1、 血小板抗體檢測(cè)的臨床應(yīng)用(婦產(chǎn)科篇) 市場(chǎng)部 蘇 凱 2016.11.07血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇13血小板免疫學(xué)血小板抗體與早期流產(chǎn)關(guān)系新生兒免疫性血小板減少4婦產(chǎn)科開展的意義及項(xiàng)目?jī)?yōu)勢(shì)22血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇一、血小板免疫學(xué)血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇血小板簡(jiǎn)介 血小板只見于哺乳動(dòng)物體內(nèi),是具有止血凝血生理功能和自然免疫防護(hù)功能的重要的血液細(xì)胞，無(wú)細(xì)胞核，有胞膜，直徑約為25m，呈兩面微凸的圓盤狀,循環(huán)血中含量一般為150350109個(gè)/L。血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇血小板生成過(guò)程骨髓干細(xì)胞多功能祖細(xì)胞巨核祖細(xì)胞巨核細(xì)胞幼巨核細(xì)胞血小板胞質(zhì)塊脫落血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)

2、用婦產(chǎn)科篇血小板功能 促進(jìn)止血和加速凝血 1 維持血管內(nèi)皮細(xì)胞的完整性 2 免疫功能3血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇血小板抗原自身抗原同種異體抗原藥物誘導(dǎo)性抗原血小板抗原同種抗原血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇同種異體抗原HLA-類抗原（HLA-A、HLA-B抗原和少量HLA-C抗原），無(wú)HLA-類抗原；HLA-類分子為血小板的固有蛋白，少量從血漿中吸附。部分為血小板的固有蛋白，另一部分從血漿中吸附；血小板上的ABH抗原個(gè)體之間表達(dá)不同，5%-10%的非O型個(gè)體為A抗原或B抗原的高表達(dá)者。血小板特異性抗原，主要存在于血小板膜的糖蛋白（Glycoprotein, GP）分子上，也少量存在于血管內(nèi)皮

3、細(xì)胞、結(jié)締組織細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞。同種異體抗原HLA抗原 ABH抗原HPA抗原血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇血小板抗原與臨床相關(guān)性血小板抗原相關(guān)疾病與反應(yīng)臨床病癥同種異體抗原同種抗原自身抗原藥物依賴性抗原輸注無(wú)效發(fā)熱、變態(tài)反應(yīng),TRALI流產(chǎn)新生兒（或胎兒）血小板減少、顱內(nèi)出血輸注無(wú)效非溶血性輸血反應(yīng)反復(fù)流產(chǎn)新生兒同種免疫性血小板減少癥（NAIT）血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇血小板血型與臨床-同種異體抗原血小板輸血妊娠骨髓移植致敏血小板并引起破壞抗供者血小板抗體抗父親血小板抗體抗供者血小板抗體出血/紫癜流產(chǎn)/死胎移植排斥血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇二、血小板抗體與早期流產(chǎn)關(guān)系血小板抗體檢測(cè)臨

4、床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇血小板抗體與早期流產(chǎn)的關(guān)系 妊娠免疫的血小板同種異體抗體陽(yáng)性的發(fā)生率有早期流產(chǎn)史者顯著高于正常孕婦，而且血小板抗體與流產(chǎn)胎次擬成正比關(guān)系。 近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)母嬰間血型不合導(dǎo)致的同種抗體免疫因素是造成不明原因流產(chǎn)的主要因素之一，母嬰間紅細(xì)胞血型抗體不合是導(dǎo)致晚期習(xí)慣性流產(chǎn)的主要原因，而母嬰間血小板血型不合的血小板同種抗體（包括血小板特異性抗體和HLA抗體）是導(dǎo)致早期流產(chǎn)的主要原因。 血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇 上海血液中心劉達(dá)莊教授對(duì)1200名正常孕婦及52名有早期流產(chǎn)史患者進(jìn)行了血小板同種抗體的篩查和研究，探討了抗體特異性與早期流產(chǎn)的發(fā)病關(guān)系和NAIT的預(yù)防，結(jié)果見下表。研究論

