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文檔簡介
1、實驗一植物細胞滲透勢的測定(質壁分離法)實驗二鉀離子對氣孔開度的影響實驗三希爾反應的觀察?實驗四植物種子生命力的快速測定實驗五單鹽的毒害作用及離子間的對抗作用實驗六水稻種子萌發對氧的需要實驗七生長素對綠豆苗發根的影響實驗八光對植物生長的影響實驗九脫落酸對植物葉柄的脫落效應實驗(上面實驗中選4個+1個學生自己設計的實驗)實驗一植物細胞滲透勢的測定(質壁分離法)植物細胞的滲透勢主要取決于液泡的溶質濃度,因此又稱溶質勢。滲透勢與植物水分代謝、生長及抗逆性等有密切關系。已知在干旱、鹽漬等條件下,一些植物常在細胞內主動積累溶質,以降低其滲透勢,增加吸水能力,而在一定程度上維持細胞膨壓,保障細胞的生長和氣
2、孔的開放,這種現象叫做滲透調節作用。滲透調節能力的大小可以用逆境條件下細胞的滲透勢的降低值來表示,在水分生理與抗逆性生理研究中經常需要測定。、原理將植物組織放入一系列不同濃度的蔗糖溶液中,經過一段時間,植物細胞與蔗糖溶液間將達到滲透平衡狀態。如果在某一溶液中細胞脫水達到平衡時剛好處于臨界質壁分離狀態,則細胞的壓力勢(Wp)將下降為零。此時細胞液的滲透勢(Ws)等于外液的滲透勢Ws0o此溶液稱為該組織的等滲溶液,其濃度稱為該組織的等滲濃度,即可計算出細胞液的滲透勢(Ws)。實際測定時,因為臨界質壁分離狀態難以在顯微鏡下直接觀察到,所以一般均以初始質壁分離作為判斷等滲濃度的標準。處于初始質壁分離狀
3、態的細胞體積,比吸水飽和時略小,故細胞液濃縮而滲透勢略低于吸水飽和狀態時的滲透勢稱基態滲透勢。二、實驗材料、試劑與儀器設備(一)實驗材料洋蔥鱗莖、紫鴨跖草、苔辭、紅甘藍或黑藻、絲狀藻等。(二)試劑1 .1mol/kg蔗糖水溶液:稱取預先在6080C下烘干的蔗糖34.2g溶于100g蒸儲水中,即為1質量摩爾濃度的蔗糖溶液。2 .%中性紅溶液。3 .蔗糖系列標準液:取干燥潔凈的小試劑瓶9支編號,用1mol/kg蔗糖水溶液依據C1V1=C2V2公式配制mol/kg、mol/kg、mol/kg、mol/kg、mol/kg等一系列不同濃度的蔗糖mol/kg、mol/kg、mol/kg、mol/kg水溶液
4、(具體范圍可根據材料不同而加以調整),貯于試劑瓶中,瓶口加塞以防蒸發濃縮。(三)儀器設備顯微鏡,載玻片,蓋玻片,溫度計,尖頭鑲子,刀片,小培養皿(直徑為6cm),試劑瓶,燒杯,容量瓶,量筒,吸管,吸水紙等。三、實驗步驟1 .取干燥、潔凈的培養皿9套編號,將配制好的不同濃度的蔗糖溶液按順序加入各培養皿,使之成一薄層,蓋好皿蓋備用。2 .用鑲子撕取(或用刀片刮取)供試材料的表皮,大小以0.5cm2為宜,迅速分別投入各種濃度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,每一濃度45片。同時記錄室溫。為了便于觀察,可先將切片于%中性紅內染色5min左右,吸去水分,再浸入蔗糖溶液中,但如不染色即能區別質壁分離時,仍以不染
