1、單克隆抗體技術(shù),獲得了抗某種病原體的高純度單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()第39講動(dòng)物細(xì)胞工程一、單項(xiàng)選擇題1.(2018江蘇揚(yáng)州中學(xué)下學(xué)期開(kāi)學(xué)檢測(cè))植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)或方法與原理不相符的是()A.植物組織培養(yǎng)和單克隆抗體細(xì)胞的全能性B.纖維素酶、果膠酶處理植物細(xì)胞壁酶的專(zhuān)一性C.原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性D.紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)細(xì)胞增殖答案A植物的組織培養(yǎng)是將離體的細(xì)胞培養(yǎng)成植株的過(guò)程,體現(xiàn)細(xì)胞的全能性,單克隆抗體的制備過(guò)程沒(méi)有將細(xì)胞培養(yǎng)成個(gè)體,其原理屬于細(xì)胞增殖,A錯(cuò)誤;植物細(xì)胞壁的成分為纖維素和果膠,因此在植物的體細(xì)胞雜交時(shí),通常采用酶解法

2、(纖維素酶和果膠酶)去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁,這體現(xiàn)酶的專(zhuān)一性,B正確;原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程涉及細(xì)胞膜的融合過(guò)程,故體現(xiàn)細(xì)胞膜的流動(dòng)性這一結(jié)構(gòu)特點(diǎn),C正確;紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)中細(xì)胞要進(jìn)行有絲分裂,故體現(xiàn)了細(xì)胞增殖這一原理,D正確。2.(2018江蘇南京、鹽城二模)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述,正確的是()A.用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后,可用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液B.少數(shù)細(xì)胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性,是某些基因選擇性表達(dá)的結(jié)果C.根據(jù)在高倍鏡下觀察到基因突變的比例可推知某化學(xué)藥品的毒性D.PEG誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞,經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能得到優(yōu)良動(dòng)物個(gè)體答案A

3、用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后,可用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液,A正確;少數(shù)細(xì)胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性,是某些基因突變的結(jié)果,B錯(cuò)誤;基因突變?cè)诟弑剁R下是觀察不到的,C錯(cuò)誤;由于動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制,動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞不能培育成動(dòng)物個(gè)體,D錯(cuò)誤。3.(2018江蘇南京、鹽城二模)某小鼠生活過(guò)程中被多種病原體感染過(guò),科學(xué)家以該小鼠為實(shí)驗(yàn)材料,利用1A.被多種病原體感染過(guò)的小鼠體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生多種漿細(xì)胞B.經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞可分泌多種特異性抗體C.使用人鼠嵌合單克隆抗體進(jìn)行疾病治療可減少副作用的發(fā)生D.單克隆抗體的制備過(guò)程中應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)答案B被多種

4、病原體感染過(guò)的小鼠體內(nèi),B細(xì)胞會(huì)增殖分化形成多種不同的漿細(xì)胞,進(jìn)而產(chǎn)生多種抗體去對(duì)付不同的抗原,A正確;經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞,只能產(chǎn)生一種抗體,B錯(cuò)誤;使用人鼠嵌合單克隆抗體進(jìn)行疾病治療可減少副作用的發(fā)生,C正確;單克隆抗體的制備過(guò)程中應(yīng)用了細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),D正確。4.(2018江蘇蘇錫常鎮(zhèn)調(diào)研)西瓜花葉病毒(WMV)是危害西瓜與甜瓜等瓜類(lèi)作物的主要病害之一。為了能快速有效檢測(cè)出該病毒,研究人員利用WMV的病毒粒子免疫健康小鼠,進(jìn)而制備出了相應(yīng)的單克隆抗體。下列有關(guān)敘述正確的是()A.以WMV病毒粒子免疫健康小鼠,直接分離獲得分泌相應(yīng)抗體的B細(xì)胞B.從小鼠體內(nèi)中分離

