1、香椿葉中總黃酮的提取方法及藥理作用研究進展李寶霞 董雙濤 冀小君 蔡翠芳 山西生物應用職業技術學院 030031【摘要】本文對香椿葉中總黃酮的提取方法及香椿葉的藥理作用研究進展做了綜述，以備相關研究者參考。【關鍵詞】香椿，總黃酮，藥理作用香椿（Toon sinensis Roem）為楝科香椿屬落葉喬木，又名椿、椿芽、椿甜樹、椿陽樹等1。香椿因其濃郁的香氣，柔嫩的質地和獨特的口感，深受人們的喜愛，是我國傳統的調味蔬菜，同時又是一味多用的良藥。本草綱目記載：椿葉、椿皮、椿根性溫味微苦，無毒，均可入藥。1 香椿葉中總黃酮的提取方法 現有文獻報道的關于香椿葉中總黃酮的提取方法主要有以下幾種：1.1超臨

2、界 CO2提取在此方法下，最佳提取工藝：稱取 50g原料，設定萃取壓力 30MPa，萃取溫度 45，分離室溫度 35、壓力7Mpa；分離室溫度 35、壓力與儲罐平衡；萃取時間2.5h；夾帶劑用量為3mL/g原料：CO2流量 35L/h，提取 5次,前 2次用無水乙醇、后 3次用 85%乙醇做夾帶劑，提取物平均得率0. 5%2。1.2微波輔助提取 在此方法下，最佳提取工藝：乙醇濃度50%，料液比1:40(g/mL)，微波作用時間9min，微波功率500w，總黃酮得率4. 285%3。1.3超聲波輔助提取在此方法下，最佳提取工藝：乙醇溶液濃度40%、乙醇用量40 mL1g粗粉、超聲電功率150 W

3、、作用時間40 min、超聲頻率20 kHz，在這個條件下試驗，總黃酮提取率為98. 24%4。1.4酶法輔助提取在此方法下，最佳提取工藝：酶濃度0.20mg/mL，酶解溫度45，酶解pH 5.0，酶解時間120min，浸提溫度90，浸提時間120min，料液比140。總黃酮得率可達2.00%5。1.5半仿生法提取在此方法下，最佳提取工藝：稱取香椿葉粉25g，分別以pH=2的鹽酸溶液，pH=7.5、pH=8.5的氯化氨-氨水的緩沖溶液作為提取液，料液比 112(g/mL)，在 80條件下，每次提取1h，共提取3次。在此條件下, 黃酮提取量為10.3417mg/g香椿葉 6-7。1.6常規溶劑提

4、取1.6.1溶劑回流法提取 在此方法下，最佳提取工藝：料液比19、溫度70、提取時間90min、乙醇濃度70%、提取4次。香椿葉總黃酮提取量為20.154 5mg/g8。1.6.2乙醇浸提法 在此方法下，最佳提取工藝：乙醇濃度70%、料液比150、浸提溫度70、浸提時間2. 0 h，在此提取工藝條件下香椿葉總黃酮的提取率可達5.84%9。1.6.3堿提酸沉法在此方法下，最佳提取工藝：準確稱取一定重量的樣品，加入6倍樣重的蒸餾水，煮沸。在攪拌條件下，緩慢加入石灰乳至pH 89。在此條件下，微沸 2030 min , 趁熱過濾。濾渣再加入 6倍量的水，同上操作 1 次，合并濾液。在 6070 下，

5、用鹽酸調節 pH至5.0 攪勻，靜置24 h, 抽濾。沉淀物水洗至中性 , 60恒溫下干燥得粗提物。1.7不同提取方法提取效率的比較黃酮提取率大小順序為：微波法>酶法>超聲波法>常規溶劑回流法>超臨界 CO2提取>半仿生提取法。由于微波提取時伴有攪拌，可以使試樣與試劑的接觸界面不斷快速更新，有助于提高提取效率，同時微波技術具有即時深層加熱作用，極大地縮短了提取時間，特別有利于用連續微波萃取線作連續式生產10 。在常規溶劑提取方法中總黃酮的提取率：乙醇回流法>乙醇浸提法>堿提酸沉法。相比之下，乙醇回流法操作簡單，溶劑易回收，且工業酒精價格便宜，是一種可行

6、的方法11。2香椿葉的藥理作用2.1抗菌作用陳元坤12等研究表明：香椿皮水煎液及乙醇處理后的水煎液對大腸桿菌C83902、沙門氏菌C500、葡萄球菌CAU0183 的最小抑菌濃度為0.125 g/mL，對大腸桿菌K88分離株的最小抑菌濃度為0.25 g/mL；朱育鳳等13的研究表明，香椿葉水、醇提取物對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌有抑殺作用。2.2抗炎作用阮志鵬14等研究認為，香椿葉水提物抗炎作用機制：低、高劑量香椿葉水提物可降低腫脹足爪組織中NO及PGE2 （血清中前列腺素 E2）含量；低劑量香椿葉水提物可降低血清中NO含量。香椿葉水提物可能通過影響炎癥介質釋放和減少NO的生成而起到抑

7、制角叉菜膠性大鼠足腫脹作用。2.3抗癌作用陳玉麗15等研究香椿葉不同提取部位的體外抗腫瘤作用，香椿葉提取物的各萃取部位在體外對SGC-7901（人胃腺癌細胞）和K562（白血病細胞）有明顯的抑制作用，乙酸乙酯部位的半數抑制濃度分別為168.47g /mL 和102.53g /mL。結果表明：香椿葉提取物的各萃取部位能抑制人胃腺癌細胞SGC-7901和白血病細胞K562的增殖，有較強的體外抗腫瘤活性。2.4對體外蛋白質非酶糖基化的抑制作用尋找有效的非酶糖基化抑制劑，以解決糖尿病慢性并發癥的發生和發展，是研究者的一個重要課題。陳紹紅16等通過建立體外蛋白質非酶糖基化模型, 研究了在體外模型中香椿葉

