1、實驗三發芽測定一、目的在室內標準條件下測定種批的最大發芽潛力，使測定結果能在最接近于隨機樣本變異的范圍內重現，據此比較不同種批的品質并估計田間播種價值。二、定義1 .發芽室內測定一粒種子發芽，是指幼苗出現并生長到某個階段，其基本結構的狀況表明它是否能在正常的田間條件下進一步長成一株合格苗木。2 .發芽率質量檢驗證書上填報的發芽率，是在附錄B表B1規定的條件下及其規定的期限內生成正常幼苗的種子粒數占供檢種子總數的百分比。3 .幼苗基本結構對于幼苗繼續生長成合格苗木必不可少的結構。隨所檢樹種而不同，組成幼苗的是以下某些基本結構的特定組合：根系、胚軸、子葉、初生葉、頂芽以及禾本科、棕楣科的芽鞘。4

2、.正常幼苗表現出具有潛力，能在土質良好，水分、溫度、光照適宜的條件下繼續生長成為合格苗木的幼苗。符合下列類型之一的可以劃為正常幼苗：a）完整幼苗：該樹種應有的基本結構全都完整、勻稱、健康、生長良好；b）帶輕微缺陷的幼苗：該樹種應有的基本結構出現某些輕微缺陷的幼苗，但其他方面正常，生長均衡，與同次測定中完整幼苗的其他方面不相上下；c）受到次生性感染的幼苗：顯然本該屬于上述a）類或b）類但受真菌或細菌感染的幼苗，條件是該粒種子不是感染源。5 .不正常幼苗表現出沒有潛力，在土質良好，水分、溫度、光照適宜的條件下不能長成合格苗木的幼苗。不正常幼苗有三種類型：a）損傷苗：任何基本結構缺失，或損傷嚴重無法

3、恢復正常，不能指望均衡生長的幼苗；b）畸形苗或不勻稱苗：生長孱弱或生理紊亂，或基本結構畸形或失衡的幼苗;c）腐壞苗：由于原發性感染（即該粒種子就是感染源），該樹種的任何基本結構染病或腐壞，停止正常生長的幼苗。6 .多苗種子單位能夠產生多株幼苗的種子單位。有以下幾種類型：a）種子單位內含的真種子多于一粒，例如柚木（Tectonagrandis）的堅果和楝樹（Meliaazedarach）的核果；b）真種子內含的胚多于一枚。有些種這是正常現象（多胚現象），有些種則是偶爾出現（孚生現象）。如果是李生胚，通常是其中一株幼苗弱小纖細，但偶爾也會是兩株幼苗都接近正常大小；c）融合胚：偶爾會從一粒種子中生出

4、兩株融合在一起的幼苗。7 .未萌發粒在附錄B表B1給定的測定條件下測定期結束時仍未發芽的種子。可以區分成幾個類型：a）硬粒：在測定條件下未能吸水而在測定期未仍然堅硬的種子。一種休眠形態，常見于豆科，也能出現于其他某些科；b）新鮮粒，在測定條件下能夠吸水但發芽進程受阻，外形依舊良好，堅實硬朗,仍然具有生出正常幼苗潛力的種子；c）死亡粒：測定期未既非硬粒，又非新鮮粒，又未萌出幼苗任何結構的種子，通常包被物極軟、變色、發霉且毫無生出幼苗的征兆；d）其他類型根據送檢單位的要求，未萌發粒還可以細分為以下幾類，它們在測定樣品中所占的百分數填入質量檢驗證書的備注欄：空粒一一完全空癟或僅含某種殘遺組織的種子；

5、澀粒一一杉木、柳杉胚珠受精后敗育，內含物為紫黑色單寧類物質的種子；無胚粒一一種子內有新鮮胚乳或配子體組織，但其中既無胚腔，也沒有胚；蟲害粒一一內有昆蟲的幼蟲或蟲糞或有其他跡象表明受到過昆蟲浸害，影響發芽能力的種子。三、發芽床用作發芽床的紙應是疏松、通氣、無毒、容易向種子不斷提供水分的濾紙或其他類型的紙，或者是潔凈無毒的紗布、脫脂棉。種子排放在床面。為了向種子提供足夠的水分，可以用多層的紙，也可以在紙下加墊紗布或脫脂棉。作床材料的pH值應在6.07.5范圍內。發芽測定用紙應在干燥涼爽的室內存放并適當包裝，避免污損破傷，必要時使用前應當滅菌，消除存放期中可能感染的霉菌。2 .沙床作床的沙應當顆粒均