5、獲得的B細(xì)胞,應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至10代左右C.用感染W(wǎng)MV的西瓜汁液,檢測(cè)經(jīng)篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞是否呈陽(yáng)性D.分別用未感染和感染W(wǎng)MV的西瓜汁液,檢測(cè)相應(yīng)的單克隆抗體的特異性答案C以WMV病毒粒子免疫健康小鼠,可以從小鼠脾臟中獲得多種B淋巴細(xì)胞,經(jīng)過(guò)篩選后可以獲得分泌相應(yīng)抗體的B細(xì)胞,A錯(cuò)誤;從小鼠體內(nèi)中分離獲得的B細(xì)胞實(shí)際上是漿細(xì)胞,已經(jīng)高度分化,不能分裂,B錯(cuò)誤;用感染W(wǎng)MV的西瓜汁液,檢測(cè)經(jīng)篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞是否呈陽(yáng)性,C正確;應(yīng)該用兩組感染W(wǎng)MV的西瓜汁液,其中一組加入單克隆抗體,另一組不加,檢測(cè)相應(yīng)的單克隆抗性的特異性,D錯(cuò)誤。5.(2018江蘇南通、徐州等六市二模)2018年1月國(guó)際頂

6、尖學(xué)術(shù)期刊Cell雜志報(bào)道,我國(guó)科學(xué)家以一只雌性獼猴胎兒成纖維細(xì)胞為核供體成功克隆兩只獼猴,成為全球首例體細(xì)胞克隆靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.這項(xiàng)技術(shù)證明高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞具有全能性B.研究中需要使用成熟卵母細(xì)胞作為移植核的受體2C.培育出的兩只雌性獼猴的基因組成幾乎完全相同D.克隆獼猴的成功為大量培育靈長(zhǎng)類(lèi)遺傳病模型動(dòng)物提供了可能答案A克隆的兩只獼猴是以一只雌性獼猴胎兒成纖維細(xì)胞為核供體發(fā)育而來(lái)的,該過(guò)程經(jīng)過(guò)了細(xì)胞核移植,只能說(shuō)明分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性,A錯(cuò)誤;卵母細(xì)胞含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),且體積比較大,容易操作,同時(shí)卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在促進(jìn)核基因表達(dá)的物質(zhì),因此研究中需

7、要使用成熟卵母細(xì)胞作為移植核的受體,B正確;克隆的兩只獼猴是以一只雌性獼猴胎兒成纖維細(xì)胞為核供體,同一個(gè)體的細(xì)胞的細(xì)胞核的基因組是相同的,因此培育出的兩只雌性獼猴的基因組成幾乎完全相同,C正確;克隆獼猴的成功為大量培育靈長(zhǎng)類(lèi)遺傳病模型動(dòng)物提供了可能,D正確。6.(2018江蘇南通、徐州等六市二模)在利用細(xì)胞融合技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體的過(guò)程中,不需要考慮()A.多次注射特定抗原蛋白,對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行免疫B.淋巴B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞之間的免疫排斥C.向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入促融劑的種類(lèi)和處理時(shí)間D.選擇特定試劑篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞答案B制備單克隆抗體過(guò)程中,要對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原,抗原進(jìn)入機(jī)體后刺

8、激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)從而產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞,A需要考慮;免疫排斥是機(jī)體對(duì)移植物(異體細(xì)胞、組織或器官)通過(guò)特異性免疫應(yīng)答使其破壞的過(guò)程,細(xì)胞之間不存在免疫排斥,B不需要考慮;向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入促融劑的種類(lèi)和處理時(shí)間會(huì)影響細(xì)胞的融合,C需要考慮;選擇特定試劑篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞需要考慮,否則會(huì)影響單克隆抗體的產(chǎn)量或得到單克隆抗體的特異性差,D需要考慮。7.如圖表示核移植與克隆動(dòng)物的相關(guān)圖解,有關(guān)敘述中錯(cuò)誤的是()A.圖示過(guò)程說(shuō)明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞核仍具有發(fā)育的全能性B.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞C.采集的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到的時(shí)期表示減數(shù)第二次分裂后期3D.選用去核

9、卵母細(xì)胞的主要原因是其細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核的全能性表達(dá)答案C分析題圖,動(dòng)物細(xì)胞通過(guò)核移植技術(shù),讓核基因得以表達(dá),即由細(xì)胞核克隆動(dòng)物,體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性,A正確;作為供體,細(xì)胞核型應(yīng)正常,通常傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞核型都正常,而10代到50代以后的細(xì)胞的核型有可能發(fā)生變化,B正確;采集的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期,C錯(cuò)誤;選用去核卵母細(xì)胞的主要原因是卵母細(xì)胞體積大,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)較豐富,細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核的全能性得以表達(dá),D正確。8.下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過(guò)程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲能與抗胃癌單克隆抗體特異結(jié)合B.與骨髓瘤細(xì)胞相比,B淋巴細(xì)胞中代謝表達(dá)更

