1、尿液干化學(xué)檢查中常見影響因素的分析 尿液分析；化學(xué)檢測 尿液干化學(xué)聯(lián)合尿沉渣檢測，使尿液分析發(fā)生了劃時(shí)代的變化。自動(dòng)化程度的日益提高，檢測參數(shù)的逐步增加，測試速度的不斷加快，極大地提高了工作效率，減輕了檢驗(yàn)人員的勞動(dòng)強(qiáng)度。但由于干化學(xué)檢測的局限性、干化學(xué)試紙的諸多影響因素以及檢查過程中忽略了許多中間環(huán)節(jié)，從而直接影響了尿液自動(dòng)化分析的準(zhǔn)確性。我們對尿液干化學(xué)檢測過程中經(jīng)常遇到的干擾因素及注意事項(xiàng)介紹如下。 1 pH、尿蛋白和尿比重的相互影響 干化學(xué)法尿蛋白、比重和pH的檢測原理都是基于pH的變化而設(shè)計(jì)的，這是pH、尿蛋白和比重之間相互影響的根源。pH 5.07.0的正常尿液對尿蛋白和尿比重?zé)o影

2、響，過低的強(qiáng)酸性尿液幾乎不存在。因此，需要我們引起足夠重視的是pH值升高的強(qiáng)堿性尿。pH升高的病理因素包括堿中毒、原發(fā)性醛固酮增多癥、變形桿菌和銅綠假單胞桿菌引起的膀胱炎、腎盂腎炎等尿路感染。許多藥物如枸櫞酸鈉、嘧啶、碳酸類藥物及某些中草藥?？梢鹉蛞簆H值不同程度的升高。強(qiáng)堿性尿?qū)Ρ戎氐挠绊懼饕悄蛞褐械腛H-中和了一部分H+，引起膜塊上的pH改變導(dǎo)致比重結(jié)果降低。實(shí)驗(yàn)室檢測pH超過7.0時(shí)，在原尿比重基礎(chǔ)上應(yīng)增加0.005，超過8.0時(shí)增加0.010。pH8.5時(shí)，對儀器報(bào)告的尿蛋白陽性標(biāo)本均應(yīng)通過其他方法加以證實(shí)。而作為兩性電解質(zhì)的蛋白質(zhì)，本身可電離出H+，與Na+從多聚電解質(zhì)中解離出來

3、的H+共同作用于尿比重膜塊上的指示劑，發(fā)生顯色反應(yīng)，使比重檢測結(jié)果偏高。 2 細(xì)菌和真菌對尿隱血的影響 尿隱血檢查是診斷泌尿系統(tǒng)疾病，特別是腎臟疾病的重要實(shí)驗(yàn)指標(biāo)之一。尿路感染的病例中，部分桿菌、球菌及真菌（主要為假絲酵母菌）一方面可能釋放過氧化物酶，另一方面為了代謝的需要在增殖過程中可能合成過氧化物酶、觸酶或超氧化物歧化酶。目前，尿隱血檢查是一種非特異性的檢測方法，上述酶類物質(zhì)在尿隱血的干化學(xué)測定中，可不同程度地使試紙膜塊上的過氧化氫茴香素或過氧化氫稀枯分解出游離氧，引起色原顏色的變化，出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。大量實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)，尿中少量細(xì)菌和真菌對隱血無影響，但延長顯色時(shí)間有時(shí)也可呈弱陽性反應(yīng)。不同

4、細(xì)菌引起尿隱血的陽性程度不同，假單胞菌屬（如銅綠假單胞桿菌）最嚴(yán)重，桿菌強(qiáng)于真菌和球菌。大量細(xì)菌和真菌是引起干化學(xué)法尿隱血假陽性的原因之一。 3 藥物對尿液檢驗(yàn)的影響 藥物具有生物活性，藥物本身及其代謝產(chǎn)物干擾尿液測定的現(xiàn)象并非少見。臨床治療中濫用抗生素的現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生，許多新藥對臨床檢驗(yàn)的干擾還尚未發(fā)現(xiàn)。藥物對尿液檢查的影響給實(shí)驗(yàn)室檢查和臨床診斷增添了許多困難。 青霉素是臨床最常用的抗生素，滴注后76%于6 h內(nèi)以原形從尿中排出。青霉素結(jié)構(gòu)中含有類似蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)中的肽鍵，可使磺柳酸法結(jié)果增強(qiáng)，而干化學(xué)法結(jié)果減弱。干化學(xué)法是基于試紙帶膜塊上pH值的變化。青霉素分子結(jié)構(gòu)中的-COOH可電離出H+

