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文檔簡介
1、運輸應激對榮昌豬生理生化指標的影響魏光河1 ,張培晏2(1. 西南大學榮昌校區動物醫學系,重慶 榮昌402460;2.四川省廣元市元壩區畜牧食品局, 四川 廣元 628021)摘要:獲取榮昌豬對運輸應激的耐受能力,以此研究針對運輸應激的保健藥品和保健措施。選擇40日齡的榮昌仔豬12頭,在最低氣溫15下運輸2個小時(100km)。從前腔靜脈采集運輸前及運輸停止后30min、運輸停止后第1d、運輸停止后第3d、運輸停止后第7d試驗組及空白對照組榮昌仔豬的血液,進行主要血液生理生化指標檢驗,同時,監測試驗組及空白對照組榮昌仔豬在運輸前及運輸停止后30min、運輸停止后第1d、運輸停止后第3d、運輸停
2、止后第7d的臨床三大生理指標(呼吸、脈搏、體溫)。采用T檢驗統計分析運輸前后差異顯著性,采用F檢驗比較運輸應激對組內各組影響的差異性。結果表明:榮昌仔豬在經過運輸后,尿素、肌酐、總膽固醇、甘油三酯、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶等大部分生理生化指標都有上升,與運輸前比較差異極顯著(p<0.01),運輸前各榮昌仔豬之間的生理生化指標無顯著差異(p>0.05),榮昌豬對運輸應激的抵抗能力較差,需要在運輸前后做好抗應激措施。關鍵詞:榮昌豬;運輸應激;生理生化指標;檢測與分析Effection of the transport stress on the blood physiobio
3、chemic and hemorheological indexes of the Rong Chang PigWei Guang-he1 Zhang Pei-yan2(1.Veterinary Medicine Department of campus Rongchang of Southwest University,Chongqing Rongchang 402460, 2. Yuan Ba district Animal Husbandry and food sstuff manage Bureau of Guang Yuan Ctiy of Si Chuan province ,Gu
4、ang Yuan Si Chuan 628021 )Abstract: exporling and learning tolerance ability of rongchang pig for transportation stress , and ressearching the health drugs and health measures for anti-transportation stress.the twelve Rong Chang Pig that arewith 40-day old have beenwere transported for two hours by
5、50 kilometers per hour below 15,about 100 kilometer. collected precaval vein blood samples of the Rong Chang Pig from test group and the control group before and half an hour ,the first day,the third day,and the seventh day after stop transportation, the main blood physiobiochemic and hemorheologica
6、l indexes of them were detected by collecting precaval vein blood samples of the Rong Chang Pig from test group and the control group before and after transportation,meanwhile,the three clinical physical signs(respiration,pulse,temperature) of the Rong Chang Pig from the test group and the control g
7、roup before transporting and half an hour,the first day,the third day and the seventh day after stop transportating. were detected and were carried out statistic analysis with .T-test and F-test. was adopted to and analyzed and compared the difference of the blood physiobiochemic and hemorheological
