1、中藥注冊分類8 申報資料4對主要研究結果的總結及評價 (膽炎康片)課題名稱 膽炎康片研究單位 申報單位 聯 系 人 聯系方式 對主要研究結果的總結及評價一、工藝研究的試驗資料(一)藥材的分揀去雜質及質量驗收 處方中各有關藥味經分揀去雜質，按有關法規檢驗；輔料按中國藥典20xx年版二部有關規定檢驗；符合規定者備用。(二)配料與摻混符合規定的藥材根據生產批量大小，按處方稱量配伍，分開放置，分別摻混。 (三) 粉碎根據生產工藝需要，將需粉碎藥材土大黃、黃芩用中藥粉碎機粉碎，過80目篩，備用。經對三批中試產品粉碎工藝考查，結果表明常規粉碎方法即可符合本品生產需要。(四) 提取工藝研究提取藥材為連錢草、

2、虎耳草、小花清風藤、鳳尾草、黃柏、穿心蓮。根據各藥味所含成分的理化性質，適宜采用水提取，故采取正交試驗優化水提取工藝條件。取提取藥材適當破碎，按原處方量配伍，制備工藝正交試驗用樣品。每正交試驗樣品藥材重1200g，其中連錢草200g、虎耳草200g、小花清風藤200g、鳳尾草200g、黃柏200g、穿心蓮200g。表1、 因素水平表 L9（34）正交表頭水平因素因 素A加溶劑量（倍） B提取時間（小時） C提取次數（次） 12310 1 1 8 2 2 6 3 3 表2、正交試驗設計表試驗號因 素A加溶劑量（倍） B提取時間（小時） C提取次數（次） 12345678910 1 1 10 2

3、2 10 3 3 8 1 2 8 2 3 8 3 1 6 1 3 6 2 1 6 3 2 取每正交試驗樣品1200g，依表2設計加溶劑量、提取時間、提取次數，分別提取，放冷，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度為1.201.25(80)的清膏，減壓干燥，恒重，以干膏量中鹽酸小檗堿的總量作為評價指標。表3、正交實驗結果評價表試驗號因 素評價指標A(倍) B(小時) C(次) 干膏量（g）鹽酸小檗堿含量(mg/g)鹽酸小檗堿總量(mg)12345678910 1 1 10 2 2 10 3 3 8 1 2 8 2 3 8 3 1 6 1 3 6 2 1 6 3 2 63.8103.8107.285.

4、293.169.185.157.684.2 63.07 43.6643.4042.2741.5351.5935.9250.3438.574023.874531.914652.483601.403866.443564.873056.792899.583247.59K1K2K313208.26 10682.06 10488.3211032.71 11297.93 11380.90 9203.96 11464.94 11575.71k1k2k34402.75 3560.69 3496.113677.57 3765.983793.633067.99 3821.653858.57R1334.76260.

5、96362.46 由上述極差分析數據表明：溶劑的倍數為顯著因素，其次為提取次數，提取時間，即A>C>B，最佳提取方法為A1B3 C3，由于B2和B3 、C2和C3相差甚微，考慮到實際生產中能源問題，擬采用加水10倍量，提取二次，每次2小時。 確證實驗：取兩份確證實驗樣品，每份樣品中 連錢草200g、虎耳草200g、小花清風藤200g、鳳尾草200g、黃柏200g、穿心蓮200g，適當破碎，加水10倍量，提取二次，每次2小時。濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度為1.201.25(80)的清膏，減壓干燥，恒重，以干膏量中鹽酸小檗堿的總量作為評價指標。結果表明：加水10倍量，提取二次，每

6、次2小時的提取方法與最優方法相當，且重復性良好。（五）成型工藝條件的選定1制粒工藝選擇：根據原標準和本公司多年的生產經驗，結合常規制粒操作，擬選用浸膏和藥粉直接混合制粒的方法。結果用清膏作粘合劑，14目篩制粒能獲得適宜的顆粒，采用6080常壓干燥方法干燥，顆粒含水量控制在57%，12目篩整粒后能夠得到理想的片芯。2壓片工藝由于本品的顆粒流動性較差，外加0.5%硬脂酸鎂作助流劑，選用直徑為12mm的淺平沖頭壓片，理論片重定為0.50g。壓片，結果：成型性好，硬度適中，脆碎度0.2%，符合包衣條件。3包衣與糖衣片相比，薄膜衣片有明顯的優勢：成膜性好、衣層堅硬穩定、色澤亮麗、光潔細膩、防潮防濕、崩解

