1、核酸化學生物化學第一節第一節 概述概述第二節第二節 核酸的化學組成核酸的化學組成第三節第三節 核酸的分子結構核酸的分子結構第四節第四節 核酸的性質核酸的性質第五節第五節 核酸的研究方法核酸的研究方法本章內容第1頁/共108頁第一節概 述 核酸（nucleic acidNA）是一類重要的生物大分子，擔負著生命信息的儲存與傳遞。 核酸是現代生物化學、分子生物學的重要研究領域，是基因工程操作的核心分子。第2頁/共108頁1868 F. Miescher從膿細胞的細胞核中分離出了一 種含磷酸的有機物，當時稱為核素（nuclein）,后稱為核酸（nucleic acid）。1944 Avery 等通過肺

2、炎球菌轉化試驗證明DNA是遺傳物質。1952 Hershey, Chase-噬菌體標記實驗。1953 Watson和Crick提出DNA結構的雙螺旋模型。1958 Crick提出遺傳信息傳遞的中心法則。1973 Boyer，Cohen-DNA Cloning(克隆）。1976 DNA Sequencing(序列分析）。1990 Human Genome Project（人類基因組計劃）。一、核酸的研究歷史第3頁/共108頁1944年Avery細菌轉化實驗肺炎病菌有二種，一種是光滑型肺炎雙球菌：有莢膜、菌落光滑且有毒。這種菌通常外包有一層黏性發光的多糖莢膜，它是細菌致病性的必要成分，引起肺炎；另

3、一種是粗糙型肺炎雙球菌：無莢膜、菌落粗糙且無毒。（a）將光滑型肺炎雙球菌注入小鼠體內，使小鼠致死。（b）將粗糙型肺炎雙球菌注入小鼠體內，對小鼠無害。（c）將光滑型肺炎雙球菌加熱殺死后，再注入小鼠體內，對小鼠無害。（d）將加熱殺死的光滑型肺炎雙球菌與粗糙型肺炎雙球菌一起注入小鼠體內，小鼠死掉。 這說明粗糙型肺炎雙球菌變成了致死的光滑型肺炎雙球菌。暗示著被殺死的光滑型肺炎雙球菌中含有某種因子，它進入了粗糙型肺炎雙球菌將它轉化成了致死的光滑型肺炎雙球菌。（e）從加熱殺死的光滑型肺炎雙球菌中提取DNA，并且盡可能地將混在DNA中的蛋白質除去，然后將除去了蛋白質的DNA與粗糙型肺炎雙球菌混合后，再注入小

4、鼠體內，小鼠死掉。1928年細菌學家Griffith 細菌毒性實驗 第4頁/共108頁1952年美國Hershey 噬菌體感染實驗 DNA的遺傳作用的進一步證明是來自A.Hershy和M.Chase的噬菌體感染大腸桿菌的研究。用放射性同位素32P標記噬菌體DNA，使標記的噬菌體感染大腸桿菌，經短期保溫后，噬菌體就附著在細菌上。然后用攪拌器（10000轉/分）攪拌幾分鐘，使噬菌體與大腸桿菌分開，再用高速離心機使細菌沉淀，分析沉淀和上清中的放射性（右圖）。用35S標記噬菌體的蛋白質外殼，進行同樣的驗證實驗。實驗結果是大多數噬菌體的DNA存在于細菌中，而外殼留在上清中。但是被感染的細菌內部出現了奇跡

5、。隨著被感染的細菌的培養，有的細菌破裂，釋放出很多噬菌體來。這說明用于復制的遺傳信息通過病毒DNA，而不是通過病毒蛋白質導入細菌內的。第5頁/共108頁第6頁/共108頁 真核生物 原核生物 細胞核（98%） 擬核 線粒體mDNA （少量） 質粒DNA（plasmid） 葉綠體ctDNA （少量）等 病毒DNA 細胞質（90%） 細胞質 核仁（少量） 病毒RNA 二、核酸的種類和分布二、核酸的種類和分布脫氧核糖核酸核糖核酸注：生物細胞都含有注：生物細胞都含有DNA DNA 和和 RNARNA； 病毒中只含病毒中只含 DNA DNA 或或 只含只含 RNARNA。第7頁/共108頁第二節核酸的化