8、 indexes of the Rong Chang Pigbetween the blood physiobiochemic and hemorheological indexes of the Rong Chang Pig before transporting and half an hour,the first day,the third day,and the seventh day after transportation.The result showed that a number of the blood physiobiochemic and hemorheological
9、 indexes which include urea creatinine,CHOL,TG,glutamic-pyruvic,transaminase,GOT and ALP etc was higher obviously,and difference between which of befor transporting and half an hour ,the first day,the third day,and the seventh day after sotp transporting was very significant (p<0.01).moreover,dif
10、ference between the individual with the indexes before transporting was not significant(p>0.05),and which of half an hour after stop transporting also was not significant (p>0.05) . These showed that the ability of anti-transport stress of the Rong Chang Pig was weaker,and anti-transport stres
11、s measures must be taken when transporting the Rong Chang Pig. 作者簡介:魏光河(1973-),男,重慶云陽人,漢族西南大學榮昌校區動物醫學系講師(重慶榮昌,402460),碩士。主要從事現代新型抗體工程藥物的研究。作者簡介:魏光河(1973-),男,重慶云陽人,漢族西南大學榮昌校區動物醫學系講師(重慶榮昌,402460),碩士。主要從事生物制品、現代新型抗體工程藥物的研究。 Key words:Rong Chang Pig;;transport stress;;Hematological and Biochemical index
12、es;;Detection and Analyzation運輸是豬的主要應激原之一,據張林(2009年)報道的相關數據統計,運輸后仔豬發病率高達25.3%,死亡率在6.1-14.29%不等,對養豬業造成了嚴重的經濟損失。K.R.Buckham等人(2008年)研究了運輸應激對國外優良品種豬的影響,但對國內優良地方品種豬的研究報道較少。榮昌豬作為中國的地方優良品種豬之一,趙敏明、張庭科等人(2009年)報道了榮昌以其母性強、繁殖率較高、性情溫順、肉質良好而聞名的品種特性;張毅、向釗等在2004年3報道了究其根源昌豬的繁殖性能選育指標,姚瑞英、方元譯等(1998年)報道過方西環江香豬等中國地優良品
13、種豬的靜態生理生化指標;康世良在1994年從運輸應激對豬的營養及健康作過研究;但運輸對榮昌豬生理生化指標的動態影響沒見報道,本研究擬通過比較運輸前后榮昌仔豬生理生化指標的變化,探討榮昌豬對運輸應激的耐受力,為榮昌豬的養殖提供技術參考,并為建立和減弱運輸應激的保健方案和措施提供科學依據。1 試驗材料與方法1.1試驗材料試驗動物 健康的40日齡榮昌仔豬12頭,購自重慶市榮昌縣石河村某養豬戶,常規飼養管理。1.1.2主要試驗儀器和設備 Au640型全自動生化分析儀,為日本奧林巴斯產品; MINDRAY BC-1800全自動血液細胞分析儀,為深圳邁瑞公司產品;5mL一次性注射器、獸用體溫計、聽診器;肝
14、素抗凝管、枸櫞酸鈉抗凝管等;豬籠、長安貨車等。1.1.3 主要試劑 肝素,3.8%的枸櫞酸鈉;谷丙轉氨酶及谷草轉氨酶測定試劑盒,為上海藍怡科技有限公司產品;甘油三酯等檢測試劑,均為四川邁克生物科技股份有限公司產品。1.2方法試驗分組 將12頭試驗用榮昌仔豬隨機編號為1-12號,其中1-10號為第I組,即試驗組;11-12號為第II組,即空白對照組。試驗組于室外溫度15左右的條件下,將10頭試驗用榮昌仔豬裝入豬籠,往返運輸合計2h約100km的路程,途中不給任何飲水和食物,并于運輸前、運輸停止后30min、運輸后1d、運輸后3d、運輸后7d采集血樣;空白對照組飼喂于圈舍,同法于試驗組開始運輸前、
