1、生態(tài)系建立的中心原則：生物體對(duì)其賴以生存的環(huán)境有影響，最先定植的是先鋒菌，先鋒菌定植后改變了環(huán)境，給后繼定植的細(xì)菌創(chuàng)造了定植條件。人體三大防御屏障：健康的皮膚和粘膜提供物理屏障；各種分泌液提供化學(xué)屏障；正常菌叢提供生物屏障。宿主體內(nèi)不同部位的菌叢不同，但在不同個(gè)體中同樣部位上菌叢組成基本相似。口腔生態(tài)系：頰上皮生態(tài)系；舌背部生態(tài)系；齦上牙菌斑生態(tài)系；齦下牙菌斑生態(tài)系嗜冷微生物：45；嗜溫：2537口腔菌叢主要成員：微需氧、兼性厭氧、厭氧菌口腔PH：58唾液中的抗體：主要是SIgA 齦溝液中抗體：主要是IgG最早定植菌：血鏈菌（S.sangius）唾液中細(xì)菌非特異抑制因素：溶菌酶、乳鐵蛋白、乳過

2、氧化物酶生物膜發(fā)育的5個(gè)階段：在表面形成條件薄膜；細(xì)菌分子對(duì)宿主表面吸附；同種細(xì)菌間聚集、一種細(xì)菌間共聚集；各菌種屬的繁殖；細(xì)菌從生物膜脫附著、傳播或定植到其他部位。牙面上獲得性薄膜：成分大致與唾液相似，黏蛋白、糖蛋白、血族抗原、免疫球蛋白成熟菌斑成熟的標(biāo)志：柵欄狀結(jié)構(gòu)齦上菌斑：G+占多數(shù)。光滑牙面：優(yōu)勢菌為鏈球菌。點(diǎn)隙裂溝：變鏈菌數(shù)量比光滑面多，陳舊裂溝菌斑中優(yōu)勢菌有從鏈球菌轉(zhuǎn)向乳桿菌的趨勢。齦下菌斑：少受自潔作用的影響，相對(duì)穩(wěn)定，有來自血液的豐富營養(yǎng)物質(zhì)，氧化還原電勢低，利于厭氧菌生長。附著性齦下菌斑：G+球菌、血鏈菌、輕鏈菌、G+桿菌（放線菌、內(nèi)氏菌、丙酸菌）。非附著性齦下菌斑：G-厭氧

3、菌、螺旋體、新月形單胞菌、二氧化碳噬纖維菌。牙菌斑成分：細(xì)菌：齦上：微需氧和需氧和兼性厭氧（鏈球菌、放線菌、奈瑟菌、乳桿菌） 齦下：厭氧菌（擬桿菌、梭形菌、韋榮菌、消化鏈球菌） 蛋白質(zhì)：主要來源于宿主唾液和血清。 非細(xì)胞成分：糖（葡聚糖、果聚糖），脂肪，無機(jī)物（鈣、磷、氟）羥基磷灰石：Ca10（PO4）6（OH）2釉質(zhì)成分：無機(jī)：95%， 鈣、磷：主要，從外到內(nèi)，逐漸降低。鈣分布不均，牙頸部最高 碳酸鹽：從外到內(nèi)，逐漸升高，釉牙本質(zhì)交界處最高，與成釉細(xì)胞代謝有關(guān) 鈉：從外到內(nèi)，逐漸升高，內(nèi)層含水高易與鈉結(jié)合 鎂：從外到內(nèi)，逐漸升高，不受口腔環(huán)境影響 氯：從外到內(nèi)，逐漸降低，不收口腔環(huán)境影響 氟