6、學組成 核酸是由幾十個甚至幾千萬個核苷酸聚合而成的具有一定空間結構的生物大分子。 基本元素：基本元素：C、H、O、N、P ；其中其中P 的含量比較穩定，占的含量比較穩定，占9%-10%，通過測，通過測定定P 的含量來推算核酸的含量（定磷法）。的含量來推算核酸的含量（定磷法）。第8頁/共108頁磷酸 核苷 堿基 戊糖 核酸核苷酸 第9頁/共108頁一、戊糖 組成核酸的戊糖有兩種。DNA所含的糖為-D-2-脫氧核糖；RNA所含的糖則為-D-核糖。OHHOHHOHOHHHOCH2HOCH2OHHOHHHOHHD-核糖D-2-脫氧核糖第10頁/共108頁二、堿基二、堿基1. 嘌呤（Purine） 腺嘌

7、呤Adenine 鳥嘌呤guanine第11頁/共108頁2. 嘧啶（Pyrimidine）胸腺嘧啶胞嘧啶尿嘧啶第12頁/共108頁 核酸中也存在一些不常見的稀有堿基。稀有堿基的種類很多，大部分是上述堿基的甲基化產物。NNNNNHCH3dRN6-Methyl-dANNCH3NH25-Methyl-dCOdR二氫尿嘧啶 （DHU）第13頁/共108頁修飾堿基的簡寫符號 m N22取代位置核苷取代基的數目取代基( 為1時可以不寫 )第14頁/共108頁核苷：戊糖核苷：戊糖+ +堿基堿基 糖與堿基之間的糖與堿基之間的C-NC-N鍵，稱為鍵，稱為C-NC-N糖苷鍵糖苷鍵核苷中戊糖與堿基的連接方式：(O

8、H)(OH)第15頁/共108頁修飾核苷/稀有核苷修飾核苷包括三種情況: （1）由修飾堿基和糖組成的核苷 （2）由非修飾堿基和2-O-甲基核糖組成的核苷 （3）由堿基與糖連接方式特殊的核苷 第16頁/共108頁NNNNNHCH3dRN6-Methyl-dA（1）HNNHO5,6-dihydrouridineORHHH(D or hU)（2）OCH2HHOHHOCH3HHO2-O-甲 基 腺 苷Ade(Am)NNCH3NH25-Methyl-dCOdR二氫尿嘧啶核苷 (Am)第17頁/共108頁（3）OCH2HHOHHOHHHO (pseudouridine)HNNHOO51假 尿 嘧 啶 核

9、苷()第18頁/共108頁取代基用下列小寫英文字母表示 :甲基甲基m 乙酰基乙酰基ac 氨基氨基n 甲硫基甲硫基ms 羥基羥基o或或h 硫基硫基s 異戊烯基異戊烯基i 羧基羧基c 第19頁/共108頁例：例：HNNORSHNNOROCH2OHs4 Uom5 U或hm5 U第20頁/共108頁四、核苷酸（四、核苷酸（nucleotide） 核苷酸： 核苷+磷酸 戊糖+堿基+磷酸H第21頁/共108頁五、游離核苷酸及其衍生物的形五、游離核苷酸及其衍生物的形式式1. 繼續磷酸化第22頁/共108頁2.2.環化磷酸環化磷酸化化 cAMP cGMP第23頁/共108頁3.3.輔酶輔酶 NAD、NADP、

10、FAD、HSCoAFADNAD、NADPHSCoA第24頁/共108頁4. GDP-4. GDP-半乳糖、半乳糖、GDP-GDP-葡萄糖等是糖葡萄糖等是糖蛋白蛋白 生物合成和多糖生物合成的活性生物合成和多糖生物合成的活性糖糖 基供體。基供體。 第25頁/共108頁第三節 核酸的分子結構 一、DNA的結構一級結構: DNA核苷酸鏈中脫氧核苷 酸的組成和排列順序。二級結構：DNA的兩條多聚鏈間通過 氫鍵形成的雙螺旋結構。三級結構：DNA雙鏈進一步折疊卷曲 形成的構象。第26頁/共108頁（一）DNADNA的一級結構 由dAMP、dGMP、 dCMP、 dTMP核苷酸單體通過3,5-磷酸二酯鍵相連而

