1、第六章微生物的生長及其控制 第一節第一節 微生物生長的測定微生物生長的測定 第二節第二節 微生物的生長規律微生物的生長規律 第三節第三節 影響微生物生長的主要因素影響微生物生長的主要因素 第四節第四節 微生物培養法概論微生物培養法概論 第五節第五節 微生物生長的控制微生物生長的控制第一節第一節 微生物生長的測定微生物生長的測定 一、微生物的純培養一、微生物的純培養 二、微生物生長的測定二、微生物生長的測定 （一）微生物細胞數目的測定（一）微生物細胞數目的測定 （二）微生物生長量的測定（二）微生物生長量的測定 （三）絲狀微生物菌絲長度的測定（三）絲狀微生物菌絲長度的測定一、微生物的純培養一、微生

2、物的純培養 微生物在自然界中不僅分布很廣，而且都是微生物在自然界中不僅分布很廣，而且都是混雜地生活在一起。要想研究或利用某一微混雜地生活在一起。要想研究或利用某一微生物，必須把混雜的微生物類群分離開來，生物，必須把混雜的微生物類群分離開來，以得到只含一種微生物的培養。微生物學中以得到只含一種微生物的培養。微生物學中將在實驗室條件下從一個細胞或一種細胞群將在實驗室條件下從一個細胞或一種細胞群繁殖得到的后代稱為純培養。純培養的分離，繁殖得到的后代稱為純培養。純培養的分離，是研究和利用微生物的第一步，是微生物工是研究和利用微生物的第一步，是微生物工作中最重要的環節之一。最常用的方法有稀作中最重要的環

3、節之一。最常用的方法有稀釋平板法、劃線法、單細胞挑取法及利用選釋平板法、劃線法、單細胞挑取法及利用選擇培養基分離法等。擇培養基分離法等。純培養的分離方法純培養的分離方法 稀釋倒平板法稀釋倒平板法 劃線法劃線法 選擇培養基分離法選擇培養基分離法 單細胞挑取法單細胞挑取法 稀釋倒平板法稀釋倒平板法（傾注法（混菌法）、涂布法傾注法（混菌法）、涂布法） 這是最常用的純種分離法，先將待分離的材這是最常用的純種分離法，先將待分離的材料作一系列的稀釋料作一系列的稀釋( (如如1 1：1010、1 1：100100、1 1：10001000、1 1：1010，000)000)，然后分別取不同，然后分別取不同稀

4、釋液少許，與已熔化并冷卻至稀釋液少許，與已熔化并冷卻至4545的瓊脂的瓊脂培養基相混合，搖勻后，傾入滅過菌的培養培養基相混合，搖勻后，傾入滅過菌的培養皿中，待瓊脂凝固后，保溫培養一定時間即皿中，待瓊脂凝固后，保溫培養一定時間即可出現菌落。如果稀釋得當，平皿上就可出可出現菌落。如果稀釋得當，平皿上就可出現分散的單個菌落，這個菌落可能就是由一現分散的單個菌落，這個菌落可能就是由一個細胞繁殖形成的。隨后挑取該單個菌落，個細胞繁殖形成的。隨后挑取該單個菌落，或重復以上操作數次，便可得到純培養。或重復以上操作數次，便可得到純培養。劃線法劃線法 將已熔化的培養基倒入無菌平皿，冷卻凝固后，將已熔化的培養基倒

5、入無菌平皿，冷卻凝固后，用接種環沾取少許待分離的材料，在培養基表用接種環沾取少許待分離的材料，在培養基表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線，微生物將隨著劃線次數的增加而分散，劃線，微生物將隨著劃線次數的增加而分散，經保溫培養形成菌落。劃線開始的部分細菌分經保溫培養形成菌落。劃線開始的部分細菌分散度小，形成的菌落往往連在一起。由于連續散度小，形成的菌落往往連在一起。由于連續劃線，微生物逐漸減少，劃到最后，常可形成劃線，微生物逐漸減少，劃到最后，常可形成單個孤立的菌落。這種單個菌落可能由一個細單個孤立的菌落。這種單個菌落可能由一個細胞繁殖而來，故可

6、獲得純培養。用其他工具如胞繁殖而來，故可獲得純培養。用其他工具如彎形玻璃代替接種環，在培養基表面涂布，亦彎形玻璃代替接種環，在培養基表面涂布，亦可得到同樣結果。此法較為簡便可得到同樣結果。此法較為簡便。單細胞挑取法單細胞挑取法 這種方法是從待分離的材料中挑取一個細胞這種方法是從待分離的材料中挑取一個細胞來培養，從而獲得純培養。具體方法是將顯來培養，從而獲得純培養。具體方法是將顯微鏡挑取器裝置在顯微鏡上，把一滴菌懸液微鏡挑取器裝置在顯微鏡上，把一滴菌懸液置于載玻片上，用安裝在顯微鏡挑取器上的置于載玻片上，用安裝在顯微鏡挑取器上的極細的毛細吸管，在顯微鏡下對準某一個單極細的毛細吸管，在顯微鏡下對準

7、某一個單獨的細胞挑取，再接種到培養基上培養。此獨的細胞挑取，再接種到培養基上培養。此法需要非常熟練的操作人員，多限于高度專法需要非常熟練的操作人員，多限于高度專業化的科學研究中采用。業化的科學研究中采用。利用選擇培養基分離法利用選擇培養基分離法 不同微生物需要不同的營養物質。有些微生物生長適不同微生物需要不同的營養物質。有些微生物生長適于酸性環境，有些則適于堿性環境。各種微生物對不于酸性環境，有些則適于堿性環境。各種微生物對不同的化學試劑如消毒劑同的化學試劑如消毒劑( (酚酚) )、染料、染料( (結晶紫等結晶紫等) )、抗生、抗生素及其他物質等具有不同的抵抗能力。利用這些特性，素及其他物質等

8、具有不同的抵抗能力。利用這些特性，便可配制成適合于某種微生物生長而限制其他微生物便可配制成適合于某種微生物生長而限制其他微生物生長的各種選擇性培養基，以達到純種分離的目的。生長的各種選擇性培養基，以達到純種分離的目的。另外，也可以將待分離的樣品先進行適當處理，以消另外，也可以將待分離的樣品先進行適當處理，以消除不希望分離到的微生物。對一些生理類型比較特殊除不希望分離到的微生物。對一些生理類型比較特殊的微生物，為了提高分離機率，往往在涂布分離前先的微生物，為了提高分離機率，往往在涂布分離前先進行富集培養，其目的是提供一個特別設計的培養環進行富集培養，其目的是提供一個特別設計的培養環境，以幫助所需