4、：從外到內(nèi)，逐漸降低，影響釉質(zhì)氟的因素：（1）釉質(zhì)蛋白：釉質(zhì)蛋白濃度高，氟高（2）組織液（3）外環(huán)境（4）生理性磨損：切緣氟相對(duì)減少，牙頸部大量堆積 其他微量元素：鐵、錫、硒，表層高 有機(jī)：0.40.8% 蛋白質(zhì)：兩大類：疏水性釉原蛋白（amelogenin）和酸性釉蛋白（enamelin） 釉原蛋白：疏水、低分子量、含較多非極性氨基酸 非釉原蛋白：分子量大小不等、親水、糖基化，釉叢蛋白、鞘蛋白、釉蛋白、成釉蛋白 蛋白水解酶：基質(zhì)金屬蛋白酶20（MMP20），絲蛋白酶 其他成分：水（4%重量），脂類（0.50.6%），枸櫞酸鹽（0.020.1%），糖釉質(zhì)硬度：牙萌出后硬度逐漸增加。老年恒年輕恒

5、成熟乳不成熟乳牙釉質(zhì)密度：表面最高，未萌牙已萌牙，乳牙恒牙釉質(zhì)表面化學(xué)：表層釉質(zhì)有一定的滲透性，表層無機(jī)物含量大、礦化程度高、密度硬度大、溶解性小牙本質(zhì)、牙骨質(zhì)成分：來自間質(zhì)細(xì)胞，70%無機(jī)成分，20%有機(jī)成分，10%水 無機(jī)成分：70%，碳、磷酸鹽，少量鈉、鎂、氯、微量元素，大部分與膠原纖維伴行，沉積在纖維內(nèi)，部分沉積于膠原纖維周圍，部分沉積在鈣球內(nèi)。 有機(jī)成分：20%，膠原，非膠原蛋白，蛋白多糖，脂類（中性脂、磷脂），枸櫞酸鹽（與鈣離子螯合） 膠原：牙本質(zhì)中90%，I型為主，少量V、IV，膠原纖維吸收礦物鹽沉積鈣化，牙本質(zhì)膠原比軟組織膠原穩(wěn)定，不易溶于酸和中性溶液。 牙骨質(zhì)中大部分為不溶性

6、膠原，I型為主。 非膠原蛋白（NCPs）：帶負(fù)電、酸性。成牙本質(zhì)細(xì)胞源性：牙本質(zhì)特異性蛋白（牙本質(zhì)磷蛋白、牙本質(zhì)涎蛋白），礦化組織特異性蛋白（牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白I、骨涎蛋白、骨鈣素、骨橋素、糖胺多糖）；非成牙本質(zhì)細(xì)胞源性：血清蛋白牙周組織膠原：牙齦：I、III主要，少量IV、V 牙周膜：I、III主要，少量V 牙槽骨：I為主 牙骨質(zhì)：I為主，少量III牙齦蛋白多糖：透明質(zhì)酸、硫酸肝素（7%）、硫酸皮膚素（60%）、4-硫酸軟骨素牙周膜蛋白多糖：主要是硫酸皮膚素牙槽骨牙骨質(zhì)蛋白多糖：主要是4-硫酸軟骨素口腔黏膜基底膜：膠原性蛋白質(zhì)：主要是IV型膠原 非膠原性糖蛋白：層黏鏈蛋白、蛋白多糖、纖維連結(jié)蛋白

7、、大皰性類天皰瘡（BP）抗原、獲得性大皰性表皮松解癥（EBA）抗原、KF-1抗原、錨原纖維抗原口腔黏膜結(jié)締組織：膠原蛋白：結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、不易分解、但可被膠原酶水解，代謝異常：惡性腫瘤、癌前狀態(tài) 彈力纖維：易變形的襯里黏膜含量最多 結(jié)締組織基質(zhì)：蛋白多糖（糖胺聚糖+蛋白質(zhì)），其間有組織液滲透，糖胺聚糖（透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素、硫酸膚質(zhì)、肝素、硫酸肝素）唾液成分：無機(jī)：0.2%，鈉鉀氯（主要），鈣磷（促進(jìn)釉質(zhì)成熟、防止釉質(zhì)脫礦、維護(hù)釉質(zhì)完整、促進(jìn)釉質(zhì)修復(fù)），氟（防齲），硫氰酸鹽（抗過氧化物酶系統(tǒng)）， 重碳酸鹽（最重要的緩沖系統(tǒng)），氫離子及氣體，硝酸鹽和亞硝酸鹽，微量元素 有機(jī)：腺泡細(xì)胞來源：漿液性腺泡：

