1、腸桿菌科（表）第9章 腸桿菌科一大群居住在人和動(dòng)物腸道中生物學(xué)性狀近似的G-桿菌多數(shù)是腸道的正常菌群有44個(gè)菌屬，170個(gè)以上的菌種少數(shù)為致病菌，是胃腸傳染病的最重要病原菌1第1頁(yè)，共37頁(yè)。共同特性1.相似的形態(tài)染色 中等大小兩端鈍圓的G-桿菌,無(wú)芽胞,多數(shù)有周鞭毛,大多有菌毛,少數(shù)有莢膜或包膜。 光滑型菌落,有的有型溶血,在液體培養(yǎng)中呈均勻混濁生長(zhǎng)。2.簡(jiǎn)單的培養(yǎng)條件2第2頁(yè)，共37頁(yè)。S-S平板3.活潑的生化反應(yīng)腸道致病菌與非致病菌鑒定中重要的生化反應(yīng)乳糖發(fā)酵試驗(yàn)?zāi)c道非致病菌（埃希菌+）志賀菌、沙門菌等-3第3頁(yè)，共37頁(yè)。4.抗原構(gòu)造復(fù)雜鞭毛抗原（H）K或Vi抗原菌體抗原(O)4第4頁(yè)

2、，共37頁(yè)。5.抵抗力 不強(qiáng) 用膽鹽、煌綠等可 制備腸道桿菌選擇 性培養(yǎng)基來(lái)分離腸 道致病菌。 6.易變異溶源性轉(zhuǎn)換生化反應(yīng)性變異通過(guò)引起耐藥性變異毒力性變異接合轉(zhuǎn)導(dǎo)5第5頁(yè)，共37頁(yè)。 7.致病物質(zhì)8.傳播方式污染的飲水及食物、經(jīng)消化道傳播。 內(nèi)毒素是腸道桿菌的主要致病物質(zhì)，部分腸桿菌產(chǎn)生外毒素致病。6第6頁(yè)，共37頁(yè)。第一節(jié) 埃希菌屬 Escherichia是人類和動(dòng)物腸道中的正常菌群出生后數(shù)小時(shí)就進(jìn)入腸道，并終生伴隨以大腸埃希氏菌（E.coli）最為重要7第7頁(yè)，共37頁(yè)。絕大多數(shù)為正常菌群，一般不致病但可條件致病某些帶有致病基因的血清型，引起腸道感染細(xì)菌居住部位改變引起的腸外感染：尿路

3、感染最常見少數(shù)致病菌株可致病8第8頁(yè)，共37頁(yè)。 在分子生物學(xué)和基因工程實(shí)驗(yàn)中重要的實(shí)驗(yàn)材料和研究對(duì)象大腸桿菌也是重要的實(shí)驗(yàn)材料和研究對(duì)象9第9頁(yè)，共37頁(yè)。 一、生物學(xué)性狀 （一）形態(tài)與染色 無(wú)芽胞，大多有周身鞭毛。有普通菌毛與性菌毛，有多糖包膜，G-桿菌。(圖1)(圖2)10第10頁(yè)，共37頁(yè)。（二）培養(yǎng)特性 兼性厭氧23mm、灰白色S型菌落。 有的有型溶血。能產(chǎn)生大腸菌素。 葡乳麥甘蔗 尿素酶 H2S IMViC 動(dòng)力 - - + + - - +（三）生化反應(yīng)11第11頁(yè)，共37頁(yè)。 （四）抗原構(gòu)造 有O、K、H三種抗原。 O抗原:為脂多糖，170多種，是分群的基礎(chǔ) K抗原:100多種，

4、有抗吞噬和補(bǔ)體殺菌作用，與細(xì)菌毒力有關(guān)。分為L(zhǎng)、A、B三種。一個(gè)菌株一般只含一個(gè)型別的K抗原。 H抗原:50多種，與運(yùn)動(dòng)有關(guān)。 表明大腸桿菌血清型方式是按OKH排列12第12頁(yè)，共37頁(yè)。（五）抵抗力對(duì)熱的抵抗力較其他腸道桿菌強(qiáng)膽鹽、煌綠等對(duì)大腸桿菌有抑制作用對(duì)磺胺類、鏈霉素、氯霉素、慶大霉素等 敏感，但易耐藥。13第13頁(yè)，共37頁(yè)。二、致病性和免疫性14第14頁(yè)，共37頁(yè)。1黏附素 定植因子抗原、(CFA/)、集聚黏附菌毛、（AAF/）、束形成菌毛(Bfp)、緊密黏附素、P菌毛、Dr菌毛、型菌毛、侵襲質(zhì)粒抗原(Ipa)蛋白等。 使人類致瀉的為CFA、CFA，有較強(qiáng)的免疫原性,能刺激機(jī)體產(chǎn)生