9、的特殊生理類型的微生物的生長，而境，以幫助所需的特殊生理類型的微生物的生長，而不利于其他類型微生物的生長。不利于其他類型微生物的生長。選擇培養基分離法1.dilute sample1 ml9 ml10 100 1000 104 105 106 107牛肉膏培養基牛肉膏培養基土豆培養基土豆培養基高氏培養基高氏培養基 微生物純培養分離方法的比較微生物純培養分離方法的比較稀釋平板法稀釋平板法 既可定性，又可定量，用途廣泛既可定性，又可定量，用途廣泛平板劃線法平板劃線法 方法簡便，多用于分離細菌方法簡便，多用于分離細菌單細胞挑取法單細胞挑取法 局限于高度專業化的科學研究局限于高度專業化的科學研究利用選

10、擇培養基法利用選擇培養基法 適用于分離某些生理類型適用于分離某些生理類型 較特殊的微生物較特殊的微生物二、微生物生長的測定二、微生物生長的測定 微生物特別是單細胞微生物，體積很小，個體的微生物特別是單細胞微生物，體積很小，個體的生長很難測定，而且也沒有什么實際應用價值。生長很難測定，而且也沒有什么實際應用價值。因此，因此，在微生物學的研究和應用中，在微生物學的研究和應用中，通常是測定通常是測定群體的增加量，即群體的生長。群體的增加量，即群體的生長。 測定不同種類、不同生長狀態微生物的生長情況，測定不同種類、不同生長狀態微生物的生長情況，需要選用不同的指標。通常對單細胞微生物來說，需要選用不同的

11、指標。通常對單細胞微生物來說，既可測定細胞數目，又可測定生長量；而對多細既可測定細胞數目，又可測定生長量；而對多細胞微生物胞微生物( (尤其是絲狀真菌尤其是絲狀真菌) )，則常以菌絲生長的，則常以菌絲生長的長度等作為生長指標。長度等作為生長指標。 （一）微生物細胞數目的測定（一）微生物細胞數目的測定 適用于單細胞微生物或絲狀微生物的孢子適用于單細胞微生物或絲狀微生物的孢子 直接計數法直接計數法總菌計數總菌計數 1 1、計數板計數法（常用）、計數板計數法（常用） 2 2、比例計數法、比例計數法 間接計數法間接計數法活菌計數活菌計數 1 1、平板菌落計數法、平板菌落計數法 2 2、液體稀釋法、液體

12、稀釋法 3 3、厭氧菌菌落計數、厭氧菌菌落計數 其他計數法其他計數法 1 1、比濁法、比濁法 2 2、膜過濾法、膜過濾法 血球計數板血球計數板 各各種種型型號號的的全全自自動動血血球球計計數數儀儀活菌計數的一般步驟活菌計數的一般步驟 （二）微生物生長量的測定（二）微生物生長量的測定 適用于一切微生物適用于一切微生物 直接法直接法 1 1、測體積法、測體積法 2 2、稱重法、稱重法 間接法間接法 1 1、含氮量測定法、含氮量測定法 2 2、DNADNA含量測定法含量測定法 3 3、其他生理指標法、其他生理指標法（三）絲狀微生物菌絲長度的測定（三）絲狀微生物菌絲長度的測定 培養基表面菌體生長速率測

13、定法培養基表面菌體生長速率測定法 培養料中菌體速率測定法培養料中菌體速率測定法 單個菌絲頂端生長速率測定法單個菌絲頂端生長速率測定法 第二節第二節 微生物的生長規律微生物的生長規律一、微生物的個體生長和同步生長一、微生物的個體生長和同步生長二、單細胞微生物的典型生長曲線二、單細胞微生物的典型生長曲線三、微生物的連續培養三、微生物的連續培養四、微生物的高密度培養四、微生物的高密度培養一、微生物的個體生長和同步生長一、微生物的個體生長和同步生長 微生物在適宜的環境條件下，不斷地微生物在適宜的環境條件下，不斷地吸收營養物質，并按照自己的代謝方吸收營養物質，并按照自己的代謝方式進行代謝活動，如果同化作

14、用大于式進行代謝活動，如果同化作用大于異化作用，則細胞質的量不斷增加，異化作用，則細胞質的量不斷增加，體積得以加大，于是表現為生長。簡體積得以加大，于是表現為生長。簡單地說，生長就是有機體的細胞組分單地說，生長就是有機體的細胞組分與結構在量方面的增加。與結構在量方面的增加。 同步培養技術：同步培養技術：是指設法使某一群體是指設法使某一群體中的所有個體細胞盡可能都處于同樣中的所有個體細胞盡可能都處于同樣細胞生長和分裂周期的一種培養方式。細胞生長和分裂周期的一種培養方式。通過分析此群體在各階段的生物化學通過分析此群體在各階段的生物化學特性變化，來間接了解單個細胞的相特性變化，來間接了解單個細胞的相

15、應變化規律。應變化規律。 同步生長同步生長：通過同步培養的手段而使：通過同步培養的手段而使細胞群體中各個體處于分裂步調一致細胞群體中各個體處于分裂步調一致的生長狀態的一種生長方式。的生長狀態的一種生長方式。獲得微生物同步生長的方法獲得微生物同步生長的方法 選擇法選擇法 誘導法誘導法同步生長的細胞經過同步生長的細胞經過23個分裂周期后會喪失同步性。個分裂周期后會喪失同步性。離心分離法離心分離法過濾分離法過濾分離法膜洗脫法膜洗脫法控制溫度控制溫度控制培養基成分控制培養基成分抑制抑制DNADNA合成法合成法選擇法選擇法 又稱機械篩選法，是通過物理學方法從隨又稱機械篩選法，是通過物理學方法從隨機、不同

