1、門文卉，陳晗，林連兵，鄧先余*（昆明理工大學，生命科學與技術學院，云南省昆明市 郵編650500） 摘要：對澤瀉、決明子、絞股藍超微粉碎物用量進行優化組合，探索降低雞蛋膽固醇的中草藥復方添加劑配比，依據響應面法原理使用Box-Behnken設計實驗數學模型并評估最優配比下中草藥復方添加劑的效果。結果表明，中草藥復方最佳配比為：澤瀉超微粉碎物用量695.49mg，決明子超微粉碎物用量893.14mg，絞股藍超微粉碎物用量334.13mg，該條件下檢測雞蛋膽固醇含量為2.48mmol/L，與空白對照相比，試驗組的料蛋比降低了33.64%，產蛋率提高了11.73%，有顯著性差異(p<0.05)

2、；顯著降低了蛋黃中的膽固醇含量69.90%和甘油三酯含量41.78%(p<0.05)，顯著提高蛋雞免疫能力(p<0.05)。響應面法能夠用于中草藥復方添加劑處方配比優化，此配方能很好的降低雞蛋膽固醇，為實際生產提供理論依據。關鍵詞：響應面；雞蛋；膽固醇；中草藥復方 中圖分類號：S831.5 The study of compound Chinese herb additives optimization for reduction of egg cholesterol content by response surface methodMENG Wen-hui, CHEN Han,

3、 LIN Lian-bin, DENG Xian-yu*（College of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Yunnan650500, China）Abstract: The quantity of superfine comminution of Alisma orientale, semen cassia and Gynostemma pentaphyllum were optimized according to the mathematic model built

4、by Box-Behnken Design on the rationale of response surface methodology and evaluate the effect of Chinese herb additives. The result was that: the best Chinese Herb Additives composition contained 695.49mg of superfine comminution of Alisma orientale, 893.14mg of superfine comminution of semen cassi

5、a, 334.13mg of superfine comminution of Gynostemma pentaphyllum. Under these conditions, the egg cholesterol concentrations was 2.48mmol/L. Compared with control group, the feed-egg rate was obviously dropped by 33.64%, the egg-laying rate increased obviously by 5.35%(p<0.05), significantly reduc

6、e egg yolk cholesterol and triglyceride levels by 69.90%, 41.78%(p<0.05), significantly increase the immune index(p<0.05). Response surface methodology could be adopted for the optimize the ratio of Chinese herb additive formulation, which can lower cholesterol eggs well, provide a theoretical

7、 basis for the actual production.Key worsds: response surface methodology; egg; cholesterol content; Chinese herb additives 隨著生活水平的不斷提高，人們越來越重視飲食結構均衡、來源安全可靠。雞蛋營養均衡，價格便宜深受人們喜愛，蛋黃粉、全蛋粉等產品的銷量也逐年增加，但其膽固醇含量較高，長期大量食用對人類健康造成一定威脅。有研究指出從機體外攝入大量膽固醇會導致血液中的膽固醇隨之升高，可能誘發腦血栓、冠狀動脈硬化等心血管疾病。為避免人體從蛋中攝取過多的膽固醇并提高雞蛋營養價值，

8、降低雞蛋膽固醇的研究十分必要。近年來有研究在飼料中加入他汀類化學合成藥物1、益生素2、微量元素3等添加物，或是用生物工程4的方法來降低雞蛋膽固醇，但存在化學殘留、效果不顯著或是難度大，短期難以達到效果等缺點。我國中草藥資源豐富，且中草藥毒副作用小，殘留性小，合理選擇不同的中草藥并合理配比能使效果更好。澤瀉為多年沼生澤瀉科植物澤瀉的干燥塊莖，含有三萜、二萜、倍半萜等成分，具有治療脂肪肝、降血糖、降血壓以及減肥等多種作用5。決明子為豆科植物決明的干燥成熟種子，含有蒽醌類、脂肪酸類、吡咯酮類等成分，具有降血脂、降血壓等作用6。絞股藍屬草質攀援植物，含有絞股藍皂苷、黃酮等成分，具有清熱解毒、增強機體免

