1、臨床檢測樣本 RNA 提取方法的比較研究摘要：選擇市售的三種細胞裂解液（Liaison Plus、Troll Plus 和RNAOUT）和兩種 DNARNA共提試劑盒（柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒、Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒），分別對豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬瘟病毒（CSFV）和乙型腦炎病毒（JEV）三種病毒 RNA 進行提取，通過瓊脂糖凝膠電泳和 Real-time PCR 間接評價所提取的 RNA 質量。結果表明：對于瓊脂糖凝膠電泳，上述三種細胞裂解液和 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組均可見清晰且高亮的條帶，可用于臨床 RNA

2、 病毒檢測以及定性分析。對于Real-time PCR，Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒 CT 值最低，Liaison Plus、Troll Plus 兩種細胞裂解液其次，以上三種試劑可用于臨床 RNA 病毒檢測以及定量分析。關鍵詞：RNA；提取方法；比較；臨床Comparison of Methods of clinical test samples RNA extractionAbstract：Three commercially available cell sates (Liaison Plus, Troll Plus and RNAOUT)and two DNA / R

3、NA co-kits (ALCMENA double-kit, Queasy rapid DNA / RNA co-kit) were selected toextract three animal RNA viruses（PRRSV, CSFV and JEV）. The RNA quality wasevaluated indirectly by agaric gel electroplate and Real-time PCR. The result shows, for agaric gel electroplate, the clearly and highlight bands c

4、an be seen above the groups of the three cell sates and Queasy rapid DNA / RNA co-kit, which can be used for clinical RNA virus detection and qualitative analysis. For Real-time PCR, the CT value of the Queasy rapid DNA / RNA co-kit group is the lowest, and the two cell sates groups(Liaison Plus, Tr

5、oll Plus) followed. The above three reagents can be used for clinical RNA virus detection and quantitative analysis.Key words: RNA；Extraction Method；Comparison；ClinicalRNA 是生物體重要的遺傳物質1。近年來，越來越多的科研結果表明，RNA 在生命進程中的作用遠不止于此，在 2002 年度 Science 評選的 10 大科學成就中RNA 名列榜首。RNA 分子提取是生物學研究中的一項基本內容，是進行基因表達分析的基礎2。對于

6、DNA 文庫構建、熒光定量 PCR、CRT、Northern 雜交等下游分子生物學實驗來說，都需要質量好的，完整性高的 RNA3。在所有 RNA 試驗中最關鍵的因素是分離得到全長 RNA。分離出純度高且完整的 RNA 是進行基因表達分析及 RNA 結構功能研究的基礎。在所有 RNA 實驗中，最關鍵的步驟是分離得到純度高且完整的 RNA。，從組織細胞中分離純粹完整的 RNA 對于分子克隆和基因表達分析等試驗是至關重要的4,5Chomsky 和 Sac chi 第一次提出了用異硫氰酸胍法提取細胞內的 RNA6， 使得 RNA 的提取過程變得簡便快捷。常見的 RNA 提取方法有強變性劑法7、CTAB

7、 法8、ADS-Phenol 法9以及熱硼酸法10等。在商品化的今天，國內外生物試劑公司研發出了許多 RNA 提取試劑盒。比如 Tamara 公司的 Liaison Plus；Inviting 公司的 Tripoli 總 RNA 提取試劑盒以及 Pure Link RNA Mini Kit；上海生工的 UNlQ-10 柱式 Tripoli 總 RNA 抽提試劑盒；Omega 公司的 RNA 小量提取試劑盒（Bacteria RNA kit）以及高純 RNA 抽提試劑盒（HP total RNA kit）；Engage 公司的 RN easy Protect Bacteria Mini and