15、運輸后采集血樣及測定其他生理指標,用于對照試驗。1.2.2血液樣本的采集及處理 準備好抗凝管、注射器等,于試驗前對處于空腹狀態的12頭試驗用榮昌仔豬按5mL/頭前腔靜脈采血。其中,3mL注入抗凝管(肝素)混勻用于檢驗血液生化指標,2mL注入抗凝管(枸櫞酸鈉)混勻用于檢驗血液生理指標,編號,靜置,備送檢。同法采集運輸停止后30min、運輸停止后第1d、運輸停止后第3d及運輸停止后第7d試驗仔豬的血樣,編號,送檢。1.2.3血液生化、生理指標的檢測 將由肝素處理的各血液樣品置于Au640全自動血液生化分析儀,按其操作添加各種檢測試劑,檢測葡萄糖、尿素等血液生化指標的變化,記錄試驗檢測結果。由枸椽酸
16、鈉處理的各血液樣品送BC-1800全自動血液細胞分析儀,檢測白細胞、RBC分布寬度變異系數等血液生理指標的變化,記錄試驗檢測結果。用T 檢驗對運輸前后的各血液生理生化指標做方差分析,比較運輸前后的差異顯著性。1.2.4三大生理指標的檢測 對所有12頭試驗用榮昌仔豬于運輸前、運輸停止后30min、運輸停止后運輸后第1d、運輸停止后運輸后3d、運輸停止后運輸后第7d監測三大生理指標即體溫、呼吸和脈搏。其中,運輸停止后的第1、3、7d均在空腹狀態時測量三大生理指標。測量體溫采取肛門測定,取其重復三次測定結果的平均值。通過觀察豬腹部起伏測定呼吸次數,重復三次,取其平均值。脈搏次數采取聽診器左側胸部聽診
17、,重復三次取其平均值。1.2.5運輸應激對榮昌豬主要血液生化指標影響的動態變化 根據測定的試驗組及空白對照組各血液樣品生化指標結果,以每個生化指標為基礎,計算試驗組(10個平行樣本)和空白對照組(2個平行樣本)每個生化指標的平均值作為本次試驗的測量值,并以此均值作縱坐標,時間作橫坐標,作2h約100km的運輸對榮昌豬各血液生化指標影響的動態變化曲線,觀察運輸應激對榮昌豬血液生化指標影響的動態變化過程。1.2.6運輸應激對榮昌豬主要血液生理指標影響的動態變化 參照本文2.6.1項的方法,作運輸2h約100km的運輸應激對榮昌豬各血液生理指標影響的變化曲線,觀察運輸應激對榮昌豬血液生化指標影響的動
18、態變化過程。1.2.7運輸應激對榮昌豬三大臨床生理指標影響的動態變化 根據測定的三大臨床生理指標結果為基礎,項的方法作運輸2h后榮昌豬在7d內的三大生理指標的變化曲線圖,觀察運輸應激對榮昌豬的影響程度。1.2.8運輸應激對榮昌豬個體間影響的差異性分析 以測定的10頭試驗豬的各血液生理、生化指標為基礎,采用F檢驗分析各試驗豬在組內各個體間的血液生理、生化指標在運輸前、運輸停止后30min、運輸停止后第1d、運輸停止后第3d、運輸停止后第7d變化的差異性。同時,以運輸停止后30min的各血液生理、生化指標為基礎,與空白對照組相應指標作參照,分析血液生化與生理指標對運輸應激試驗組血n,共采集激的為重
19、量變化曲線圖,選擇生化指標中變化明顯的333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333333的差異性。試驗數據用Microsoft Excel 2010統計處理軟件進行方差分析和F值檢驗其差異顯著性,差異顯著標準:差異顯著(P<0.05),差異極顯著(p<0.01)。2結果2.1血液樣本數 按試驗設計,通過采集在運輸前、運輸后30min、運輸停止后第1d(表中簡稱運輸后1d,下同)、運輸停止后第3d、運輸停止后第7d的10頭試驗組仔豬的前腔靜脈血
20、液,共采集50份試驗組的待檢血液樣品;同法采集2頭空白對照組仔豬的前腔靜脈血液,共采集10份空白對照組待檢血液樣品。2.2運輸前后榮昌豬生化指標的變化及分析 榮昌豬在運輸前后的血液生化指標變化見表1。表中值為測得指標的均值加減標準差,*表示與運輸前比較差異顯著(P<0.05),*表示與運輸前比較差異極顯著(p<0.01),沒有標注則表示差異不顯著。表1運輸前后血液生化指標的檢測及分析(±S)Table 1 detection and analyzation of the blood biochemical sign of the Rong Chang Pig for th
21、e transport stress檢測項目Test Items運輸前beforeTransportation運輸后30min30 minutes after transportation運輸后1dThe first day after transportation運輸后3dOn the third day after transportation運輸后7d7th day after transportation葡萄糖dextrose6.05±0.176.09±0.185.30±0.24*5.08±0.28*6.25±0.34尿素urea4.0
22、4±0.134.53±0.25*2.15±0.12*3.70±0.23*2.63±0.25*肌酐Cr30.36±0.7442.62±0.97*40.90±1.13*45.59±1.59*29.00±0.67*總膽固醇TC2.14±0.082.53±0.16*2.11±0.111.58±0.17*1.87±0.08*甘油三酯TG0.78±0.030.89±0.06*0.54±0.10*0.85±0.05*0.
