放大倍數這樣大的鏡頭，焦距就很短，直徑就很小，所以自標本玻片透過的光線，因介質密度(從玻片至空氣，再進入油鏡)不同，有些光線因折射或全反射，就不能進入境頭，致使射入的光線較少，物象顯現不清。所以為了不使通過的光線有所損失，須在油鏡與玻片中間加入和玻璃折射率（n=1.52）相仿的鏡油(香柏油， n=1.515)。因為這種接物鏡使用時須加鏡油，所以我們稱它為油鏡(圖82)。一般的低倍鏡或高

4、倍鏡使用時不加油，所以也稱干鏡。使用低倍鏡和高倍鏡時，一般作活體的觀察，不進行染色。在觀察細小動物時，低倍鏡主要用來區別動物的種類和看出它們的活動狀態，而高倍鏡則可看清動物的結構待征，低倍鏡容易看到標本的全貌，油鏡在大多數情況下是用來觀察染色的涂片。3集光器 集光器在載物臺的下面，用來集合由反光鏡反射來的光線。集光器可以上下調整，中央裝有光圈，用以調節光線的強弱。當光線過強時，應縮小光圈或把集光器向下移動。4反光鏡 反光鏡裝在顯微鏡的最下方至集光器。(二)顯微鏡使用和保護的方法1低倍鏡的使用法(1)置顯微鏡于固定的桌幾上，窗外不宜有障礙視線之物。(2)撥動回轉板，把低倍鏡移到鏡筒正下方，和鏡筒

5、連接而對直。(3)撥動反光鏡向著光線的來源處。同時用眼對準接目鏡(選用適當放大倍數的接目鏡)仔細觀察，使視野完全成為白色，這是光線已經通到鏡里的表示。(4)把載玻片放到載物臺上，要觀察的標本放到圓孔的正中央。(5)將粗調節器向下旋轉，同時眼睛注視接物鏡，以防接物鏡和載玻片相碰。當接目鏡的尖端距載玻片約0.5cm時停止旋轉。(6)把粗調節器向上旋轉，同時左眼向接目鏡里觀察。如標本顯出，但不十分清楚，可用細調節器調節，至標本完全清晰為止。(7)假如因旋轉粗調節器太快，致使超過焦點，標本不能出現時，不應在眼睛注視接目鏡的同時向下旋轉粗調節器，必須從第(5)步做起，以防因沒有把握的旋轉，使接目鏡與載玻

6、片碰觸。(8)在觀察時，最好兩眼都能同時睜開一面看一面畫出所看到的物象。2高倍鏡的使用法(1)使用高倍鏡以前，先用低倍鏡檢查，把要觀察的標本放到視野正中。(2)撥動回轉板使高倍和低倍兩鏡頭互相對換。當高倍鏡移動到載玻片時，往往鏡頭十分靠近載玻片。這時必須注意是否因高倍鏡靠近的緣故而使載玻片也隨著移動。如果載玻片有移動的現象，則應立刻停止推動回轉板，把高倍鏡退回原處，再按照使用低倍鏡的方法，校正標本的位置，然后旋動調節器，使鏡筒稍微向上，再對換高倍鏡頭。(3)當高倍鏡已被推到鏡筒下面時，向鏡內觀察所顯現的標本，往往不很清楚，這時可旋轉細調節器，上下移動，但不要過分移動。3油鏡的使用法(此節在實驗

7、三中學習)(1)如用高倍鏡放大，倍數還不夠，則須采用油鏡。用油鏡以前，先用高倍鏡檢查，把要觀察的標本放到視野正中。(2)用油鏡時，在載玻片上加一滴鏡油，然后撥動回轉板對換高倍鏡和油鏡，使油鏡頭尖端和油接觸，而后向接目鏡觀察。假如不清晰，可稍微轉動調節器，但切記不要用粗調節器。(3)用過油鏡后，必須用擦鏡紙或軟綢將載玻片和油鏡所粘著的油拭凈。必要時，可略蘸二甲苯少許，揩拭鏡頭，最后用擦鏡紙或軟綢擦干。4顯微鏡的保護法(1)顯微鏡應放置在干燥的地方，使用時須避免強烈的日光照射。(2)接物鏡或接目鏡不清潔時，應當用擦鏡紙或軟綢揩擦。(3)用完顯微鏡后，應當立即放到鏡匣中。(三)顯微鏡觀察(1)低倍鏡觀察1)在選定的接目鏡下，利用低倍鏡，確定目測微尺一格的長度(單位以m計)。2)觀察教學生物標本玻片或所制備的微生物標本玻片，畫出所見的形態草圖。3)記下觀察所用接目鏡和接物鏡的放大倍數和算出顯微鏡的放大倍數。(2)高倍鏡觀察1)改用高倍鏡觀察，畫出微生物的形態草圖，并與用低倍鏡所看到的比較，注