5、文項(xiàng)目n抗體陽(yáng)性數(shù)陽(yáng)性率（%）有早期流產(chǎn)史婦女52112115無(wú)早期流產(chǎn)史婦女120144366丈夫（陰性對(duì)照）120100血小板血型與早期流產(chǎn)關(guān)系的研究.劉達(dá)莊，丁蘇鄂，王健等.中國(guó)輸血雜志J.1996,9(4).血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇研究論文血小板血型抗體與反復(fù)流產(chǎn)關(guān)系的研究.覃小青, 申衛(wèi)東, 焦偉, 朱春麗. 廣西醫(yī)學(xué) 2005年10月, 第27卷, 第10期. 通過(guò)對(duì)1228名正常孕婦及62名有早期流產(chǎn)史患者進(jìn)行血小板同種抗體的篩選和調(diào)查。結(jié)果在1228名正常孕婦中，檢出血小板抗體陽(yáng)性45例 (3.66)，62名有早期流產(chǎn)史的患者，檢出13例(20.96) ，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析血小板

6、血型抗體與早期流產(chǎn)有顯著相關(guān)性。血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇 通過(guò)對(duì)299名復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的患者血漿中HLA抗體和 GPIIbIIIa 抗體進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果檢測(cè)的299例 RSA患者中，IgG抗體陽(yáng)性26例，陽(yáng)性率 8.69 。26例IgG抗體陽(yáng)性患者中，25例 HLA抗體呈陽(yáng)性。HLA-I類抗體陽(yáng)性占5.02，HLA-II類抗體陽(yáng)性占1.33，HLA-I+II類抗體陽(yáng)性占2.0l;在 26例RSA患者中，GPIIb IIIa 抗體陽(yáng)性4例( 占15.38) ,其中GPbIIIa陽(yáng)性和HLA抗體均陽(yáng)性 3例( 占l1.54) ，GPbIIIa抗體單獨(dú)陽(yáng)性1例(占3.85)。研究論文復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者H

7、LA及血小板特異性糖蛋白抗體GPIIbIIIa表達(dá)的初步研究.尹愛(ài)華, 鄧 晶, 吳菁, 徐秀章, 夏文杰,丁浩強(qiáng), 陳揚(yáng)凱, 葉 欣. 中國(guó)免疫學(xué)雜志, 2012年第28卷.血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇三、新生兒免疫性血小板減少血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇新生兒同種異體免疫血小板減少癥（NAIT） NAIT是新生兒重度血小板減少癥最常見原因，由于胎兒血小板表面表達(dá)的抗原既有父親的，也有母親的，這種表達(dá)同種異體抗原的血小板通過(guò)胎盤屏障進(jìn)入母親體內(nèi)，刺激母體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對(duì)同種異體抗原的血小板抗體，這種血小板抗體再通過(guò)胎盤屏障進(jìn)入胎兒體內(nèi)，致敏胎兒血小板，激活胎兒免疫系統(tǒng)發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，使

8、胎兒血小板減少引起相應(yīng)的病癥，從目前文獻(xiàn)報(bào)道顯示，該疾病的發(fā)病率為1/8001500，而新生兒溶血病的發(fā)病率為1/1700,故NAIT發(fā)病率高于新生兒溶血病。 胎兒宮內(nèi)死亡或顱內(nèi)出血（ICH）可能早在14-16周妊娠時(shí)發(fā)生；而在妊娠30周之前，胎兒因NAIT導(dǎo)致的ICH發(fā)生的概率為10%。患有NAIT的新生兒產(chǎn)后患有ICH的概率為10%20%，其中有10%的死亡率。研究者發(fā)現(xiàn)，患有ICH的新生兒常伴有神經(jīng)功能損傷。 與新生兒溶血病不同的是，NAIT可能會(huì)出現(xiàn)在第一次妊娠，且在以后的妊娠中血小板抗體陽(yáng)性率為100%，患有NAIT的概率非常高，且血小板減少癥的程度更嚴(yán)重。 因此，NAIT是一種嚴(yán)重

