1、移植免疫及其免疫檢測鄭州大學檢驗醫學系第二十六章Transplantation ImmunologyTransplantation Immunology.n移植transplantation將身體的某一部分如細胞、組織或器官，經過手術或其他途徑移到同一個體或另一個體的特定部位，并使其繼續存活的方法，稱移植。 n被移植的部分稱為移植物graft，transplant ，獻出移植物的個體稱供者donor；接受移植物的個體稱受者recipient或宿主host。n不同個體間進展組織或器官移植時，供者與受者雙方相互接受兼容的程度稱為組織相容性histocompatibility。 .移植根據移植物來源

2、不同分類.移植根據移植部位不同分類n原位移植：即移植物植入到原來的解剖部位，移植前需將受者原來的器官切除，如原位心臟移植、原位肝移植；n異位移植：即移植物植入到另一個解剖位置，普通情況下，不用切除受者原來器官，如腎移植、胰腺移植普通是異位移植，原位不好固定；n旁原位移植：即將移植物植入到貼近受者同名器官的位置，不切除原來器官，如胰腺移植到緊貼受者胰腺的旁原位胰腺移植。.移植根據移植物種類不同分類n器官移植：將一個器官整體或部分從一個個體轉移到另一個體的過程，肝移植、腎移植、心臟移植、肺移植。n組織移植：將自體組織或人工資料等移植到身體的某一部位，如皮膚移植、骨及軟骨移植、真皮及脂肪移植、黏膜移

3、植、筋膜移植、肌移植、神經移植、復合組織移植、生物資料填入以及組織工程化組織移植等。n細胞移植：干細胞具有自我更新、多向分化與重建長期造血的潛能及損傷后自我修復的才干。.其他移植類型n“多米諾骨牌式移植：例如病人A需求移植肺臟而心臟安康，病人B需求移植心臟，這時出現捐贈者C可以同時捐贈心臟和肺臟，由于心肺結合移植勝利率更高，所以可以思索將C的心臟肺臟都移植給A，同時將A的心臟移植給B。n劈離式移植：(split liver transplantation, SLT)是基于肝臟是功能性分段器官的實際，將完好的供肝分割成2個或2個以上的解剖功能單位分別移植給不同受者，到達“一肝兩受或“一肝多受，是

4、拓展供肝池和緩解供肝短缺的重要方法之一。.n排斥反響排斥反響rejectionrejection由于供受者間組織不相由于供受者間組織不相容，移植物與受者免疫系統相互作用引起免容，移植物與受者免疫系統相互作用引起免疫應對，導致移植物或受者組織損傷反響，疫應對，導致移植物或受者組織損傷反響，反之，供受者遺傳物質愈一樣，即組織相容反之，供受者遺傳物質愈一樣，即組織相容性愈高，排斥反響愈弱，長期存活率就愈高。性愈高，排斥反響愈弱，長期存活率就愈高。nHVGR- host versus garaft rejectionHVGR- host versus garaft rejection 宿主抗移植物反響

5、宿主抗移植物反響nGVHR- garaft versus host rejectionGVHR- garaft versus host rejection 移植物抗宿主反響移植物抗宿主反響.第一節 器官移植與移植免疫特點n移植物能否長期存活取決于n移植器官在移植過程中活力的堅持n手術時的血管吻合和血液循環重建質量n移植排斥反響的控制.一、器官和組織移植的普通規律n移植器官或組織的抗原性異物屬性n排斥移植物的記憶特性n負向免疫調理的必要性：免疫抑制劑運用或免疫耐受誘導非常必要.二、HLA是誘導排斥反響最強的靶抗原nI、II類分子，尤其HLA-DR位點的抗原分子，首要抗原n保守估計HLA至少存在1

6、300個不同的單體型，相應地約有17107個基因型，這就是除同卵雙生子以外幾乎無HLA一樣者的遺傳根底，從而HLA可視作個體的“身份證。n其次，HLA-A、B、DQ、DPnHLA-C與排斥反響無關.三、受體對HLA的識別與效應機制n受體對HLA的識別：n直接識別：受體T細胞對移植物外表完好的同種異型HLA分子的識別，參與劇烈的急性排斥反響；nCD4+ Th細胞間接識別，在急性期、中期和晚期、慢性排斥反響中發揚作用。n受體對移植物的排斥效應：nCD4+ T細胞的活化和巨噬細胞的發動，介導遲發性超敏反響，導致免疫損傷；nCD8+ T細胞的直接殺傷作用；nADCC或CDC呵斥急性或超急性免疫損傷；n

7、抗原/抗體復合物，激活補體損傷血管；n殘留于移植物的過客細胞介導GVHR。.第二節 HLA配型與運用分析n供、受體之間的HLA同源性是移植物長期存活的關鍵。nHLA型別的斷定具有多樣性、復雜性.HLA的配型方法n1.血清學分型法n2.細胞學分型法n3.分子生物學分型法.1.血清學方法n運用知的抗HLA特異性規范分型血清與待測淋巴細胞混合，借助補體的生物學作用，介導細胞裂解的細胞毒實驗。可檢測的抗原稱SDserologically defined antigen抗原，包括HLA-A、B、C、DR、DQ。n該方法簡單、快速、易操作；缺陷是誤差率較高。.2.細胞學分型法n是以混合淋巴細胞培育MLC或

