1、貫葉連翹提取物外經(jīng)貿(mào)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 前 言貫葉連翹提取物(St.Johns Wort Extract)是以貫葉連翹原料經(jīng)提取分離制成的產(chǎn)品。目前尚無相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)能夠遵循，為了規(guī)范貫葉連翹提取物在生產(chǎn)、貯存和運(yùn)輸過程中的質(zhì)量治理，特制定本標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C、附錄D為規(guī)范性要素。本標(biāo)準(zhǔn)由由中國醫(yī)藥保健品進(jìn)出口商會(huì)提出。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國商務(wù)部歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由中國醫(yī)藥保健品進(jìn)出口商會(huì)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)解釋。本標(biāo)準(zhǔn)由湖南九匯現(xiàn)代中藥有限公司、西安高科實(shí)業(yè)股份有限公司天誠醫(yī)藥生物工程分公司、中國醫(yī)藥保健品進(jìn)出口商會(huì)提出并負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)要緊起草人：曾建國、繆建榮、劉小苗、黃仁泉、關(guān)立忠貫 葉 連 翹

2、 提 取 物1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了貫葉連翹提取物的技術(shù)要求、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則和標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸、貯存要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于以貫葉連翹為原料經(jīng)提取而成的規(guī)格為總金絲桃素0.30%、貫葉金絲桃素3.0%的提取物。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓舞依照本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T5009.146-2003 植物性食品中有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多種殘留的測定SN/0339-95 出口茶葉中黃曲霉毒素

3、B1的檢驗(yàn)方法中華人民共和國藥典2000年版一部3結(jié)構(gòu)式總金絲桃素（Hypericin）、貫葉金絲桃素（Hyperforin）結(jié)構(gòu)式如下：4技術(shù)要求4.1工藝要求4.1.1植物基源 為藤黃科植物貫葉連翹(Hypericum perforatum L. )的干燥地上上半部分。4.1.2植物原料 秋末采收，除去泥沙，陰干。4.1.3工藝過程 用乙醇提取后，濃縮，干燥即得。4.2感官要求應(yīng)符合表1的要求。表1項(xiàng) 目 要 求色 澤 深棕色或棕褐色氣 味 氣香，味微苦外 觀 均勻、無可見異物的粉末4.3 理化要求應(yīng)符合表2的要求。表2項(xiàng) 目 指 標(biāo)粒度(80目篩的通過率，%) 90堆密度(g/100ml

4、) 松密度 3560緊密度 5575干燥失重(%) 8.0熾灼殘?jiān)?%) 10.0重金屬以Pb計(jì)/（mg/kg） 20砷鹽以As計(jì)/（mg/kg） 2農(nóng)藥殘留 六六六（mg/kg） 0.01滴滴涕（mg/kg） 0.01五氯硝基苯（mg/kg） 0.01黃曲霉毒素B1（g/kg） 5指標(biāo)成分含量（%） 總金絲桃素 0.30貫葉金絲桃素 3.0 4.4 衛(wèi)生要求應(yīng)符合表3的要求。表 3項(xiàng) 目 指 標(biāo)細(xì)菌總數(shù)（cfu/g） 10000霉菌及酶母菌數(shù)（cfu/g） 100大腸桿菌 不得檢出沙門氏菌 不得檢出金黃色葡萄球菌 不得檢出5 檢驗(yàn)方法5.1 感官檢驗(yàn)啟開試樣后，立即嗅其氣味和品其味道；另取試

5、樣適量置于白色瓷盤中觀看其色澤、外觀，并檢查有無異物。5.2 理化要求5.2.1 粒度按附錄A中規(guī)定的試驗(yàn)方法進(jìn)行測定。5.2.2 堆密度堆密度分為松密度和緊密度，按附錄B中規(guī)定的試驗(yàn)方法進(jìn)行測定。5.2.3 干燥失重按中華人民共和國藥典2000年版一部中附錄 G 規(guī)定的方法進(jìn)行測定。5.2.4 熾灼殘?jiān)粗腥A人民共和國藥典2000年版一部附錄中 J 規(guī)定的方法進(jìn)行測定。5.2.5 重金屬按中華人民共和國藥典2000年版一部中附錄 E 的第二法進(jìn)行測定。5.2.6 砷鹽按中華人民共和國藥典2000年版一部附錄 F 的第一法進(jìn)行測定。5.2.7 六六六、滴滴涕、五氯硝基苯按GB/T5009.14

