1、附件10化妝品中乙醇胺等5種有機胺的檢測方法1適用范圍本方法規(guī)定了測定化妝品中乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二甲胺、二乙胺的離子色譜法。本方法適用于膏霜、乳、液、粉類化妝品中乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二甲胺、二乙胺 的含量測定。2方法提要化妝品中乙醇胺等5種有機胺用流動相提取后，經(jīng)含羧酸功能基的陽離子交換柱分離，電導(dǎo) 檢測器檢測，以保留時間定性，峰面積定量。對于陽性結(jié)果，可用氣相色譜-質(zhì)譜進行進一步確 證。本方法中乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二甲胺、二乙胺的檢出限、定量下限及取0.5g樣 品時的檢出濃度和最低定量濃度見表1。表1 5種有機胺的檢出限、定量下限、檢出濃度和最低定量濃度物質(zhì)名稱乙醇

2、胺二乙醇胺三乙醇胺二甲胺二乙胺檢出限（ng）4.54.594.54.5定量下限（ng）1515301515檢出濃度（pg/g）1818361818最低定量濃度（pg/g）606012060603試劑和材料除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，水為一級實驗用水。3.1甲烷磺酸，優(yōu)級純。3.2正已烷。3.3乙月青，優(yōu)級純。3.4無水乙醇，優(yōu)級純。3.5無水硫酸鈉。3.6乙醇胺，優(yōu)級純，純度99%O3.7二乙醇胺，優(yōu)級純，純度99%。3.8三乙胺，優(yōu)級純，純度99%O3.9二甲胺水溶液，純度33%。3.10二乙胺，優(yōu)級純，純度99%。3.11流動相：取0.16mL甲烷磺酸、50mL乙月青，加水稀釋至1L

3、，過濾后備用。3.12混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別稱取0.1g （精確到0.0001g）乙醇胺、二乙醇胺、二乙胺，及）.2g （精 確到0.0001g）三乙醇胺、0.3g （精確到0.0001g）二甲胺水溶液于100mL容量瓶中，用乙青定 容，配成如表2所示濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。吸取5.00mL儲備溶液于100mL容量瓶中，用流 動相定容至刻度，搖勻，得到50mg/L乙醇胺、二乙醇胺、二甲胺、二乙胺和100mg/L三乙醇胺 混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，再用流動相稀釋混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液配成系列濃度混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。表2 5種有機胺混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液及工作溶液濃度物質(zhì)名稱乙醇胺二乙醇胺三乙醇胺二甲胺二乙胺混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶

4、液濃度（mg/L）100010002000100010000.50.510.50.5混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃22422度（mg/L）10102010102525502525505010050504儀器和設(shè)備4.1離子色譜儀，具有電導(dǎo)檢測器，配色譜工作站。4.2氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀。4.3微量進樣器或自動進樣裝置。4.4超聲波清洗器。4.5離心機。4.6旋渦振蕩器。4.7分析天平，感量0.0001g。4.8分析天平，感量0.001go5測定步驟5.1樣品預(yù)處理稱取樣品約0.5g （精確至0.1 mg）于50 mL具塞比色管中，用流動相稀釋到刻度，加入2mL 正已烷，用渦旋振蕩器分散，超聲浸提10min，

5、并棄去有機相。從水相中吸取部分溶液，經(jīng)5000rpm 離心5min，用0.45pm濾膜過濾，濾液作為待測樣液備用。5.2測定5.2.1色譜參考條件色譜柱：Ion Pac SCS 1 （250 x4 mm， 5pm），Ion Pac SCG 1 （50 x4 mm， 5pm），柱填料為具 有羧基功能團的弱陽離子交換劑；流動相：2.5mmol/L甲烷磺酸一5%乙月青；流速：0.65mL/min；柱溫：25C；檢測器：電導(dǎo)檢測器；進樣量：25pL。5.2.2校準(zhǔn)曲線的制備取乙醇胺等5種有機胺系列濃度混合標(biāo)準(zhǔn)溶液25pL注入離子色譜儀，色譜工作站記錄、計 算各色譜峰的保留時間和峰面積，繪制5種有機胺的

6、峰面積一濃度校準(zhǔn)曲線。5.2.3樣品測定取待測樣液25pL注入離子色譜儀，根據(jù)色譜峰的保留時間定性，色譜工作站計算乙醇胺等 5種有機胺的濃度。5.2.4平行試驗按以上步驟，做兩份樣品的平行測定。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測試結(jié)果的絕對差值 不大于這兩次測定值的算術(shù)平均值的10%。6計算D x p x Vw （有機胺）=m式中：w （有機胺）化妝品中有機胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，pg/g；待測樣液中有機胺的質(zhì)量濃度，mg/L；V樣品定容體積，mL；m樣品取樣量，g;D 稀釋倍數(shù)（不稀釋則取1）。7回收率和精密度經(jīng)多家實驗室驗證，乙醇胺等5種有機胺的加標(biāo)回收率在86%114%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.2%6.

7、4%之間。8色譜圖色譜峰：1.乙醇胺（1.2mg/L）； 2.二乙醇胺（1.2mg/L）； 3.二甲胺（1.2mg/L）；4,三乙醇胺（2.4mg/L）； 5.二乙胺（1.2mg/L）9陽性結(jié)果的確證測定過程中如果有陽性結(jié)果，可采用氣相色譜-質(zhì)譜法（GC/MS）進行進一步確證。在相同的實驗條件下，如果樣品中檢出的色譜峰的保留時間和紫外光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)溶液中對應(yīng) 的成分一致，所選擇的檢測離子對的相對豐度比與相當(dāng)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的離子相對豐度比的偏差不 超過表3規(guī)定的范圍，則可判定樣品中存在對應(yīng)的待測成分。表3陽性結(jié)果確證時相對離子豐度比的最大允許偏差相對離子豐度（k）k50%50% k20%20% k1

8、0%k10%最大允許偏差20%25%30%50%9.1樣品前處理稱取化妝品樣品0.5g （精確至0.1mg），置于10mL具塞比色管中，加入約8mL無水乙醇， 用渦旋振蕩器充分振蕩、分散，超聲提取10 min，冷卻至室溫，用無水乙醇稀釋至刻度。加入3g無水硫酸鈉，輕輕搖蕩幾次，靜置，取上清液經(jīng)0.45pm濾膜過濾，濾液供GC/MS測定。9.2氣相色譜參考條件色譜柱：DB-624，60 mx0.25 mm，1.4 pm；載氣：高純He；進樣口壓力：8.2psi；汽化室溫度：300r；進樣方式：分流進樣，分流比：30： 1；程序升溫：起始溫度80r保持5min，以30r/min速率升至250C，保持18min；進樣量：1pL。9.3質(zhì)譜參考條件離子源：EI；離子源溫度：230C；接口溫度：250C；離子化能量：70eV；數(shù)據(jù)采集方式：全掃描方式（scan），質(zhì)量范圍28450。表4 5種有機胺定性離子對化合物名稱基峰（m/z）定性離子對（m/z）二甲胺4445/42二乙胺5830/73