5、色為宜。3 .510min后,取出表皮薄片放在滴有同樣溶液的載玻片上,蓋上蓋玻片,于低倍顯微鏡下觀察,如果所有細胞都產生質壁分離的現象,則取低濃度溶液中的制片作同樣觀察,并記錄質壁分離的相對程度。如果在兩個相鄰濃度的切片中,一個切片沒有發生質壁分離,另一個切片發生質壁分離的細胞數超過50%,則這兩個濃度的平均值為其等滲濃度。每一制片觀察的細胞不應少于100個。檢查時可先從中間濃度開始在找到上述濃度極限時,用新的溶液和新鮮的葉片重復進行幾次,直至有把握確定為止。在此條件下,細胞的滲透勢與兩個極限溶液濃度之平均值的滲透勢相等。將結果記錄于表5-1中。表5-1植物細胞滲透勢測定記載表實驗人日期材料名
6、稱實驗室溫度蔗糖濃度(mol/kg)滲透勢(Mpa)質壁分離的相對程度(作圖表示)四、結果計算由所得到的等滲濃度和測定的室溫,用下式計算供試溶液的滲透勢(Ws0),即為細胞的滲透勢(Ws)。Ws(MPa)=Ws0=-iCRT式中,Ws0供試溶液的滲透勢,MPa。i解離系數,蔗糖=10供試溶液的濃度,mol/kg(以水作溶劑)氣體常數,LMPa/(molK)T絕對溫度,(273+t0C),K。思考題某種植物葉片吸水飽和時的滲透勢經測定為-,有用質壁分離法測出其滲透勢為-,請計算質壁分離狀態的細胞液體積相當于飽和時的百分數。實驗二鉀離子對氣孔開度的影響一、目的了解鉀離子對氣孔開度的影響。二、材料用
7、具及儀器藥品蠶豆葉片、顯微鏡、溫箱、蓋玻片、培養皿、1酸鉀、悔肖酸鈉、純水、滴管三、原理保衛細胞的滲透系統可由鉀離子所調節,無論是環式或非環式光合磷酸化都可形成ATP,ATP不斷供給保衛細胞膜上的H+泵作功,使保衛細胞中的hf泵出,并從周圍表皮細胞吸收鉀離子,降低保衛細胞的水勢,使保衛細胞吸水,氣孔張開。四、方法步驟1、在三個培養皿中各加入KNO5%NaN(及蒸儲水15m1。2、撕蠶豆葉下表皮若干放入上述三個培養皿中。3、將培養皿放入25c溫箱中,使溶液溫度達到25Co4、將培養皿置于光照條件下照光半小時,然后分別在顯微鏡下觀察氣孔開度。五、實驗報告根據實驗結果,解釋鉀離子引起氣孔張開的機理。
8、六、思考題鉀離子引起氣孔張開的原理是什么?實驗三希爾反應的觀察(離體葉綠體對染料的還原作用)一、原理希爾反應(Hillreaction)是綠色植物的離體葉綠體在光下分解水,放出氧氣,同時還原電子受體的反應,它是光合作用反應中的重要現象。氧化劑2,6-二氯酚靛酚是一種藍色染料,接受電子和H+后被還原成無色,可以直接觀察顏色的變化,也可用分光光度計對還原量進行精確測定。二、實驗材料、試劑與儀器設備(一)實驗材料菠菜或其他綠色植物新鮮葉片。(二)試劑%2,6-二氯酚靛酚(三)儀器設備研缽,石英砂,小試管,試管架,漏斗,紗布,小燒杯,剪刀。三、實驗步驟取新鮮的菠菜或其他植物葉片0.5g,剪碎后放入研缽
9、中,加少量石英砂,研磨成勻漿。力口50mL蒸儲水,通過56層紗布,過濾到小燒杯中,即得到葉綠體粗懸浮液。取試管兩支。每管中加入葉綠體懸浮液5mL,%2,6-二氯酚靛酚溶液56滴,搖勻。將其中一管置于直射光下,另一管置于暗處,注意日光下的試管液顏色變化。58min后,將置于暗處的試管取出,比較兩管溶液顏色變化,并解釋原因。思考題試管中藍色褪色的原因是什么?與光照有什么關系?實驗四植物種子生命力的快速測定n.染料染色法一、原理有生命力種子胚細胞的原生質膜具有半透性,有選擇吸收外界物質的能力,一般染料不能進入細胞內,胚部不染色。而喪失生命力的種子,其胚部細胞原生質膜喪失了選擇吸收能力,染料可自由進入