7、時限短、增重少、生產成本低、操作時間短、勞動效率高，無粉塵飛揚，有利于勞動保護等優點，特別是薄膜衣片不含糖，糖尿病患者也可使用。故膽炎康片定為薄膜衣片。高效包衣操作方法及技術參數：包衣液配制篩去素片中的細粉及殘片將素片置高效包衣機內，開啟主電機，轉速控制在1-3轉/分，開啟熱風，片芯預熱至40-45攝氏度。開啟噴液系統，調整好噴槍高度，包衣液流量，霧化壓力，在噴霧過程中片床的溫度保持在3540(此時鍋速為35轉/分)。待片面包勻一層衣后，調節鍋轉速為69轉/分，繼續操作，直至將包衣液噴完、吹干。包衣結束后，將包好的薄膜衣片置涼片室干燥。包衣材料采用xxxx藥用輔料有限公司生產的胃溶型薄膜包衣粉

8、（批準文號為x藥準字F20xxxxxx），按常規高效包衣工藝操作，可以得到理想的成品。以上八味，土大黃、黃芩粉碎成細粉，其余連錢草等六味，加10倍量水提取二次，每次2小時，合并濾液，濃縮至相對密度為1.201.25(80)的清膏，加入上述細粉，混勻，制粒，干燥，加入硬脂酸鎂，壓片，包薄膜衣，即得。 (六)三批中試生產考核工藝穩定性取處方十倍量藥材，在中試設備上試驗，考核工藝穩定性，三批數據表明，工藝穩定，具可重復性和再現性。根據中試制成品量，確定本品每處方量制成1000片。二、質量研究的試驗資料及文獻資料膽炎康膠囊收載于國家藥品監督管理局國家中成藥標準匯編（中成藥地方標準上升國家標準部分 內科

9、 肝膽分冊），膽炎康片是根據膽炎康膠囊改變劑型的中藥8類新藥（減免臨床研究），為了實施膽炎康片的質量標準研究，將成型工藝中制備的樣品（批號：xx1103）用于質量標準研究，現將質量標準起草說明報告如下：【名稱】 膽炎康片 【處方】 除輔料外，與原劑型標準一致。【制法】 除成型工藝外，與原劑型標準一致。【性狀】 依三批中試產品的實際性狀描述。【鑒別】 (1)為處方中連錢草的薄層色譜鑒別，經與連錢草對照藥材、熊果酸對照品、缺連錢草陰性對照樣品對照，斑點顯色清晰，Rf值適宜，專屬性強。予以采用。本鑒別項與原劑型標準一致。（2）為處方中黃芩的薄層色譜鑒別，經與黃芩對照藥材、黃芩苷對照品、缺黃芩陰性樣品

10、對照，在與對照藥材及對照品相應的位置上顯相同顏色的斑點，斑點顯色清晰，Rf值適宜，專屬性強。予以采用。本鑒別項與原劑型標準一致。（3）還進行了黃柏的薄層色譜鑒別，參考文獻，取本品10片，除去包衣,研細，取1g， 加甲醇10ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。同法制成對照藥材和缺黃柏陰性樣品溶液。再取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的對照品溶液。吸取上述溶液各10µl點于硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10:6:1:1）或正丁醇-醋酸-水（7:1:2）為展開劑，置氨蒸汽預飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm

11、）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜及對照品色譜相應的位置上，陰性樣品有干擾，本品中黃柏暫未找到具特異性的薄層色譜鑒別方法。（4）還進行了穿心蓮的薄層色譜鑒別，參考文獻，取本品10片，除去包衣,研細，取2g， 加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液。同法制成對照藥材和缺穿心蓮陰性樣品溶液。再取穿心蓮內酯對照品、脫水穿心蓮內酯對照品適量，加無水乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液,作為對照品溶液。吸取上述溶液各5µl點于硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-乙醇（2:1）或三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇（4:3:0.4）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光

12、燈（254nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜及對照品色譜相應的位置上，斑點不清晰，專屬性不強,本品中穿心蓮暫未找到具特異性的薄層色譜鑒別方法。【檢查】依照中國藥典20xx年版一部附錄( L)的有關規定對三批中試產品檢查，均符合藥典有關規定。 此項與原劑型標準一致。重金屬 三批中試產品重金屬均低于百萬分之五，暫不設定重金屬檢查項。砷鹽檢查 三批中試產品砷鹽均低于百萬分之二，暫不設定砷鹽檢查項。【微生物檢查】依中國藥典20xx年版一部附錄（ C）的有關規定對三批中試產品檢查，均符合藥典有關規定。此項是根據中國藥典20xx年版一部與歷版藥典的不同而增加的。【含量測定】 照高效液相色譜法(中

