1、血清糖化蛋白四氮唑藍測定法1. 實驗原理血清糖化蛋白（即：果糖胺）是一種大分子酮胺類化合物。堿性條件下可將四氮唑藍還原成紫色甲月替，其生成量與血清果糖胺濃度成正比。用比色法 在 540mm（ 530-550mm ）、以 糖 化 血 清 蛋 白 作 校 準 物 測 出 反 應 中 甲 月替 的 生 成量從而得出血清果糖胺的濃度。2. 標 本 ：2.1病人準備：無特殊。2.2 類型：血清、肝素或 EDTA處理的血漿。應使用新鮮標本。標本必須避光保 存 ！3. 標本存放：標本在 28可穩定 7天，20保存至少穩定 6個月。4. 標本運輸：常溫條件下保存運輸。5. 標本拒收標準：標本溶血、細菌污染的標

2、本。6. 實驗材料6.1試 劑南 京 波 因 特 GSP 測 定 試 劑 盒 （ 試 劑 1 × 70ml ）6.1.1試劑組成：硝基四氮唑藍、碳酸鹽、穩定劑。6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩定性與貯存：試劑在 28保存，自生產日起可穩定 12 個月。6.1.4變質指示：當試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質，不能繼續使用。6.1.5注意事項：試劑和樣品可因儀器要求不同，按比例增減；間隔時間可按儀器不同進行調整，但為減少樣本中還原物質的干擾，延遲時間不應低于300 秒。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應采取必要的預防措施使用試劑6

3、.2 校準品：使用南京波因特提供的糖化血清蛋白校準品對自動分析儀進行校準，具體參見生化檢驗校準品和質控品.SOP 文件。6.3質控品：具體參見生化檢驗校準品和質控品.SOP 文件。7. 儀器：貝克曼 AU680 生化分析8. 操作步驟8.1項目基本參數：參見 AU680 生化分析儀項目測定參數.SOP 文件8.2儀器操作步驟：參見 AU680 生化分析儀操作規程.SOP 文件9. 檢驗結果的判斷與分析：10. 質量控制：在每一批標本中都應把非定值血清水平 I 與 II 質控做為未知標本進行分析，以 2S 為質控警告限，3S 為失控限，繪制質控圖，判斷是否在控。質控規則參見室內質控操作規程.SO

4、P 文件。11. 計算方法：南京波因特提供的糖化血清蛋白校準品校準儀器后，在病人結 果 可 報 告 范 圍 內 ， 儀 器 直 接 報 告 可 靠 的 檢 測 結 果 ， 以 mmol/L報 告 。12. 參 考 值 范 圍 2 , 3 ： 1.40-2.95mmol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據好的實驗室經驗，每個實驗室應建立自己的參考值。13. 臨床意義：血清糖化蛋白是葡萄糖與血清蛋白質進行非酶促化作用而形成的一種具有酮胺結構物質，其生成量與血糖濃度有關。糖尿病人血清果糖胺含量明顯高于正常及非糖尿病人，血清果糖胺的代謝周期與血清蛋白相同，半衰期為 17 天左右，在

5、 1-3 周內發生代謝變化，因此，測定血清果糖胺可反映被側前 10-20 天內連續變化的血糖濃度的平均水平。實驗研究表明：血清果糖胺是糖尿病診斷、病情監測和治療過程中療效觀察的一項重要指標。14. 操作性能14.1線 性 范 圍 ： 0-6mmol/L 。14.2精密度：精密度的評估是根據 NCCLS推薦的標準方法，AU680批內精密度小于3%，總精密度小于3%。用于分析的質控血清和數據處理符合以上的NCCLS的規則。 測定 GSP的變異系數 <4.0% 。14.3方 法 學 比 較 ： 本 公 司 的 試 劑 盒 (y)與 某 商 品 化 試 劑 盒 (x)，同時對 20 個樣品進行

6、GSP檢測，將檢測結果作方法學比較，其統計結果如下：y=0.95x+1.05mmol/L； r=0.992 。14.4靈 敏 度 ： 本 試 劑 的 檢 測 限 為 0.2mmol/L 。14.5病 人 結 果 可 報 告 范 圍 ： 0.2-6mmol/L。15.超 出 范 圍 結 果 處 理 ： 本 法 的 檢 測 范 圍 上 限 值 為 6mmol/L。當樣品測定值超 過 上 限 時 ，應 將 樣 品 用 9g/L 氯 化 鈉 溶 液 作 1+1 稀 釋 ，重 新 測 定 ，結 果 乘 以 2 。16. 病危報警值的處理：無。17. 方法局限性17.1本 法 的 檢 測 范 圍 上 限 值 為 6mmol/L 。 當 樣 品 測 定 值 超 過 上 限 時 ， 應 將 樣品 用 9g/L 氯 化 鈉 溶 液 作 1+1稀釋，重新測定，結果乘以 2。17.2干