23、69±0.02*高密脂蛋白HDLP0.69±0.030.77±0.08*0.78±0.09*0.76±0.06*0.67±0.04低密脂蛋白LDLP1.40±0.041.29±0.10*1.11±0.10*0.83±0.08*0.80±0.04*肌酸激酶CK594.00±5.83895.20±32.28*352.40±8.28*676.20±26.98*511.20±10.74*直接膽紅素DB0.84±0.060.64
24、7;0.06*0.30±0.04*0.48±0.09*0.56±0.09*間接膽紅素IB2.00±0.091.11±0.21*0.14±0.03*0.40±0.06*1.48±0.07*谷丙轉氨酶GPT49.20±0.6631.08±1.37*28.20±0.94*28.60±1.71*45.80±1.87*谷草轉氨酶GOT49.29±0.9773.40±1.50*60.02±1.10*53.40±1.51*50.80
25、7;2.56堿性磷酸酶ALP120.40±2.28151.00±4.02*203.80±3.82*264.40±4.17*248.60±3.86*谷氨酰胺基轉移酶GBT92.00±3.8970.40±5.40*96.00±2.00*87.20±3.39*90.60±5.15總蛋白TP54.12±1.6760.64±1.40*49.28±1.99*51.64±0.99*53.54±1.60白蛋白ALB29.10±1.3428.32
26、7;0.8027.92±1.6628.32±0.9529.36±1.11球蛋白GLB25.02±0.6032.32±0.99*21.36±1.66*23.32±0.56*24.18±0.88*血清鉀Serum potassium ion 6.53±0.234.63±0.18*6.28±0.346.28±0.12*5.73±0.34*血清鈉Serum sodium ions 135.20±1.90136.40±2.88142.60±3.6
27、7*146.40±4.53*141.20±3.08*血清氯Serum chloride ions 97.20±1.8198.00±3.0693.40±2.75*90.20±3.65*101.40±2.46*血清鈣Serum calcium ions1.60±0.081.34±0.10*1.86±0.08*1.89±0.12*1.74±0.09*血清磷Serum phosphorus ion2.30±0.092.05±0.19*1.97±0.27*
28、2.09±0.13*2.44±0.18*血清鎂Serum mg ions 1.28±0.080.61±0.07*0.70±0.07*0.79±0.07*0.89±0.06*淀粉酶amylase 1052.80±56.091126.20±41.12*1186.20±88.13*1272.80±54.68*1417.60±44.72*注:*:表示與運輸前相比P<0.01,差異極顯著;* :P<0.05,差異顯著;:算術平均數;:標準差。Notes: Notes: *
29、mean P<0.01,and whow that Compared with the index before transportation is extremely significant difference , * meanP<0.05,and show that is significant difference; stand for Arithmetic average; stand for standard deviation(SD). 從表1可知:尿素、肌酐、總膽固醇、甘油三酯、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶、球蛋白、血清鉀、血清鈣、血清磷、血清鎂、淀粉酶在運輸
30、停止時與運輸前比較差異都極顯著;葡萄糖、白蛋白、血清鈉、血清氯在運輸停止時與運輸前比較差異不顯;葡萄糖、尿素、肌酐、總膽固醇、肌酸激酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶、球蛋白、淀粉酶在運輸停止時與運輸前比較時都有不同程度升高后逐漸恢復到運輸前水平;低密脂蛋白、直接膽紅素、間接膽紅素、谷丙轉氨酶、谷氨酰胺基轉移酶、血清鉀、血清鈣、血清鎂、血清磷在運輸停止時與運輸前比較都有不同程度降低后逐漸恢復到運輸前水平。從表1也可知,從監測的運輸停止后30min內到運輸停止后第7d的榮昌豬血液生化各指標的動態變化看出,血液中葡萄糖在運輸停止后第1d到第3d內降至正常值以下,即5.0mmol/L,運輸停止后第7d基本恢
31、復至正常水平;谷草轉氨酶于運輸后30min內上升明顯,達73.40 mmol/L,運輸停止后第3d開始下降,在運輸停止后第7d時恢復到運輸前水平;肌酸激酶于運輸停止時(即運輸后30min內)急劇上升,運輸停止后第1d急劇下降,并于運輸停止后第7d表現接近對照組的水平;血清鉀、鈉、鈣離子水平于運輸后30min運輸停止時(即運輸停止時)運輸后30min)降低,運輸停止后第1d升高,運輸停止后第7d接近正常水平。2.3運輸前后榮昌豬血液生理指標的變化及分析 運輸前后榮昌豬血液生理指標的變化結果見表2。表中值為測得指標的均值加減標準差,*表示與運輸前比較差異顯著(P<0.05),*表示與運輸前比