8、Midi Kits 等。都可以從病料組織或者培養細胞中快速有效地提取出高質量高純度的 RNA。實時熒光定量 PCR 的原理是以熒光共振能量轉移原理為基礎11,12。熒光共振能量轉移原理是當一個熒光分子（供體分子）的熒光光譜與另一個熒光分子（受體分子）的激發光譜重疊時，供體熒光分 子自身的熒光強度衰減，受體熒光分子的熒光強度增強。Ct 值是指每個反應管內的熒光信號到達設定的閾值時所經歷的循環數。Ct 值是實時熒光 PCR 中一個很關鍵的因素，C 代表循環（Cycle），t 代表閾值（Threshold）。每個模板的 Ct 值與該模板的起始拷貝數的對數存在線性關系，起始拷貝數越多，Ct 值越小。利

9、用已知起始拷貝數的標準品可做出標準曲線13-15。因此，根據熒光探針的發光基團所發出的熒光強度與 PCR 產物的數量呈對應關系，只要對熒光信號進行“實時”檢測并獲得未知樣品的 Ct 值，即可從標準曲線上計算出該樣品的起始拷貝數。與普通 PCR 相比，實時熒光定量PCR 可以利用熒光信號實時監測 PCR 反應過程中每一個循環擴增產物的變化， 可以對初始模板量進行定量分析。簡單地說，實時熒光定量 PCR 的基本原理就是樣本核酸擴增呈指數增長，在反應體系和條件完全一致的情況下，樣本 DNA 含量與擴增產物的對數成正比，由于反應體系中的熒光染料或熒光標記物（熒光探針）與擴增產物結合發光，其熒光量與擴增

10、產物量成正比，因此通過熒光量的檢測就可以測定樣本核酸量16-18。大量的研究實驗證明：雖然提取 RNA 的方法很多，但是其基本都是把細胞破碎以后，以除去材料中糖、蛋白質、DNA 等雜質為目標。而且材料自身物理化學性質的不同，不同的材料需要不同的提取方法19 ,20。因此，需要通過對比試驗，針對不同細胞組織，選擇更加合適的 RNA 提取方法。1 材料與方法1.1 試劑高致病性豬繁殖于呼吸綜合癥活疫苗（JXA1-R 株，中牧實業股份有限公司），豬瘟耐熱保護劑活疫苗（成都天邦生物制品有限公司，），日本乙型腦炎弱毒活疫苗（SA14-14-2 株），Troll Plus 總 RNA 提取試劑（南京天為生

11、物科技有限公司），動物 RNAOUT（北京天恩澤基因科技有限公司），Liaison Plus（寶生物工程有限公司），柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒（北京天恩澤基因科技有限公司），Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒（上海快靈生物科技有限公司），氯仿（），乙醇（），異丙醇（上海申博化工有限公司），逆轉錄試劑盒（），Mixture（）1.2 總 RNA 提取1.2.1 細胞裂解液法提取 RNA(1) Liaison Plus 法取疫苗稀釋液 100L，加 dH2O 稀釋到 500uL，加 700L 細胞裂解液；劇烈振蕩，靜置 515min，充分反應，期間振蕩搖勻；加氯仿 200L，劇

12、烈振蕩，靜置 5min；12000rpm/min，4離心 5min；吸取 600L 上清，加入等體積的異丙醇，沉淀RNA，緩慢搖勻；-20保存 30min 以上；12000rpm/min 離心 15min，棄上清； 加入 400L，75%的乙醇，顛倒 4 次；12000rpm/min 離心 5min，棄上清；12000rpm/min，瞬離，吸干；吹干；每空加入 3040L Release free dH2O，-80 保存備用。其中，疫苗稀釋液有三種（PRRSV、CSFV 和 JEV）。每組試驗設立三個重復。（2） RNAOUT 法取疫苗稀釋液 100L，加 dH2O 稀釋到 500uL，加 7

13、00L 細胞裂解液；劇烈振蕩，靜置 515min，充分反應，期間振蕩搖勻；加氯仿 200L，劇烈振蕩，靜置 5min；12000rpm/min，4離心 5min；吸取 600L 上清，加入等體積的異丙醇，沉淀RNA，緩慢搖勻；-20保存 30min 以上；12000rpm/min 離心 15min，棄上清； 加入 400L，75%的乙醇，顛倒 4 次；12000rpm/min 離心 5min，棄上清；12000rpm/min，瞬離，吸干；吹干；每空加入 3040L Release free dH2O，-80 保存備用。其中，疫苗稀釋液有三種（PRRSV、CSFV 和 JEV）。每組試驗設立三個