16、步群體中選擇出同步的群體。機、不同步群體中選擇出同步的群體。 此法可在不影響微生物代謝的情況下獲得此法可在不影響微生物代謝的情況下獲得同步培養物。同步培養物。 若微生物在相同發育階段大小不一，則不若微生物在相同發育階段大小不一，則不適宜用此法。適宜用此法。 舉例：過濾分離法、密度梯度離心法、舉例：過濾分離法、密度梯度離心法、 膜洗脫（常用）等。膜洗脫（常用）等。誘導法誘導法 誘導因子：不影響微生物生長，可特異性抑制細誘導因子：不影響微生物生長，可特異性抑制細胞分裂，消除該抑制后，細胞同時出現分裂。胞分裂，消除該抑制后，細胞同時出現分裂。 此法會擾亂細胞的正常代謝此法會擾亂細胞的正常代謝 舉例：

17、舉例： 1 1、溫度調整法；、溫度調整法； 2 2、營養條件調整法；、營養條件調整法； 3 3、抑制、抑制DNADNA合成法合成法（代謝抑制劑：）（代謝抑制劑：） （抑制抑制DNADNA合成法是利用代謝抑制劑阻礙合成法是利用代謝抑制劑阻礙DNADNA合成相當一合成相當一 段時間，然后解除其抑制，可達到同步目的。常用的代段時間，然后解除其抑制，可達到同步目的。常用的代 謝抑制劑：氨甲蝶呤、羥基尿素、謝抑制劑：氨甲蝶呤、羥基尿素、5-5-氟脫氧尿苷、胸腺氟脫氧尿苷、胸腺 苷、脫氧腺苷、脫氧鳥苷等。苷、脫氧腺苷、脫氧鳥苷等。 ）二、單細胞微生物的生長曲線二、單細胞微生物的生長曲線 多數細菌的繁殖速度

18、很快。大腸桿菌在適宜的條多數細菌的繁殖速度很快。大腸桿菌在適宜的條件下繁殖件下繁殖4848h h，其子代總重可達其子代總重可達2.22.210 10 3131g g，這這是一個巨大的數字。然而，實際情況是不可能的。是一個巨大的數字。然而，實際情況是不可能的。那么，細菌的群體生長規律到底怎樣呢那么，細菌的群體生長規律到底怎樣呢? ? 將少量單細胞純培養物接種到一恒定容積的新鮮將少量單細胞純培養物接種到一恒定容積的新鮮液體培養基中，在適宜的條件下培養，定時取樣液體培養基中，在適宜的條件下培養，定時取樣測定細胞含量，可以看到以下現象：開始有一短測定細胞含量，可以看到以下現象：開始有一短暫時間，細胞數

19、量并不增加，隨之細胞數目增加暫時間，細胞數量并不增加，隨之細胞數目增加很快，繼而細胞數又趨穩定，最后逐漸下降。如很快，繼而細胞數又趨穩定，最后逐漸下降。如果以培養時間為橫坐標，以細胞數目的對數或生果以培養時間為橫坐標，以細胞數目的對數或生長速度為縱坐標作圖，可以得到一條曲線，稱為長速度為縱坐標作圖，可以得到一條曲線，稱為生長曲線。生長曲線。微生物的典型生長曲線微生物的典型生長曲線(growth curve)總菌數總菌數活菌數活菌數培養時間培養時間/ /h h . .指數期指數期 . .穩定期穩定期 . .衰亡期衰亡期. .延滯期延滯期細菌數目（個細菌數目（個/ /mlml）對數對數n 根據微生

20、物的根據微生物的生長速率常數生長速率常數的不同，可將生長的不同，可將生長曲線大致分為四個時期：曲線大致分為四個時期： （一）延滯期（一）延滯期( (lag phase)lag phase) 延滯期出現的原因延滯期出現的原因 把少數單細胞微生物接種到新鮮的培養基把少數單細胞微生物接種到新鮮的培養基中培養時，細胞并不立即進行分裂繁殖，微生中培養時，細胞并不立即進行分裂繁殖，微生物的增殖數為，這時物的增殖數為，這時細胞需要合成多種酶，細胞需要合成多種酶，輔酶和某些中間代謝產物，因此要經歷一個調輔酶和某些中間代謝產物，因此要經歷一個調整和適應過程。整和適應過程。 延滯期的特點延滯期的特點 1 1、生長

21、速率常數為零；、生長速率常數為零； 2 2、細胞形態變大或增長；、細胞形態變大或增長； 3 3、細胞內的、細胞內的RNARNA含量增高，原生質呈嗜堿性；含量增高，原生質呈嗜堿性； 4 4、合成代謝十分活躍；、合成代謝十分活躍； 5 5、對外界不良環境反應敏感。、對外界不良環境反應敏感。 影響延滯期長短的因素影響延滯期長短的因素 1. 1.菌種特性；菌種特性； 2. 2.接種齡；接種齡； 3. 3.接種量；接種量； 4. 4.培養基成分培養基成分 縮短延滯期的方法縮短延滯期的方法 1 1、接種對數生長期的菌種，采用最適菌齡；接種對數生長期的菌種，采用最適菌齡； 2 2、加大接種量；加大接種量；

22、3 3、用營養豐富的天然培養基等。用營養豐富的天然培養基等。 （二）指數期（二）指數期 ( (exponential phase)exponential phase) 指數期的特點指數期的特點 1 1、活菌數和總菌數接近、活菌數和總菌數接近 2 2、生長速率常數最大，代時、生長速率常數最大，代時(generation time，G)最短最短 3 3、細胞進行平衡生長，細胞的化學組成及形態，、細胞進行平衡生長，細胞的化學組成及形態， 生理特性比較一致生理特性比較一致 4 4、酶系活躍，代謝旺盛、酶系活躍，代謝旺盛 該期的微生物生產中多被用做種子和科學試驗材料該期的微生物生產中多被用做種子和科學試

23、驗材料x2x1t2t1培養時間培養時間Lg 細胞數細胞數/mlt2 - t13.322(lgx2-lgx1)生長速率常數生長速率常數R=t2 - t13.322(lgx2-lgx1)代時代時G G= =指數期生長的數學模型指數期生長的數學模型繁殖代數繁殖代數 n n=3.322(lgx=3.322(lgx2 2-lgx-lgx1 1) ) 生長速率常數生長速率常數R R：指細胞每小時的分裂次數。指細胞每小時的分裂次數。 代時代時G G：細胞每分裂一次所需的時間。細胞每分裂一次所需的時間。 R=1/GR=1/G影響指數期微生物代時長短的因素影響指數期微生物代時長短的因素 菌種菌種 營養成分營養成