6、勻一致，能通過直徑為0.8mm的篩孔，而截留在孔眼直徑為0.05mm的篩子上，沙必須無菌無毒，不含任何種子。沙的pH值應在6.07.5范圍內。沙不能重復使用。3 .土床只有在紙床、沙床上發芽的幼苗出現植物毒性癥狀，或者對紙床上的幼苗的鑒定發生懷疑時，才可以使用質地疏松、結構良好、不會板結的壤土作床，使用時不能擠壓。質地緊密的土壤應適當混加蛭石或沙。土中不能混有任何種子。土的pH值應在6.07.5之間。土不能重復使用。四、發芽設備1 .發芽盒用于紙床的帶蓋的、內具有孔隔板的透明發芽容器。盒的長度和寬度應能容納四次或至少兩次重復的種粒。盒高應略大于受檢樹種正常幼苗的高度。發芽床鋪放在具有孔眼的隔板

7、上。隔板同盒底之間的空間用于存水，使盒內的相對濕度盡可能接近100%。2 .直立板發芽盒有機玻璃制成的長方形盒，盒高約20cm。盒內可以垂直嵌入若干塊中心距約2cm的有機玻璃板。在玻板頂邊之下適當距離處播放一排種子并覆以同玻板等大的濕濾紙。濾紙下端浸入盒底的水中向種子供水。改變濾紙下端入水的深度可以控制供水量。蓋上盒蓋可以保持盒內空氣濕度。從玻板的反面可以清晰地觀察種子的發芽狀況。3 .帶有水箱的發芽裝置主體是鍍鋅鋼板或不銹鋼板制作的水箱，水箱頂板上排放鐘形發芽皿。鐘形發芽皿的芯帶穿過頂板上的孔眼或窄縫伸入水箱吸水。水溫由控溫器控制，為發芽環境提供所需的溫度。水箱上方懸放冷白熒光燈管。4 .發

8、芽箱能調控溫度、濕度和光照的密閉箱體。好的發芽箱應具有加熱和降溫兩個系統，隔熱性能良好，能提供發芽所需的光照條件，且能控制濕度，能使箱內的相對濕度接近100%0箱內的隔板承放紙床，直接排放供檢樣品。隔板的間距應使同一時間里能夠測定盡可能多的樣品。五、測定程序1 .提取測定樣品測定樣品從凈度分析所得的、經過充分混拌的純凈種子中按照隨機原則提取。可以用四分法將純凈種子區分成4份，從每份中隨機數取25粒組成100粒，共取4個100粒，即為4次重復。種粒大的，可以將100粒的每個重復以50粒或25粒為組，以組為單位在發芽床上排放，由這樣的2個組或4個組組成1次重復，使種粒之間有足夠的距離。附錄B表B1

9、規定采用稱量發芽測定法的樹種，或因種粒特小決定采用稱量發芽測定法的其他樹種，用符合第3章規定的程序從送檢樣品中提取測定樣品，共取4個重復。每個重復的重量見附錄B表B1。2 .測定樣品的預處理對測定樣品作預處理的目的是解除休眠。預處理的方法已分樹種列在附錄B表B1的備注欄。也可以采用其他有效的預處理方法，但必須在質量檢驗證書中注明。附錄B表B1所列的測定時間不包括預處理時間。帶翅的種子可以去翅，但不能傷及種子。3 .置床和管理(1)種粒在發芽床上應保持一定距離，避免病菌蔓延、根系纏繞，也便于點數。(2)采用沙床(土床)時，需光種子壓入沙(土)的表層，忌光種子播在疏松而平整的沙(土)之上，再均勻疏

10、松地加蓋厚度為1020mm的沙(土)。(3)發芽容器和直立板發芽盒中的直立板應當編號。(4)經常檢查測定樣品及其水分、通氣、溫度、光照條件。檢查的間隔時間由檢驗機構根據樹種特性和樣品狀況等自行確定。輕微發霉的種粒可以揀出作清水沖洗后放回原發芽床。發霉種粒較多的要及時更換發芽床或發芽容器。4 .測定條件(1)水發芽床的用水不應含有雜質。水PH值應在6.07.5之間。如果當地的水質不符合要求，可以使用蒸儲水或去離子水。發芽床應始終保持濕潤，不斷地向種子提供所需的水分。但供水過量也會影響種子的通氣。對種子的供水量取決于受檢樹種的特性、發芽床的性質及發芽盒的種類。各重復間的供水量應當一致。(2)通氣置

11、床的種子要保持通氣良好，但不能使發芽床過度失水而影響萌發。(3)溫度附錄B表B1所列的溫度是指發芽床上種子所處水平層次的溫度，因設備性能而產生的溫度變化不能超過±1C。為發芽種子提供光照時不能使溫度發生波動。附錄B表B1列出帶有幅度的溫度指的是變溫，每24h內應有16h保持較低的那個溫度，其余8h保持較高的那個溫度。溫度的轉換最好在3h內逐漸完成，休眠性種子可以在1h內完成。周末或節假日不能按要求轉換溫度時，應使發芽環境保持在較低的那個溫度水平上。(4)光除非確已證實某個樹種的發芽會受到光抑制，否則發芽測定中的每個24h都應當給予8h的光照，使幼苗長勢良好，不容易遭受微生物侵害，也便