8、富脯蛋白、富酪蛋白、富半胱蛋白、富組蛋白 粘液性腺泡：粘蛋白 導(dǎo)管上皮來源：乳鐵蛋白、溶菌酶、過氧化物酶 非腺泡細(xì)胞來源：血清滲出 唾液酶（唾液腺、細(xì)菌產(chǎn)生）：溶菌酶、淀粉酶、唾液過氧化物酶、蔗糖酶、葡糖基轉(zhuǎn)移酶（GTF） 其他成分：游離的葡萄糖、脂類、維生素、氨基酸、尿素、唾液素唾液蛋白的作用：參與獲得性膜形成 保護(hù)并覆蓋黏膜 維護(hù)釉質(zhì)完整，促進(jìn)再礦化 影響口腔微生物在口腔表面定居 介導(dǎo)口腔微生物間的集聚，調(diào)節(jié)微生物量唾液粘蛋白：MG1：1000kD，疏水結(jié)構(gòu)，與HA有親和力，結(jié)合牙面，參與獲得性膜形成，覆蓋黏膜MG2:250kD，無疏水結(jié)構(gòu)，與HA親和力不高，細(xì)菌粘附集聚，調(diào)節(jié)菌叢齦溝液化

9、學(xué)組成：細(xì)胞 電解質(zhì)：鈉、鉀 有機(jī)成分 特殊成分：膠原酶（collagenase）、組織蛋白酶、堿性磷酸酶、PGE2牙菌斑成分：蛋白質(zhì)：來源于細(xì)菌、唾液（淀粉酶、溶菌酶、IgM、IgA、IgG）、齦溝液（IgM、IgA、IgG） 碳水化合物：葡聚糖、果聚糖、細(xì)胞內(nèi)糖原 無機(jī)成分：鈣、磷酸鹽、氟牙菌斑形成和發(fā)育：形成獲得性膜：修復(fù)或保護(hù)釉質(zhì)表面，影響微生物的附著，作為菌斑微生物的底物和營養(yǎng)細(xì)菌附著平滑面牙菌斑：大多為G+，早期主要為鏈球菌，后期絲狀菌和桿菌出現(xiàn)較多窩溝牙菌斑：G+球菌和短桿菌為主，偶爾見酵母菌牙菌斑物質(zhì)代謝：糖的分解代謝：最終都變成丙酮酸，菌斑表層：有氧，CO2和H2O；菌斑深層

10、：無氧酵解 糖的合成代謝：細(xì)胞內(nèi)途徑：胞內(nèi)多糖（糖原）儲(chǔ)存 細(xì)胞外途徑：細(xì)胞外多聚糖 氮源化合物代謝：為細(xì)菌提供生長必須的氨基酸牙菌斑內(nèi)礦物質(zhì)轉(zhuǎn)換：唾液-菌斑間：鈣、磷、氟離子擴(kuò)散（濃度梯度） 菌斑-牙面間：菌斑內(nèi)礦物質(zhì)含量高于唾液，原因：1）、菌斑作為屏障阻擋牙面離子的擴(kuò)散，2）、菌斑中礦物質(zhì)與蛋白結(jié)合，3）、菌斑中細(xì)菌具有結(jié)合一些離子的能力菌斑PH降低1個(gè)單位，羥基磷灰石溶解性增加7倍，致齲；菌斑PH升高，形成磷酸鈣晶體，導(dǎo)致菌斑鈣化形成牙結(jié)石。生物礦化的機(jī)制：成核：離子結(jié)晶形成晶核 晶核的成長：運(yùn)送過程和表面過程 集聚：固相顆粒的聚集并沉淀 固相的轉(zhuǎn)換：鈣磷結(jié)晶-磷酸鈣-羥磷灰石參與DN

