1、關于實驗一生長譜法第一張，PPT共十二頁，創作于2022年6月實驗一用生長譜法測定微生物的營養要求第二張，PPT共十二頁，創作于2022年6月一、目的要求學習并掌握生長譜法測定微生物營養需求的基本原理和方法。第三張，PPT共十二頁，創作于2022年6月二、基本原理微生物的生長繁殖需要適宜的營養環境；在缺乏某種營養物質的、含有指示劑的培養基上接入某種微生物，再在接菌平板上置入這種營養物質，經一定條件培養后 , 即可通過指示劑變化情況來判斷對不同營養物質的利用情況。該法可以定性、定量地測定微生物對各種營養物質的要求，在微生物育種、營養缺陷型鑒定以及飲食制品質量檢測等諸多方面具有重要用途。第四張，P

2、PT共十二頁，創作于2022年6月三、實驗器材菌種 大腸桿菌 (Escherichia coli) 、枯草芽孢桿菌 (Bacillus subtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) 培養基（ 合成培養基） (NH4 )3 PO4 1 g, KCl 0.2 g, MgSO4 7H2O 0.2 g, 豆芽汁 10 mL, 瓊脂 20 g, 蒸餾水定容至 1L pH 7.05,加入 12mL 0.04%的溴甲酚紫作指示劑 (pH5.26.8) , 將顏色由黃色調為紫色。1 105 Pa滅菌 25 min。溶液和試劑 A葡萄糖、B乳糖、C麥芽糖、D蔗糖、E木糖、F半

3、乳糖。器具無菌培養皿、吸管、鑷子、牙簽、酒精燈、接種環等 , 另備試管無菌水 6支。第五張，PPT共十二頁，創作于2022年6月四、操作步驟配制培養基制作糖浸片將圓形打孔器 (d=0.8 cm) 打下的濾紙片 , 置入不同糖的飽和溶液中浸泡 10 min后 , 取出置 28培養箱中烘干備用 (最好置紫外燈下滅菌 20 30min)。制備菌懸液在已培養 24h的大腸桿菌 (E.coli) 等 3種斜面內分別倒入5ml無菌水，用接種環輕輕刮下菌苔，振蕩，制成菌懸液。制平板混菌法在無菌平板內加入上述菌懸液(1ml菌懸液/10ml培養基），倒入溶化冷卻至50OC左右的合成培養基，輕輕搖勻。涂布法將溶化

4、冷卻至50OC左右的合成培養基倒入無菌培養皿，待其凝固后，加入0.5ml菌懸液，用玻棒涂布均勻。第六張，PPT共十二頁，創作于2022年6月對照：培養基+菌0+糖0（1）處理：培養基+菌+糖（3混菌，3涂布）培養基+菌+糖0（3，混菌或涂布）培養基+菌0+糖（1）第七張，PPT共十二頁，創作于2022年6月分小區植糖在冷凝后的平皿背面 , 用記號筆畫出 6個均勻的植糖區域 (圖1) , 用無菌鑷子分別取代號為 A、B、C、D、E、F的 6種糖浸片各 1張對號放入用兩種方法接菌的平板的對應區域中 , 并輕輕按壓 , 以免在進行倒置培養時糖片脫離培養基平板。培養及觀察將已放置糖浸片后的平皿置于37

5、條件下 , 培養 18 24 h后 , 觀察濾紙片周圍有無菌落生長以及指示劑變色程度。四、操作步驟圖 1平板分區示意圖第八張，PPT共十二頁，創作于2022年6月五、實驗報告結果繪圖，表示大腸桿菌等三種菌在平板上的生長狀況。分析繪制表格，說明大腸桿菌等三種菌利用六種糖的情況。如何保證實驗結果的準確性？第九張，PPT共十二頁，創作于2022年6月實驗安排及分組情況第一次課（第四周）：講述實驗內容，完成實驗步驟1：配培養基，滅菌第二次課（第六周）：完成實驗步驟2、3、4、5、6等撰寫實驗報告分組4個人一組，分成6組，每組作兩種制平板方式。第十張，PPT共十二頁，創作于2022年6月注意事項1.做實驗之前要想好要準備哪些東西，準備多少；滅菌時要想好要滅哪些東西，要滅多少。2.要嚴格無菌操作。3.加入菌懸液后要趁培養基尚未凝固及時倒平板，否則將會出現平板尚未倒好培養基已經凝固于三角瓶中。4.放濾紙片時要對號入座并輕輕按壓