8、稱混合淋巴細胞反響MLR為根本技術，所測定的抗原稱為LD抗原(lymphocyte defined antigen)。包括HLA-D，DPn雙向MLCn單向MLC.3.分子生物學分型法nRFLP與PCR- RFLP分型法：檢測HLA多態性方法nPCR-SSO分型法：序列特異性寡核苷酸-聚合酶鏈式反響，運用廣泛，能鑒定一切知序列的HLA-DR，DQ，DP等位基因；nPCR-SSP分型法：序列特異引物引導的PCR反響，HLA-A，B，DRB1nPCR-SSCP分型法：單鏈構象特異性-PCRnSBT分型法：基于序列的HLA分型法.HLA分型方法的運用nHLA配型nHLA交叉配型與預存抗體的檢測n群體

9、反響性抗體panel reactive antibodies, PRA是指群體反響性抗HLA-IgG抗體，是各種組織器官移植術前挑選致敏受者的重要目的，與移植排斥反響和存活率親密相關。假設病人在曾經的輸血或者器官移植中接觸過他人HLA，那么會產生較強的抗性，不利于器官移植配型。PRA10%為陰性；1050%低致敏；PRA50%為高致敏，PRA越強，獲得適宜供體或移植勝利的概率越低。.第三節 常見的組織或器官移植n腎移植n肝臟移植n心臟移植和心肺結合移植n角膜移植n皮膚移植n骨髓與其他來源的干細胞移植：骨髓、外周血、臍血干細胞.第四節 排斥反響的種類及發活力制n超排斥反響n急性排斥反響n慢性排斥

10、反響n移植物抗宿主反響.1.超急性排斥反響hyperacute rejection n大多發生于血管吻合后數分鐘至術后24小時內。n移植物HLA或ABO血型抗原與受者血清中預存抗體結合，激活補體，導致血小板聚集，吸引中性粒細胞聚集，并使凝血系統激活，最終導致嚴重的部分缺血及移植物壞死。也可由微生物感染引起。n目前臨床上以ABO血型鑒定、ABO血型抗體效價測定、供受者ABO交叉配合和供受者補體依賴的淋巴細胞毒交叉實驗作為預測實驗，要求ABO血型配合，交叉配合實驗陰性，以防止超急性排斥反響的發生。.2.急性排斥反響 acute rejectionn為同種移植中最常見的一種排斥反響類型。多發生于術后

11、數天至數月內。其發病機理中主要為細胞免疫，受者致敏產生大量細胞毒性T細胞可直接殺傷靶細胞，也可經過產生的細胞因子損傷組織。 n急性體液性排斥反響：內皮細胞外表HLA分子的抗體介導，導致移植物組織或器官的血管炎。n急性細胞性排斥反響：移植組織或器官本質性損傷，伴有淋巴細胞和巨噬細胞浸潤。與CD4+Th1、CD8+CTL、ADCC作用相關。.3.慢性排斥反響 chronic rejectionn術后數月至1年后發生的緩慢、進展性、不可逆，并最終導致移植物功能喪失的損害方式。正常組織構造的喪失和纖維化是其病理特點。 n引起慢性排斥反響的要素n1CD4+Th1細胞、巨噬細胞介導的遲發性超敏反響n2B細

12、胞產生的抗體活化補體或經過ADCC破壞血管內皮細胞n3急性排斥反響反復發作所致移植物退行性變n4非免疫相關要素：部分缺血，微生物感染等.4.移植物抗宿主反響n移植物中淋巴細胞主要是T細胞識別宿主抗原而致敏、增殖分化，直接或間接攻擊受者靶組織而發生的一種排斥反響，稱為移植物抗宿主反響graft versus host reaction，GVHR，嚴重時稱移植物抗宿主病graft versus host disease，GVHD。n GVHR發生前提：供受者HLA不相容；移植物中含有足夠數量的免疫細胞；受者免疫功能低下。.第五節 排斥反響的免疫監測n體液免疫與細胞免疫程度檢測的意義n尿微量蛋白檢測

13、的臨床意義n急性時相反響物質檢測的臨床意義.一、體液免疫與細胞免疫程度檢測n1.體液免疫：特異性抗體程度檢測，補體水檢測n2.細胞免疫：外周血T細胞及其亞群檢測；NK細胞活性測定；血清細胞因子測定；粘附分子及其配體測定.二、尿微量蛋白檢測的臨床意義n血漿蛋白：Alb，IgG，IgA，輕鏈，b2M，C3，a1-微球蛋白、TRF，Hb，Mbn非血漿蛋白：SIgA，Tamm-Horsfall蛋白，GBM抗體n方法：免疫比濁，ELISA，RIA、毛細管電泳.三、急性時相反響物質檢測nCRPnIL-1，IL-6，TNF-a.第六節 常用的免疫抑制藥物及濃度監測n免疫抑制劑運用n對移植抗原特異性免疫耐受的誘導n免疫抑制劑體內濃度監測.一、免疫抑制劑運用n化學性抑制劑n生物性抑制劑n中草藥.1.化學性抑制劑n環孢霉素CsAn糖皮質醇激素n硫唑嘌呤n環磷酰胺nFK-506他克莫斯n霉酚酸酯MMF.2.生物性抑制劑n抗淋巴細胞球蛋白n細胞性單克隆抗體n某些交融