5、特異性抗體。 使細(xì)菌能緊密黏著在泌尿道和腸道細(xì)胞上。 致病物質(zhì)15第15頁(yè)，共37頁(yè)。2.外毒素 除內(nèi)毒素、莢膜、載鐵蛋白、型分泌系統(tǒng)外,還能產(chǎn)生多種類型的外毒素： 志賀毒素和（Stx-1,Stx-2） 耐熱腸毒素a和b（STa, STb） 不耐熱腸毒素和（LT-,LT-） 溶血素A(HlyA)16第16頁(yè)，共37頁(yè)。 1腸道外感染： 以化膿性和泌尿系感染為主，多為內(nèi)源性感染。 （1）敗血癥：嬰兒、年老體弱、慢性消耗性疾病 、大面積燒傷患者,可侵入血流, 引起敗血癥,占45%。 （2）新生兒腦膜炎：1歲內(nèi)多見。 （3）泌尿系統(tǒng)感染：尿路致病性大腸埃希菌 （UPEC）所致疾病17第17頁(yè)，共37

6、頁(yè)。2腸內(nèi)感染（胃腸炎）： 根據(jù)其致病機(jī)理不同分：菌株作用部位疾病與癥狀致病機(jī)制ETEC小腸旅行者腹瀉；嬰幼兒腹瀉；水樣便，惡心，嘔吐，腹痛，低熱質(zhì)粒介導(dǎo)LT和ST腸毒素，大量分泌液體和電解質(zhì)；黏附素EIEC大腸水樣便，繼以少量血便，腹痛，發(fā)熱質(zhì)粒介導(dǎo)侵襲和破壞結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞EPEC小腸嬰兒腹瀉；水樣便，惡心，嘔吐，發(fā)熱質(zhì)粒介導(dǎo)A/E組織病理變化，伴上皮細(xì)胞絨毛結(jié)構(gòu)破壞，導(dǎo)致吸收受損和腹瀉EHEC大腸水樣便，繼以大量出血，劇烈腹痛，低熱或無(wú)，可并發(fā)HUS、血小板減少性紫癜溶原性噬菌體編碼Stx-I或Stx-II，中斷蛋白質(zhì)合成; A/E損傷，小腸絨毛結(jié)構(gòu)破壞，導(dǎo)致吸收受損EAEC小腸嬰兒腹瀉

7、；持續(xù)性水樣便，嘔吐，脫水，低熱質(zhì)粒介導(dǎo)集聚性粘附上皮細(xì)胞，伴絨毛變短，單核細(xì)胞浸潤(rùn)和出血，液體吸收下降18第18頁(yè)，共37頁(yè)。致病物質(zhì)定植因子腸毒素:LT、ST內(nèi)毒素K抗原各型大腸埃希菌引起胃腸炎的機(jī)制（1）腸產(chǎn)毒性大腸桿菌 （Enterotoxigenic E. coli, ETEC）所致疾病5歲以下嬰幼兒腹瀉旅游者腹瀉水樣便，惡心、嘔吐，腹痛，低熱19第19頁(yè)，共37頁(yè)。ETEC的腸毒素不耐熱腸毒素（LT）耐熱腸毒素（ST）STa：致瀉 STb：與人類疾病無(wú)關(guān)LT-：致瀉LT-：與人類疾病無(wú)關(guān)ETEC腸毒素：20第20頁(yè)，共37頁(yè)。 LT-LT-A：1個(gè)，A1為毒性部分B：5個(gè)，介導(dǎo)作用

8、與霍亂腸毒素有共同抗原關(guān)系21第21頁(yè)，共37頁(yè)。 STa 激活鳥苷環(huán)化酶,使胞內(nèi)cGMP ，改變空腸的液體運(yùn)轉(zhuǎn),使腸腔積液而導(dǎo)致腹瀉。 ST與霍亂毒素?zé)o共同的抗原關(guān)系。 引起嬰幼兒和旅游者腹瀉,常為自限性。22第22頁(yè)，共37頁(yè)。（2）腸侵襲性大腸桿菌（Enteroinvasive E.coli,EIEC）:致病物質(zhì)不產(chǎn)生腸毒素侵襲結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞并在其中生長(zhǎng)繁殖所致疾病主要侵犯較大兒童和成人腹瀉呈膿血便，有里急后重致病類似菌痢，較少見23第23頁(yè)，共37頁(yè)。（三）腸致病性大腸桿菌（Enteropathogenic E.coli,EPEC）嬰幼兒腹瀉致病機(jī)制黏附到小腸上皮細(xì)胞，破壞刷狀緣，導(dǎo)