6、6規(guī)定執(zhí)行。5.2.8 黃曲霉毒素B1按SN/0339的檢驗(yàn)方法進(jìn)行測定。5.2.9 指標(biāo)成分含量總金絲桃素和貫葉金絲桃素的含量分不按附錄C、附錄D中規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行測定。5.3 微生物指標(biāo)按中華人民共和國藥典2000年版一部中附錄 C 規(guī)定的方法進(jìn)行測定。6. 檢驗(yàn)規(guī)則6.1 批檢驗(yàn)：按中華人民共和國藥典2000年版一部中附錄規(guī)定的方法，并以混合均勻、在一定限度內(nèi)具有同一性質(zhì)和質(zhì)量的產(chǎn)品為同一批次進(jìn)行檢驗(yàn)。6.2 檢驗(yàn)分類6.2.1 出廠檢驗(yàn)產(chǎn)品出廠前必須經(jīng)生產(chǎn)廠質(zhì)量檢驗(yàn)部門按4.24.4的要求逐批次進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)合格并簽發(fā)質(zhì)量合格證明書的產(chǎn)品方可出廠銷售。6.2.2 型式檢驗(yàn)按第4章進(jìn)行

7、型式檢驗(yàn)。型式檢驗(yàn)每半年進(jìn)行一次，有下列情況之一者，亦應(yīng)進(jìn)行：a) 原料有較大變化時(shí)；b) 調(diào)整關(guān)鍵工藝時(shí)；c) 更換設(shè)備或停產(chǎn)后，重新恢復(fù)生產(chǎn)時(shí)；d) 出廠檢驗(yàn)與上次型式檢驗(yàn)結(jié)果有較大差異時(shí)。6.3 判定規(guī)則6.3.1 當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果有一項(xiàng)不符合本標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)，應(yīng)從同批產(chǎn)品中重新抽取兩倍量的樣品進(jìn)行復(fù)檢，并以復(fù)檢結(jié)果為準(zhǔn)。若復(fù)檢仍有一項(xiàng)指標(biāo)不合格時(shí)，則判該批產(chǎn)品為不合格。6.3.2 微生物項(xiàng)目中有任何一項(xiàng)不符合本標(biāo)準(zhǔn)，即判為不合格，不再復(fù)檢。6.3.3 型式檢驗(yàn)的判定同出廠檢驗(yàn)。7. 標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸、貯存7.1 標(biāo)簽7.1.1 包裝標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)注：貫葉連翹提取物、批號(hào)、規(guī)格（0.30%和3.0%）

8、、凈重、毛重、生產(chǎn)日期、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)。7.1.2 標(biāo)簽內(nèi)容清晰可見，標(biāo)簽粘貼牢固。7.2 包裝包裝材料應(yīng)符合食品衛(wèi)生要求。使用前應(yīng)對(duì)所用包裝材料進(jìn)行嚴(yán)格的衛(wèi)生檢查。桶裝后，應(yīng)加封封口簽。7.3 運(yùn)輸7.3.1 運(yùn)輸工具應(yīng)清潔、衛(wèi)生，不得與有毒、有害、有腐蝕性或有異味的物品混裝混運(yùn)。7.3.2搬運(yùn)時(shí)應(yīng)輕裝輕卸，運(yùn)輸時(shí)防止擠壓、曝曬、雨淋。7.4 貯存7.4.1產(chǎn)品不得與有毒、有害、有腐蝕性或有異味的物品混合存放。7.4.2產(chǎn)品應(yīng)貯存于陰涼、干燥的倉庫中。7.5 保質(zhì)期保質(zhì)期暫定二年，應(yīng)定期抽檢總金絲桃素和貫葉金絲桃素的含量。附錄A（規(guī)范性附錄）粒度的測定方法A.1 設(shè)備A.1.1 分樣篩（帶篩蓋與接

9、收盒），80目。A.1.2 天平，分度值0.1g。A.2操作程序A.2.1 取接收盒，將分樣篩置接收盒上，稱取約100g提取物粉末(m1,g)置分樣篩內(nèi)，將篩蓋蓋好。將分樣篩保持水平狀態(tài)，左右往返輕輕篩動(dòng)min,稱量接收盒內(nèi)的提取物粉末質(zhì)量（m2,g）。A.3計(jì)算通過率的計(jì)算方法見式（A.1）。通過率= m2/ m1100%（A.1）附錄B（規(guī)范性附錄）堆密度的測定方法B.1設(shè)備B.1.1 天平,分度值0.1g。B.1.2 玻璃量筒,100mLB.2 操作程序B.2.1 量筒的預(yù)備：取潔凈干燥的量筒，并稱量其質(zhì)量（m0 , g）。B.2.2 松密度的測定：將通過20目篩的樣品松緩地轉(zhuǎn)入量筒中至