9、疫力等作用7。本研究采用澤瀉、決明子、絞股藍三種中草藥復合，制成中草藥復方添加劑，通過采用響應面優化設計來研究其降低雞蛋膽固醇最佳效果的復合配比。1 材料和方法1.1 實驗材料 澤瀉超微粉碎物、決明子超微粉碎物、絞股藍超微粉碎物（由四川同泰植物化工有限公司提供，超微粉碎物可以過300目篩），羅氏比色扇，分析天平（上海光正醫療儀器有限公司），游標卡尺（上海匯一尺業有限公司）、總膽固醇（CHO酶法）測試盒、甘油三酯試劑盒（酶法）、高密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒（試劑盒均購買于南京建成生物工程研究所）。1.2 實驗動物與飼喂 本實驗選用190日齡健康、體重和產蛋率相近的綠

10、殼蛋雞255羽。采用隨機分組原則，將其分為17組，每組15羽。預飼期14天，各組統一飼喂基礎日糧，預飼期結束時統計各組雞蛋膽固醇含量，經分析無顯著差異才開始進行正式實驗，正式實驗4周。每組飼喂基礎日糧外，按照響應面試驗設計添加中草藥復方添加劑。1.3 飼養管理及基礎日糧組成蛋雞養殖實驗在綠色循環農業實驗基地進行。采用三層立體籠飼養，每日喂干粉料2次，每次每羽雞飼喂50克，自由采食和飲水。保持良好的通風，適宜的溫度和濕度。按照常規免疫程序進行防疫和雞舍消毒。基礎日糧參照中華人民共和國專業標準NY/T 33-2004，結合綠殼蛋雞生長情況，自行設計日糧配方，如表1所示。表1 雞日糧組成及營養水平T

11、able1 The composition and nutrient levelof hens daily diet 原料組成含量%營養水平含量%玉米粉61代謝能MJ/KG11.42豆粕22粗蛋白18.17麩皮2鈣3.73魚粉4.5總磷0.64石粉9蛋氨酸0.31食鹽0.2胱氨酸0.27硫化鈣3賴氨酸0.97預混料0.3注：1. 每千克添加維生素A 9000IU，維生素D 2500IU，維生素E 20IU，維生素12 12g，維生素K 2.4mg。2.每千克飼料添加微量元素Mn 100mg，Zn 60mg，Fe 25mg，Cu 5mg，Co 0.1mg。1.4 實驗設計 采用響應面分析法（Re

12、sponse Surface Methodology，RSM）尋求最優參數。在前期實驗的基礎上，選取澤瀉超微粉碎物用量（1001000mg）、決明子超微粉碎物用量（1501500mg）、絞股藍超微粉碎物用量（60600mg）三個因素為自變量，以雞蛋蛋黃中的膽固醇含量作為響應值，表觀中草藥復方添加劑降低雞蛋膽固醇的效果。根據響應面法中的Box-Behnken實驗設計原理，運用Design Expert 8.0設計3因素、3水平的響應面實驗（實驗因素與水平見表2，實驗設計見表3，每邊中心點為5，共17組實驗）。表2 響應面試驗因素、水平表Table2 Factors and leve1s of r

13、esponse surface因素編碼編碼水平-101澤瀉超微粉碎物用量A1005501000決明子超微粉碎物用量B1508251500絞股藍超微粉碎物用量C60330600表3 響應面設計及試驗結果Table3 Experimental design and results of response surface編號因素水平蛋黃膽固醇含量(mmol/L)澤瀉超微粉碎物用量（mg）決明子超微粉碎物用量（mg）絞股藍超微粉碎物用量（mg）實測值預測值1-1-105.024.9521-103.923.863-1104.304.3641103.583.655-10-15.185.17610-14.3