24、分 營養物濃度營養物濃度 培養溫度培養溫度（三）穩定期（三）穩定期 ( (stationary phase)stationary phase) 穩定期的特點穩定期的特點 1 1、生長速率常數、生長速率常數R R等于零，活菌數達到最高峰，等于零，活菌數達到最高峰， 并保持相對穩定。并保持相對穩定。 2 2、微生物細胞內代謝物積累達到最高峰。、微生物細胞內代謝物積累達到最高峰。 3 3、芽孢桿菌這時開始形成芽孢。、芽孢桿菌這時開始形成芽孢。 4 4、這是產物（菌體或與菌體生長相平行的代謝、這是產物（菌體或與菌體生長相平行的代謝 產物）的最佳收獲時期。產物）的最佳收獲時期。 穩定期到來的原因穩定期到

25、來的原因 1 1、營養物尤其是生長限制因子的耗盡、營養物尤其是生長限制因子的耗盡 2 2、營養物的比例失調、營養物的比例失調 3 3、有害代謝產物的積累、有害代謝產物的積累 4 4、pHpH值、值、E Eh h值等理化條件不適宜值等理化條件不適宜（四）衰亡期（四）衰亡期 ( (decline phase)decline phase) 衰亡期的特點衰亡期的特點1 1、微生物死亡數大于增殖數，活菌數大大減少，、微生物死亡數大于增殖數，活菌數大大減少， 群體衰落群體衰落2 2、細胞出現多形態、細胞出現多形態, ,大小不等的畸形大小不等的畸形, ,變成衰退型變成衰退型3 3、細胞死亡、細胞死亡, ,出

26、現自溶現象。出現自溶現象。4 4、有的微生物在此期合成或釋放次生代謝物。、有的微生物在此期合成或釋放次生代謝物。5 5、芽孢桿菌在此期釋放芽孢。、芽孢桿菌在此期釋放芽孢。三、微生物的連續培養三、微生物的連續培養 將微生物置于一定容積的培養基中，經過培養生將微生物置于一定容積的培養基中，經過培養生長，最后一次收獲，此稱分批培養長，最后一次收獲，此稱分批培養( (batch culture)batch culture)。通過對細菌純培養的生長曲線的分析可知，在分批通過對細菌純培養的生長曲線的分析可知，在分批培養中，培養基一次加入，不予補充，細菌的對數培養中，培養基一次加入，不予補充，細菌的對數生長

27、期不可能長時間維持。生長期不可能長時間維持。 如果在培養器中不斷補充新鮮營養物質，并及如果在培養器中不斷補充新鮮營養物質，并及時不斷地以同樣速度排出培養物時不斷地以同樣速度排出培養物( (包括菌體及代謝產包括菌體及代謝產物物) )，理論上講，對數生長期就可無限延長。這種方，理論上講，對數生長期就可無限延長。這種方法就叫連續培養法。連續培養方法的出現，不僅可法就叫連續培養法。連續培養方法的出現，不僅可隨時為微生物的研究工作提供一定生理狀態的實驗隨時為微生物的研究工作提供一定生理狀態的實驗材料，而且可提高發酵工業的生產效益和自動化水材料，而且可提高發酵工業的生產效益和自動化水平。此法已成為當前發酵

28、工業的發展方向。平。此法已成為當前發酵工業的發展方向。 優點：優點：縮短發酵周期；便于自動控制；產物質量均一縮短發酵周期；便于自動控制；產物質量均一 缺點：菌種易退化；易染雜菌缺點：菌種易退化；易染雜菌 ( (一一) )恒濁連續培養恒濁連續培養 不斷調節流速而使細菌培養液不斷調節流速而使細菌培養液濁度保持恒濁度保持恒定定的連續培養方法叫恒濁連續培養。在恒濁連的連續培養方法叫恒濁連續培養。在恒濁連續培養中裝有濁度計，借光電池檢測培養室中續培養中裝有濁度計，借光電池檢測培養室中的濁度的濁度( (即菌液濃度即菌液濃度) )，并由光電效應產生的電，并由光電效應產生的電信號強弱變化，來自動調節新鮮培養基

29、流入和信號強弱變化，來自動調節新鮮培養基流入和培養物流出培養室的流速。培養物流出培養室的流速。 ( (二二) )恒化連續培養恒化連續培養 控制控制恒定的流速恒定的流速，使由于細菌生長而耗去，使由于細菌生長而耗去的營養物及時得到補充，培養室中營養物濃度的營養物及時得到補充，培養室中營養物濃度基本恒定，從而保持細菌的恒定生長速率，故基本恒定，從而保持細菌的恒定生長速率，故稱恒化連續培養，又叫恒組成連續培養。稱恒化連續培養，又叫恒組成連續培養。裝置裝置控制對象控制對象培養基培養基培養液流速培養液流速生長速率生長速率產物產物應用范圍應用范圍恒濁器恒濁器菌體密度菌體密度（內控制）（內控制）無限制無限制生

30、長因生長因子子不恒定不恒定最高速率最高速率大量菌體大量菌體或與菌體或與菌體相平行的相平行的代謝產物代謝產物生產為主生產為主恒化器恒化器培養液流速培養液流速（外控制）（外控制）有限制有限制生長因生長因子子恒定恒定低于最高低于最高速率速率不同生長不同生長速率的菌速率的菌體體實驗室為實驗室為主主恒濁器與恒化器的比較恒濁器與恒化器的比較第三節第三節 影響微生物生長的主要因素影響微生物生長的主要因素一、溫度一、溫度二、氧氣二、氧氣三、三、pHpH 一、溫度一、溫度 影響微生物生長繁殖的最重要因素之一。影響微生物生長繁殖的最重要因素之一。 就總體而言，微生物生長的溫度范圍較廣，就總體而言，微生物生長的溫度

31、范圍較廣，已知的微生物在已知的微生物在-10-109595范圍內生長。而范圍內生長。而對某一具體微生物而言，只能在一定的溫對某一具體微生物而言，只能在一定的溫度范圍內生長，且此溫度范圍有寬、有窄。度范圍內生長，且此溫度范圍有寬、有窄。 生長溫度三基點：任何微生物的生長溫度生長溫度三基點：任何微生物的生長溫度總有總有最低生長溫度、最適生長溫度、最高最低生長溫度、最適生長溫度、最高生長溫度。生長溫度。溫溫 度度 生長速度生長速度溫度停止生長停止生長致死致死最低最低最高最高最適最適 嗜冷菌嗜冷菌 嗜熱菌嗜熱菌l 嗜冷菌嗜冷菌 其生長溫度范圍在其生長溫度范圍在10102020，最適生長，最適生長溫度為