12、于評定。施加的光指的是不含或極少含遠紅光的冷白色熒光。提供的光應均勻一致地使種子表面接受75012501X的照度。對于變溫發芽的樹種，是在給予高溫的那個8h內提供光照。5 .測定的持續時間(1)各樹種發芽測定的持續時間在附錄B表B1中以末次記數的天數表示，自置床之日起算，不包括預處理的時間。(2)如果測定樣品在規定時間里發芽的種粒不多、可以適當延長測定時間。延長的時間最多不應超過規定時間的二分之一。如果在規定的結束時間之前樣品已經充分發芽，且后期連續三天每天的發芽粒數不超過各重復供試種子粒數的1%,則該次測定可以提前結束。無論是延長還是提前結束，測定的實際天數應在質量檢驗證書中注明。(3)中期

13、計數的次數由檢驗機構自行確定，除有特殊要求外，通常不宜過多，盡量減少對尚未充分生長的幼苗造成傷害。6 .觀察、評定和記載(1)發芽測定的情況要定期觀察記載。觀察記載的間隔時間由檢驗機構根據樹種和樣品情況自行確定，但初次計數和末次計數必須有記載。(2)生長到一定階段，必要的基本結構都已展現的每株幼苗都必須進行評定，并在記數后從發芽床上揀出。嚴重腐壞的幼苗也應揀出，以免造成次生性感染。呈現其他缺陷的不正常幼苗則應保留在發芽床上直至末次計數。揀出的幼苗數同發芽床上剩余的種粒數應當等于前一次記載時的剩余種粒數。揀出幼苗時要防止影響正在發芽生長的幼苗。(3)一個多苗種子單位常能生出兩株或幾株幼苗，都記為

14、一株正常幼苗。(4)測定結束根據定義7給出的條件區分未發芽粒。六、測定結果的計算1 .發芽測定結束時按定義2計算發芽率。2 .按表3檢查重復間發芽百分數的差異是否為隨機誤差。如果各重復發芽百分數的最大值同最小值的差距沒有超過表3的容許范圍，就用各重復發芽百分率的平均數作為該次測定的發芽率。表3發芽測定容許差距平均發芽百分率最大容許差距1r239925983697479658956993-947-81091-929-101189-9011-121287-8813-141384-8615-171481-8318-201578-8021-231673-7724-281767-7229-3418566

15、635-451951-5546-50203.稱量發芽測定法的測定結果用單位重量樣品中的正常幼苗數表示，單位為株/克。計算時，利用表6檢查重復間的差異是否為隨機誤差。先計算4個重復正常幼苗的總數，在表4第1欄找出該總數所在范圍，并在第2欄中查到最大容許差距。如果4個重復中正常幼苗數的最大值和最小值之間等于或小于最大容許差距，該次測定可靠，以4個重復單位重量的正常幼苗數的平均數作為測定結果填報。表4稱量發芽測定容許差距供檢樣品總重量中的正常發芽粒數最大容許差距供檢樣品總重量中的正常發芽粒數最大容許差距12H12064161174277-1061751882811-1481892022915-189

16、2032163019-22112172303123-26122312443227-30132452563331-38142572703439-50152712883551-56162893023657-62173033213763-70183223383871-82193393583983-90203593784091102213794024110311222403420421131222342143843123134244394604413514625>46045147160264.重新測定有下列情況之一時應重新布置測定。重新測定仍按規定計算結果并檢查誤差。a）懷疑是休眠干擾測定結果時

17、，可以仍按附錄B表B1的發芽條件，但選用一種或幾種解除休眠的方法重新布置一次或同時布置幾次測定，將其中最好的結果作為測定結果填報，并注明所用方法。b）由于病毒或真菌、細菌蔓延干擾測定結果時，可以使用沙床或土床重新布置一次或同時布置幾次測定。必要時還可以加大種粒間的距離。將所得的最好結果作為測定結果填報，并注明所用方法。c）難于評定的幼苗數量較多而干擾測定結果時，可以仍按附錄B表B1的發芽條件，用沙床或土床重新布置一次或同時布置幾次測定。將所得的最好結果作為測定結果填報，并注明所用方法。d）由于測定條件、幼苗評定或計數顯然有誤時，應當按原用方法重新測定，并填報重新測定的結果。e）由于其他不明因素使得各重復問的最大差距超過表3規定的容許誤差時，應當提取測定樣