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文檔簡(jiǎn)介
1、缺缺 氧氧幾種類型的小鼠缺氧實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵笸ㄟ^(guò)在動(dòng)物身上復(fù)制乏氧性、血通過(guò)在動(dòng)物身上復(fù)制乏氧性、血液性和組織中毒性等缺氧模型,觀察液性和組織中毒性等缺氧模型,觀察缺氧時(shí)動(dòng)物的活動(dòng)、呼吸、血液和粘缺氧時(shí)動(dòng)物的活動(dòng)、呼吸、血液和粘膜顏色等指標(biāo)的改變以及動(dòng)物的存活膜顏色等指標(biāo)的改變以及動(dòng)物的存活時(shí)間,加深理解各類缺氧的發(fā)病原因時(shí)間,加深理解各類缺氧的發(fā)病原因和機(jī)制。和機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物n每組取成年小鼠每組取成年小鼠7 7只,新生小鼠只,新生小鼠1 1只。只。n成年鼠稱重、編號(hào)。成年鼠稱重、編號(hào)。n選出兩對(duì)體重相等或最相近(誤差在選出兩對(duì)體重相等或最相近(誤差在1g1g以以內(nèi))的成年小鼠備用。內(nèi))的
2、成年小鼠備用。實(shí)驗(yàn)一:乏氧性缺氧n取體重相等或相近的小鼠取體重相等或相近的小鼠2 2只,同時(shí)密只,同時(shí)密閉并計(jì)時(shí);閉并計(jì)時(shí);n觀察小鼠的活動(dòng)、呼吸和皮膚粘膜顏觀察小鼠的活動(dòng)、呼吸和皮膚粘膜顏色的改變,死亡時(shí)記錄存活時(shí)間。色的改變,死亡時(shí)記錄存活時(shí)間。n測(cè)死亡時(shí)瓶?jī)?nèi)氧濃度(同時(shí)測(cè)尚存活測(cè)死亡時(shí)瓶?jī)?nèi)氧濃度(同時(shí)測(cè)尚存活鼠的瓶?jī)?nèi)氧濃度)。鼠的瓶?jī)?nèi)氧濃度)。n死后立即開胸取心血,觀察血液顏色。死后立即開胸取心血,觀察血液顏色。實(shí)驗(yàn)二:一氧化碳中毒性缺氧n取小鼠取小鼠1 1只,放入指定裝置,調(diào)只,放入指定裝置,調(diào)節(jié)煤氣流量(節(jié)煤氣流量(6060個(gè)左右氣泡個(gè)左右氣泡/min/min)吸入吸入COCO。n觀
3、察指標(biāo)、方法同實(shí)驗(yàn)一的觀察指標(biāo)、方法同實(shí)驗(yàn)一的2 2、4 4項(xiàng)。項(xiàng)。實(shí)驗(yàn)三:亞硝酸鈉中毒性缺氧n取體重相等或相近的小鼠取體重相等或相近的小鼠2 2只;只;n腹腔注射給藥腹腔注射給藥: 體重體重n觀察指標(biāo)與方法同實(shí)驗(yàn)一的觀察指標(biāo)與方法同實(shí)驗(yàn)一的2 2、4 4項(xiàng)。項(xiàng)。鼠鼠1 1鼠鼠2 25 5亞硝酸鈉溶液亞硝酸鈉溶液1 1美藍(lán)溶液美藍(lán)溶液生理鹽水生理鹽水實(shí)驗(yàn)四:氰化鉀中毒n取健康小鼠取健康小鼠1 1只,稱重;只,稱重;n腹腔注射氰化鉀(按腹腔注射氰化鉀(按10g10g體重體重注射);注射);n觀察指標(biāo)同實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)同實(shí)驗(yàn)一的一的2 2、4 4項(xiàng)。項(xiàng)。實(shí)驗(yàn)五:年齡因素的影響n取成年鼠和新生幼鼠各取成
4、年鼠和新生幼鼠各1 1只;只;n新生鼠置入青霉素小瓶中,瓶口蓋新生鼠置入青霉素小瓶中,瓶口蓋棉花;與成年鼠共同置入廣口瓶并棉花;與成年鼠共同置入廣口瓶并密閉。密閉。n觀察活動(dòng)、呼吸情況和存活時(shí)間。觀察活動(dòng)、呼吸情況和存活時(shí)間。 注意事項(xiàng) n所用廣口瓶須密閉不漏氣,且各瓶容量應(yīng)一致。所用廣口瓶須密閉不漏氣,且各瓶容量應(yīng)一致。n動(dòng)物死亡后要立即取血,血液要充分與抗凝劑混合,動(dòng)物死亡后要立即取血,血液要充分與抗凝劑混合,量要準(zhǔn)(即液滴大小相同),各管血滴數(shù)要一致,量要準(zhǔn)(即液滴大小相同),各管血滴數(shù)要一致,否則對(duì)比性差。試管應(yīng)事先編號(hào),以免搞錯(cuò)。否則對(duì)比性差。試管應(yīng)事先編號(hào),以免搞錯(cuò)。n記錄時(shí)間要準(zhǔn)