14、24.317-1014.924.9481013.994.0090-1-14.965.041001-14.354.30110-114.374.42120114.444.36130002.752.52140002.532.52150002.342.52160002.472.52170002.532.521.5 驗證實驗 在1.2的255羽雞外另選取30羽雞，隨機分為實驗組和空白組兩組，每組15羽。實驗組日糧中（除基礎日糧外還要）添加按照最優配方比配制的降膽固醇中草藥復方添加劑，空白對照則只飼喂基礎日糧，飼喂方法和管理均同1.3。預飼期2周結束后，進行4周正式試驗，收集第28天的雞蛋，進行蛋黃膽固醇

15、含量測定。把實驗組的實驗值和預測值相對比，進行模型驗證。1.6 中草藥復方添加劑效果評估與(評估)方法1.6.1 生產性能指標 實驗期間每日以組為單位記錄產蛋數和蛋重，每七天末稱重一周余料量，統計日均產蛋率、日均采食量和料蛋比等指標。日均產蛋率%=總蛋數/（天數*雞的數量）*100%日均采食量（g）=（每周飼喂量-每周余料量）/（天數*雞的數量）料蛋比=總采食量（g）/總蛋重（g）1.6.2 蛋的品質檢測實驗第28天，隨機抽取兩組雞蛋各5枚，測定抽樣雞蛋的蛋品質指標。用分析天平測定蛋重、蛋黃重、蛋殼重，用游標卡尺測定蛋形指數、哈氏單位、蛋殼厚度，用羅氏比色扇測定蛋黃顏色。1.6.3 蛋黃膽固醇

16、含量、甘油三酯含量的檢測實驗第28天，隨機抽取兩組雞蛋各5枚，分離蛋黃后攪勻。稱取1.00g蛋黃液，0.9%生理鹽水溶解，20ml容量瓶定容待測。利用試劑盒，采用膽固醇氧化酶法測定總膽固醇含量；采用酶法測定甘油三酯含量、高密度脂蛋白膽固醇含量和低密度脂蛋白膽固醇含量。1.6.4 血清生化指標檢測實驗結束后禁水禁食24小時，每組抽樣5羽雞，進行翅靜脈采血35mL，4靜置12小時，離心10分鐘（4000r/min），抽取上清液待測。利用試劑盒，采用膽固醇氧化酶法測定血清中總膽固醇含量，采用酶法測定甘油三酯含量、采用直接法測定高密度脂蛋白膽固醇含量和低密度脂蛋白膽固醇含量。根據Friedewald公

17、式，極低密度脂蛋白=甘油三脂含量/F，其中甘油三酯含量單位為“mmol/L”，F=2.2，由此可以計算出極低密度脂蛋白的含量。1.6.5 免疫指數的測定 實驗結束后禁水禁食24小時。每組隨機抽取3羽雞進行屠宰實驗，摘取雞胸腺、脾臟和法氏囊，濾紙吸取表面血液，并剝離表面脂肪和結締組織，最后稱重。免疫器官指數=免疫器官重（g）/活體重（kg）1.6.6 數據統計與處理 實驗數據采用spss19.0軟件 ONE-WAY ANOVA進行方差分析，采用Duncans法進行均值的多重比較，結果以“平均值±標準差”表示，以P0.05作為顯著性差異的判斷標準。2 結果與分析2.1模型的建立及顯著性檢

18、驗 利用Design Expert 8.0 軟件對實驗數據進行多元回歸擬合，得到雞蛋膽固醇（Y）對澤瀉超微粉碎物用量（A）、決明子超微粉碎物用量（B）、絞股藍超微粉碎物用量（C）的回歸方程為:Y=2.52-0.45*A-0.20*B-0.14*C+0.095*A*B-0.017*A*C+0.17*B*C+0.88*A2+0.80*B2+1.2*C2 回歸方程中，各變量對響應值影響的顯著性用F檢驗法判定，概率p值越小，則顯著性程度越高：p0.01為極顯著，p0.05為顯著。對該模型進行方差分析和擬合度檢驗，結果見表4和5。由表4可知，模型的F值為99.05，p0.0001，說明該模型方程極為顯著