11、A復(fù)制的酶和蛋白因子：DNA多聚酶III（DNA合成，同時(shí)具有35方向的內(nèi)切酶功能，識(shí)別并水解配對(duì)錯(cuò)誤的堿基）、DNA前體材料、Mg2+、引物、DNA模板DNA引物酶、解鏈酶、拓?fù)洚悩?gòu)酶（消除DNA螺旋）、DNA連接酶、DNA單鏈結(jié)合蛋白（保持DNA合成區(qū)單鏈的穩(wěn)定）RNA的類型：信使RNA（mRNA）、核糖體RNA（rRNA）、轉(zhuǎn)運(yùn)RNA（tRNA）轉(zhuǎn)錄的方向：53分子克隆的材料：限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶、質(zhì)粒、噬菌體分子克隆的步驟：基因文庫的建立 目的基因的篩選 目的基因的分析核酸分子雜交原理：帶有互補(bǔ)的特定核苷酸序列的單鏈DNA或RNA混合，在一定條件下，其特定的同源區(qū)（即互補(bǔ)區(qū)）將根

12、據(jù)堿基互補(bǔ)原則形成雙鏈，如果形成雙鏈的兩條DNA單鏈來自不同的生物有機(jī)體，則稱為雜種核酸分子。核酸分子雜交的技術(shù)過程：探針制備：與特定基因序列互補(bǔ)，帶有示蹤物 待測核酸處理（變性）：虹吸或電泳作用將待測基因轉(zhuǎn)移、固定到固相基質(zhì) 雜交及漂洗：帶待測DNA單鏈的膜放入含探針的溶液中雜交，漂洗去掉游離的沒有雜交的探針分子核酸雜交的類型：點(diǎn)雜交、southern雜交PCR步驟：DNA變性 引物與靶DNA退火 引物延伸TaqDNA多聚酶：熱穩(wěn)定性，高特異性，適宜較長DNA片段的擴(kuò)增PCR所需因素：TaqDNA多聚酶、模板、引物、底物濃度（dNTP濃度相等）、溫度（變性溫度：94，2030秒；復(fù)性溫度：5

13、560，30秒；延伸溫度：72）、循環(huán)次數(shù)（2530）釉基質(zhì)特征：釉原蛋白：分泌階段主要成分，90%，AMEL基因，牙齒特異性基因，位于X染色體上，突變與X連鎖的釉質(zhì)發(fā)育不全相關(guān)釉蛋白：成釉細(xì)胞最早分泌的釉基質(zhì)蛋白，ENAM基因，牙齒特異性基因，突變與常染色體顯性或隱形遺傳的釉質(zhì)發(fā)育不全有關(guān)成釉蛋白：5%，N段多肽相對(duì)穩(wěn)定，存在于釉質(zhì)各層；C段多肽降解消失，僅存在于釉質(zhì)外層。AMBN基因，高表達(dá)于成釉細(xì)胞，低表達(dá)于成牙本質(zhì)細(xì)胞和前成牙本質(zhì)細(xì)胞。釉叢蛋白：發(fā)育期、成熟期，酸性蛋白，位于釉牙本質(zhì)界，表達(dá)短暫，可能作為羥磷灰石晶體形成的成核中心，TUFT基因。蛋白水解酶：基質(zhì)金屬蛋白20（MMP20

14、），鈣依賴性蛋白，基因突變與常染色體隱形遺傳的釉質(zhì)發(fā)育不全相關(guān)；絲蛋白酶，降解釉質(zhì)蛋白，KLK4基因，突變與常染色體遺傳的釉質(zhì)發(fā)育不全相關(guān)。牙本質(zhì)細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）：無機(jī)物（70%）：羥基磷灰石水（12%）有機(jī)物（18%）：膠原（90%） 非膠原蛋白（10%）：成牙本質(zhì)細(xì)胞源性：牙本質(zhì)特異性蛋白：牙本質(zhì)磷蛋白、牙本質(zhì)涎蛋白礦化組織特異性蛋白：骨涎蛋白、骨鈣素、牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1多組織非特異性蛋白：骨橋素、糖胺多糖 非成牙本質(zhì)細(xì)胞源性：IgG、白蛋白、2HS-糖蛋白變鏈菌致齲的特征：1、能牢固粘附至牙面 2、能利用外源性糖類（特別是蔗糖）迅速產(chǎn)生乳酸 3、能利用外源性糖產(chǎn)生細(xì)胞內(nèi)多糖，在外源性糖