10、（905）mL處，稱量量筒與樣品的質(zhì)量（m1 ,g）,精確到0.1g，并稍弄平粉末表面，讀取固體粉末的體積（V1 ,mL）。B.2.3 緊密度的測定：將上述盛有樣品的量筒放在臺(tái)面上（鋪有約5mm厚的橡膠），由2cm左右的高度自墜到臺(tái)面上，反復(fù)此操作約100次，量得壓緊后的粉末體積（V0,mL），接著上述操作約30次，量得粉末體積（V2,mL）。當(dāng)V0與V2相差小于2mL時(shí)，讀取終體積（V2, mlL，否則重復(fù)上述操作，直到符合為止。B.3 計(jì)算分不按式（B.1）和式（B.2）計(jì)算松密度和緊密度。松密度=（m1-m0）/V1100（B.1）緊密度=（m1-m0）/V2100（B.2）附錄C（規(guī)范

11、性附錄）總金絲桃素的含量測定方法C.1 方法提要樣品經(jīng)超聲提取后，采納紫外分光光度法測定，用汲取系數(shù)計(jì)算含量。C.2 儀器和用具C.2.1 分析天平：感量萬分之一。C.2.2 超聲波清洗儀（250W，20kHz）C.2.3 紫外分光光度計(jì)C.3 試劑和溶液C.3.1 甲醇，分析純。C.4 操作方法C.4.1取樣參照中華人民共和國藥典2000年版一部中附錄A 的方法取樣。C.4.2供試品溶液的制備取貫葉連翹提取物粉末約50mg，周密稱定，置50mL量瓶中，并加入約40mL甲醇溶液，置冷水浴中超聲提取15min，取出，放置10min，加甲醇溶液至刻度，搖勻。用雙層中速濾紙過濾，取續(xù)濾液即得供試液。

12、C.4.3測定方法紫外分光光度計(jì)以甲醇為空白，在590nm處測定汲取度。C.5 結(jié)果計(jì)算貫葉連翹提取物中總金絲桃素的含量按式（C.1）計(jì)算： A50總金絲桃素= 100（C.1）870100m式中：A 供試品溶液的汲取度；870金絲桃素的汲取系數(shù)；m 試樣質(zhì)量，單位為克（g）。附錄D（規(guī)范性附錄）貫葉金絲桃素1)的含量測定D.1 方法提要樣品經(jīng)超聲提取后，采納反相高效液相色譜法測定，以外標(biāo)法定量。D.2 儀器和用具D.2.1 分析天平，精度為十萬分之一。D.2.2 超聲波清洗儀：250W，20kHz。D.2.3 高效液相色譜儀（附紫外檢測器）。D.3試劑和溶液D.3.1 乙腈，色譜純。D.3.

13、2 甲醇，色譜純、分析純。D.3.3 水，二次蒸餾水。D.3.4 磷酸二氫鈉，分析純。D.3.5 貫葉金絲桃素對(duì)比品：純度95%以上，使用前應(yīng)在放有五氧化二磷的減壓干燥器內(nèi)干燥24h。D.4 色譜條件及系統(tǒng)適用性D.4.1 色譜條件a) 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱。b) 流淌相：甲醇-乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鈉溶液（200:300:100），經(jīng)0.45m濾膜過濾備用。c) 流速：0.8mL/min。d) 檢測波長：284nm。D.4.2 系統(tǒng)適用性理論塔板數(shù)按貫葉金絲桃素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。D.5 操作方法D.5.1 取樣參照中華人民共和國藥典2000年版一部附錄A的方法取樣。D.5.2 對(duì)比品溶液的制備周密稱取貫葉金絲桃素對(duì)比品約5mg，置于50mL棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。此溶液1mL含貫葉金絲桃素約0.1mg。D.5.3 供試品溶液的制備取貫葉連翹提取物粉末約0.15g，周密稱定，置于50mL棕色量瓶中，加入約40mL甲醇，超聲提取30min后取出，放置至室溫，加甲醇溶液至刻度，搖勻。用0.45m微孔濾膜過濾，濾液置于棕色試樣瓶中，即得供試液。D.5.4 測定方法分不周密吸取對(duì)比品溶液與供試品溶液5l注入液相色譜