10、弱C.利用滅活的病毒、PEG等可誘導(dǎo)細(xì)胞融合以獲得乙D.兩次篩選應(yīng)用的主要原理相同,但丙中含有不能分泌抗體的細(xì)胞答案D實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲為抗原,能與抗胃癌單克隆抗體特異結(jié)合,A正確;骨髓瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖的特性,B淋巴細(xì)胞沒(méi)有增殖能力,因此與骨髓瘤細(xì)胞相比,B淋巴細(xì)胞中代謝較弱,B正確;利用滅活的病毒、PEG等可誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合,進(jìn)而獲得乙,C正確;兩次篩選應(yīng)用的主要原理不同,首次篩選是用特定的選擇培養(yǎng)基,將融合的雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái),二次篩選是通過(guò)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),將分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái),丙中的細(xì)胞都能分泌抗體,D錯(cuò)誤。二、多項(xiàng)選擇題9.(2018江蘇南師附中等四校聯(lián)考)下圖表示

11、抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過(guò)程。下列敘述正確的是()A.反復(fù)給小鼠注射甲的目的是讓小鼠體內(nèi)產(chǎn)生更多的抗體4B.人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙的常用方法是用滅活的病毒C.丁細(xì)胞既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗甲抗原的抗體D.制備的單克隆抗體可以早診斷人體胃癌的發(fā)生情況答案BCD反復(fù)給小鼠注射甲的目的是讓小鼠體內(nèi)產(chǎn)生更多的漿細(xì)胞,A錯(cuò)誤;人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙的常用方法是用滅活的病毒,B正確;丁細(xì)胞是篩選出來(lái)的能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗甲抗原的抗體,C正確;制備的單克隆抗體可以早診斷人體胃癌的發(fā)生情況,D正確。10.(2018江蘇金湖中學(xué)考前模擬)人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕

12、后胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞的分泌的一種糖蛋白,制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷,如圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()抗體。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.過(guò)程的促融劑常用聚乙二醇(PEG),也可用滅活的病毒誘導(dǎo)B.過(guò)程以抗HCG單克隆抗體為抗原,利用抗原抗體雜交的原理進(jìn)行檢測(cè)C.給小鼠多次注射HCG的目的是獲得較多的記憶細(xì)胞D.過(guò)程需要添加抗生素等物質(zhì),目的是防止病毒污染答案BCD與植物細(xì)胞融合相比,動(dòng)物細(xì)胞融合還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)處理,A正確;過(guò)程以抗HCG單克隆抗體為抗體,再加入特定的HCG為抗原,利用抗原抗體雜交的原理進(jìn)行檢測(cè),B錯(cuò)誤;給小鼠多次注射HCG的目的是獲

13、得較多免疫過(guò)的B細(xì)胞,C錯(cuò)誤;過(guò)程需要添加抗生素等物質(zhì),目的是防止雜菌污染,而不是防止病毒污染,D錯(cuò)誤。11.(2018江蘇南京師大附中考前模擬)利用細(xì)胞工程的方法,以SARS病毒蛋白外殼為抗原制備出單克隆A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體5B.體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體C.將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合,經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D.利用該單克隆抗體與SARS病毒特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者答案ABC單克隆抗體是由單個(gè)的雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)增殖而形成的遺傳信息相同的大量細(xì)胞產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體,所以用純化的核

14、衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體不屬于單克隆抗體,A錯(cuò)誤;漿細(xì)胞不能增殖,體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞不能獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體,B錯(cuò)誤;將等量漿細(xì)胞和骨髄瘤細(xì)胞混合,經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞中,只有漿細(xì)胞和骨髄瘤細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞才屬于雜交瘤細(xì)胞,C錯(cuò)誤;利用該單克隆抗體能夠與抗原特異性結(jié)合的原理,可診斷出SARS病毒的感染者,D正確。三、非選擇題12.(2018江蘇揚(yáng)州期末)人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三個(gè)結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中肌鈣蛋白I(cTnI)在血液中含量上升是心肌損傷的特異指標(biāo)。為制備抗cTnI