15、缺乏時(shí)利用細(xì)胞內(nèi)多糖產(chǎn)酸 4、能在酸性環(huán)境（PH5）生存，并繼續(xù)產(chǎn)酸，具較強(qiáng)的耐酸性變鏈菌屬致齲毒力因子：葡糖基轉(zhuǎn)移酶（GTF）：合成葡聚糖，誘導(dǎo)細(xì)菌對(duì)牙面的粘附 GTFI合成非水溶性葡聚糖 GTFS合成水溶性葡聚糖，作為引物 GTFSI合成水溶性和非水溶性葡聚糖 表面蛋白（PAC、SPA）：疏水鍵，介導(dǎo)粘附 葡聚糖結(jié)合蛋白（GBP）：與葡聚糖結(jié)合，但不能合成葡聚糖 果糖基轉(zhuǎn)移酶（FTF）：裂解蔗糖為果糖合成果聚糖果聚糖酶（Fru）：外源性糖缺乏時(shí)裂解果聚糖，為細(xì)菌提供營養(yǎng)核酸雜交法檢測牙周病相關(guān)細(xì)菌的探針：全基因組探針，克隆DNA片段探針，特定探針，寡核苷酸探針探針的驗(yàn)證：特異性驗(yàn)證：與代表

16、50種菌屬的大量菌株雜交，某些相近屬間細(xì)菌DNA雜交 敏感性驗(yàn)證：同屬內(nèi)各地區(qū)分離的大量菌種（100株以上）16SrRNA：進(jìn)化保守的生物大分子，保守區(qū)、可變區(qū)常用的DNA多態(tài)性標(biāo)記：限制性片段長度多態(tài)性（RFLP） 小衛(wèi)星和微衛(wèi)星標(biāo)記 單核苷酸多態(tài)性標(biāo)記（SNP）遺傳性乳光牙本質(zhì)致病基因：DGI-II，定位于4號(hào)染色體長臂的1221區(qū)間口腔防御系統(tǒng)組成：牙齒、牙周上皮、口腔黏膜組織、口腔淋巴組織、唾液、齦溝液唾液防御的機(jī)制：1、機(jī)械沖洗 2、在牙齒和口腔黏膜表面形成保護(hù)性薄膜，液相防御系統(tǒng) 3、維持表面完整，避免有害物質(zhì)的直接作用 4、抗菌物質(zhì)的防御作用唾液防御系統(tǒng)：非特異性物質(zhì)：粘蛋白、溶

17、菌酶、乳鐵蛋白、唾液過氧化物酶 特異性物質(zhì)：SIgASIgA：漿細(xì)胞分泌，兩個(gè)單體IgA，J鏈+一個(gè)分泌片斷，唾液的主要抗體，口腔局部免疫齲病：主要致病菌變性鏈球菌，影響因素：致齲菌、糖類、宿主因素（唾液/牙齒），機(jī)體的免疫功能變形鏈球菌的抗原物質(zhì)：GTF（葡萄基轉(zhuǎn)移酶）、PAc（表面蛋白抗原）、GBPs（葡聚糖結(jié)合蛋白），促進(jìn)或協(xié)助細(xì)菌的粘附，可刺激局部或全身免疫反應(yīng)的發(fā)生牙髓病免疫病理特點(diǎn)：體液免疫、細(xì)胞免疫同時(shí) 炎癥牙髓中既有產(chǎn)生抗體的淋巴細(xì)胞、IgA、IgM、IgE，也有致敏T根尖周病免疫病理特點(diǎn)：體液免疫、細(xì)胞免疫同時(shí) 炎癥根尖周組織中有多種免疫細(xì)胞，IgG、IgA、IgM、IgE、