32、溫度為1515或以下，或以下，它們常分布在地球兩極地區的水它們常分布在地球兩極地區的水域和土壤中。域和土壤中。 嗜冷機制：嗜冷機制：酶系在低溫下仍能起催化作用酶系在低溫下仍能起催化作用 細胞膜含較多的不飽和脂肪酸細胞膜含較多的不飽和脂肪酸 ， 在低溫下仍具有通透性。在低溫下仍具有通透性。 嗜熱菌嗜熱菌 它們適于在它們適于在45455050以上的溫度中生長，以上的溫度中生長，在自然界中的分布僅局限制于某些地區，如溫泉、日在自然界中的分布僅局限制于某些地區，如溫泉、日照充足的土壤表面、堆肥堆、發酵飼料等腐爛有機物照充足的土壤表面、堆肥堆、發酵飼料等腐爛有機物中，比如堆肥在發酵過程中溫度常高達中，比

33、如堆肥在發酵過程中溫度常高達60607070。 嗜熱機制：嗜熱機制： 細胞內的酶具強抗熱性。細胞內的酶具強抗熱性。 產生的多胺，熱亞胺和高溫精胺物質對蛋白質產生的多胺，熱亞胺和高溫精胺物質對蛋白質 等組織結構具有保護作用。等組織結構具有保護作用。 核酸也具有熱穩定性的保護結構。核酸也具有熱穩定性的保護結構。 細胞膜含有較多的飽和脂肪酸和直鏈脂肪酸，細胞膜含有較多的飽和脂肪酸和直鏈脂肪酸， 使膜具有穩定性。使膜具有穩定性。二、氧氣二、氧氣 專性好氧菌專性好氧菌：需氧，正常大氣壓下呼吸產能需氧，正常大氣壓下呼吸產能 以呼吸為主，兼營發酵產能以呼吸為主，兼營發酵產能 好氧菌好氧菌 兼性厭氧菌兼性厭氧

34、菌 以呼吸為主，兼營厭氧呼吸產能以呼吸為主，兼營厭氧呼吸產能 微好氧菌微好氧菌：需要微量氧下生活需要微量氧下生活 耐氧菌耐氧菌：不需氧，只以發酵產能，氧無毒害不需氧，只以發酵產能，氧無毒害 厭氧菌厭氧菌 ( (專性專性) )厭氧菌厭氧菌：氧有害或致死，以發酵或無氧呼吸產能氧有害或致死，以發酵或無氧呼吸產能 氧與細菌生長的關系氧與細菌生長的關系 專性好氧菌（專性好氧菌（obligate or strict aerobesobligate or strict aerobes） 必須在較高濃度分子氧的條件下才能生長，有完必須在較高濃度分子氧的條件下才能生長，有完整的呼吸鏈，以分子氧作最終氫受體，具有

35、超氧化物整的呼吸鏈，以分子氧作最終氫受體，具有超氧化物歧化酶（歧化酶（SODSOD）和過氧化氫酶（和過氧化氫酶（Catalase Catalase ）。）。絕大多絕大多數真菌和多數細菌、放線菌都是專性好氧菌。數真菌和多數細菌、放線菌都是專性好氧菌。 兼性厭氧菌（兼性厭氧菌（facultative anaerobesfacultative anaerobes） 在有氧條件下生長為主（以呼吸產能），兼在厭在有氧條件下生長為主（以呼吸產能），兼在厭氧條件下生長（以發酵或無氧呼吸產能）。細胞內含氧條件下生長（以發酵或無氧呼吸產能）。細胞內含有有SODSOD和過氧化氫酶。許多酵母菌和不少細菌都是兼性和過

36、氧化氫酶。許多酵母菌和不少細菌都是兼性厭氧菌。厭氧菌。 微好氧菌（微好氧菌（microaerophilic bacteriamicroaerophilic bacteria） 在較低氧分壓下才能正常生長。通過呼吸鏈以氧在較低氧分壓下才能正常生長。通過呼吸鏈以氧作最終氫受體而產能。作最終氫受體而產能。 耐氧菌（耐氧菌（aerotolerant anaerobesaerotolerant anaerobes） 在分子氧存在下進行發酵性厭氧生活。不需要氧，在分子氧存在下進行發酵性厭氧生活。不需要氧，氧對其無害。不具有呼吸鏈，依靠專性發酵和底物水氧對其無害。不具有呼吸鏈，依靠專性發酵和底物水平磷酸化獲

37、得能量。細胞內存在平磷酸化獲得能量。細胞內存在SODSOD和過氧化物酶和過氧化物酶（缺乏過氧化氫酶）。通常的乳酸菌多為耐氧菌。（缺乏過氧化氫酶）。通常的乳酸菌多為耐氧菌。 厭氧菌（厭氧菌（anaerobesanaerobes） 可分為一般厭氧菌和嚴格厭氧菌。可分為一般厭氧菌和嚴格厭氧菌。 厭氧菌（厭氧菌（anaerobesanaerobes） 將環境中氧吸掉；抽真空；深層培養將環境中氧吸掉；抽真空；深層培養氧對其有毒氧對其有毒 能量來源于發酵能量來源于發酵、無氧呼吸無氧呼吸、環式光合磷酸化或甲烷發酵環式光合磷酸化或甲烷發酵O2. -超氧陰離子自由基超氧陰離子自由基 普遍存在普遍存在H2O+1/

38、2O2 過氧化氫酶過氧化氫酶（好氧菌）（好氧菌）2H2O過氧化物酶過氧化物酶（耐氧菌）（耐氧菌）NADH2NADO2. +2H+ H2O2+O2 -SOD（好氧菌及耐氧菌）（好氧菌及耐氧菌）11 11 11 細胞內缺乏細胞內缺乏SODSOD、細胞色素氧化酶和過氧化氫酶細胞色素氧化酶和過氧化氫酶A. + B. A:B 共價結合共價結合均裂均裂三、三、pHpH 作為一個整體來說，微生物生長的作為一個整體來說，微生物生長的pHpH范圍極廣范圍極廣（2 21010），有少數種類還可超出這一范圍。），有少數種類還可超出這一范圍。但絕大多數微生物的生長但絕大多數微生物的生長pHpH都在都在5 59 9之間