14、重復。（3） Troll Plus 法取疫苗稀釋液 100L，加 dH2O 稀釋到 500uL，加 700L 細胞裂解液；劇烈振蕩，靜置 515min，充分反應，期間振蕩搖勻；加氯仿 200L，劇烈振蕩，靜置 5min；12000rpm/min，4離心 5min；吸取 600L 上清，加入等體積的異丙醇，沉淀RNA，緩慢搖勻；-20保存 30min 以上；12000rpm/min 離心 15min，棄上清； 加入 400L，75%的乙醇，顛倒 4 次；12000rpm/min 離心 5min，棄上清；12000rpm/min，瞬離，吸干；吹干；每空加入 3040L Release free d

15、H2O，-80 保存備用。其中，疫苗稀釋液有三種（PRRSV、CSFV 和 JEV）。每組試驗設立三個重復。1.2.2 柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒法提取 RNA在 1.5mL 離心管中加入 100L 疫苗稀釋液，加入 600L 溶液 A，振蕩 30s 混勻后室溫放置 10min（溶液 A 在 4放置后可能產生沉淀，使用前必須放入 65水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用）；短暫離心后，將 500L 溶液轉移到離心吸附柱中，室溫放置 2min；12000rpm 室溫離心 1min，棄收集管中的的穿透液，把離心柱放回到收集管中；將剩余的溶液短暫離心后全部轉移到上一步的離心柱中，室溫放置 2

16、min；12000rpm 室溫離心 1min，棄收集管中的的穿透液，把離心柱放回到收集管中；加入 700L 的通用洗柱液到離心吸附柱中，12000rpm 室溫離心 1min，棄收集管中的穿透液，把離心柱放回到收集管中；12000rpm 室溫離心 1min（干甩），棄含穿透液的離心管；將干甩后的離心吸附柱套入到一個自備的 Freebase 的 1.5mL 離心管中，在離心吸附柱的中心加入 3040L 的洗脫液，然后室溫放置 2min；12000rpm 離心 1min，離心管中為 RNA 溶液，-80保存備用。其中，疫苗稀釋液有三種（PRRSV、CSFV 和 JEV），每組試驗設立三個重復。1.2

17、.3 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒法提取 RNA在 1.5mL 了離心管中加入 100L 處理好的樣本液，然后加入 300L 核酸提取液，振蕩混勻，室溫靜置 23min；加入 400L 異丙醇，振蕩混勻，12000rpm 離心 5min，棄凈溶液；加入 600L 50%異丙醇，振蕩混勻，12000rpm 離心 1min，棄凈溶液； 加入 600L 75%乙醇，振蕩混勻，12000rpm 離心 1min，棄凈溶液；離心管短暫離心 510s 后，用 10L 槍頭棄凈溶液，若管底出現少量沉淀，可開蓋室溫干燥23min；加入 1030uL 洗脫液，振蕩混勻后短暫離心，置于-80保存備

18、用。其中，疫苗稀釋液有三種（PRRSV、CSFV 和 JEV），每組試驗設立三個重復。1.3 RNA 質量檢測1.3.1 瓊脂糖凝膠電泳檢測分別取 RNA 樣品 6L，加入 Ac Curt Reaction Mix（4X）2L，混勻后室溫放置2min；加入 Ac Curt Reaction Shoppe（r 5X）2L，5X All-in-One RT Choirmaster 4L，Antinuclear H2O 6L，總體系為 20L 進行 CRT（25 10min，42 50min， 85 5min）。將反應生成的 DNA 分別用于普通 PCR，分別取 RNA 45 µL，在1.