11、成的鏈狀聚合物。5533第27頁/共108頁結構式l 5-5-磷酸端（常用磷酸端（常用5 5-P-P表表示）；示）；3 3- -羥基端（常用羥基端（常用3 3 -OH-OH表示）表示）l 核苷酸鏈具有方向性，當核苷酸鏈具有方向性，當表示一個核苷酸鏈時，必表示一個核苷酸鏈時，必須注明它的方向是須注明它的方向是5353或是或是3535。第28頁/共108頁字母式5PAPCPGPCPTPGPTPAOH 3 5 PACGCTGTAOH 3線條式PP5335PP53P53ACGTOH第29頁/共108頁DNA的一級結構也可指DNA分子中堿基的順序。DNA的堿基順序本身就是遺傳信息存儲的分子形式。生物界物

12、種的多樣性即寓于DNA分子中四種核苷酸千變萬化的不同排列組合之中。第30頁/共108頁（二）DNA的二級結構qWatson 和 Crick 于1953年提出了DNA 雙螺旋結構模型，說明了DNA 的二級結構。（即B型DNA）第31頁/共108頁（1 1）ChargaffChargaff定則 （1950s,E. Chargaff1950s,E. Chargaff發現）I.I. DNADNA堿基組成符合：堿基組成符合： A=TA=T；G=CG=C； A+G=T+CA+G=T+C。II.II. 不對稱比率：不對稱比率：A+T/G+CA+T/G+C； 物種不同，物種不同，DNADNA堿基組成不同；堿基

13、組成不同； 物種親緣愈接近，堿基組成也愈接近，該比物種親緣愈接近，堿基組成也愈接近，該比 率越相近似。率越相近似。.具有種的特異性，沒有器官和組織的特異性，具有種的特異性，沒有器官和組織的特異性，年齡、營養狀況、環境的改變不影響年齡、營養狀況、環境的改變不影響DNADNA的的堿基組成。堿基組成。1提出DNA雙螺旋結構模型的根據 第32頁/共108頁第33頁/共108頁（2）x-光衍射分析 20世紀40年代Astbury 1952年M.Wilkins 第34頁/共108頁2DNA雙螺旋結構模型（雙螺旋結構模型（double-helical structure） 1953年年Watson和和Cri

14、ck提出了提出了DNA雙螺旋結構。雙螺旋結構。 第35頁/共108頁DNADNA雙螺旋結構模型要點（1 1）q螺旋中的兩條鏈反向平行，即其中一條鏈的方向為53，而另一條鏈的方向為35，兩條鏈共同圍繞一個假想的中心軸呈右手雙螺旋結構。 第36頁/共108頁DNADNA雙螺旋結構模型要點（2 2）q疏水的堿基位于雙螺旋的內側，親水的磷酸和脫氧核糖基位于螺旋外側。堿基平面與螺旋軸垂直，脫氧核糖平面與中心軸平行。q由于幾何形狀的限制，堿基對只能由嘌呤和嘧啶配對，即A與T，G與C。這種配對關系，稱為堿基互補。A和T之間形成兩個氫鍵， G與C之間形成三個氫鍵。第37頁/共108頁T-A堿基對C-G堿基對第

15、38頁/共108頁DNADNA雙螺旋結構模型要點（3 3）q由于堿基對排列的方向性，使得堿基對占據的空間是不對稱的，因此，在雙螺旋的表面形成大小兩個凹槽，分別稱為大溝和小溝，二者交替出現。2.0 nm小小溝溝大大溝溝第39頁/共108頁DNADNA雙螺旋結構模型要點（4 4）q雙螺旋橫截面的直徑約為2 nm，相鄰兩個堿基平面之間的距離（軸距）為0.34 nm，每10個核苷酸形成一個螺旋，其螺距（即螺旋旋轉一圈）的高度）為3.4 nm。2.0 nm小小溝溝大大溝溝第40頁/共108頁DNADNA雙螺旋結構模型要點（5 5）q兩條鏈借堿基之間的氫鍵和堿基堆積力（即堿基之間的范德華力）牢固的連接起來

16、，維持DNA雙螺旋的三維結構。q兩條鏈是堿基互補關系。第41頁/共108頁3. DNA的雙螺旋結構穩定因素 氫鍵 堿基堆積力 磷酸基上負電荷被胞內組蛋白或正離子中和 堿基處于疏水環境中第42頁/共108頁4. DNA的雙螺旋結構的意義 該模型揭示了DNA作為遺傳物質的穩定性特征，最有價值的是確認了堿基配對原則，這是DNA復制、轉錄和反轉錄的分子基礎，亦是遺傳信息傳遞和表達的分子基礎。該模型的提出是上個世紀生命科學的重大突破之一，它奠定了生物化學和分子生物學乃至整個生命科學飛速發展的基石。第43頁/共108頁DNA雙螺旋構象的類型第44頁/共108頁（三）DNADNA的三級結構-超螺旋1）超螺旋

