1、微生物知識及消毒與滅菌知識培訓微生物知識及消毒與滅菌知識培訓微生物知識及消毒與滅菌知識培訓 潔凈車間員工衛生及微生物知識培訓一、微生物的特點分布范圍廣生長速度快生存能力強堅強 潔凈車間員工衛生及微生物知識培訓一、微生物的特點分布范圍廣生長速度快生存能力強微生物包括： 我們所生活的環境中，到處都存在著大量的微生物。在一般空氣中，微生物達8003500個/m3，在土壤中達1500108個/g，在嚴重污染的水中可達107個/ml。（飲用水要求細菌總數100個/ml，大腸桿菌3個/ml。經水塔或貯水池貯存后，短期內可繁殖至105106個/ml。）人的頭皮上有140萬個/cm2，兩手上約有440萬個，1

2、g指甲污垢有38億個，1g糞便可達101000億個。可以說微生物是無處不在，無處不有。許多以前被人們認為是極端（高溫、高壓、強酸、強堿、低溫等）甚至是致死的環境，現在已發現生活著各種類型的微生物（稱為極端微生物）。事實說明，微生物有特別頑強的生存、繁殖和變異能力來適應環境。 二、微生物特點種類多、分布廣微生物在地球上幾乎無處不有，無孔不入，人的皮膚上，口腔，腸道里都有許多微生物。微生物聚集最多的地方是土壤，土壤是各種微生物生長繁殖的大本營，約占微生物總量的70-90%，任意取一把土或一粒土，就是一個微生物世界，不論數量或種類均最多。在肥沃的土壤中，每克土含有20億個微生物，即使是貧瘠的土壤，每

3、克土中也含有35億個微生物。空氣里懸浮著無數細小的塵埃和水滴，它們是微生物在空氣中的藏身之地。哪里塵埃多，哪里的微生物就多。迄今為止，我們知道的微生物約有10萬種，目前已知的種類只占地球上實際存在的微生物總數的20%，人類生產和生活中僅開發利用了已發現微生物種數的1%。 個體小、面積大生物的個體極其微小，必須借助顯微鏡放大幾倍、幾百倍、上千倍，乃至數萬倍才能看清。桿菌的寬度是0.5微米，因此80個桿菌“肩并肩”地排列成橫隊，也只有一根頭發絲的寬度。桿菌的長度約2微米，故1500個桿菌頭尾銜接起來僅有一顆芝麻長。 物體的表面積和體積之比稱為比表面積。大腸桿菌的比表面積是人的30萬倍。 吸收多、轉

4、化快微生物有驚人的繁殖速度，大多數微生物幾十分鐘內就可以繁殖一代，如細菌一般每2030分鐘既可分裂一次；微生物的食譜非常廣泛，凡是動植物能利用的營養，微生物都能利用，大量的動植物不能利用的物質，甚至劇毒的物質，微生物照樣可以視為美味佳肴。如大腸桿菌在合適條件下，每小時可以消耗相當于自身重量2000倍的糖，而人體則需要40年之久。 適應強、易變異多數細菌能耐0196的低溫；在海洋深處的某些硫細菌可在250300的高溫條件下正常生長；一些嗜鹽細菌甚至能在飽和鹽水中正常生活；產芽孢細菌和真菌孢子在干燥條件下能保藏幾十年、幾百年。由于微生物繁殖快，也可在短時間內產生大量變異的后代。正是由于這個特性，人

5、們才能夠按照自己的要求不斷改良在生產上應用的微生物，如青霉素生產菌的發酵水平由每毫升20單位上升到近10萬單位，利用變異和育種得到如此大幅度的產量提高。 三、微生物的類群和形態結構微生物按其結構、化學組成及生活習性等分為三大類：原核細胞型：細菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次氏體、螺旋體等真核細胞型：真菌非細胞型：病毒 噬菌體 芽孢桿菌 （細菌） 淡水中的螺旋菌 spirochetes . 蠟樣芽孢桿菌 蠟樣芽孢桿菌 蠟樣芽孢桿菌 蠟樣芽孢桿菌（細菌） 支原體掃描電鏡圖片支原體（mycoplasma）以前被認為是最小的能獨立存活的原核生物，以前也被認為是地球上迄今為止被發現的最小的細胞生物。全

