1、 小鼠腸道菌群代謝產物與糖尿病小鼠腸道菌群代謝產物與糖尿病人體腸道微生態系統中存在著一個龐大的細菌菌群，在正常生人體腸道微生態系統中存在著一個龐大的細菌菌群，在正常生理狀態下，腸道菌群中，結腸內含菌量多達理狀態下，腸道菌群中，結腸內含菌量多達1010111110101212個，其個，其中厭氧菌如雙歧桿菌、擬桿菌占絕對優勢，占中厭氧菌如雙歧桿菌、擬桿菌占絕對優勢，占98%98%以上。以上。腸內菌群在機體內能夠參與食物的降解、代謝產生的代謝產物，腸內菌群在機體內能夠參與食物的降解、代謝產生的代謝產物，除了提供自身生長所需營養物質外，對腸道內環境也起到一定除了提供自身生長所需營養物質外，對腸道內環境

2、也起到一定的作用。的作用。短鏈脂肪酸（短鏈脂肪酸（SCFASCFA）也稱為揮發性酸，是由）也稱為揮發性酸，是由 1 16 6個碳原子組成個碳原子組成的有機脂肪酸，大多是由結腸內厭氧菌利用低聚糖、非淀粉多的有機脂肪酸，大多是由結腸內厭氧菌利用低聚糖、非淀粉多糖、抗性淀粉等未消化碳水化合物發酵和蛋白質降解的主要產糖、抗性淀粉等未消化碳水化合物發酵和蛋白質降解的主要產物，主要包括乙酸、丙酸、異丁酸、丁酸、異戊酸、戊酸、異物，主要包括乙酸、丙酸、異丁酸、丁酸、異戊酸、戊酸、異己酸和己酸。其中乙酸、丙酸和丁酸含量最高己酸和己酸。其中乙酸、丙酸和丁酸含量最高, ,短鏈脂肪酸在結腸內作用：短鏈脂肪酸在結腸內

3、作用：為腸粘膜細胞提供能量，促進細胞的代謝、生長；為腸粘膜細胞提供能量，促進細胞的代謝、生長；降低結腸內環境降低結腸內環境pHpH值，減少有害菌的生長，防止腸道功能紊亂；值，減少有害菌的生長，防止腸道功能紊亂；抑制抗炎因子的生成，對結腸炎癥反應起到抑制作用；抑制抗炎因子的生成，對結腸炎癥反應起到抑制作用；抑制腫瘤細胞的增殖、控制原癌基因的表達、促進腫瘤細胞的抑制腫瘤細胞的增殖、控制原癌基因的表達、促進腫瘤細胞的分化和凋亡，起到抗腫瘤的作用。分化和凋亡，起到抗腫瘤的作用。小鼠糞便的采集、稀釋混勻小鼠糞便的采集、稀釋混勻腸道菌群計數腸道菌群計數 取糞樣均質液以取糞樣均質液以1010倍梯度稀釋，分別

4、接種到相應培養基上培養，倍梯度稀釋，分別接種到相應培養基上培養， 采用平板計數法對樣品中的雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸桿菌、腸球采用平板計數法對樣品中的雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸桿菌、腸球 菌和產氣莢膜梭菌計數。菌和產氣莢膜梭菌計數。動物分組、喂養動物分組、喂養 分組：正常、高脂、糖尿病、模型給藥組分組：正常、高脂、糖尿病、模型給藥組指標的測定：空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白指標的測定：空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白低密度脂蛋白以及糞便中短鏈脂肪酸和低密度脂蛋白以及糞便中短鏈脂肪酸和D-D-乳酸含量。乳酸含量。代謝產物的測定：采用氣相色譜法檢測糞便中代謝產物乙酸、代謝產物的測定：