5、，可能通過H+影響pH值的變化而導(dǎo)致尿蛋白的陽性減弱。因此，靜脈滴注青霉素最好56 h后再做尿液檢查，對蛋白尿患者使用青霉素治療時(shí)，不同的測定方法應(yīng)考慮不同的干擾作用，干化學(xué)法可使結(jié)果減弱甚至為假陰性。氧哌嗪青霉素僅影響磺柳酸法尿蛋白的測定，而不影響干化學(xué)法的檢測。氧哌嗪是青霉素的衍生物，靜滴后主要以原形從尿中排出。氧哌嗪分子結(jié)構(gòu)中含有兩個(gè)牢固結(jié)合的肽鍵，與磺柳酸可發(fā)生明顯的結(jié)合，產(chǎn)生類似尿蛋白的假陽性反應(yīng)。因此，遇到磺柳酸法尿蛋白強(qiáng)陽性，與儀器檢測或顯微鏡檢查明顯不符時(shí)，應(yīng)詳細(xì)詢問病情，了解用藥史，及時(shí)反饋給臨床。 維生素C是最常用的維生素類藥物。本藥水溶性好，口服或滴注后體內(nèi)代謝快，尿中濃

6、度迅速升高。維生素C具有較強(qiáng)的還原性，對尿液成分測定的影響機(jī)制可理解為競爭性抑制反應(yīng)，使結(jié)果減弱或出現(xiàn)假陰性。一般認(rèn)為，常規(guī)劑量口服維生素C對實(shí)驗(yàn)結(jié)果無影響，而大劑量口服特別是靜脈滴注時(shí)，30 min內(nèi)尿中濃度即迅速升高，隨著尿液的濃縮其濃度不斷上升。高濃度的維生素C可影響尿中葡萄糖、隱血、膽紅素和亞硝酸鹽的測定。不同濃度的維生素C對尿液檢查的影響不同，同樣濃度的維生素C對尿液中不同成分的影響也不相同，不同批號的試紙抗維生素C的干擾不同。從事尿液分析的檢驗(yàn)人員，應(yīng)參照本實(shí)驗(yàn)室的儀器和試紙，建立健全維生素C在多大濃度范圍內(nèi)才對以上實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生影響及影響程度如何，選擇維生素C滴注后的最短取尿時(shí)間。 4

7、 干化學(xué)測定與尿液有形成分顯微鏡檢查的關(guān)系 4.1 干化學(xué)測定與白細(xì)胞顯微鏡檢查的關(guān)系 干化學(xué)法白細(xì)胞檢查的原理是依賴于白細(xì)胞漿內(nèi)粒細(xì)胞酯酶的存在。該酶作用于試紙膜塊上的吲哚酚酯游離出吲哚酚，吲哚酚與重氮鹽反應(yīng)形成紫色縮合物。粒細(xì)胞酯酶主要存在于粒細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，單核細(xì)胞含有少量，淋巴細(xì)胞中無此酶。因此，干化學(xué)法主要測定粒細(xì)胞。甲醛防腐尿液及應(yīng)用某些藥物（如呋喃坦啶）時(shí)，可使尿白細(xì)胞呈假陽性。而陳舊性尿液中的膿細(xì)胞，尿中含有大量先鋒和慶大霉素，尿蛋白大于5 g/L，乳糜尿及深棕色尿均可導(dǎo)致尿白細(xì)胞陽性減弱或呈假陰性。由于干化學(xué)測定的原理與顯微鏡計(jì)數(shù)的形態(tài)學(xué)檢查是兩種截然不同的概念，所以有時(shí)出現(xiàn)結(jié)果不

8、一致的情況。 4.2 干化學(xué)測定與紅細(xì)胞顯微鏡檢查的關(guān)系 顯微鏡血尿是許多泌尿系統(tǒng)疾病病理變化的初始信號之一，極少量紅細(xì)胞有時(shí)只表現(xiàn)為隱血陽性。臨床無癥狀的尿隱血陽性對疾病的早期診斷更為重要。尿隱血檢測包括尿液中的紅細(xì)胞和（或）紅細(xì)胞變形裂解后溢出的血紅蛋白。紅細(xì)胞和血紅蛋白均含有亞鐵血紅素，具有過氧化物酶樣活性，亞鐵血紅素還原試紙帶膜塊上的過氧化物釋放出游離氧，氧化色原顯色。因此尿隱血報(bào)告的陽性程度往往高于顯微鏡檢查的紅細(xì)胞數(shù)。許多患者紅細(xì)胞在腎臟或泌尿道中因滲透壓過低或pH值偏高而破壞，血紅蛋白釋放，出現(xiàn)所謂干化學(xué)檢查的假陽性現(xiàn)象。因此遇到與顯微鏡檢查結(jié)果不符時(shí)，一定要結(jié)合臨床加以分析，尋