9、致鄰近微絨毛破壞，A/E組織病理?yè)p傷，引起嚴(yán)重水樣腹瀉。Brett Finlay, University of British Columbia24第24頁(yè)，共37頁(yè)。（四）腸出血性大腸桿菌 （Enterohemorrhagic E.coli,EHEC）主要型別:O157:H7。致病因子:菌毛和毒素。 致病機(jī)制:細(xì)菌緊密粘附回腸末端、盲腸和結(jié)腸上皮細(xì)胞,釋放毒素(志賀毒素),裂解60S核糖體上的28S rRNA,中斷蛋白質(zhì)合成;A/E損傷,小腸絨毛結(jié)構(gòu)破壞,導(dǎo)致吸收受損，引起輕度水瀉、血性腹瀉、出血性結(jié)腸炎和溶血性尿毒綜合癥(HUS)。可逾萬(wàn)人流行、死亡率 3%5%。傳染源:牛肉、牛奶是EHE

10、C感染的重要傳染源。25第25頁(yè)，共37頁(yè)。（五）腸集聚型大腸桿菌（Enteroaggregative E.coli,EAEC）嬰兒、旅行者持續(xù)性水樣腹瀉致病機(jī)制黏附腸細(xì)胞表面聚集，形成磚狀排列。導(dǎo)致微絨毛變短，單核細(xì)胞浸潤(rùn)和出血產(chǎn)生腸毒素26第26頁(yè)，共37頁(yè)。 三、微生物學(xué)檢查法 (一)標(biāo)本:腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液等,腹瀉者取糞便。 (二)分離培養(yǎng)與鑒定 1、腸外感染 (1)涂片染色檢查27第27頁(yè)，共37頁(yè)。 (2)分離培養(yǎng) 觀察菌落并涂片染色鏡檢。 (3)鑒定 初步鑒定IMViC試驗(yàn)為“+、+、-、-”，最后鑒定采用一系列生化反應(yīng)。 泌尿系統(tǒng)感染還應(yīng)計(jì)數(shù)，每毫升尿含菌量

11、超過(guò)100,000時(shí)，才有診斷價(jià)值。 28第28頁(yè)，共37頁(yè)。2、腸內(nèi)感染 鑒定為大腸桿菌后,再檢測(cè)腸毒素、毒力因子和血清型。(1)ETEC 過(guò)去用動(dòng)物或細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)LT或ST,現(xiàn)用ELISA法或基因探針檢測(cè)。(2)EIEC 多無(wú)動(dòng)力,乳糖不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵,毒力(Senery)試驗(yàn)陽(yáng)性。29第29頁(yè)，共37頁(yè)。 (3)EPEC 用特異O、H抗血清測(cè)定特異血清型,也可用細(xì)胞培養(yǎng)或ELISA法。 (4)EHEC O157H7血清型多數(shù)對(duì)山梨醇不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵,VT毒素可用ELISA法測(cè)定,也可用PCR法結(jié)合基因探針檢測(cè)VT基因。 (5)EAEC 用液體培養(yǎng)-集聚試驗(yàn)檢測(cè)粘附性,或用探險(xiǎn)針技術(shù)測(cè)定EA

12、ST基因。30第30頁(yè)，共37頁(yè)。3、衛(wèi)生學(xué)檢測(cè) 大腸桿菌越多,表示樣品被糞便污染越嚴(yán)重,也表明樣品中存在腸道致病菌的可能性越大。 31第31頁(yè)，共37頁(yè)。3個(gè)大腸菌群/1L飲水100個(gè)細(xì)菌總數(shù)/1ml飲水衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)大腸菌群指數(shù)每1000ml水中大腸菌群數(shù)我國(guó)飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌總數(shù)每1ml或1g樣品中細(xì)菌總數(shù)5個(gè)大腸菌群/100ml瓶裝汽水、果汁等32第32頁(yè)，共37頁(yè)。 四、防治原則 疫苗接種預(yù)防已在畜牧業(yè)中廣泛研究。 預(yù)防人類ETEC感染、O157感染的疫苗正在研究 牛肉、牛奶等要徹底加熱消毒，其中的EHEC可能患出血性結(jié)腸炎。 尿道插管和膀胱鏡檢查應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌操作。對(duì)腹瀉病人應(yīng)進(jìn)行隔離治療。 抗生素治療應(yīng)在藥物敏感試驗(yàn)的指導(dǎo)下進(jìn)行。可選用慶大霉素、丁胺卡那霉素等。33第33頁(yè)，共37頁(yè)。34第34頁(yè)，共37頁(yè)。35第35頁(yè)，共37頁(yè)。36第36頁(yè)，共37頁(yè)。腸桿菌科中與醫(yī)學(xué)有關(guān)的常見菌屬和菌種 埃希菌