39、。之間。 不同微生物的生長不同微生物的生長pHpH存在最低、最適與最高三個存在最低、最適與最高三個數值。數值。 不同微生物有其最適生長不同微生物有其最適生長pHpH，另外，同一微生物另外，同一微生物在其不同生長階段和不同生理、生化過程，也有在其不同生長階段和不同生理、生化過程，也有不同最適不同最適pHpH要求。要求。 各類微生物能夠生長的各類微生物能夠生長的pHpH值較寬，但細胞內部值較寬，但細胞內部pHpH值卻接近中性。值卻接近中性。 微生物生命活動能改變外界環境微生物生命活動能改變外界環境pHpH，如如 糖類糖類 pHpH 有機物有機物 脂肪脂肪 pHpH培養基內培養基內 蛋白質蛋白質 p

40、HpH中性成分中性成分 ( (NHNH4 4) )2 2SOSO4 4pHpH 無機鹽無機鹽 NaNONaNO3 3 - pH- pH發酵、氧化發酵、氧化水解水解脫羧脫羧選擇吸收選擇吸收選擇吸收選擇吸收 過酸時：過酸時：加加NaOHNaOH、NaNa2 2COCO3 3等堿液中和等堿液中和 治標治標 過堿時：過堿時：加加H H2 2SOSO4 4、HClHCl等酸液中和等酸液中和 pHpH 調節調節 加適當氮源：加尿素、加適當氮源：加尿素、 NaNONaNO3 3、 過酸時過酸時 NHNH4 4OH OH 或蛋白質等或蛋白質等 治本治本 提高通氣量提高通氣量 加適當碳源：加糖、乳酸、醋酸、加適

41、當碳源：加糖、乳酸、醋酸、 檸檬酸或油脂檸檬酸或油脂 過堿時過堿時 降低通氣量降低通氣量 第四節第四節 微生物培養法概論微生物培養法概論一、實驗室的微生物培養法一、實驗室的微生物培養法二、生產實踐中的微生物培養法二、生產實踐中的微生物培養法實驗室的微生物培養法好氧培養法好氧培養法 厭氧培養法厭氧培養法好氧菌液體培養法好氧菌液體培養法好氧菌固體培養法好氧菌固體培養法厭氧菌固體培養法厭氧菌固體培養法厭氧菌液體培養法厭氧菌液體培養法試管液體培養試管液體培養淺層液體培養淺層液體培養搖瓶培養搖瓶培養臺式發酵罐臺式發酵罐高層瓊脂柱法高層瓊脂柱法厭氧培養皿法厭氧培養皿法厭氧罐技術厭氧罐技術厭氧手套箱技術厭氧

42、手套箱技術亨蓋特滾管技術亨蓋特滾管技術 試管斜面、平板試管斜面、平板茄瓶、曲盤茄瓶、曲盤Different culture methodsLiquid CultureBatch culture Batch & Continuous culture10 ml20 ml- 1 L1 L - 1000LFermentor.Brewer 皿皿. .高層瓊脂柱高層瓊脂柱亨蓋特技術亨蓋特技術 厭氧罐厭氧罐anaerobic jarAnaerobic Glove Box生產實踐中的微生物培養法好氧培養法好氧培養法厭氧培養法厭氧培養法好氧菌液體培養法深層液體通風培養好氧菌液體培養法深層液體通風培養好氧

43、菌固體培養法曲法培養好氧菌固體培養法曲法培養厭氧菌固體培養法堆積培養厭氧菌固體培養法堆積培養厭氧菌液體培養法液體靜置培養厭氧菌液體培養法液體靜置培養生產實踐中微生物培養的實例生產實踐中微生物培養的實例發酵類型發酵類型 生產實例生產實例 設設 備備固體好氧固體好氧醬油醬油、食醋食醋、白酒白酒、制醬等制曲工藝制醬等制曲工藝厚層通風池，固厚層通風池，固體發酵罐體發酵罐固體厭氧固體厭氧白酒白酒，青貯飼料青貯飼料池，罐，壇，缸，池，罐，壇，缸，坑，瓶等坑，瓶等液液體好氧體好氧有機酸有機酸，氨基酸氨基酸，抗生素抗生素，酶制劑等酶制劑等搖床，液體深層搖床，液體深層發酵罐發酵罐液液體厭氧體厭氧啤酒啤酒，葡萄酒

44、葡萄酒，酸乳等酸乳等池，罐，壇，缸，池，罐，壇，缸，坑，瓶等坑，瓶等掛曲掛曲小小曲曲紅紅曲曲近代人工踏制大曲近代人工踏制大曲A whole process of DA-QU prepation固體好氧固體好氧通風曲通風曲fermenter第五節第五節 微生物生長的控制微生物生長的控制一、幾個基本概念一、幾個基本概念二、控制微生物生長的物理方法二、控制微生物生長的物理方法 三、控制微生物生長的化學方法三、控制微生物生長的化學方法一、幾個基本概念一、幾個基本概念 殺菌殺菌 滅菌：徹底殺滅（一切微生物）滅菌：徹底殺滅（一切微生物） 殺滅法殺滅法 溶菌溶菌 消毒：部分殺滅（僅殺滅病原菌）消毒：部分殺滅

45、（僅殺滅病原菌）控制有害菌控制有害菌 的措施的措施 防腐：抑制霉腐微生物防腐：抑制霉腐微生物 抑制法抑制法 化療：抑制寄主體內的病原菌化療：抑制寄主體內的病原菌 滅菌（滅菌（sterilitionsterilition） ：采用強烈的理化采用強烈的理化因素使任何物體內外部的一切微生物永遠因素使任何物體內外部的一切微生物永遠喪失其生長繁殖能力的措施。喪失其生長繁殖能力的措施。 消毒消毒( (disinfection)disinfection) ：采用較溫和的理化采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內部一部分對人因素，僅殺死物體表面或內部一部分對人體或動、植物有害的病原菌。而對被消毒體或動、植物

46、有害的病原菌。而對被消毒的對象基本無害的措施。的對象基本無害的措施。 防腐防腐( (antisepsis)antisepsis) ：利用某種理化因素完利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖，即通過制全抑制霉腐微生物的生長繁殖，即通過制菌作用防止食品、生物制品等對象發生霉菌作用防止食品、生物制品等對象發生霉腐的措施。腐的措施。 化療化療( (chemotherapy)chemotherapy) ：利用具有高度選擇利用具有高度選擇毒力即對病原菌具高度毒力而對其宿主基毒力即對病原菌具高度毒力而對其宿主基本無毒的化學物質來抑制宿主體內病原微本無毒的化學物質來抑制宿主體內病原微生物的生長繁殖，借以