10、細胞內使胚部染色。所以可根據種子胚部是否被染色來判斷種子的生命力。二、材料、儀器設備及試劑(一)材料:玉米種子(二)設備:小燒杯;刀片;鑲子;(三)試劑:%靛紅溶液、5%紅墨水三、實驗步驟1, 將種子用溫水(約30C)浸泡26h?2, 隨機取種子100粒,然后沿種胚中央準確切開,取其一半備用。3, 將準備好的種子浸于TTC試齊U中,于恒溫箱(3035C)中保溫30min4, 反應結束,觀察種胚的情況,凡種胚全部或大部分被染成紅色的即為具有生命力的種子。種胚不被染色的為死種子,如果種胚中非關鍵性部位(如子葉的一部分)被染色,而胚根或胚芽的尖端不染色都屬于不能正常發芽的種子。實驗五單鹽的毒害作用及
11、離子間的對抗作用、目的觀察單鹽對植物的毒害作用或離子間的對抗作用;從而進一步了解礦質元素的相互作用,為科研和農業生產提供理論依據。二、原理任何植物如果培養在單一種鹽溶液中,不久即呈現不正常狀態,最后導致死亡。這種單鹽毒害現象,即使在濃度很低,而且是植物所必需的元素的單鹽溶液中也會發生。尤其是陽離子的毒害更為嚴重,因為陽離子對原生質的理化特性及生理機能有巨大的影響,如K:能使原生質粘度變小,而Ca2+則能使原生質粘度變大。如果在這種單鹽溶液中加入微量的其它一種鹽(陽離子),便可減輕或消除單鹽毒害。離子價數越高,其消除單鹽毒害作用所需的濃度越低,這種現象稱為離子間的對抗作用(拮抗作用)0三、材料、
12、設備及試劑1 .材料:水稻幼苗或玉米幼苗。2 .設備:250ml三角瓶;200ml量筒;石蠟,未脫脂棉花。3 .試齊U:LTNaCl溶液;molL-CaCb溶液(這些試劑要經過重結晶,使其十分純凈)。四、實驗步驟取三個250ml三角瓶,用石蠟涂在內壁表面,貼上1、2、3標簽,分別作如下處理:1 .瓶內加入200mlrkaCl溶液;2 .瓶內加入200mlmolL-CaCb溶液;3 .瓶內加入100mlL-NaCl溶液及100mlmolL-CaCb溶液。選才t15株大小一致的玉米幼苗,每瓶插入5株,使根部完全浸在溶液中,莖部用棉花包住,以免擦傷。把各處理放在陽光不太強的地方,每天通氣一次,并補充
13、蒸儲水,使瓶內溶液保特原來的容量。經12周后,觀察記錄莖、葉、根生長情況。并簡要解釋其原因。實驗六水稻種子萌發對氧的需要一、目的通過實驗,證明高等植物種子的正常萌發生長都必需要有充足的氧氣,即使是水稻這類淹水植物也不例外。二、原理水稻系淹水植物,對缺氧環境有一定的適應能力,但適應方式主要是借助發達的通氣組織使根系得到從地上部運來的氧氣。水稻種子能在氧氣不足的水中萌發,這是一般作物如小麥、玉米所不能的。但在缺氧嚴重的情況下,其胚根和真葉也不能正常生長,只能長出細長的芽鞘。由于芽鞘迅速伸出水面,便可將空氣中的氧氣運至基部,而利于發根和長葉。三、材料、儀器設備及試劑1 .材料:水稻種子。2 .儀器設
14、備:光照培養箱;500ml燒杯;尖頭鑲子,塑料尺。3 .試劑:升汞溶液。四、實驗步驟1 .種子處理選取飽滿的水稻種子,用升汞溶液進行表面消毒10min,再用清水充分洗凈種子,然后浸種幾小時。2 .種子培養取5個500ml燒杯,編號并貼上標簽,作五個處理,每個處理(燒杯)放30-40粒種子,然后各處理加入不同深度的蒸儲水如下:1:剛剛加水至種子厚度的一半。2:加水浸沒種子1cm3:加水浸沒種子3cm34:加水浸沒種子5cm35:加水浸沒種子7cm將各處理放在2530C的光亮處培養57d(期間2天換水1次)。五.結果測量培養5-7d后,各處理隨機取10株測量其芽鞘和真葉長度、胚根數和長度,求10株