17、是指雙螺旋進一步扭曲或再螺旋的構象。2）正超螺旋（變緊，過旋）和負超螺旋（變松，欠旋）。3）人類46條染色體的DNA總長可達1.7m，經過螺旋化壓縮，實際總長只有200nm。第45頁/共108頁負超螺旋第46頁/共108頁核小體盤繞及染色質示意圖第47頁/共108頁DNADNA的存在形式-核小體 真核生物中DNA雙螺旋沿著組蛋白八聚體核心的短軸繞1.75圈，形成左手超螺旋，稱核小體。 染色質的基本結構單位是核小體。 串珠狀結構進一步卷曲形成螺線管，后者再進一步卷曲形成超螺旋管，形成染色單體。第48頁/共108頁基因和基因組 基因即一段有功能的DNA片段，生物細胞中DNA分子的最小功能單位（交換

18、單位）。 一個細胞或生物體所含的全套基因稱基因組。第49頁/共108頁二、RNA的分子結構（一） RNA的分類及特點（二） RNA分子的結構特點 第50頁/共108頁（一）RNARNA的特點及分類結構特點：1. 堿基組成：A、G、C、U （AU/GC）；2. 稀有堿基較多，穩定性較差，易水解；3. 多為單鏈結構，少數局部形成螺旋（發夾結構）；4. 分子較小。分類：1. 信使RNA（ mRNA）2. 轉運RNA （ tRNA）3. 核糖體RNA （r RNA）第51頁/共108頁 Messenger RNA Messenger RNA1)約占總RNA的3%-5%，含量最少，種類最多。2)成熟mR

19、NA不含內含子，hnRNA含有。3)mRNA從DNA轉錄遺傳信息，并作為蛋白質合成的模板，決定蛋白質的氨基酸順序。第52頁/共108頁Ribosome RNARibosome RNA 約占全部RNA的80%，含量最多。 與多種蛋白質結合成核糖體，后者是合成蛋白質的場所。第53頁/共108頁原核生物原核生物真核生物真核生物核糖體核糖體rRNArRNA核糖體核糖體rRNArRNA 30s30s70s70s 50s50s16s16s5s 5s 、23s23s 40s 40s 80s80s 50s 50s 18s18s5s5s、5.8s5.8s、28s28s第54頁/共108頁Transfer RNA

20、Transfer RNA 約占總RNA的10-15%，分子最小。 它在蛋白質生物合成中起翻譯mRNA信息，并將相應的氨基酸轉運到核糖體，參與蛋白質體的合成。 已知每一個氨基酸至少有一個相應的tRNA。第55頁/共108頁（二）RNA分子的結構特點 tRNA 的結構第56頁/共108頁二級結構二級結構特征特征： 單鏈單鏈 三葉草葉形三葉草葉形 四臂四環四臂四環三級結構三級結構 特征：特征： 在二級結構基礎上在二級結構基礎上進一步折疊扭曲形成倒進一步折疊扭曲形成倒L型型第57頁/共108頁酵母tRNA Ala 的二級結構DHU環IGC反密碼子反密碼環氨基酸臂可變環TC環CCAAla35第58頁/共

21、108頁2） rRNA的分子結構特征： 單鏈，螺旋化程度較tRNA低 與蛋白質組成核糖體后方能發揮其功能5SRNA5SRNA的二級結構第59頁/共108頁 3）mRNA的分子結構在轉錄一章講授第60頁/共108頁第四節 核酸的性質一、一般物理性質二、核酸的水解三、兩性解離四、紫外吸收性質五、穩定性六、變性七、復性與雜交第61頁/共108頁一、一般物理性質1. DNA白色纖維狀固體，RNA白色粉末狀固體，都微溶于水，不溶于乙醇，因此常用乙醇來沉淀DNA ； DNA溶液黏度大于RNA 。2. DNA難溶于0.14mol/L的NaCl溶液，可溶于 12 mol/L的NaCl溶液，RNA則相反，可據此

