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文檔簡介

1、關于實驗二影響酶促反應的因素第一張,PPT共十七頁,創作于2022年6月一、實驗目的1通過實驗,觀察溫度、pH值、激活劑與抑制劑對酶促反應速度的影響。2能運用所學的生化知識對實驗結果進行正確的分析。第二張,PPT共十七頁,創作于2022年6月二、實驗原理利用淀粉及其水解產物的顏色反應,來比較唾液淀粉酶在不同條件下催化淀粉水解的程度,從而判斷溫度、pH、激動劑和抑制劑對酶的活性影響。淀粉糊精麥芽糖和葡萄糖藍色碘紫色紅色無色無色碘碘第三張,PPT共十七頁,創作于2022年6月二、實驗原理 在低溫時,酶活性降低,酶促反應速度較慢,甚至停止;隨著溫度升高,酶的活性恢復,反應速度加快;當達到最適溫度時,

2、酶的活性最大,酶促反應速度達到最大。人體內大多數的酶的最適溫度在37左右。溫度過高,酶變性失活,酶促反應速度下降,甚至停止。每種酶都有最適的pH值,在最適pH值時,酶的活性最大,酶促反應速度最快;偏離酶的最適pH均可引起酶蛋白變性而降低或失去活性。唾液淀粉酶的最適pH值為6.8。氯離子對唾液淀粉酶有激活作用;銅離子對唾液淀粉酶有抑制作用。第四張,PPT共十七頁,創作于2022年6月三、實驗材料1.1%淀粉溶液 取可溶性淀粉1g, 加5ml蒸餾水, 調成糊狀, 再加80ml蒸餾水, 加熱并不斷攪拌, 使其充分溶解, 放冷, 最后用蒸餾水稀釋至100ml。2.pH3.0緩沖液 取0.2mmol/L

3、Na2HPO4溶液205ml,0.1mol/L檸檬酸溶液795ml, 混合即成.3.pH6.8緩沖液 取0.2mmol/LNa2HPO4溶液772ml,0.1mol/L檸檬酸溶液228ml, 混合即成.4.pH8.0緩沖液 取0.2mmol/LNa2HPO4溶液972ml,0.1mol/L檸檬酸溶液28ml混合即成.第五張,PPT共十七頁,創作于2022年6月5.0.9%NaCl溶液 6.1% CuSO4溶液7.碘液 9.試管架 11.試管夾 12.滴管 13.白瓷板 14.恒溫水浴箱 15.電爐 16.燒杯第六張,PPT共十七頁,創作于2022年6月【注意事項】1.注意實驗器材的干凈,避免雜

4、質影響反應結果2.各管反應時間應嚴格控制,保證一致。第七張,PPT共十七頁,創作于2022年6月四、實驗方法稀釋唾液制備 用水漱口,含蒸餾水咀嚼2分鐘后,把唾液吐進燒杯中備用。(注:唾液淀粉酶活性具有個體差異,按下述各實驗方法進行實驗,有部分同學可能失敗,可重新操作,但在重做過程中,要根據第一次實驗結果改變稀釋唾液的用量,反應太慢,則增加稀釋唾液用量,如果反應太快,則減少稀釋唾液的用量)煮沸唾液的制備 取上述唾液約5ml,放入沸水中煮沸5分鐘,取出備用。第八張,PPT共十七頁,創作于2022年6月(一)溫度對酶促反應速度的影響管 號 123緩沖液(pH6.8)20滴20滴20滴1%淀粉溶液10

5、滴10滴10滴把三支管溶液搖勻,然后分別放至相應的溫度中水浴預溫預溫溫度 0 37 37預溫5分鐘后取出,繼續向各管加入相應唾液稀釋唾液10滴10滴 煮沸唾液10滴把三支管搖勻,然后分別放至相應的溫度中水浴10分鐘,加碘2滴水浴溫度 03737結果與分析第九張,PPT共十七頁,創作于2022年6月取白瓷板一塊,向各凹分別加1滴碘液,每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號管取溶液1滴,加到已加有碘液的小凹中,觀察顏色變化,直至與碘不呈色時(即只顯棕黃色時),向各管加碘液1滴,搖勻觀察顏色變化(切記勿搖動)。搖勻再觀察。第十張,PPT共十七頁,創作于2022年6月(二)pH對酶促反應速度的影響管號1231%

6、淀粉溶液10滴10滴10滴pH5.0緩沖液10滴pH6.8緩沖液10滴pH8.0緩沖液10滴稀釋唾液5滴5滴5滴把三支管搖勻,然后放至 37水浴10分鐘,加碘2滴搖勻結果與分析第十一張,PPT共十七頁,創作于2022年6月將各管混勻,放進37水浴箱中保溫。取白瓷板一塊,向各凹分別加1滴碘液,每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號管取溶液1滴,加到已加有碘液的小凹中,觀察顏色變化,直至與碘不呈色時(即只顯棕黃色時),向各管加碘液1滴,搖勻觀察顏色變化。第十二張,PPT共十七頁,創作于2022年6月(三)激活劑與抑制劑對酶促反應速度的影響管號12341%淀粉溶液10滴10滴10滴10滴pH6.8緩沖液10滴

7、10滴10滴10滴蒸餾水2滴氯化鈉溶液2滴CuSO4溶液2滴Na2SO4溶液2滴稀釋唾液5滴5滴5滴5滴把三支管搖勻,然后放至 37水浴10分鐘,加碘2滴搖勻結果與分析第十三張,PPT共十七頁,創作于2022年6月將各管搖勻,放進37水浴箱中保溫。取白瓷板一塊,向各凹分別加1滴碘液,每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號管取溶液1滴,加到已加有碘液的小凹中,觀察顏色變化,直至與碘不呈色時(即只顯棕黃色時),向各管加碘液1滴,搖勻,觀察各管顏色變化。 激活劑與抑制劑第十四張,PPT共十七頁,創作于2022年6月激活劑與抑制劑五、思考題1. 什么是酶的最適溫度?2. 什么是酶的最適pH?3. 激活劑與抑制劑對酶活性影 響實驗中設置第四管的作用 是什么?4. 什么是酶的特異性?第十五張,PPT共十七頁,創作于2022年6月(四) 酶的專一性對酶促反應的影響。加入物1號管2號管3號管PH值6.8緩沖液20滴20滴20滴1%的淀粉10滴10滴1%的蔗糖10滴煮沸唾液5滴 稀釋唾液5滴

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