9、找原因，切不可一概對干化學(xué)法加以否定，更不可武斷地調(diào)節(jié)儀器的靈敏度。尿隱血假陰性主要見于維生素C的干擾所致。假陽性主要是尿液中存在對熱不穩(wěn)定的酶（如過氧化物酶、類過氧化物酶）和肌紅蛋白。前者加熱后酶類破壞即轉(zhuǎn)為陰性，后者是一類特殊的疾病。 4.3 干化學(xué)測定與管型顯微鏡檢查的關(guān)系 尿液干化學(xué)檢查中,沒有管型的檢測項(xiàng)目。管型是尿液檢驗(yàn)中最有意義的成分，是尿液中蛋白質(zhì)、腎小管分泌物、變性的腎上皮細(xì)胞及其剝脫物、紅細(xì)胞或白細(xì)胞及其崩解產(chǎn)物在遠(yuǎn)曲小管、集合管內(nèi)形成的。所以尿液中出現(xiàn)管型時(shí),絕大多數(shù)尿蛋白陽性。尿液中檢出病理性管型表示腎小管有一過性尿潴留，常可反映腎臟的病變。因此，必須嚴(yán)格按規(guī)定鏡檢，以

10、保證管型不被漏診。干化學(xué)試紙帶受諸多因素的影響，不同尿液分析儀檢測的靈敏度也有一定差異。目前，任何一臺尿液分析儀只能起顯微鏡檢查的過篩實(shí)驗(yàn)，即使可進(jìn)行無玻片鏡檢及細(xì)胞分布直方圖報(bào)告的電腦遙控顯像尿液分析儀，也不能完全取代顯微鏡?；谝陨显颍瑢?shí)驗(yàn)室需要常規(guī)鏡檢的情況至少應(yīng)包括:（1）泌尿系統(tǒng)或可疑泌尿系統(tǒng)疾病的患者；（2）尿蛋白、白細(xì)胞、紅細(xì)胞、亞硝酸鹽有陽性者或四項(xiàng)均陰性而尿維生素C（+）以上或標(biāo)本留取前使用了對尿液檢查有影響的藥物；（3）可疑尿中有管型、腎上皮細(xì)胞、亞硝酸鹽還原酶陰性的細(xì)菌、病理性結(jié)晶等異常成分；（4）尿液混濁或尿色異常者；（5）近期內(nèi)尿檢異常正在治療觀察的患者。 5 減小

11、誤差，提高尿液分析的準(zhǔn)確性 5.1 標(biāo)本的采集與放置 干化學(xué)檢查要求尿液應(yīng)新鮮，最好不要超過2 h。長時(shí)間放置的尿標(biāo)本，某些化學(xué)成分或有形成分可能會(huì)分解、破壞或轉(zhuǎn)化成其他成分（待測物或非待測物），從而直接或間接影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如尿液中大量繁殖的細(xì)菌在葡萄糖和蛋白質(zhì)的分解過程中，細(xì)菌大量增加，葡萄糖和蛋白質(zhì)逐漸減少；紅細(xì)胞無氧酵解過程中對葡萄糖的利用及各種細(xì)胞成分的破壞，都不同程度地增加了實(shí)驗(yàn)的誤差。又如新鮮尿中的酮體形式主要為乙酰乙酸，長時(shí)間放置的尿標(biāo)本，乙酰乙酸的含量逐漸降低，而丙酮和-羥丁酸逐漸增高，由于三種酮體物質(zhì)檢測的靈敏度差異甚大，勢必造成同一份標(biāo)本應(yīng)用同一臺儀器和試紙?jiān)诓煌瑫r(shí)間

12、檢測結(jié)果的差異。干化學(xué)檢查更不可應(yīng)用加入防腐劑（如甲苯、甲醛）和抑制劑（如氟化鈉）的尿液，否則加入的化學(xué)試劑將直接影響到某些成分的測定。 5.2 干化學(xué)試紙的保存、浸濕時(shí)間及測試溫度 干化學(xué)試紙一旦啟封應(yīng)盡快用完，且每次使用后必須緊塞筒蓋，勿放入冰箱保存，以免被空氣氧化或吸水變質(zhì)。由于各項(xiàng)目的檢測原理不同，延長浸濕時(shí)間加之室內(nèi)溫度增高，可使葡萄糖、蛋白質(zhì)、膽紅素和尿膽原的陽性增強(qiáng)，而酮體陽性減弱，pH值降低。禁止用手觸摸試紙帶上任何一個(gè)測試膜塊，浸濕后的試紙帶不宜甩動(dòng)，以免互相污染影響結(jié)果。因此尿液檢查必須標(biāo)準(zhǔn)化，試紙浸濕時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格控制在2 s或規(guī)定的時(shí)間，啟封后應(yīng)在1周內(nèi)用完，保存于室溫在15 25 的通風(fēng)干燥處為宜。 5.3 使用配套試紙、定期校準(zhǔn)儀器、開展室內(nèi)室間質(zhì)控 由于尿試紙帶各項(xiàng)目的檢測原理不同，同一項(xiàng)目不同廠家的試紙反應(yīng)原理也不盡相同，各膜塊反應(yīng)的靈敏度