9、的甚至可能危及生命的疾病。血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇發(fā)病機(jī)理Simona CONSTANTINESCU, Vlad ZAMFIRESCU, Prof. Radu VLADAREANU. Fetal and Neonatal Alloimmune Thrombocytopenia. Maedica (Buchar) 2012 December; 7(4): 372376.血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇臨床表現(xiàn)2. 較重病情較重患兒臨床表現(xiàn)為皮膚、體內(nèi)外黏膜出血，出現(xiàn)紫癜、瘀點(diǎn)或瘀斑。3. 重度嚴(yán)重者會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)損傷（占已報(bào)道病例的20%）以及顱內(nèi)出血（ICH）。 1. 輕度輕度血小板減少患

10、兒有時(shí)沒(méi)有任何臨床癥狀。血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇NAIT-常規(guī)檢測(cè)1. 血小板數(shù)量檢查 血小板減少的嬰兒通常在出生72h內(nèi)血小板的量較低。然而一些中度NAIT因不會(huì)有這些出血癥狀而被忽略。 2. 血小板抗體檢測(cè)在不能排除FNAIT的可能時(shí)，需要對(duì)母體中的抗體進(jìn)行檢測(cè)，必要的時(shí)候可以進(jìn)行抗體鑒定，可以用于血小板抗體檢測(cè)及交叉配型。3. 基因檢測(cè)在隨后的妊娠的家族性復(fù)發(fā)率取決于父親的基因型。若為純合子顯性的父親，在后續(xù)妊娠中復(fù)發(fā)率接近100%，雜合子的父親，復(fù)發(fā)率接近50%。因此，有NAIT病史的母親，其后代是非常危險(xiǎn)的。不管父親是純合子還是雜合子，檢測(cè)的是胎兒的基因，現(xiàn)在胎兒的HPA-1a

11、基因配型可采取母體血漿中胎兒游離的DNA。血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇NAIT的治療-產(chǎn)前管理靜脈注射用人免疫球蛋白（IVIG） 許多研究中心用IVIG治療HPA-1a免疫的孕婦，在瑞典，治療HPA-1a免疫的孕婦用量為0.51.0g/kg/周，新西蘭為2g/kg/周，在妊娠12周開始使用。 2. 糖皮質(zhì)激素治療 許多治療方案中同時(shí)使用IVIG和糖皮質(zhì)激素，研究發(fā)現(xiàn)IVIG和糖皮質(zhì)激素一起的治療效果高于單獨(dú)使用IVIG。3. 剖腹產(chǎn) 在分娩時(shí)選擇性剖宮產(chǎn)可能有助于防止腦出血發(fā)生。4. 血小板輸注 在一些情況，IVIG的作用是不可預(yù)測(cè)的，因此需要每周進(jìn)行宮內(nèi)血小板輸注。然而在子宮內(nèi)的血小板輸注

12、是一種侵入性的過(guò)程，有胎兒損失的風(fēng)險(xiǎn)，尤其是對(duì)低血小板計(jì)數(shù)的胎兒。如果出血性疾病是由血管損傷造成的，那么輸血小板是不起作用的。胎兒血小板輸注可能需要重新評(píng)估，以更好地平衡這種治療的風(fēng)險(xiǎn)和有效性。血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇NAIT的治療產(chǎn)后處理1. 輸注血小板 在分娩中或即將分娩時(shí)，許多嬰兒會(huì)有出血癥狀發(fā)生，并且不能立即進(jìn)行適當(dāng)?shù)闹委煛Ｄ壳埃诔錾^(guò)程中有出血癥狀的嬰兒可輸注與獻(xiàn)血員配型的、抗原陰性的血小板治療。在95%的FNAIT患兒中，源于HPA-1a-和HPA-5b-陰性的個(gè)體血小板是相合的，且可有效增加血小板量。 如果兼容的血小板不可用，而與母親的機(jī)采血小板相合，可給新生兒輸經(jīng)洗滌的

13、、照射和去白細(xì)胞的母親的血小板。 2. IVIG治療 由于FNAIT可危及生命的出血可能會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)損害，需要進(jìn)行快速有效的治療。在沒(méi)有配型的血小板情況下，可以使用IVIG，IVIG可迅速起作用。 Simona CONSTANTINESCU, Vlad ZAMFIRESCU, Prof. Radu VLADAREANU. Fetal and Neonatal Alloimmune Thrombocytopenia. Maedica (Buchar) 2012 December; 7(4): 372376.血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇治療方案血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇四、婦產(chǎn)科開展的意義