18、C3引起根尖周免疫的抗原：根管內(nèi)各種細(xì)菌及其代謝產(chǎn)物 變性或壞死的牙髓組織及其分解產(chǎn)物常見口腔黏膜超敏反應(yīng)：唇血管神經(jīng)性水腫、藥物性口炎、接觸性口炎、多型性紅斑、光化性唇炎常見口腔自身免疫?。簩こＬ彀挴彛嚎辜?xì)胞抗體 大皰性天皰瘡：抗基底膜抗體 舍格倫綜合征：抗DNA抗體、抗唾液腺抗體 慢性紅斑狼瘡 復(fù)發(fā)性口腔潰瘍 口腔扁平苔蘚獲得性免疫缺陷綜合征：HIV感染TH細(xì)胞，TH減少，TH/TS下降，巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞異常，活性下降牙槽骨：密質(zhì)骨：機(jī)械支撐、保護(hù)作用 松質(zhì)骨：代謝功能頜骨：膜內(nèi)化骨，沒有軟骨化骨牙周膜：牙周纖維：主纖維素（沙比纖維）：I型膠原，還存在III、V、VI、XII、XIII

19、 細(xì)胞成分：成纖維細(xì)胞（主要細(xì)胞，增殖能力比牙齦成纖維細(xì)胞強(qiáng)，表達(dá)堿性磷酸酶） 未分化干細(xì)胞 基質(zhì)：粘蛋白、糖蛋白，咀嚼力的緩沖系統(tǒng)骨基質(zhì)中其他成分：骨鈣素、骨涎蛋白、骨橋蛋白、骨黏連蛋白、生長因子、骨形成蛋白破骨細(xì)胞鑒定標(biāo)準(zhǔn)：1、細(xì)胞表面降鈣素受體陽性 2、抗酒石酸磷酸酶染色陽性 3、可以在骨表面形成骨吸收陷窩破骨細(xì)胞來源于造血系統(tǒng)單核細(xì)胞，與巨噬細(xì)胞有共同前體。影響前列腺素產(chǎn)生的因素：1、許多影響組織改建的激素、生長因子和細(xì)胞激肽 2、前列腺素自身放大 3、機(jī)械力骨改建的調(diào)節(jié)因子：白細(xì)胞介素-1（IL-1）、腫瘤壞死因子（TNF）、轉(zhuǎn)化生長因子-1（TGF-1）、胰島素樣生長因子（IGF）

20、、成纖維細(xì)胞生長因子（FGF）引起牙槽骨改建的關(guān)鍵不是力值大小，而是力在組織中的分布Illizarov效應(yīng)：1、牽張力影響組織的新生和生長2、血供和負(fù)荷影響骨與關(guān)節(jié)的形狀體外細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)： 1、貼壁型細(xì)胞：上皮型細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、游走型細(xì)胞、多形型細(xì)胞2、懸浮型細(xì)胞：癌細(xì)胞、血液白細(xì)胞分散組織的方法：1、機(jī)械分離法：用吸管或注射器針頭反復(fù)吸吹液體，分散組織細(xì)胞。常用于纖維成分少、質(zhì)地較軟的組織，如腦組織、胚胎組織、某些腫瘤組織。此法簡便，但對(duì)組織細(xì)胞有一定損害。2、消化分離法：結(jié)合生化和化學(xué)手段將已經(jīng)剪碎的組織進(jìn)一步分散的方法，常用消化劑有消化酶和螯合劑。常用于消化傳代細(xì)胞。培養(yǎng)細(xì)胞的人工純化方法：酶消化法、機(jī)械刮除法、反復(fù)貼壁法、克隆法、培養(yǎng)基限定法、流式細(xì)胞儀分離法、免疫磁珠細(xì)胞凍存與復(fù)蘇原則：慢凍快融牙髓細(xì)胞培養(yǎng)方法：組織塊法、酶消化法細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)：長梭性，有突起，核圓或橢圓，居中免疫組化染色：波形蛋白陽性，角蛋白陰性，來源于中胚層生長特點(diǎn)：生長較快，傳代后生長，曲線呈S形，可復(fù)層生長，形成細(xì)胞結(jié)節(jié) 功能特點(diǎn)：堿性磷