47、達到治療該宿主傳生物的生長繁殖，借以達到治療該宿主傳染病的一種措施。染病的一種措施。二、控制微生物生長的物理方法二、控制微生物生長的物理方法 高溫滅菌高溫滅菌（重點介紹）（重點介紹） 低溫抑菌低溫抑菌 輻射輻射 干燥和滲透壓干燥和滲透壓 過濾除菌過濾除菌 超聲波超聲波 火焰灼燒法火焰灼燒法（焚燒滅菌法）焚燒滅菌法） 干熱滅菌法干熱滅菌法 烘箱內熱空氣滅菌法烘箱內熱空氣滅菌法高溫滅菌高溫滅菌 巴氏消毒法巴氏消毒法 常壓下常壓下 煮沸消毒法煮沸消毒法 濕熱滅菌法濕熱滅菌法 間歇滅菌法間歇滅菌法 常規加壓滅菌法常規加壓滅菌法 加壓下加壓下 連續加壓滅菌連續加壓滅菌法濕熱滅菌效果比干熱滅菌效果好 焚燒

48、滅菌法（火焰灼燒法）焚燒滅菌法（火焰灼燒法） 此法滅菌徹底，迅速簡便，但使用范此法滅菌徹底，迅速簡便，但使用范圍有限。常用于接種工具、污染物品以及圍有限。常用于接種工具、污染物品以及實驗動物尸體等廢棄物的處理。實驗動物尸體等廢棄物的處理。 烘烤滅菌法烘烤滅菌法 主要在干燥箱中利用熱空氣進行滅菌。主要在干燥箱中利用熱空氣進行滅菌。通常通常160160處理處理1 12 2h h便可達到滅菌的目的。便可達到滅菌的目的。如果被處理物傳熱性差、體積較大或堆積如果被處理物傳熱性差、體積較大或堆積過擠時，需適當延長時間。此法只適用于過擠時，需適當延長時間。此法只適用于玻璃器皿、金屬用具等耐熱物品的滅菌。玻璃

49、器皿、金屬用具等耐熱物品的滅菌。其優點是可保持物品干燥。其優點是可保持物品干燥。n 巴氏消毒法巴氏消毒法( (pasteurization)pasteurization)是食品（牛奶）釀造（啤酒）工業中常用的方法。是食品（牛奶）釀造（啤酒）工業中常用的方法。NoImage具體做法是具體做法是61.761.762.862.8處理處理3030minmin或或71.671.6處處理理1515minmin。這樣即可殺死病原微生物。又不致損壞營養，可這樣即可殺死病原微生物。又不致損壞營養，可保留食品飲料原有用味。保留食品飲料原有用味。根據結核桿菌在根據結核桿菌在6262下下1515minmin被致死。被

50、致死。低溫維持法低溫維持法; ;高溫瞬時滅菌高溫瞬時滅菌n 煮沸滅菌法（煮沸消毒法）煮沸滅菌法（煮沸消毒法） 物品在水中煮沸物品在水中煮沸 15 15minmin，可殺死所有營可殺死所有營養細胞和一部分芽孢。在水中加入的養細胞和一部分芽孢。在水中加入的 a a2 2COCO3 3或的碳酸效果更好。此法或的碳酸效果更好。此法適合注射器和解剖用具的消毒。適合注射器和解剖用具的消毒。NoImagen 間歇滅菌法間歇滅菌法( (fractional sterilization)fractional sterilization)是用常壓蒸汽反復幾次進行滅菌的方法。是用常壓蒸汽反復幾次進行滅菌的方法。No

51、Image 主要用于不宜高壓滅菌的培養基，不耐熱主要用于不宜高壓滅菌的培養基，不耐熱 的藥物和營養物等。的藥物和營養物等。方法是將待滅菌物品置于蒸鍋內加熱到沸騰維持方法是將待滅菌物品置于蒸鍋內加熱到沸騰維持15153030minmin殺死營養細胞，取出冷卻后在殺死營養細胞，取出冷卻后在3737恒恒溫培養溫培養2424小時，使芽孢萌發，再用此法滅菌，反小時，使芽孢萌發，再用此法滅菌，反復三次，即可達到滅菌目的。復三次，即可達到滅菌目的。n 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌( (normal autoclving)normal autoclving)是濕熱滅菌中最好的方法，通常在是濕熱滅菌中最好的方法，通

52、常在1.051.05kg/cmkg/cm2 2的的壓力下（此時溫度壓力下（此時溫度121121）處理）處理15153030minmin。要排冷，否則會形成假壓，雖然壓力達到要求，要排冷，否則會形成假壓，雖然壓力達到要求，溫度卻達不到相應高度，而影響滅菌效果。溫度卻達不到相應高度，而影響滅菌效果。 高壓蒸汽滅菌的影響因素 高溫對培養基成分的有害影響及其防止 低溫的作用主要是抑菌。它可使微生物的低溫的作用主要是抑菌。它可使微生物的代謝活力降低，生長繁殖停滯，但仍能保代謝活力降低，生長繁殖停滯，但仍能保持活性。持活性。 低溫法常用于保藏食品和菌種。低溫法常用于保藏食品和菌種。 包括冷藏法和冷凍法包括

53、冷藏法和冷凍法 輻射主要有紫外光、電離輻射、強可見光。輻射主要有紫外光、電離輻射、強可見光。 可用于控制微生物生長和保存食品。可用于控制微生物生長和保存食品。 紫外線：紫外線：波長波長265265266266nmnm的紫外線殺菌力最強。的紫外線殺菌力最強。 紫外輻射對微生物有明顯的致死作用，是強殺菌紫外輻射對微生物有明顯的致死作用，是強殺菌 劑。由于紫外線穿透能力差，不易透過不透明的劑。由于紫外線穿透能力差，不易透過不透明的 物質，故紫外殺菌燈只適用于空氣及物體表面消物質，故紫外殺菌燈只適用于空氣及物體表面消 毒。紫外輻射的殺菌機制是復雜的，現知主要是毒。紫外輻射的殺菌機制是復雜的，現知主要是