8、醇提物對蛋白質非酶糖基化具有抑制作用。2.5體外抗氧化作用香椿葉中70 %乙醇提取物在菜油中的抗氧化性較強，與檸檬酸的協同效果最好，其抗氧化能力均強于單個乙醇提取物和單用檸檬酸的抗氧能力。另外，用70 %乙醇提取物在豬肉保鮮防腐方面有明顯的作用17-18，是天然抗氧化劑的良好來源。陳叢瑾等19測得香椿葉提取物以總黃酮計算的清除DPPH·（1，1-二苯基苦基苯阱）的半數抑制濃度（IC50）值約為蘆丁的6.7倍、槲皮素的3.3倍、沒食子酸的1.6倍。王昌祿等20研究表明，香椿老葉提取純化后的物質具有很強的抗氧化活性，采用Fe3+被還原成Fe2+的方法測定的總還原力時總還原力為（863.5

9、9±13.90）mg/g；DPPH·清除能力和Fe3+還原抗氧化能力測試（FRAP）均呈現明顯的劑量依賴性關系，顯著高于相同濃度的2，4 二叔丁基甲基苯酚（BHT）（P0.01），與同濃度的維生素C相當。可以使用不同的抗氧化模型來評價香椿葉提取物的抗氧化活性21-25。3結語綜上所述，香椿作為我國藥食兩用的植物具有較強的藥理作用，國內外的研究多集中在香椿葉和香椿樹皮上, 對化學成分的研究多集中在總黃酮、沒食子酸及衍生物及多糖類成分, 并且對黃酮和多糖類成分藥理作用的研究較多。因此有必要對香椿中的揮發油進行進一步提取分離，以期開發出一種天然無害的可用于食品的香料物質。【參考文

10、獻】1中國科學院中國植物志編輯委員會中國植物志M北京：科學出版社，1997.2 周富臣，盧斌斌，李炎強等香椿葉超臨界CO2 萃取物在卷煙中的作用研究J香料香精化妝品2008,8（4）：26-29.3孟志芬，谷永慶，張偉鋼香椿葉中總黃酮的微波提取工藝J光譜實驗室.2008,11(3):1095-1098.4 丁彩梅，曾榮華，丘泰球等香椿葉黃酮類化合物超聲強化提取研究J中成藥2005,12（12）：1390-1391.5 孟志芬，董彩霞，任多勝酶法提取香椿葉中總黃酮的工藝研究J光譜實驗室2005,9(5):1086-1089.6 陳叢瑾，黃克瀛，王貴武等香椿葉總黃酮不同提取方法的比較J食品研究與開

11、發.2009,3(3):57-59.7 陳叢瑾，黃克瀛，李德良正交試驗法優選香椿葉總黃酮的半仿生提取工藝J食品科技2007,6:119-121.8 陳叢瑾，楊國恩，黃克瀛溶劑回流法提取香椿葉總黃酮的工藝研究J. 中國藥房2008（19）：2108-2110.9 黃紅英，鄧斌，周蕓等香椿葉總黃酮提取工藝的研究J.安徽農業科2010,11（38）：5879-5881.10劉川生.微波萃取技術在天然藥物提取中的研究進展J.中國天然藥物,2003,1(3):187-19.11 李秀信, 張院民, 劉青利, 香椿果實中黃酮類化合物的提取及鑒定J. 河北 林果研究.2002,6(6):126-128.12

12、 陳元坤，歐紅萍，房春林等香椿皮及臭椿皮體外抑菌活性測定J. 四川畜牧獸醫2011（5）：27-28.13 朱育鳳，周琴妹，陶開春臭椿葉與香椿葉的比較鑒別及體外抗菌試驗J中藥材，2000，23（8）：484.14 阮志鵬，陳玉麗，林麗珊香椿葉水提物對小鼠炎癥抑制作用J中國公共衛生2010,3(26):334-336.15 陳玉麗，阮志鵬，林麗珊等香椿葉提取物的體外抗腫瘤活性J福建中醫藥大學學報2011，21（2）：30-3216陳紹紅, 任鵬康, 趙云濤香椿葉醇提物對體外蛋白質非酶糖基化的抑制作用J安徽農業科學2010, 38( 11): 5642 564317 李秀信，張院民，劉青利等香椿葉

13、提取物抗氧化作用的研究J.內蒙古農業大學學報2002,9（23）：114-117.18 余鈾，兩種天然抗氧化劑對豬肉保鮮效果的比較研究J食品科學，1995，16 (10) :69 7119 陳叢瑾，黃克瀛，李德良等香椿葉提取物清除DPPH自由基的測定方法J.林產化學與工業，2006，26（3）：69.20 王昌祿，江慎華，陳志強等香椿老葉中活性物質提取及其抗氧化活性的研究J農業工程學報，2007，23（10）：229.21 Chen HY，Lin YC，Hsieh CL. Evaluation of antioxidantactivity of aqueous extract of some selected nutraceuticalherbsJ. Food Chemi，2007，104（4）：1 418.22 周麗，張京芳，陸剛等不同生長期香椿葉片的抗氧化活性及其抗氧化作用分析J西北植物學報，2007，27（3）：526.23 田迪英，楊榮華果蔬抗氧化活性的研究J食品與發酵工業，2003，29（4）：372