1、 PAGE 7 銅綠假單胞菌耐藥因素觀察與耐藥機制的分析研究邱春華 王靜 劉玉敏滄州市人民醫院呼吸內科（河北滄州，061000）【摘要】目的：了解臨床銅綠假單胞菌（Pa)耐藥因素與耐藥機制的特點，為臨床合理使用抗菌素藥物治療提供參考依據。方法：選擇我科2011年6月至2013年6月感染患者送檢標本中所分離出的330株銅綠假單胞菌進行藥敏實驗測定，并對其菌株來源、耐藥性分布及耐藥機制等資料進行回顧性分析與總結。結果：銅綠假單胞菌耐藥性因素主要與耐藥機制和臨床不合理用藥相關，它顯示出了不同的抗菌藥物有著不同的耐藥機制，如患者使用抗菌素時間越長、住院時間越長、臨床使用抗菌素越廣泛及使用種類超過3種以

2、上等現象，也是造成銅綠假單胞菌耐藥的主要原因。結論：銅綠假單胞菌耐藥機制較復雜，它具有多重耐藥特性，因此做好臨床抗菌素耐藥性的檢測分析，充分考慮耐藥性機制，并嚴格掌握抗菌素使用范圍和劑量，盡量選用耐藥率較低的抗菌藥物，防止住院時間過長和抗菌素藥物長期使用及濫用，以防銅綠假單胞菌耐藥的發生。【關鍵詞】 銅綠假單胞菌；抗菌素；耐藥性因素；耐藥機制Study antimicrobial resistance of Pseudomonas aeruginosa factors and mechanisms of resistanceQiu ChunHua Wang Jing Liu YuMingRes

3、piratory Department of Cangzhou City Peoples Hospital（Cangzhou,Hebei,061000)【Abstract】Objective: To investigate the resistance factors and resistance mechanisms of Pseudomonas aeruginosa （Pa)，and provide a reference for the antibiotics reasonably. Methods: 330 strains of Pseudomonas aeruginosa were

4、isolated and made drug susceptibility test that samples were collected from infection patients during June 2011-June 2013 in respiration medicine, then the characteristics ,distribution and resistance mechanisms of strains were retrospectively analysed .Results: The resistant factors of Pseudomonas

5、aeruginosa associated with drug resistance mechanisms and clinical rational drug use，it shows different antibiotics have different resistance mechanisms . The longer of antibiotic use，the longer hospitalization and types of antibiotic used more than 3 species were also the key factors resulted in re

6、sistance of Pseudomonas aeruginosa. Conclusion: The resistance mechanisms Pseudomonas aeruginosa are complicated，so the drug susceptibility test is important for the antibiotics reasonably in clinical practice. In order to decrease the resistance rates of Pseudomonas aeruginosa，try to strict control

7、 the antibiotic use and dose range, prevent prolonged hospitalization and long-term use and abuse of antibiotic drugs.【Key words】 Pa；Antibiotics；Drug resistance；Resistance mechanisms隨著廣譜抗菌素在臨床廣泛使用，銅綠假單胞菌（Pa)在多種抗菌素中出現了極高的耐藥性，并有上升趨勢，且由于細菌的不斷變遷和耐藥率逐漸增多，而出現了多重不同耐藥銅綠假單胞菌1。其耐藥菌株的出現不僅具有耐藥率高和致病力強等特點，同時也嚴重影響

8、到醫院感染控制與臨床治療效果。本研究對330株銅綠假單胞菌耐藥因素及耐藥機制進行了觀察分析，其目的就是為了加強耐藥性的檢測，減少其發生，并為臨床合理使用抗菌素提供科學依據。現將銅綠假單胞菌耐藥因素與耐藥機制的分析報告如下。1 資料與方法1.1 一般資料：本組資料選擇我科2011年6月2013年6月感染患者所送檢的臨床標本當中而分離出的銅綠假單胞菌共330株為研究對象，其菌株的來源均為患者的痰液、膿液、尿液、血液、咽拭子、傷口分泌物等分離出的銅綠假單胞菌。其中銅綠假單胞菌在痰液中為220株、尿液41株、膿液32株、血液18株、咽拭子15株、傷口分泌物4株。以上所含的耐藥銅綠假單胞菌株均依據抗菌藥

9、物藥敏實驗進行菌種鑒定后而得到確認。1.2儀器與試劑：藥物敏感性試驗采用美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS)推薦的紙片擴散法（K-B法)測定銅綠假單胞菌對抗菌素的敏感性；質控菌株為銅綠假單胞菌ATCC27853和藥敏紙片等均購自原國家衛生部藥品生物制品鑒定所。其抗菌素藥敏紙片包括頭孢唑林、頭孢哌酮、頭孢噻肟、氨曲南、亞胺培南、慶大霉素、左氧氟沙星、頭孢他啶等藥物，藥敏紙片中抗菌素含量和紙片大小符合WHO規定。藥敏試驗培養基選自杭州天和微生物試劑公司MH肉湯與MH瓊脂。1.3方法：應用PCR檢測技術對住院患者分離出的銅綠假單胞菌330株進行系統分析，分離菌株嚴格按照臨床檢驗操作規程對送檢標本