6、世界90%的豬體內寄生著支原體。立克次氏體（rickettsiae），一種微小的寄生的細菌。上圖是動物的淋巴細胞，紅色的是寄生的立克次氏體。 青霉是種真菌，屬于子囊菌。 有的能產生青霉素，救了無數人的命。 產生無性孢子。根霉（Rhizopus)是種真菌，屬于接合菌。能產生無性孢子菌絲體的直徑約12 um黑的是孢子囊 噬菌體SARS病毒是一類新發現的冠狀病毒 禽流感病毒愛滋病毒 粘質沙雷氏菌的菌落特征 沙門氏菌的菌落特征 銅綠假單孢菌的菌落特征 弗氏志賀氏菌的菌落特征 粘質沙雷氏菌的菌落特征 放線菌的菌落特征 A：諾爾斯氏鏈霉菌； B：皮疽諾卡氏菌； C：酒紅指孢囊菌； D：游動放線菌； E：小

7、單胞菌； F：皺雙孢馬杜拉放線菌產抗菌素的放線菌的菌落特征A：卡特利鏈霉菌； B：弗氏鏈霉菌；C：吸水鏈霉菌金淚亞種；D：卡那霉素鏈霉菌；E：除蟲鏈霉菌； F：生磺酸鏈霉菌 各種曲霉的菌落 各種病原真菌的菌落 青霉的菌落 青霉的菌落 各種酵母菌的菌落 啤酒酵母的菌落 紅酵母的菌落 四、微生物的營養水分：水占細胞漿的70%90%，是細胞的重要組成成分。較普遍的觀點認為，只有在含水的環境中微生物才能存活。但也有人發現在無水碳氫化合物中微生物可長期存活。碳源：碳源是構成細胞的重要物質。有些微生物的碳源必須來自有機碳化合物如糖、蛋白質、脂肪、有機酸等（同時利用其化學能），屬異養型；有些微生物不需有機碳

8、化合物，以CO2為碳源，屬自養型（分為光能自養型和化能自養型）。氮源：氮是組成蛋白質和核酸的重要元素。無機鹽類：細菌所需無機鹽包括磷、硫、鎂、鐵、鉀、鈉、鈣、氯、錳、鋅、鈷、銅等。其中磷、硫、鎂、鉀、鈉、鐵需要量較多，其他只需微量。生長因子：生長因子是某些微生物生長發育所必需，而其自身又不能合成的一類營養物質。包括維生素、嘌呤和嘧啶。五、微生物生長的影響因素1、營養物2、PH值3、溫度4、氧氣5、滲透壓6、表面張力六、消毒與滅菌消毒與滅菌是微生物實驗技術中最基本的操作，從事藥品生產和檢驗的人員都應當了解消毒與滅菌的方法及其意義，嚴格遵守操作規程，否則會影響產品質量，危害患者安全。概念無菌不存在

9、活的生物（GMP指南）。 “無菌”從定義上來說是一個絕對的概念，但遺憾的是，在科學和技術高度發展的今天，藥品的絕對無菌即做不到，也無法加以證實。然而，無菌制劑的安全性要求人們設定無菌的相對標準。FDA、歐洲制藥工業界曾將百萬分之一微生物污染率作為滅菌產品“無菌”的相對標準，它和蒸汽滅菌后產品中微生物存活的概率為 10-6（即產品的無菌保證值為6），系同一標準的不同表示法。這一標準于1980起收錄于USP 中，如今已為世界各國普遍接受和采用。概念滅菌使達到無菌狀態的方法（GMP指南）。用物理或化學方法殺滅傳播媒介上所有的微生物，使其達到無菌（GB）。通常是指殺滅或除去全部活的微生物（包括繁殖體和

10、芽孢）。消毒用物理或化學方法殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物，使其達到無害化（GB）。通常是指殺死病原微生物的繁殖體，但不能破壞其芽孢。所以消毒是不徹底的，不能代替滅菌。概念無菌制劑不存在活的微生物的制劑（GMP指南）。非無菌制劑所含活的微生物量符合衛生學標準的制劑（GMP指南）。常用消毒劑 70%75%乙醇水溶液； 0.5%洗必泰溶于70%乙醇，再加入2%甘油，用于皮膚、器具等消毒；異丙醇 75%水溶液，用于皮膚、器具等消毒；甲醛 37%40%甲醛液89ml，再加入45g高錳酸鉀，每m3熏蒸量，密閉1224h，刺激性強；戊二醛 2%水溶液，用于空氣、器具等消毒。廣譜、高效、低毒，可殺芽孢和病