13、國藥典20xx年版一部附錄VI D)測定。 色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.4磷酸溶液(75:25)為流動相；檢測波長為436nm。理論板數按大黃素峰計算應不低于3000。 對照品溶液的制備 取大黃素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含20g的溶液，即得。供試品溶液的制備 取重量差異項下的本品，研細，取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加熱回流1小時，放冷，轉移至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻

14、度，搖勻，用微孔濾膜(0.45m)濾過，取續濾液，即得。測定法 分別精密吸取上述對照品溶液和供試品溶液各10l,注入液相色譜儀,測定,即得。大黃素對照品 中國藥品生物制品檢定所 756-樣品 自制 批號：儀器與試劑高效液相色譜儀 xxxx 型高壓恒流泵xxxx紫外可見波長檢測器xxxx色譜數據工作站色譜柱 依利特填料：Hypersil ODS2 5um 尺寸： 4.6×200mm柱號：E1523753批號：xxxxxx色譜甲醇 天津四友磷酸為分析純精密稱取大黃素對照品適量,加甲醇制成每1ml含510µg的溶液,作為對照品溶液。以510µg/ml的對照品溶液為母液，

15、分別配制 102µg/ml、51µg/ml、40.8µg/ml、30.6µg/ml、20.4µg/ml、10.2µg/ml的對照品溶液。分別精密吸取上述各對照品溶液10µl,注入液相色譜儀,測定,計算，即得。回歸曲線為Y(峰面積)=28.7987X (濃度)67.6584 r=0.9995 線性范圍為10.2102g/ml，標準曲線近似過圓點，采用外標一點法定量。供試品溶液制備方法的選擇：1.取重量差異項下的本品，研細，取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入三氯甲烷25ml和2.5mol/L硫酸溶液20ml，稱定重量，置

16、80水浴上加熱回流2小時，冷卻至室溫，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失重量，搖勻。分取三氯甲烷液，精密量取10ml，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，轉移至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。2.取重量差異項下的本品，研細，取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加熱回流1小時，放冷，轉移至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45m)濾過，取續濾液，即得。同一樣品按上述二種方法，每種方法制備三個供試品，分別取上述溶液各1

17、0l，注入液相色譜儀，測定，經比較兩種方法測定得的含量基本一致，第二種方法重現性好，操作簡單，故選用第二種供試品溶液制備方法。精密度 同一樣品連續進樣測定5次，相對標準偏差為 0.94%，小于3.0%。穩定性 同一樣品,制備后在30分鐘、1小時、2小時、6小時、12小時后分別測定，相對標準偏差為 3.06%，小于5.0%，表明樣品放置12小時內穩定。重現性 同一樣品，取5份，各約3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理1小時，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加熱回流1小時，放冷，轉移至25m

18、l量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(045m)濾過，取續濾液作為供試品溶液。取上述供試品溶液各10µl，注入液相色譜儀，測定。相對標準偏差為1.89%，小于5.0%。加樣回收率 取已知含量的樣品5份(約3g)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，各精密加入每1ml含510g的大黃素對照品溶液5ml，蒸干，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理1小時，放冷，再稱定重量,用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加熱回流1小時，放冷，轉移至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45m)濾過，取續濾液，即得。作為供

19、試品溶液。取上述供試品溶液各5l,注入液相色譜儀，測定,平均回收率為99.72%。樣品測定 對三批中試產品，采用原標準的含量測定方法測定，其結果如下：【含量測定】 照高效液相色譜法(中國藥典20xx年版一部附錄VI D)測定。 色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.4磷酸溶液(75:25)為流動相；檢測波長為436nm。理論板數按大黃素峰計算應不低于3000。 對照品溶液的制備 取大黃素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含20g的溶液，即得。供試品溶液的制備 取重量差異項下的本品，研細，取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處

20、理1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液10ml，加入1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加熱回流1小時，放冷，轉移至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45m)濾過，取續濾液，即得。測定法 分別精密吸取上述對照品溶液和供試品溶液各10l,注入液相色譜儀,測定,即得。三批中試樣品含量測定數據表批 號含量（g/片）xx0101xx0102xx0103259265272參考原劑型標準，暫定本品每片含土大黃以大黃素(C15H1005)計，不得少于200g。【功能與主治】苗醫：泱疴洼胗，沓斡檔孟：陡：乃興仰，乃興仰·蒙浮秋管兜。 中醫：清熱利濕，排石止痛。用于肝膽濕熱蘊結所致急慢性膽囊炎，膽管炎，膽石癥， 以及膽囊手術后綜合癥。 與原劑型標準一致 【用法與用量】 口服，一次24片，一日3次。與原劑型標準一致 【注意事項】 孕婦忌服。與原劑型標準一致 【規格】 基片每