14、及項(xiàng)目?jī)?yōu)勢(shì)血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇檢測(cè)原理-SPRCA 采用先進(jìn)的固相紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)技術(shù)（solid-phase red cell adherence, SPRCA），反應(yīng)板中已包被抗血小板單克隆抗體，血小板懸液經(jīng)離心洗滌后可在反應(yīng)孔底部形成血小板單層。加入血清或血漿，在孔中經(jīng)過(guò)孵育后，若該血清或血漿中含有血小板抗體，則該抗體與反應(yīng)孔中的血小板單層結(jié)合，未結(jié)合的成分通過(guò)洗滌被去除。加入抗人IgG及人IgG致敏紅細(xì)胞（指示紅細(xì)胞），經(jīng)離心后指示紅細(xì)胞通過(guò)抗人IgG的橋連與血小板單層上的血小板抗體結(jié)合，因此陽(yáng)性反應(yīng)為指示紅細(xì)胞平鋪在反應(yīng)孔底部表面。而陰性反應(yīng)為指示紅細(xì)胞在離心力的作用下聚集于

15、反應(yīng)孔底部中央。 血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇試驗(yàn)流程血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇結(jié)果解釋 可疑陽(yáng)性，要對(duì)該患者給予風(fēng)險(xiǎn)提示，告知下次妊娠可能會(huì)導(dǎo)致血小板抗體強(qiáng)度增強(qiáng)，從而引起相關(guān)疾病。可建議該患者推遲懷孕的時(shí)間并以中醫(yī)調(diào)理為主。 血小板抗體陽(yáng)性，引起患者流產(chǎn)、死胎、不孕不育、NAIT等相應(yīng)疾病的風(fēng)險(xiǎn)極大。建議臨床要采取干預(yù)和治療措施，如注射丙球、糖皮質(zhì)激素等。血小板抗體陰性，可排除由血小板抗體引起相關(guān)疾病的可能。血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇臨床意義三階段：孕前，孕期，產(chǎn)后一、育齡婦女孕前血小板抗體篩查對(duì)孕期流產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)做出評(píng)估 對(duì)于有不良孕產(chǎn)史、反復(fù)流產(chǎn)史、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)史、不孕不育史、多次妊

16、娠史、高齡產(chǎn)婦、需借助輔助生殖措施懷孕的婦女以及有自身免疫性疾病史的育齡婦女皆建議在孕前及孕期檢測(cè)其體內(nèi)血小板抗體狀況，檢測(cè)患者血清和血漿中血小板抗體的水平，對(duì)其孕期流產(chǎn)、死胎風(fēng)險(xiǎn)做出評(píng)估，從而提高優(yōu)生優(yōu)育的水平。二、產(chǎn)檢（尤其針對(duì)高齡、二胎產(chǎn)婦） 1. 孕早期檢測(cè) 由于胎兒和母親血小板不相容所產(chǎn)生的同種抗體在14孕周即可致胎兒血小板的破壞，建議孕12-14周檢測(cè)孕婦體內(nèi)血小板抗體的水平，如陽(yáng)性則提示臨床醫(yī)生胎兒有流產(chǎn)和死胎的風(fēng)險(xiǎn)。 2. 孕晚期檢測(cè) 在胎兒出生前再檢測(cè)一次孕婦體內(nèi)血小板抗體的水平，如陽(yáng)性則提示臨床醫(yī)生要做好胎兒患新生兒血小板相關(guān)性疾病的治療預(yù)案。血小板抗體檢測(cè)臨床應(yīng)用婦產(chǎn)科篇臨床意義三、妊娠期血小板降低的查因： 對(duì)于妊娠期血小板減低的孕婦（尤其是罹患或有自身免疫性疾病史）建議進(jìn)行血小板抗體檢測(cè)以對(duì)其孕期流產(chǎn)