19、;模型不失擬（p=0.530.05），這說明該方程在被研究的回歸區域擬合較好；對回歸模型顯著性分析可知因素C的p值0.0227，小于0.05，說明對降低膽固醇效果的影響顯著；A、B的p值分別為< 0.0001、0.0037，小于0.01，說明對結果影響極顯著；BC的p值為0.0372，表明因素B和C對結果的交互性影響顯著，而其他因素兩兩交互效應不顯著。A2、B2、C2的p值均小于0.0001，說明對結果的影響極為顯著。由表5可知決定系數為0.99，校正決定系數為0.98，均接近1，模型的變異系數較低3.41，說明該模型相關性較好，試驗誤差小，可以用此模型對中草藥復方添加劑配比進行分析和預

20、測。2.2 各因素及其交互作用對膽固醇含量的影響如圖1所示，雞蛋膽固醇含量隨決明子超微粉碎物、澤瀉超微粉碎物、絞股藍超微粉碎物用量的增加而下降。當這三種中草藥的用量到達中心值后，雞蛋膽固醇含量又隨這三種中草藥用量的上升而上升。等高線形狀可以反映各因素交互作用的強弱。由圖1可知決明子超微粉碎物（B）、絞股藍超微粉碎物（C）用量兩因素等高線為橢圓形，交互作用明顯。當決明子超微粉碎物用量為825mg，絞股藍超微粉碎物用量為330mg時,膽固醇含量最低。AB兩因素、AC兩因素等高線呈近似圓形，交互作用不明顯。表4 響應面方差分析Table4 Analysis of variance of respon

21、se surface變異來源Source平方和Sum of Squares自由度df均方Mean SquareF值F ValueP值P Valure模型 Model15.6491.7499.05< 0.0001A1.6311.6392.83< 0.0001B0.3210.3218.230.0037C0.1510.158.460.0227AB0.03610.0362.060.1946AC0.00110.0010.0700.7992BC0.1210.126.590.0372A23.2413.24184.43< 0.0001B22.7212.72155.19< 0.0001C

22、26.0816.08346.50< 0.0001殘差 Residual0.1270.018失擬項 Lack of Fit0.03530.0120.530.6857純誤差 Pure Error0.08840.022總變異 Cor Total15.7716表5 擬合度檢驗Table5 Goodness of fit test均值Mean3.88誤差Deviation（standard deviation）0.13決定系數Coefficient of determination（R-Squared）0.99信噪比Signal to noise ratio（Adequate precision）

23、26.07校正決定系數Adjuested Coefficient of determination（R-Squared）0.98預測決定系數Predicted Coefficient of determination（R-Squared）0.96變異系數C.V%（coefficient of variation）3.41圖1 各因素及其交互作用對膽固醇含量的影響Fig1 Effect of variables and their interactions on cholesterol content2.3 模型驗證經Design Expert 對實驗結果進行響應面分析，可以得到中草藥復方最佳配

24、方為澤瀉超微粉碎物用量為695.49mg，決明子超微粉碎物用量為893.14mg，絞股藍超微粉碎物用量為334.13mg，膽固醇含量最低2.46mmol/L。在此配方下飼喂蛋雞28天，檢測雞蛋膽固醇含量，結果如表6示。實驗響應值2.48mol/L與預測響應值接近，表明所選模型可以較好地預測降低雞蛋膽固醇的中草藥復方添加劑參數。表6 最優條件下響應值的預測值和實驗值Table6 Predicted and experimental response value at optimum conditions因素水平膽固醇含量mmol/L澤瀉超微粉碎物用量決明子超微粉碎物用量絞股藍超微粉碎物用量預測響