19、0%的瓊脂糖凝膠上進行電泳檢測，85 V 恒壓 25 min。紫外燈下照射觀察條帶，并拍照記錄結果。其中，RNA 樣品有三種（PRRSV、CSFV 和 JEV），每組試驗設立三個重復。1.3.2 Real-time PCR分別取 RNA 樣品 6L，加入 Ac Curt Reaction Mix（4X）2L，混勻后室溫放置2min；加入 Ac Curt Reaction Shoppe（r 5X）2L，5X All-in-One RT Choirmaster 4L，Antinuclear H2O 6L，總體系為 20L 進行 CRT（25 10min，42 15min， 85 5min）。其中，

20、RNA 樣品有三種（PRRSV、CSFV 和 JEV），每組試驗設立三個重復。而后配置 Real-time PCR 體系，如下：體系：SYBR Premix EX Ta （2x）： 10 AL PCR Forward Primer：0.6 ALPCR Reverse Primer：0.6 ALDNA 模板2 AL三蒸水6.8 AL總 20 AL兩步法 PCR 擴增標準程序：Stage1：預變性Reps：195 30 秒Stage2：PCR 反應Reps：40 95 5 秒60 30 秒反應結束后確認 Real-time PCR 的擴增曲線和融解曲線，按照內參基因和目的基因的擴增結果，應用 2C

21、T 的方法技術最終的 CT 值；評價擴增的效果，間接評價核酸的提取效果。上述反應應用 ABI 7300 熒光定量 PCR 儀（美國 Applied Bio systems 公司）進行。其中，每組試驗設立三個重復。2.結果2.1 瓊脂糖凝膠電泳檢測結果2.1.1 高致病性豬繁殖于呼吸綜合癥活疫苗（JXA1-R 株）檢測結果從圖 1 可以看出，Liaison Plus、RNAOUT、Troll Plus 和 Queasy 快速DNA/RNA 共提試劑盒對應的組，電泳條帶亮度和清晰度很高，彼此之間無肉眼可見差距；柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒對應的組未發現條帶，表現不理想。圖 1 PRRSV D

22、NA 瓊脂糖凝膠電泳結果（M 為 Marker，0 為空白對照，1-3、4-6、7-9、10-12、13-15 分別為 3 個平行組，依次對應Liaison Plus、RNAOUT、Troll Plus、柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒、Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒）2.1.2 豬瘟耐熱保護劑活疫苗檢測結果從圖 2 可以看出，Liaison Plus、RNAOUT、Troll Plus 和 Queasy 快速DNA/RNA 共提試劑盒對應的組，電泳條帶亮度和清晰度很高。其中，Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組條帶最清晰、亮度最高；Liaison Plus

23、 和RNAOUT 對應的組條帶中度清晰、亮度中等，但兩組之間無肉眼可見差距； Troll Plus 對應的組清晰度較低，亮度低；柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒對應的組未發現條帶，表現不理想。圖 2 CSFV DNA 瓊脂糖凝膠電泳結果（M 為 Marker，0 為空白對照，1-3、4-6、7-9、10-12、13-15 分別為 3 個平行組，依次對應Liaison Plus、RNAOUT、Troll Plus、柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒、Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒）2.1.3 日本乙型腦炎弱毒活疫苗檢測結果從圖 3 可以看出，Liaison Plus、RNAOU

24、T、Troll Plus 和 Queasy 快速DNA/RNA 共提試劑盒對應的組之間，電泳條帶亮度和清晰度很高。其中，Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組條帶最清晰、亮度最高；LiaisonPlus 和 RNAOUT 對應的組條帶中度清晰、亮度中等，但兩組之間無肉眼可見差距；Troll Plus 對應的組清晰度較低，亮度低；柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒對應的組未發現條帶，表現不理想。圖 3 JEV DNA 瓊脂糖凝膠電泳結果（M 為 Marker，0 為空白對照，1-3、4-6、7-9、10-12、13-15 分別為 3 個平行組，依次對應Liaison Plus、R