32、較差異極顯著(p<0.01),沒有標注則表示差異不顯著。表2 運輸前后血液生理指標的檢測及分析(±S)Table 2 change and analyzation of the blood physical signs of the Rong Chang Pig for the transport stress檢測項目Test Items運輸前beforeTransportation運輸后30min30 minutes after transportation運輸后1dThe first day after transportation運輸后3dthird day after
33、transportation運輸后7d7th day after transportation白細胞WBC15.38±0.829.08±0.59*21.28±0.96*21.06±0.72*24.58±1.72*淋巴細胞絕對值LYM8.90±0.745.54±0.33*3.52±0.23*9.10±0.409.12±0.67中性粒細胞絕對值NEUT14.15±0.3511.00±0.79*10.42±0.66*10.82±0.82*12.19±1
34、.06*中間細胞絕對值MC3.13±0.151.48±0.24*2.98±0.271.64±0.14*2.96±0.50紅細胞壓積HCT33.53±0.6030.80±1.22*33.20±1.9232.29±1.11*32.86±1.32平均紅細胞血紅蛋白MCH19.25±0.6317.74±0.54*17.82±0.96*17.64±1.10*17.49±0.79*紅細胞平均壓積RBC average deposited 55.79±
35、;1.1752.36±1.33*53.26±1.67*52.92±1.39*53.43±1.25*血小板壓積PCT0.23±0.280.10±0.020.34±0.060.09±0.040.22±0.09血小板platelet 306.42±14.51120.40±8.74*234.60±14.85*123.80±3.89*291.20±40.06RBC分布寬度標準差Red blood cell distribution width standard de
36、viation 34.83±1.1634.24±0.8134.34±1.4934.50±0.7934.64±0.84紅細胞RBC5.23±0.396.25±0.68*6.44±0.37*6.20±0.12*6.16±0.33*淋巴細胞百分比LYMP34.17±1.4631.74±0.74*40.86±1.33*43.72±1.82*38.43±4.39*中性粒細胞百分比NEU58.72±1.7263.62±2.00*46.64
37、±1.03*47.82±1.90*52.64±3.99*中間細胞百分比Mid cells percentage9.57±0.406.58±0.52*11.60±0.51*8.26±0.56*10.38±0.54*血紅蛋白濃度HCB121.20±4.46104.40±4.45*119.00±4.33111.60±3.34*124.80±10.24平均RBC血紅蛋白濃度MCHC351.20±15.47342.40±5.20342.00±14
38、.10*345.20±6.75346.40±17.59平均血小板體積MPV7.76±0.437.86±0.327.36±0.267.56±0.377.74±0.65血小板分布寬度PDW15.05±0.2614.72±0.5114.64±0.41*14.40±0.48*14.18±0.85*RBC分布寬度變異系數RBC Distribution width coefficient of variation 17.57±1.4819.70±0.94*19.04
39、±0.85*18.72±0.71*18.93±0.92*注:*表示與運輸前相比P<0.01差異極顯著;* P<0.05差異顯著;算術平均數;標準差。Notes: * mean P<0.01,and whow that Compared with the index before transportation is extremely significant difference , * meanP<0.05,and show that is significant difference; stand for Arithmetic avera