25、應值實驗響應值695.49mg893.14mg334.13mg2.462.48±0.362.4 中草藥復方添加劑效果評估2.4.1 生產性能檢測如表7所示，實驗組與空白組相比，(實驗組的)產蛋率由53.43%提高到65.16%，提高了11.73%；日均采食量由77.57g增加到89.45g，增加了13.28%；料蛋比由2.86下降到2.14，下降了33.64%，三個指標均具有顯著性差異（p0.05）。表7 中草藥復方添加劑對蛋雞生產性能的影響Table7 Effects of the additive of Chinese herbal medicine compound on la

26、ying hens producing performance檢測項目組別產蛋率%Laying rate日均采食量（g） Average daily feed intake料蛋比Feed-egg ratio實驗組65.16±0.35a89.45±0.51b2.14±0.43b空白組53.43±0.20b77.57±0.49a 2.86±0.15a注：同列數據旁標不同小寫字母表示差異顯著，P0.05；相同或不標字母表示差異不顯著 P0.05；下同。2.4.2 雞蛋品質檢測 如表8所示，實驗組和空白組對比，（實驗組的）蛋重、蛋形指數、蛋殼

27、厚度、蛋殼相對重差異不顯著（p0.05），蛋黃顏色上升兩個色度，蛋黃相對重比對照組提高2.41%，具有顯著性差異（P0.05）。表8 中草藥復方添加劑對蛋品質的影響Table8 Effects of the additive of Chinese herbal medicine compound on egg quality組別項目實驗組空白組組別項目實驗組空白組蛋殼厚度（mm）Eggshell thickness0.41±0.070.44±0.06蛋重（g）Egg weight53.65±6.3350.44±3.88蛋形指數Egg shape inde

28、x1.32±0.321.19±0.12蛋黃顏色Yolk color12.29±0.75a9.64±0.58b蛋黃相對重（%）Yolk relative weight29.55±1.44a27.14±1.26b哈氏單位Haugh unit87.59±1.7286.07±1.55蛋殼相對重（%）Eggshell relative weight7.32±0.27b7.59±0.39a2.4.3 免疫指數的檢測 免疫器官指數是指中草藥復方添加劑對蛋雞免疫能力的作用效果，免疫器官指數=免疫器官重（g）/活

29、體重（kg）。由表9可知，中草藥復方添加劑使仔雞的各種免疫器官指數均有增加。實驗組胸腺指數、法氏囊指數和脾臟指數分別為3.16、2.79、1.99，分別比空白組提高了0.23、0.67、0.23，均具有顯著差異(P0.05)。 表9 中草藥復方添加劑對免疫器官指數的影響Table 9 Effects of the additive of Chinese herbal medicine compound on indices of immune organs in hens項目組別胸腺指數Thymus index法氏囊指數Bursa of Fabricius index脾臟指數Spleen in

30、dex實驗組3.16±0.13a2.79±0.19a1.99±0.14a空白組2.93±0.19b2.12±0.19b1.76±0.13b2.4.4 蛋黃膽固醇含量、甘油三酯含量的檢測如表10所示，實驗組與空白組相比，蛋黃膽固醇含量由8.24 mmol/L下降到2.48 mmol/L，下降了5.76 mmol/L；甘油三酯含量由14.29 mmol/L下降到8.32 mmol/L，下降了5.97 mmol/L。兩個指標均具有顯著性差異（P0.05）。表10 中草藥復方添加劑對蛋黃甘油三酯和膽固醇含量的影響Table10 Effects

31、 of the additive of Chinese herbal medicine compound on triglycerides and cholesterols concentration in egg yolk 項目組別膽固醇(mmol/L)TC甘油三酯(mmol/L)TG實驗組2.48±0.36a8.32±0.25a空白組8.24±0.67b14.29±0.57b2.4.5 血清生化指標的檢測 如表11所示，實驗組與空白組相比，膽固醇下降52.90%、甘油三酯下降55.23%、低密度脂蛋白膽固醇下降51.85%、極低密度脂蛋白膽固醇含量下