25、NAOUT、Troll Plus、柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒、Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒）2.2 Real-time PCR 檢測結果2.2.1 高致病性豬繁殖于呼吸綜合癥活疫苗（JXA1-R 株）檢測結果從圖 4 可以看出，Liaison Plus、RNAOUT、Troll Plus、柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒和 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組 CT 值均較低。其中，Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組 CT 值最低；Liaison Plus 和RNAOUT 對應的組 CT 值其次，但兩組間差距不明顯；Troll

26、Plus 對應的組 CT 值稍高；柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒對應的組 CT 值最高。圖 4 PRRSV Real-time PCR 檢測結果（Tamara、天恩澤、天為、天恩澤盒、快靈盒依次對應 Liaison Plus、RNAOUT、Troll Plus、柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒、Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒）2.2.2 豬瘟耐熱保護劑活疫苗檢測結果從圖 5 可以看出，Liaison Plus、RNAOUT、Troll Plus、柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒和 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組 CT 值均較低。其中，Queasy

27、 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組 CT 值最低；Liaison Plus 和RNAOUT 對應的組 CT 值其次，但兩組間差距不明顯；Troll Plus 和柱式病毒DHARNA 雙提試劑盒對應的組 CT 值稍最高，但兩組間差距不明顯。圖 5 CSFV Real-time PCR 檢測結果（Tamara、天恩澤、天為、天恩澤盒、快靈盒依次對應 Liaison Plus、RNAOUT、Troll Plus、柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒、Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒）2.2.3 日本乙型腦炎弱毒活疫苗檢測結果從圖 6 可以看出，Liaison Plus、RNAOU

28、T、Troll Plus、柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒和 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組 CT 值均較低。其中，Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組 CT 值最低；Liaison Plus 和RNAOUT 對應的組 CT 值其次，但兩組間差距不明顯；Troll Plus 對應的組 CT值稍高；柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒對應的組 CT 值最高。圖 6 JEV Real-time PCR 檢測結果（Tamara、天恩澤、天為、天恩澤盒、快靈盒依次對應 Liaison Plus、RNAOUT、Troll Plus、柱式病毒 DHARNA 雙提試

29、劑盒、Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒）3 討論RNA 的提取是分子生物學的基礎21，如何提取從動物細胞和組織中提取高質量的 RNA 更是科研研究和病原診斷的關鍵。只有獲得高純度、高濃度和完整性好的 RNA 才能更好的進行下游反應，如 DNA 文庫構建、熒光定量 PCR、CRT、Northern 雜交等下游分子生物學實驗。RNA 的提取關鍵在于組織細胞裂解。組織裂解方法有很多，包括胍鹽裂解法、堿裂解法、CTAB 裂解法和酚油抽提法等，這類方法雖然具有提取高純度核酸的優點，但是普遍存在實驗步驟多、操作繁瑣、耗時長以及部分存在毒性等缺點22。隨著生物產業的商業化發展，很多試劑公司根據

30、組織裂解的方法設計出了很多商品化試劑，比如 Tamara 公司的 Liaison Plus、天為生物科技有限公司的 TrollPlus，天恩澤基因科技有限公司的動物 RNAOUT 等。這些試劑可以從動物組織、培養細胞和微生物中簡單、快速的提取 RNA，且獲得的 RNA 完整性好，純度高操作過程簡單，并且毒性小，實驗危險性小。通常情況下，分子生物學試驗只需單獨提取一種類型的核酸（DNA/RNA）或蛋白質。如果想要同時獲得 DNA、RNA 以及蛋白質，則需要分別提取。顯然這種方式效率不高，因此，隨著科技的進步，出現了很多商品化試劑盒，如天恩澤基因科技有限公司的柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒法、

31、快靈生物科技有限公司的 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒等。此類方法操作起來簡便，時間短，可以同時提取 DNA 和 RNA，毒性小，且獲得的核酸完整性好，純度高等。筆者所在實驗室選取了市售的三種細胞裂解液（Liaison Plus、Troll Plus 和RNAOUT）和兩種 DNARNA 共提試劑盒（柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒、Queasy 快速DNA/RNA 共提試劑盒）。分別對豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬瘟病毒（CSFV）和乙型腦炎病毒（JEV）三種疫苗毒的 RNA 進行提取，而后進行 CRT 將所提取的 RNA 轉換成 DNA，分別用于普通 PCR 并