15、平均值記錄下表中。不同淹水層對水稻種子萌發的影響處理芽鞘長度(cm)真葉長度(cm)胚根數(條)胚根長度(cm)加水至種子厚度的一半加水浸沒種子1cm加水浸沒種子3cm加水浸沒種子5cm加水浸沒種子7cm實驗七生長素對綠豆苗發根的影響目的通過實驗,了解生長素誘導植物不定根形成的原理和方法。二、原理生長素不但能促進細胞的伸長與長大,而且能促進細胞的分裂與分化,用適宜濃度的生長素處理綠豆苗的下胚軸,可誘導不定根的發生。在一定濃度范圍內,發生的根數與生長素濃度呈正相關。三、材料、設備及試劑1 .材料:綠豆種子。2 .設備:光照培養箱;100ml容量瓶;50ml燒杯;瓷盤;剪刀;木尺。3 .試劑及配制
16、:100dgm1IAA母液:準確稱取10mgIAA于小燒杯中,加幾滴95%乙醇溶解后加蒸儲水稀釋,然后倒入100ml容量瓶中定容至刻度。四、實驗步驟1 .綠豆苗的培養精選綠豆種,浸種后播入裝有砂粒的瓷盤中,用砂粒復蓋種子,在光照處25C左右培養至長出2片初生葉和一心葉即可。2 .系列IAA濃度溶液配制:用100dgm(CKIAA母液稀釋成10、1、g-ml1的系列濃度溶液。3 .誘導綠豆苗發根的培養選取長勢一致的砂培綠豆幼苗(2片初生葉和一心)60株,從子葉節起保留3cm下胚軸,其余下胚軸一起切除,并除去殘留子葉。取6個干凈的50ml燒杯,編號,分別加入100、10、1、dg-mL的IAA溶液
17、20ml,對照(CR加20ml蒸儲水。然后每個處理放10株。將各處理放在透光良好的地方培養,觀察發根時間及發根數。(要隨時注意燒杯中的培養液位基本不變,如因蒸發減少時,用蒸儲水補充到原來液位。五、測量結果培養10天左右,按下表格內容測量實驗結果。不同生長素(IAA)濃度處理對綠豆幼苗發根的影響生長素濃度平均株高/株平均發根數/株平均根長度/株根粗細根鮮重/10株(醫gml1)(cm)(條)(cm)(、+、+)(m10.100注:-表示根細、+表示根較粗、+示根粗壯實驗八光對植物生長的影響實驗實驗原理光對植物生長的作用是多方面的。光不僅影響光合作用,而且對植物生長有著直接的作用。光抑制細胞伸長,
18、而促進細胞的分化,對植株形態起范型作用。一、材料、儀器設備1 .材料:豌豆或其他植物種子2 .儀器設備:培養缸,暗室,細砂,恒溫培養箱二、實驗步驟1 .將實驗種子浸種后放入大培養皿中,置于培養箱在2528c培養發芽3d。2 .取培養罐四個(分別編上1、2、3、4號)盛滿細砂,將發芽一致的種子播入砂中,澆水(以濕潤為宜),分別作如下處理:1號,整個實驗期間,植物均放在暗室培養,2號,同上條件,每天移至光照20min,3號,同上條件,每天移至光照1h,4號,整個實驗期間,置于自然光照下培養。實驗期間注意保持適當的溫度和土壤水分,23周后(根據實驗期間溫度而定)觀察各處理植株高度、節間長度,葉子展開情況。三、結果測量及分析按下表記錄實驗結果,比較暗處理與不同光照時間處理,植株長勢、形態、節間數,葉子展開情況,葉色表現有何不同
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