10、進行測定2，并根據銅綠假單胞菌特點進行判斷。選取血瓊脂培養基上生長良好的革蘭陰性桿菌，測氧化酶試驗陽性者做菌種鑒定。1.4 統計學方法：數據采用SPSS13.0軟件進行分析處理。2 結果2.1銅綠假單胞菌在臨床標本中的分布：根據抗菌藥物藥敏實驗進行菌種鑒定后得知，在本研究330株銅綠假單胞菌中，有220株（66.6%)來源于痰液，有41株（12.4%)來源于尿液，有32株（9.6%)來源于膿液，有18株（5.4%)來源于血液，有15株（4.5%)來源于咽拭子，有4株（1.2%)來源于傷口分泌物，差異具有統計學意義（P0.05)。見表1。表1：銅綠假單胞菌在臨床標本中的分布情況（n=330株；%

11、)標本株數(n)百分率(%)痰液22066.6尿液4112.4膿液329.6血液185.4咽拭子154.5傷口分泌物41.22.2銅綠假單胞菌抗菌素耐藥機制與耐藥性情況：本結果顯示，銅綠假單胞菌耐藥機制呈多樣化，可對不同抗菌素有不同耐藥機制，其抗菌素使用越廣，耐藥性就越強。通過臨床證實，銅綠假單胞菌在呼吸道感染中高居首位，且在使用碳青霉烯類、喹諾酮類等抗菌素或使用種類3種及使用時間4周、住院時間3周、氣管插管7d等方面均是造成銅綠假單胞菌耐藥和感染的主要因素。經K-B法測定銅綠假單胞菌對抗菌素的藥敏試驗，我們發現銅綠假單胞菌耐藥性從高到低的抗菌素依次為：頭孢唑林、頭孢噻肟、頭孢哌酮、氨曲南、亞

12、胺培南、慶大霉素、左氧氟沙星、頭孢他啶，其耐藥性分別為96.6%、59.5%、54.4%、44.1%、32.7%、26.3%、19.0%、18.8.%，差異具有統計學意義（P0.05)。3討論銅綠假單胞菌是目前臨床最常見的院內感染條件致病菌，廣泛存在于自然界中，可引起人體各部位感染，該菌大多分布在感染患者的呼吸道、痰液、尿液、血液、傷口分泌物中并經試驗技術分離而來，尤其患有糖尿病、血液病、惡性腫瘤化療及術后長期使用抗菌素治療等患者易感染本菌，并可導致菌血癥或敗血癥等。所以準確監測分析銅綠假單胞菌耐藥原因，并探討其相關耐藥機制，將對當前臨床合理使用抗菌素提供重要參考價值。從本研究分析顯示，銅綠假

13、單胞菌耐藥性增加因素主要與耐藥機制和臨床不合理用藥等相關。首先是銅綠假單胞菌的耐藥機制較復雜，可攜帶多種耐藥基因，對不同抗菌素藥物有不同的耐藥機制，其臨床抗菌素使用越廣泛，而攜帶新耐藥基因的優勢菌和菌群量就越多3；其次碳青霉烯類、喹諾酮類、內酰胺酶類、氨基糖苷類等抗菌素是一類廣譜高效抗菌素，且該類抗菌素的抗菌能力極強，但隨著抗菌素在臨床廣泛使用，其耐藥菌株不斷增加，致使這些抗菌素藥物對銅綠假單胞菌的活性通過特殊的孔蛋白通道進行擴散，若一旦孔蛋白通道消失，則銅綠假單胞菌對抗菌素就會產生耐藥4。我們通過臨床觀察證實，銅綠假單胞菌對碳青霉烯類、喹諾酮類、內酰胺酶類、氨基糖苷類等抗菌素具有很高的多重耐

14、藥性，能天然抵抗多種抗菌素，且易在抗菌素治療中通過長時間延長治療或住院等多種途徑產生耐藥，尤其是以上這些抗菌素藥物使用時間4周、住院時間3周、患者氣管插管7d等都會增加銅綠假單胞菌的耐藥基因突變率。另外，本研究抗菌素藥敏試驗也表明，我科標本中分離的銅綠假單胞菌對抗菌素耐藥率從高到低的前3位是頭孢唑林（96.6%)、頭孢噻肟（59.5%)和頭孢哌酮（54.4%)，提示這可能是由于銅綠假單胞菌對抗菌素存在有多種耐藥機制，并在廣譜抗菌素使用的情況下，多重耐藥菌株被檢測出來的結果。綜上所述，隨著對銅綠假單胞菌耐藥因素與耐藥機制的深入研究，我們在規范化和合理化使用抗菌素治療的前提下，應采取有效措施加強標本的正確采集和細菌基因的耐藥監測，杜絕抗菌素藥物的不合理使用或濫用現象的發生，完善醫院感染控制措施，防止銅綠假單胞菌耐藥的發生。參考文獻1中華醫學會外科分會,中華外科雜志編輯委員會.圍手術期預防應用抗菌藥物指南J. 中華外科雜志,2006,44（23):1