15、的單克隆抗體,科研人員完成了以下過(guò)程。(1)細(xì)胞培養(yǎng)中,為防止有害代謝物的積累,可采用的方法。每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠一次,共注射三次,其目的是,最后一次免疫后第3天,取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,常用的誘導(dǎo)因素是。(2)甲、乙、丙中,只含雜交瘤細(xì)胞的是,過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè),之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè),并多次重復(fù)上述操作,其目的是篩選獲得能產(chǎn)生的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。(3)酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法,具體原理如下圖:6據(jù)圖分析,固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合,這是由于不同抗體與同一抗原表面的結(jié)合。

16、該檢測(cè)方法中,酶標(biāo)抗體的作用是,可通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物量來(lái)判斷待測(cè)抗原量。(4)研究人員獲得三種抗cTnI單克隆抗體,分別記為A、B、C。為檢測(cè)哪兩種單克隆抗體適合用于雙抗體夾心法,科研人員需要進(jìn)行組實(shí)驗(yàn)。答案(1)定期更換培養(yǎng)液加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞滅活的病毒(或PEG)(2)乙和丙特異性強(qiáng)、靈敏度高(3)不同部位與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化檢測(cè)底物反應(yīng)(4)6解析(1)細(xì)胞培養(yǎng)中,為防止有害代謝物的積累對(duì)自身造成危害,可采用定期更換培養(yǎng)液的方法,以便清除代謝產(chǎn)物。每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠一次,共注射三次,其目的是加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞;誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的

17、誘導(dǎo)因素是滅活的病毒(或PEG)。(2)圖中依次表示單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選,其中第一次是用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,第二次是通過(guò)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。因此,甲、乙、丙中,只含雜交瘤細(xì)胞的是乙和丙;過(guò)程目的是篩選獲得能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。(3)據(jù)圖分析,固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合,這是由于不同抗體與同一抗原表面的不同部位結(jié)合。該檢測(cè)方法中,酶標(biāo)抗體的作用是與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化檢測(cè)底物反應(yīng),可通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物量來(lái)判斷待測(cè)抗原量。(4)根據(jù)題意,為檢測(cè)A、B、C中哪兩種單克隆抗體適合用于雙抗體夾心法,科研人員需要進(jìn)行

18、6組實(shí)驗(yàn),檢測(cè)并比較各組實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)物量。13.(2019江蘇蘇州模擬)某生物興趣小組從資料上獲知:二氯二乙胺能夠阻止參與DNA復(fù)制的酶與DNA相互作用,他們推測(cè),二氯二乙胺能抑制癌細(xì)胞的增殖,能作為一種癌癥的化療藥物,并就此問(wèn)題設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了探究。實(shí)驗(yàn)材料:肝部長(zhǎng)有腫瘤的小鼠,二氯二乙胺溶液,蒸餾水,生理鹽水,含有全部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的細(xì)胞培養(yǎng)液,顯微鏡,血球計(jì)數(shù)板,試管,吸管,培養(yǎng)皿等。(1)其中某位同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作如下:(請(qǐng)將實(shí)驗(yàn)內(nèi)容補(bǔ)充完整)7a.取潔凈的培養(yǎng)皿一個(gè),加入適量的培養(yǎng)液,從小鼠肝部切取腫瘤組織,剪碎,并用處理,使其分散開(kāi)來(lái),配制成細(xì)胞懸液,將其均勻分成5份,置于5個(gè)培養(yǎng)皿中培養(yǎng),分別編號(hào)。b.取潔凈的試管5支,加入等量的培養(yǎng)液,編號(hào)1、2、3、4、5,并在14號(hào)試管中加入等量的不同濃度的二氯二乙胺溶液,5號(hào)試管中加入,作為對(duì)照組。c.將步驟b中配制的溶液分別置于5個(gè)培養(yǎng)皿中,搖勻后,在冰箱中培養(yǎng)一段時(shí)間。d.取出5個(gè)培養(yǎng)皿,振蕩搖勻后,分別吸取適量的培養(yǎng)液,用(工具)在顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)并