32、進行瓊脂糖 凝膠電泳和 Real-time PCR，之后分別通過瓊脂糖凝膠電泳條帶清晰度、亮度和Real-time PCR CT 值來間接對所提取 RNA 質量作評價和比較。瓊脂糖凝膠電泳結果表明，對于 PRRSV，Liaison Plus、RNAOUT、Troll Plus 和 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒所對應的組均可見清晰度高，亮度高的條帶，表明對應 DNA 質量好，間接表明所提取的 RNA 質量好。因此，上述試劑可用于臨床 PRRSV 的病毒檢測以及定性分析。對于 CSFV，Queasy 快速DNA/RNA 共提試劑盒所對應的組條帶最清晰、亮度最高，其次是 Liais

33、on Plus 和 RNAOUT，Troll Plus 稍差。因此，對于臨床 CSFV 的病毒檢測以及定性分析，首選 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒、Liaison Plus 和 RNAOUT。對于JEV，Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒所對應的組條帶最清晰、亮度最高， 其次是 Liaison Plus 和 RNAOUT，Troll Plus 稍差。因此，對于臨床 JEV 的病毒檢測以及定性分析，首選 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒、Liaison Plus 和 RNAOUT。Real-time PCR 結果表明，對于 PRRSV，Queasy 快

34、速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組 CT 值最低，表明對應的 DNA 濃度和純度最好，間接說明所提取的 RNA 質量最好。其次是 Liaison Plus 和 RNAOUT，柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒和 Troll Plus 表現不理想。因此，對于臨床 PRRSV 的病毒檢測以及定量分析， 首選 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒、Liaison Plus 和RNAOUT。對于 CSFV，Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組 CT 值最低，表明對應的 DNA 濃度和純度最好，間接說明所提取的 RNA 質量最好。其次是 Liaison Plus 和RNA

35、OUT，柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒和 Troll Plus 表現不理想。因此， 對于臨床 CSFV 的病毒檢測以及定量分析，首選 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒、Liaison Plus 和 RNAOUT。對于 JEV，Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒對應的組 CT 值最低，表明對應的 DNA 濃度和純度最好，間接說明所提取的RNA 質量最好。其次是 Liaison Plus 和 RNAOUT，柱式病毒 DHARNA 雙提試劑盒和 Troll Plus 表現不理想。因此，對于臨床 JEV 的病毒檢測以及定量分析，首選 Queasy 快速 DNA/RNA 共

36、提試劑盒、Liaison Plus 和 RNAOUT。本次實驗僅僅對 PRRSV，CSFV 和 JEV 三種 RNA 病毒的疫苗毒 RNA 進行提取比較。以上三種病毒均為臨床常見的 RNA 病毒，具有代表性。通過比較分析實驗結果，筆者認為當臨床需要對 PRRSV，CSFV 和 JEV 三種 RNA 病毒進行檢測時，可首選 Queasy 快速 DNA/RNA 共提試劑盒和 Liaison Plus 和 RNAOUT 兩種細胞裂解液，獲得的 RNA 質量好，利于后續實驗的進行。隨著科學技術的進步，市面上已經出現自動核酸提取儀，如 ABI 公司的 ABI PRISMTM 6100 核酸提取儀，半個小

37、時即可完成 96 個樣品的純化工作，并且可純化來自多種生物樣本的總 RNA 和基因組 DNA23。隨著科技的發展，類似的儀器也在不斷出現和升級，但由于成本較高，且有時并不需要同時提取 96 個樣本，因此多數高校和科研機構并未普及。每種 RNA 提取方法均有其各自的優勢，如何選擇合適的 RNA 提取方法應根據提取對象、所需濃度和數量、時間以及純度等來綜合選擇。隨著科學技術的進步， 相信動物組織 RNA 提取的方法會越來越簡便、快速、高效。致謝參考文獻：1 Jun H L, Chan H T. A simple rapid and effective method for total RNA ex

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