54、 由于它對由于它對 DNADNA的作用，最明顯的是形成胸腺嘧啶的作用，最明顯的是形成胸腺嘧啶 二聚體。經紫外輻射處理后，受損傷的微生物細二聚體。經紫外輻射處理后，受損傷的微生物細 胞若再暴露于可見光中，一部分可恢復正常，稱胞若再暴露于可見光中，一部分可恢復正常，稱 光復活現象。光復活現象。 微生物代謝離不開水。干燥或提高溶液滲微生物代謝離不開水。干燥或提高溶液滲透壓降低微生物可利用水的量或活度，從透壓降低微生物可利用水的量或活度，從而抑制其生長。而抑制其生長。 過濾除菌是將液體通過某種多孔的材料，過濾除菌是將液體通過某種多孔的材料，使微生物與液體分離，現今大多用膜濾器使微生物與液體分離，現今大

55、多用膜濾器除菌。此法除菌。此法可用于對熱敏感液體的滅菌，可用于對熱敏感液體的滅菌，如含有酶或維生素的溶液、血清等，還可如含有酶或維生素的溶液、血清等，還可用于啤酒生產代替巴氏消毒法。用于啤酒生產代替巴氏消毒法。 超聲波超聲波( (頻率在頻率在2000020000HzHz以上以上) )具有強烈的具有強烈的生物學作用。其作用是使細胞破裂，內含生物學作用。其作用是使細胞破裂，內含物外溢，從而實現殺滅微生物的目的。幾物外溢，從而實現殺滅微生物的目的。幾乎所有的微生物都能受其破壞。乎所有的微生物都能受其破壞。 科研中常用此法破碎細胞，以研究細胞結科研中常用此法破碎細胞，以研究細胞結構及化學組成、抗原結構

56、和酶的活性等。構及化學組成、抗原結構和酶的活性等。三、控制微生物生長的化學方法三、控制微生物生長的化學方法 消毒劑和防腐劑消毒劑和防腐劑 抗代謝物抗代謝物 抗生素抗生素 化學治療劑化學治療劑是指能直接干擾病原微生物的生長繁是指能直接干擾病原微生物的生長繁殖并可用于治療感染性疾病的化學藥物，按其作用殖并可用于治療感染性疾病的化學藥物，按其作用和性質又可分為抗代謝物和抗生素。和性質又可分為抗代謝物和抗生素。 消毒劑消毒劑是可抑制或殺滅微生物，對人體也可能產是可抑制或殺滅微生物，對人體也可能產生有害作用的化學藥劑，主要用于抑制或殺滅非生有害作用的化學藥劑，主要用于抑制或殺滅非生物體表面、器械、排泄物

57、和環境中的微生物。生物體表面、器械、排泄物和環境中的微生物。 防腐劑防腐劑是可以抑制微生物但對人和動物毒性較低是可以抑制微生物但對人和動物毒性較低的化學藥劑，可用于機體表面如皮膚、黏膜、傷的化學藥劑，可用于機體表面如皮膚、黏膜、傷口等處防止感染，也可用于食品、飲料、藥品的口等處防止感染，也可用于食品、飲料、藥品的防腐。防腐。 理想的消毒劑和防腐劑應具有作用快、效力大、理想的消毒劑和防腐劑應具有作用快、效力大、滲透強、易配制、價格低、毒性小、無怪味的特滲透強、易配制、價格低、毒性小、無怪味的特點。點。 1 1、醇類、醇類 醇類是脫水劑、蛋白質變性劑，也是脂溶劑，可醇類是脫水劑、蛋白質變性劑，也是

58、脂溶劑，可使蛋白質脫水、變性，損害細胞而具殺菌能力。使蛋白質脫水、變性，損害細胞而具殺菌能力。 70%70%7575的乙醇殺菌效果最好的乙醇殺菌效果最好，常用于皮膚及器，常用于皮膚及器械的消毒。械的消毒。 醇類物質，隨著分子量的增大，殺菌力增強。例醇類物質，隨著分子量的增大，殺菌力增強。例如戊醇丁醇丙醇乙醇甲醇。那些高級醇如戊醇丁醇丙醇乙醇甲醇。那些高級醇雖殺菌力強于乙醇，由于丙醇以上的醇不易與水雖殺菌力強于乙醇，由于丙醇以上的醇不易與水相混，故一般不用作消毒劑。相混，故一般不用作消毒劑。2 2、醛類、醛類 醛類的作用主要是使蛋白質烷基化，改變酶醛類的作用主要是使蛋白質烷基化，改變酶或蛋白質的

59、活性，使微生物的生長受到抑制或蛋白質的活性，使微生物的生長受到抑制或死亡。或死亡。 常用的醛類是甲醛，常用的醛類是甲醛，37374040甲醛溶液稱甲醛溶液稱福爾馬林福爾馬林，因有刺激性和腐蝕性，不宜在人，因有刺激性和腐蝕性，不宜在人體使用，常以體使用，常以2 2甲醛溶液浸泡器械，甲醛溶液浸泡器械，1010甲醛溶液進行熏蒸以消毒廠房、無菌室或者甲醛溶液進行熏蒸以消毒廠房、無菌室或者傳染病患者的家具、房屋等。傳染病患者的家具、房屋等。3 3、酚類、酚類 低濃度的酚可破壞細胞膜組分，高濃度的酚低濃度的酚可破壞細胞膜組分，高濃度的酚可凝固菌體蛋白。酚還能破壞結合在膜上的可凝固菌體蛋白。酚還能破壞結合在

60、膜上的氧化酶與脫氫酶，引起細胞的迅速死亡。氧化酶與脫氫酶，引起細胞的迅速死亡。 石炭酸石炭酸 O.5O.5可消毒皮膚，可消毒皮膚，2 25 5可消可消毒痰、糞便與器皿，毒痰、糞便與器皿，5 5可噴霧消毒空氣。可噴霧消毒空氣。 甲酚甲酚 是酚的衍生物，殺菌效果比苯酚強幾是酚的衍生物，殺菌效果比苯酚強幾倍，但在水中的溶解度較低，可在皂液或堿倍，但在水中的溶解度較低，可在皂液或堿性溶液中形成乳濁液。市售的消毒劑性溶液中形成乳濁液。市售的消毒劑來蘇爾來蘇爾就是甲酚與肥皂的混合液，常用就是甲酚與肥皂的混合液，常用3 35 5的的溶液消毒皮膚、桌面及用具。溶液消毒皮膚、桌面及用具。4 4、表面活性劑、表面活性劑