22、分離二者。3. 加熱條件下， D核糖濃鹽酸苔黑酚 綠色 D2脫氧核糖酸二苯胺 藍紫色第62頁/共108頁二、核酸的水解1.核酸分子中的磷酸二酯鍵可在酸或堿性條件下水解切斷。2.DNA和RNA對酸或堿的耐受程度有很大差別。室溫條件下，DNA在堿中變性，但不水解，RNA水解。3.在細胞內核酸分子受DNA酶作用。第63頁/共108頁三、兩性解離1.核酸含酸性的磷酸基團，又含弱堿性的堿基，為兩性電解質，可發生兩性解離；2.核酸相當于多元酸，pH大于4時，呈陰離子狀態；3.等電點第64頁/共108頁四、紫外吸收1.在核酸分子中嘌呤堿和嘧啶堿都含有共軛雙鍵體系，在260 nm有吸收；2.可以作為區別蛋白質

23、和對核酸及其組份定性和定量測定的依據，進行核酸純度鑒定，也可作為核酸變性和復性的指標。第65頁/共108頁DNA的紫外吸收光譜天然天然DNA變性變性DNA核苷酸總吸收值核苷酸總吸收值1232202402602800.10.20.30.4波長（nmnm）光吸收123第66頁/共108頁根據A260/A280的比值判斷核酸樣品的純度純DNA：A260/A280=1.8 純RNA：A260/A280=2.0（若樣品中含有雜蛋白或苯酚，則A260/A280比值明顯降低）純的核酸樣品可根據260nm的光吸收值算出其含量若260nm光吸收值為1相當于50g/ml雙螺旋DNA或相當于40g/ml單鏈DNA或

24、RNA或相當于20g/ml寡核苷酸。第67頁/共108頁五、DNADNA的穩定性1.DNA的溶液呈粘稠狀，但實際上DNA的雙螺旋結構僵直而有剛性，易斷成碎片，這也是目前難以獲得完整大分子DNA的原因。2.溶液狀態的DNA易受DNA酶作用而降解，抽干水分的DNA性質十分穩定。第68頁/共108頁六、DNA的變性1. 概念2. 變性條件3. 變性的特征第69頁/共108頁1. 概念是指核酸雙螺旋區的多聚核苷酸鏈間的氫鍵斷裂，變成單鏈結構的過程。第70頁/共108頁2.DNA2.DNA的變性的條件能夠引起核酸變性的因素有：1）溫度升高；2）酸堿度改變、 pH（11.3或5.0）；3）有機溶劑如甲醛和

25、尿素、甲酰胺等；4）低離子強度。第71頁/共108頁3.DNA3.DNA變性的特征 變性核酸將失去其部分或全部的生物活性。 變性改變了DNA的二級結構。核酸的變性并不涉及磷酸二酯鍵的斷裂，所以它的一級結構(堿基順序)保持不變。 DNA的變性過程是突變性的，它在很窄的溫度區間內完成。 DNA解鏈溫度 紫外吸收值明顯增加，即增色效應。 粘度降低，沉降系數增加。第72頁/共108頁DNADNA解鏈溫度（熔點，TmTm ） 當50% 的DNA變性時的溫度稱為該DNA的解鏈溫度，即增色效應達到一半時的溫度；一般DNA的Tm值在70-85C之間。 均一DNA（如病毒）的Tm值范圍較小。 分子中G和C的含量

26、越高，越不易變性，Tm值越高。可通過經驗公式計算：（G+C)%=(Tm-69.3)X2.44Tm值隨溶液鹽濃度增加而增大， Tm值較低，易變性，不易保存。第73頁/共108頁溶解曲線與T Tm m。第74頁/共108頁影響Tm值的因素 DNA的均一性 DNA中G-C對的含量 經驗式: (G-C)%=(Tm-69.3)2.44 鹽離子強度 第75頁/共108頁增色效應與減色效應 天然DNA分子在熱變性條件下，雙螺旋結構破壞，堿基暴露，在紫外光260nm波長處的吸收度明顯增加，此現象稱為增色效應。 變性DNA分子復性形成雙螺旋結構時其紫外吸收降低的現象稱為減色效應。第76頁/共108頁第77頁/共