32、降32.62%，高密度脂蛋白膽固醇含量上升75.6%，均具有顯著性差異（p0.05）。表11 中草藥復方添加劑對血清生化指標的影響Table11 Effects of the additive of Chinese herbal medicine compound on serum biochemical indices項目組別膽固醇(mmol/L)TC甘油三酯(mmol/L)TG低密度脂蛋白膽固醇(mmol/L)LDL-CH高密度脂蛋白膽固醇(mmol/L)HDL-CH極低密度脂蛋白膽固醇(mmol/L)VLDL-CH實驗組2.03±0.26a6.94±1.32a0.13

33、±0.03a0.82±0.16a4.75±0.71b空白組4.31±1.16b15.50±1.46a0.27±0.02b0.20±0.03b7.05±0.66a3 討論現已有文獻報道中草藥可以提高蛋雞生產性能，通過改變飼料成分能改善雞蛋品質8，如蛋黃顏色和蛋殼厚度。朱寧等7報道以黃芪、山楂、麥芽、黨參等12味中藥組成的1%復方添加劑能提高仔雞的平均體重、平均日增重提高6.3%，料蛋比下降3.5%。本實驗使用優化后的中草藥復方添加劑連續飼喂蛋雞28天后，與空白對照組相比能顯著提高產蛋率、日均采食量、料蛋比,提高蛋黃比

34、重，加深蛋黃顏色，提高雞蛋品質。本實驗結果可能是因為中草藥特有的清香能促進雞群的進食，加快消化，增加采食量，同時中草藥可以影響雞卵子的質量和數量，改善蛋黃顏色和增加蛋黃比重，促進產蛋率的提高。胸腺為細胞免疫器官，脾臟為外周免疫器官，法氏囊是體液免疫器官。免疫器官指數能直觀反映蛋雞的免疫水平。有研究表明中草藥能在一定程度上提高機體免疫水平。Wu等9報道貫葉連翹提取物可以提高小雞體內抗體而調節免疫水平，達到治療禽流感的目的。10Hueza等人報道在肉雞日糧中加入0.75%的決明子，飼喂42天發現其可以增強巨噬細胞的活性，增加雞體內過氧化氫含量。本實驗結果表明，和空白對照組相比實驗組能夠顯著提高胸腺

35、指數、脾臟指數和法氏囊指數。蛋雞約2月齡時法氏囊最發達，以后隨著性器官發育日漸成熟而逐步萎縮。大量試驗顯示，雞體內的免疫細胞B細胞主要來源于法氏囊。本復方能提高免疫能力的原因可能是其能促進免疫器官的良好生長發育，并且延緩了免疫器官的萎縮，可以直接加強機體的體液免疫功能和器官免疫功能。高密度脂蛋白為血清蛋白之一，可輸出膽固醇促進膽固醇的代謝，所以現在作為動脈硬化預防因子而受到重視。高密度脂蛋白運載周圍組織中的膽固醇，再轉化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出。所以高密度脂蛋白是一種抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，是冠心病的保護因子，俗稱“血管清道夫”。低密度脂蛋白是一種運載膽固醇進入外周組織細胞的脂蛋白

36、顆粒，然后膽固醇可被氧化成氧化低密度脂蛋白，當低密度脂蛋白，尤其是氧化修飾的低密度脂蛋白過量時，它攜帶的膽固醇便積存在動脈壁上，久了容易引起動脈硬化。因此低密度脂蛋白被稱為“壞的膽固醇”。本實驗配制的中草藥復方添加劑能顯著降低蛋黃和血清中膽固醇和甘油三酯含量，顯著降低血清中低密度脂蛋白膽固醇的含量，升高血清中高密度脂蛋白膽固醇的含量。中醫臨床辯證一般認為高脂血癥主要是氣滯血瘀、肝腎虧虛、脾虛痰濕等證引起，在治療時辨證施治，多用補益肝腎、健脾化濕、活血化瘀、清熱通便、消食化痰藥。澤瀉具有利水、清濕熱和泄熱等功效，可用于治療小便不利、水腫脹滿、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛以及高血脂癥等病癥；決明子