5、采用氣相色譜法檢測糞便中代謝產物乙酸、丙酸和正丁酸的含量。丙酸和正丁酸的含量。 糖尿病組小鼠糞便中乙酸、丙酸和正丁酸的含量均明顯低于正常糖尿病組小鼠糞便中乙酸、丙酸和正丁酸的含量均明顯低于正常組及高脂組。組及高脂組。可能存在著生成乙酸、丙酸和正丁酸的某些厭氧益生菌的缺失或可能存在著生成乙酸、丙酸和正丁酸的某些厭氧益生菌的缺失或減少減少, ,致使腸道菌群對宿主代謝產生異常影響致使腸道菌群對宿主代謝產生異常影響, ,引發代謝紊亂。引發代謝紊亂。給藥組的乙酸、丙酸和正丁酸的含量明顯上升，給藥后丙酸和正給藥組的乙酸、丙酸和正丁酸的含量明顯上升，給藥后丙酸和正丁酸基本恢復到正常水平丁酸基本恢復到正常水平

6、, ,而乙酸含量雖有所上升而乙酸含量雖有所上升, ,但未能達到正但未能達到正常水平常水平, ,可能生成乙酸的某些厭氧益生菌未能恢復正常水平。可能生成乙酸的某些厭氧益生菌未能恢復正常水平。糖尿病小鼠血糖升高時糖尿病小鼠血糖升高時, ,腸道益生菌腸道益生菌( (雙歧桿菌雙歧桿菌, ,乳酸桿菌乳酸桿菌) )、梭、梭菌的數量降低菌的數量降低; ;經二甲雙胍處理后小鼠血糖降低經二甲雙胍處理后小鼠血糖降低, ,腸道益生菌、梭菌的數量恢復腸道益生菌、梭菌的數量恢復到正常值到正常值但某些條件致病菌但某些條件致病菌, ,如大腸埃希菌、腸球菌和真菌等如大腸埃希菌、腸球菌和真菌等, ,在整個實在整個實驗里呈遞增狀態

7、驗里呈遞增狀態D-D-乳酸是腸道細菌酵解的產物乳酸是腸道細菌酵解的產物, ,其代謝變化與腸道細菌的增殖程其代謝變化與腸道細菌的增殖程度相關度相關,D-,D-乳酸的量可間接反映腸道細菌的增殖情況。乳酸的量可間接反映腸道細菌的增殖情況。由于由于D-D-乳酸的變化與血糖變化方向一致乳酸的變化與血糖變化方向一致, ,提示提示D-D-乳酸可能是一個乳酸可能是一個病理性因素病理性因素, ,其含量的上升其含量的上升, ,可能與致病菌的增加有關。可能與致病菌的增加有關。糖尿病動物及患者血漿中的糖尿病動物及患者血漿中的D-D-乳酸含量顯著升高。乳酸含量顯著升高。D-D-乳酸正常情況下很少被吸收乳酸正常情況下很少

8、被吸收, ,且哺乳動物不具備將其快速降解且哺乳動物不具備將其快速降解的酶系統。只有當腸黏膜通透性增加時的酶系統。只有當腸黏膜通透性增加時, ,腸道中細菌產生的大量腸道中細菌產生的大量D-D-乳酸才能通過受損黏膜入血乳酸才能通過受損黏膜入血, ,使血漿使血漿D-D-乳酸水平升高。由于血乳酸水平升高。由于血漿漿D-D-乳酸來源于腸道乳酸來源于腸道, ,血漿血漿D-D-乳酸含量升高反映了腸道乳酸含量升高反映了腸道D-D-乳酸的乳酸的高水平狀態。高水平狀態。腸道通透性增加在糖尿病發病機制中發揮著關鍵作用。腸道通透性增加在糖尿病發病機制中發揮著關鍵作用。糖尿病小鼠糞便中糖尿病小鼠糞便中D-D-乳酸含量顯著升高乳酸含量顯著升高, ,一定程度上反映一定程度上反映出糖尿病小鼠腸道存在黏膜受損通透性增加的變化。出糖尿病小鼠腸道存在黏膜受損通透性增加的變化。當腸黏膜通透性增加時血中當腸黏膜通透性增加時血中D-D-乳酸及脂多糖均顯著增加乳酸及脂多糖均顯著增加, ,且二且二者具有正相關性者具有正相關性總之，糖尿病組總之，糖尿病組D-D-乳酸含量的上升是腸道功能受損的一種表現乳酸含量的上升是腸