27、108頁七、DNADNA的復性1. 概念2. 復性的條件3. 影響復性的因素4. 復性動力學5. 分子雜交第78頁/共108頁1. 1. 概念1.變性DNA在適當的條件下，兩條彼此分開的單鏈可以重新締合成為雙螺旋結構，其物理性質和生物活性隨之恢復，這一過程稱為復性；2.對于熱變性的DNA，在緩慢冷卻的條件下可重新結合恢復雙螺旋結構，稱為退火。3.DNA復性后，一系列性質將得到恢復，但是生物活性一般只能得到部分的恢復。第79頁/共108頁DNA的復性圖示第80頁/共108頁2.DNA2.DNA的復性條件1.將熱變性的DNA驟然冷卻至低溫時，DNA不可能復性。即淬火。2.將變性的DNA緩慢冷卻時，

28、可以復性。退火溫度Tm253.分子量越大復性越難。濃度越大，復性越容易。此外，DNA的復性需要一定的鹽濃度，也與它本身的組成和結構有關。第81頁/共108頁高于Tm值5 復性 也稱退火 緩緩慢慢冷冷卻卻迅迅速速冷冷卻卻第82頁/共108頁3. 影響復性的因素 樣品的性質(G+C) DNA的濃度 DNA片段的大小 溫度 離子強度 第83頁/共108頁5.5.分子雜交1.在變性的DNA溶液中加入外源DNA單鏈分子或RNA單鏈分子（與原DNA具有同源性），去掉變性條件后復性形成雙螺旋結構的過程。2.這樣形成的新分子稱為雜交DNA分子。3.利用核酸雜交可檢測特定的核苷酸片段或研究同源性等。第84頁/共

29、108頁分子雜交 探針：用于雜交的異源DNA或RNA序列，其核苷酸序列是人工特定的、已知的，經放射性標記的一條鏈。第85頁/共108頁核酸的變性、復性和雜交變性（加熱）探針雜交（緩慢冷卻）復性（緩慢冷卻）第86頁/共108頁分子雜交的種類 Southern Blot：DNA-DNA雜交 Northern Blot：DNA-RNA雜交 Western Blot：抗原-抗體進行雜交 原位雜交：活體組織上進行雜交，顯出熒光第87頁/共108頁Southern印跡法DNA分子限制片段限制性酶切割瓊脂糖電泳轉移至硝酸纖維素膜上與放射性標記DNA探針雜交放射自顯影帶有DNA片段的凝膠凝膠濾膜用緩沖液轉移D

30、NA吸附有DNA片段的膜第88頁/共108頁第五節第五節 核酸的研究方法核酸的研究方法 一、核酸的分離、提取通則 為了得到完整的大分子核酸，一般要注意3點 ：1保持低溫（04）。2防止過酸、過堿，避免劇烈攪拌。3防止核酸酶的作用。 第89頁/共108頁抑制DNase： 可加檸檬酸鈉、EDTA等金屬螯合劑；或加去污劑 十二烷基硫酸鈉（SDS）；或加蛋白變性劑。 抑制RNase： （1）實驗器皿高溫，或高壓滅菌，不能高壓滅菌的用 具用0.1%二乙基焦碳酸鹽（diethyl pyrocarbonate, DEPC）處理。 （2）加強的蛋白變性劑如硫氰酸胍、異硫氰酸胍等。 （3）加核糖核酸酶阻抑蛋白（

31、RNasin）等RNase的抑制劑。 第90頁/共108頁二、大分子DNA的提取 1材料的選擇 2細胞破碎 第91頁/共108頁3DNA-蛋白質（DNP）的提取 真核細胞DNA與蛋白質結合成核蛋白（DNP），RNA與蛋白質結合成RNP，而且DNP和RNP常常混在一起。利用DNP和RNP在不同濃度NaCl中溶解度的不同來分離DNP和RNP。 可用1mol/LNaCl溶液提取DNP。 0.51.0012 0.14相 對 溶 解 度NaCl（mol/L）DNP在NaCl中的溶解度第92頁/共108頁4去蛋白質 （1）SDS （2）苯酚法 （3）氯仿法 （4）酚:氯仿:異戊醇25:24:1 第93頁/共108頁5沉淀DNA 6去雜質 （1）去RNA （2）去多糖 7進一步純化 生物材料 DNP（RNP） DNP 纖維狀DNA 較純DNA 純DNA *原核生物的DNA是裸露的，與蛋白質結合不多，分離純化要簡單些。 破細胞1.0mol/L NaCl*去蛋白質酒精沉淀去RNA柱層析，電泳密度梯度離心去