37、入腎經和肝經，有消積通便、清肝益腎、逐痰化濁、降脂等功效；絞股藍歸肝脾，具有健脾祛痰、利濕化瘀、降濁等功效。現代臨床藥理研究表明澤瀉中主要成分為三萜類化合物，能抑制外源性膽固醇和甘油三酯的吸收，影響內源性膽固醇代謝，加速三酰甘油的水解或影響肝臟對其合成，同時升高高密度脂蛋白膽固醇含量，清運動脈壁上的膽固醇，促進肝臟脂質的代謝和排泄11。決明子中主要成分為蒽醌類化合物，具有降血脂的作用。研究指出其可以減少膽固醇的吸收，二來促進脂類轉運和排泄，第三可以降低膽固醇合成酶的活性或減少乙酰輔酶A的生成6。絞股藍主要成分為絞股藍皂苷，具有抗腫瘤、降血脂、延長細胞壽命的作用12。張文濤13指出澤瀉有減輕肝臟

38、脂質蓄積的作用，減小脂肪空泡，減輕細胞炎癥浸潤的作用。盧錕剛14等人報道將決明子、丹參、絞股藍配伍使用能顯著降低高脂血癥小鼠的血中膽固醇和甘油三酯，升高血清中高密度脂蛋白膽固醇。綦振峰15等人報道將山楂和決明子提取物配伍使用飼喂小鼠，能顯著降低小鼠的腎臟指數、肝臟指數、低密度脂蛋白膽固醇含量,極顯著升高高密度脂蛋白膽固醇含量。本中草藥復方添加劑降低膽固醇的作用效果與文獻報道一致，都能很好地達到預期目標。4 結論利用實驗設計軟件Design Expert 8.0，采用Box-Behnken 實驗設計，對用于降低雞蛋膽固醇含量的中草藥復方添加劑的配比進行優化，結果表明三種中草藥超微粉碎物降低雞蛋膽

39、固醇含量的效果依次為：澤瀉決明子絞股藍，決明子和絞股藍之間存在顯著的交互作用，澤瀉和決明子、澤瀉和絞股藍之間的交互作用不明顯。中草藥復方添加劑最佳配比為：澤瀉超微粉碎物用量695.49mg，決明子超微粉碎物用量893.14mg，絞股藍超微粉碎物用量334.13mg，該條件下預測雞蛋膽固醇含量為2.46mmol/L。采用該條件進行了重復試驗，得到的驗證結果2.48 mmol/L和預測值吻合較好，說明優化效果顯著，進一步證明該回歸模型是有效可靠的。評估本中草藥復方添加劑發現其可以提高產蛋率11.73%，降低料蛋比33.64%；顯著降低蛋黃膽固醇含量69.90%和甘油三酯含量41.78%；血清膽固醇

40、下降52.90%、血清甘油三酯下降55.23%、血清低密度脂蛋白膽固醇含量下降51.85%、血清極低密度脂蛋白膽固醇含量下降32.62%，血清高密度脂蛋白膽固醇含量上升75.6%；胸腺指數、法氏囊指數和脾臟指數分別提高了0.23、0.67、0.23。本中草藥復方添加劑降低膽固醇的作用較好，能很好的達到預期目標，為實際生產提理論依據。參考文獻 1 Qureshi A A, Peterson D M. The combined effects of novel tocotrienols and lovastatin on lipid metabolism in chickensJ. Atheros

41、clerosis, 2001, 156(1): 39-47. 2 Jr. Ribeiro V, Albino L F T, Rostagno H S, et al. Effects of the dietary supplementation of Bacillus subtilis levels on performance, egg quality and excreta moisture of layersJ.Animal feed science and technology, 2014, 195: 142-146. 3 袁建敏，甘冰，張天國，等. 肉用仔雞日糧中添加蛋氨酸銅、鋅和錳對糞便微量元素排放的研究J.家畜生態學報,2008(06):66-70. 4 Elkin R G. Reducing shell egg cholesterol content. II. Review of appro