40、ge; stand for standard deviation(SD). 從表2可知:白細胞、淋巴細胞絕對值、中性粒細胞絕對值、紅細胞壓積、平均紅細胞血紅蛋白、血小板壓積、血小板、紅細胞、淋巴細胞百分比、中性粒細胞百分比、中間細胞百分比、血紅蛋白濃度、RBC分布寬度變異系數在運輸停止時與運輸前比較差異都極顯著;血小板壓積、RBC分布寬度標準差、平均RBC血紅蛋白濃度、平均血小板體積、血小板分布寬度在運輸停止時與運輸前比較差異不顯著;紅細胞、中性粒細胞百分比、平均血小板體積、RBC分布寬度變異系數這四項血液生理指標在運輸停止時與運輸前比較都有不同程度的升高,其它的血液生理指標在運輸停止時都呈現
41、下降。從表2的動態監測可知,白細胞含量于運輸后30min運輸停止時(即運輸停止時運輸后30min)急劇下降,運輸停止后第1d、3d、7d處于高水平;紅細胞于運輸停止時到運輸停止后的7d之內均處于高水平。2.4運輸前后榮昌豬臨床三大生理指標的變化及分析 榮昌豬在運輸前后三大臨床生理指標的具體結果見表3。表中為測得指標的均值加減標準差,*表示與運輸前比較差異顯著(0.01<P<0.05),*表示與運輸前比較差異極顯著(p<0.01),沒有標注則表示差異不顯著。表3 臨床三大生理指標檢測結果(±S)Table 3 change of three clinical phys
42、ical signs of The Rong Chang Pig for the transport stress 項目名稱Test Items運輸前beforeTransportation運輸后30min30 minutes after transportation運輸后1dThe first day after transportation運輸后3dOn the third day after transportation運輸后7d7th day after transportation體溫()(BT)39.20±0.4539.30±0.3839.46±0.2
43、939.52±0.3839.22±0.26脈搏(次/M)Sphygmus104.20±2.59115.80±4.55*131.00±2.12*115.60±5.98*112.00±7.21呼吸(次/M)RR30.60±1.6727.60±1.52*29.20±1.48*26.40±1.34*26.8±1.79*注:*表示與運輸前相比P<0.01差異極顯著;* P<0.05差異顯著;算術平均數;標準差。Notes: * mean P<0.01,and whow
44、 that Compared with the index before transportation is extremely significant difference , * meanP<0.05,and show that is significant difference; stand for Arithmetic average; stand for standard deviation(SD).從表3可知,在整個試驗過程中體溫變化不大,運輸前后差異不顯著;脈搏在運輸停止時與運輸前比較差異極顯著,運輸脈搏次數明顯增加;呼吸在運輸停止時與運輸前比較差異顯著,呼吸次數減少。從表
45、3的動態監測可知,脈搏于運輸后加快,運輸停止后第1d達最高值,即131次,運輸停止后第7d還處于正常水平之上;呼吸頻率于運輸后30min內停止時降低,運輸停止后第1d接近正常值后,運輸停止后第2d起持續處于26次左右的較低水平26次左右。2.5運輸應激對榮昌豬個體間影響的差異性分析多重比較表明,運輸前的10頭試驗用榮昌仔豬與空白組的2頭榮昌仔豬各血液生理生化指標及臨床指標在個體間差異不顯著(P0.05),運輸后30min各生理生化指標在試驗豬及空白對照組間的差異顯著(0.01P0.05),部分指標在試驗豬組內的個體間差異極顯著(P0.01)。3 分析與討論 3.1 動物血液生化指標作為衡量其機
46、體的健康指針,根據環境和飼養等因素的變化一直處于動態平衡,以適應周圍環境得以生存。作為器官機能正常與否的信號,各血液生化指標的變化程度必將表明動物某個器官是否發生了器質性的病變或損傷。本文對榮昌豬在運輸前后重要的幾個血液生化指標進行了動態變化監測。從監測運輸2h停止后7d內的動態變化曲線可知,葡萄糖、肌酐、谷草轉氨酶及三種主要血清離子都在運輸前后波動很大,統計分析差異極顯著(P0.01)。但在運輸停止后的第7d基本恢復到和對照組一致的水平。谷草轉氨酶主要存在于肝細胞線粒體內,當肝臟發生嚴重壞死或破壞時,將引起谷草轉氨酶的升高,運輸后谷草轉氨酶濃度值的升高說明運輸應激對榮昌豬肝臟功能影響較大。鉀離子是細胞內的主要陽離子,體內98%的鉀離子存在于細胞內。心肌和神經都需要有相對恒定的鉀離子濃度來維持正常的應激性。朱道立(1994年)報道動物應激時血清中鈉離子變化不明顯,高得儀、韓博(1996年)報道要減少。本試驗結果表明,運輸停止時血清鉀離子減少,停止運輸后第1d血清鉀離子回升,應該是運輸時的應激及氣溫等緊密相關。本次試驗中的其它幾種血清離子鈣、磷、鎂等在運輸前后的差異都極顯著。3.2 本研究監測榮昌豬在運輸停止后連續7d內的血液生理指標的動態變化表明,除白細胞于運輸
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