5、確,以一只表為準(zhǔn)。記錄時(shí)間要準(zhǔn)確,以一只表為準(zhǔn)。n氰化鉀有劇毒,勿沾染皮膚、粘膜,尤其是破損處。氰化鉀有劇毒,勿沾染皮膚、粘膜,尤其是破損處。n要認(rèn)真仔細(xì)觀察小鼠活動(dòng)情況,呼吸深度和尾、耳、要認(rèn)真仔細(xì)觀察小鼠活動(dòng)情況,呼吸深度和尾、耳、口顏色的變化。口顏色的變化。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果幾種類型缺氧指標(biāo)的改變乏氧性乏氧性血液性血液性組織組織年齡年齡玻璃珠玻璃珠 鈉石灰鈉石灰CONaNO2+NSNaNO2+美藍(lán)美藍(lán)KCN成年成年新生新生存活時(shí)間存活時(shí)間(minmin)血液顏色血液顏色呼吸變化呼吸變化FiOFiO2 2( () )分組討論題n各組缺氧存活時(shí)間不同及死亡的原因和機(jī)各組缺氧存活時(shí)間不同及死亡的原因和
6、機(jī)制是什么?制是什么?n各組血液顏色生成的原因;美藍(lán)的作用是各組血液顏色生成的原因;美藍(lán)的作用是什么?什么?n各組的呼吸變化有何不同,為什么?各組的呼吸變化有何不同,為什么?n實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一FiOFiO2 2變化的原因、機(jī)制是什么?變化的原因、機(jī)制是什么?(完)(完)分組討論題n各組缺氧存活時(shí)間不同及死亡的原因和機(jī)制是各組缺氧存活時(shí)間不同及死亡的原因和機(jī)制是什么?什么?n各組血液顏色生成的原因;美藍(lán)的作用是什么?各組血液顏色生成的原因;美藍(lán)的作用是什么?n各組的呼吸變化有何不同,為什么?各組的呼吸變化有何不同,為什么?n年齡差異對(duì)缺氧耐受有何不同,為什么?年齡差異對(duì)缺氧耐受有何不同,為什么?n實(shí)
7、驗(yàn)一缺氧裝置的原理是什么?其中實(shí)驗(yàn)一缺氧裝置的原理是什么?其中FiOFiO2 2變化變化的原因、機(jī)制是什么?的原因、機(jī)制是什么?(完)(完)分組討論題n存活時(shí)間,死存活時(shí)間,死亡原因和機(jī)制亡原因和機(jī)制n血液顏色血液顏色n呼吸變化呼吸變化nFiOFiO2 2變化變化年齡差異年齡差異美藍(lán)的作用美藍(lán)的作用實(shí)驗(yàn)一裝置的實(shí)驗(yàn)一裝置的原理原理(完)(完)CO中毒死因結(jié)合速率= = 解離速率= = 親和力= =吸入氣鐘中CO達(dá),血中HBCO可達(dá)50 HBCO使氧曲線左移,血液向組織釋放氧減少抑制RBC糖酵解,2,3-DPG減少,氧離曲線左移22HBOOHBHBCOCOHB10122OHBHBOCOHBHBC
8、O22HBOOHBHBCOCOHB210011300200亞硝酸鈉中毒高鐵血紅蛋白血癥(methemoglobinemia) nHB-Fe2+ NaNO2 HB-Fe3+ NaNOn正常人MHB含量占HB總量的0.070.38%,相當(dāng)于0.03g%左右nNaNO2中毒時(shí)MHB含量占HB總量的10%以上,相當(dāng)于1.5g%以上nHB-Fe3+ 美藍(lán) HB-Fe2+氧化還原2KCN中毒 Cyt aa3-Fe3+ CN Cyt aa3-Fe3+-CN幼鼠耐受缺氧的原因: n中樞方面:中樞方面:n神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育不完善,對(duì)氧需求量少;神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育不完善,對(duì)氧需求量少; n腦無(wú)氧酵解能力強(qiáng);腦無(wú)氧酵解能力強(qiáng);nATPATP利用率為成年的利用率為成年的1/101/10;n心臟方面:心肌糖元含量高,新生心臟方面:心肌糖
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