11、毒，毒性較輕；常用消毒劑新潔爾滅（苯扎溴銨） 0.1%水溶液，用于皮膚、粘膜、器具等消毒，有清潔和消毒雙重功效，抗菌譜較窄；杜滅芬（消毒寧） 0.05%0.1%水溶液，用于皮膚、器具等消毒；過氧乙酸 a、 0.2%0.5%水溶液；b、新配0.5%水溶液；c 、1g/m3； 用于器具等消毒，抗菌譜廣，可用于皮膚消毒殺滅某些病毒；熏蒸，但性質不穩定。乳酸 a、0.331mol/L；b、 11.5ml/m3熏蒸或與等量苯酚合用熏蒸 噴霧，用于空氣消毒，有強殺菌作用；熏蒸，密閉12h以上。麝香草酚 5%麝香草酚溶于50%乙醇，噴灑墻面、地面，殺霉菌。干熱滅菌常見的有火焰、燒灼、干烤和紅外線滅菌等。火焰

12、、燒灼：通常用于實驗室無菌操作中金屬或其它耐火材料制成的器具的滅菌。干烤和紅外線：利用干熱空氣或熱輻射進行滅菌。一般135145需35h，160170需2h以上，170180需1h以上，180200需0.51h。除熱原，則需25030min，或20045min，1802h。空氣傳熱慢，穿透力不強，故干熱滅菌時間長。干熱滅菌時烤箱內裝入物品應留有空隙，以利空氣流動，否則使箱內溫度不均，部分物品滅菌不徹底。濕熱滅菌通過熱蒸汽或沸水使蛋白質變性而殺滅微生物的方法。濕熱穿透力強，滅菌效果較干熱好。煮沸或流通蒸汽滅菌：常壓下沸水和蒸汽的溫度是100，一般處理3060min可殺死細菌繁殖體，但不能完全殺滅

13、芽孢。此法適用于不能高壓蒸汽滅菌的物品。低溫間隙滅菌（巴斯德滅菌法）：將物品先用6080加熱（或煮沸）1h，然后置2025保存24h（或常溫過夜），使其中殘存的芽孢萌發成繁殖體，再用以上條件滅菌，如此反復三次。本法適用于不耐高溫或高溫下易變質的物品，但很費時。高壓蒸汽滅菌（熱壓滅菌）超過一個大氣壓時，水的沸點高于100，反之亦然。高壓蒸汽滅菌就是通過加壓提高蒸汽溫度，滅菌效果最好。它簡便、經濟、可靠、無毒，是最可靠、應用最廣泛的滅菌法。此法適用于耐高溫和潮濕的物品。常用條件為：115.5 、30min； 121.5 、20min； 126.5、 15min。注意事項 a.必須完全排出滅菌器內的

14、空氣。否則會影響滅菌器內溫度達到規定的要求。b. 注意被滅菌物品的溫度。滅菌器內溫度與被滅菌物品的溫度一般是一致的，但在蒸汽輸入過快時，后者可能低于前者，所以升溫時要有一定的預熱時間。另外，降溫過快易引起玻璃炸裂。因此，對于一種滅菌產品，應制定一固定的滅菌曲線（像凍干曲線一樣）。c. 定期檢查滅菌器內溫度的準確性。化學滅菌利用化學試劑形成的氣體來殺滅微生物的方法。常用的滅菌劑為環氧乙烷（又稱氧化乙烯）。環氧乙烷是廣譜殺菌劑，能殺滅細菌、芽孢和多種病毒，還能殺死昆蟲及蟲卵。但由于環氧乙烷易燃易爆且有毒（有致變異性），用于藥品方面極有限，多用于醫療器械、塑料制品等滅菌。（不能用于橡膠和乳膠手套，能將其溶解。 濾過除菌利用細菌不能通過致密孔濾材的原理，除去對熱不穩定的藥品溶液或液體物質中的細菌的方法。過濾法一般只能除菌，不能除去支原體和