1、第六章第六章 芳酸及其酯類藥物的分析芳酸及其酯類藥物的分析概述概述n本類藥物的分子結構為：具有取代本類藥物的分子結構為：具有取代苯基的羧酸化合物。苯基的羧酸化合物。n結晶性粉末結晶性粉末，具有具有mpmp。n游離芳酸類藥物，幾乎不溶于水，游離芳酸類藥物，幾乎不溶于水，易溶于有機溶劑，芳酸堿金屬鹽易易溶于有機溶劑，芳酸堿金屬鹽易溶于水。溶于水。n第一節典型藥物第一節典型藥物分類與理化性質分類分類與理化性質分類 水楊酸類水楊酸類 苯甲酸類苯甲酸類1.1.其他芳酸類其他芳酸類 n（一）（一）. . 水楊酸類水楊酸類n1. 1. 典型藥物典型藥物COOHOCOCH3C O O N aO HN H2阿斯

2、匹林阿斯匹林（ASAASA） 水楊酸水楊酸 （SASA） 對氨基水楊酸鈉對氨基水楊酸鈉OHCOOH雙水楊酯雙水楊酯貝諾酯貝諾酯OCOOHCOHOCOOOCOCH3NHCOCH3FFOHCOOH二氟尼柳二氟尼柳n水楊酸nSalicylic acid CAS 69-72-7nPka 2.98nDissociation Constant: pKa12.98 ( 25 ) pKa213.6 ( 25 ) nPartition Coefficient (Calculated): Log P 2.19(calc)n阿司匹林阿司匹林 Aspirin CAS 50-78-2 nDissociation Con

3、stant: pKa3.38 ( 25 , 1M KCl) nPartition Coefficient (Calculated): Log P 1.02(calc)nWhite monoclinic tablets or needle-like crystals. d 1.40. mp 135 (rapid heating); the melt solidifies at 118. uv max (0.1N H2SO4): 229 nm (E1%1cm 484); (CHCl3): 277 nm (E1%1cm 68). Is odorless, but in moist air it is

4、 gradually hydrolyzed into salicylic and acetic acids and acquires the odor of acetic acid. Stable in dry air. pK (25) 3.49. One gram dissolves in 300 ml water at 25, in 100 ml water at 37, in 5 ml alcohol, 17 ml chloroform, 10-15 ml ether. Less soluble in anhydr ether. Decomp by boiling water or wh

5、en dissolved in solns of alkali hydroxides and carbonates. Inorganic salts of acetylsalicylic acid are soluble in water (esp the Ca salt, q.v.), but are decomposed quickly. LD50 orally in mice, rats: 1.1, 1.5 g/kg (Hart). n二氟尼柳 diflunisal CAS 22494-42-4 nLog P 4.39 nWhite, crystals from toluene, mp

6、211-213. Freely sol in alc, methanol; sol in most organic solvents, ethyl acetate, acetone; slightly sol in chloroform, carbon tetrachloride, methylene chloride. Practically insol in water at neutral or acidic pH. Insol in hexane. LD50 orally in female mice: 439 mg/kg (Stone). n雙水楊酸酯 salsalatenWhite

7、, crystals from toluene, mp 211-213. Freely sol in alc, methanol; sol in most organic solvents, ethyl acetate, acetone; slightly sol in chloroform, carbon tetrachloride, methylene chloride. Practically insol in water at neutral or acidic pH. Insol in hexane. LD50 orally in female mice: 439 mg/kg (St

8、one). n對氨基水楊酸鈉 sodium aminosalicylate2. 2. 主要性質主要性質（1 1）酸性：）酸性：a. a. 芳酸類藥物分子中具有芳酸類藥物分子中具有COOHCOOH，顯顯弱酸性，可用酸堿滴定法測定含量弱酸性，可用酸堿滴定法測定含量b. b. 藥用芳酸藥用芳酸pKapKa在在3 36 6之間之間COOHOCOCH3COOHOHCOOHlpKa4.263.492.95HOHOCO分子內分子內氫鍵氫鍵無游離無游離- -COOHCOOH，有有ArAr，可用可用UVUV法法具有芳伯氨基，可采用亞硝酸鈉滴定法。具有芳伯氨基，可采用亞硝酸鈉滴定法。具有酚羥基，與具有酚羥基，與F

9、eFe3 3生成有色的物質生成有色的物質水楊酸酯類易水解，產生特殊雜質水楊酸酯類易水解，產生特殊雜質（二）（二）. . 苯甲酸類苯甲酸類1. 1. 代表藥物代表藥物苯甲酸（鈉）苯甲酸（鈉） 丙磺舒丙磺舒C O OH(Na)SO2COOHN(CH2CH2CH2)2CH3CH3NHCOOH甲芬那酸甲芬那酸2.2.主要性質主要性質具有游離具有游離- -COOHCOOH，用用NaOHNaOH直接滴定直接滴定；根據溶解差異，可選用雙相滴定法；根據溶解差異，可選用雙相滴定法；具有苯環，有具有苯環，有UVUV、IRIR特征吸收，鑒別和特征吸收，鑒別和含量測定。含量測定。苯甲酸（鈉）與苯甲酸（鈉）與FeClF

10、eCl3 3顯色反應，丙磺舒顯色反應，丙磺舒的受熱分解等用于鑒別。的受熱分解等用于鑒別。（三）其他芳酸類（三）其他芳酸類ClOCCH3CH3COOC2H5氯貝丁酯氯貝丁酯CHCH2CHCOOHCH3CH3CH3布洛芬布洛芬1. 1. 代表藥物代表藥物2. 2. 性質性質 氯貝丁酯是油狀液體，具有羧酸氯貝丁酯是油狀液體，具有羧酸酯易水解，酸堿滴定法（剩余滴定酯易水解，酸堿滴定法（剩余滴定法）含量測定法）含量測定 布洛芬具有酸性，可直接酸堿滴布洛芬具有酸性，可直接酸堿滴定法。定法。均具有均具有UVUV、IRIR特征吸收，可用于鑒特征吸收，可用于鑒別和含量測定。別和含量測定。 一一 與與FeClFe

11、Cl3 3反應反應n1. 1. 水楊酸及其鹽水楊酸及其鹽OHCOOH 紫堇色紫堇色第二節鑒別反應第二節鑒別反應 水楊酸水楊酸+ FeCl3pH 462COOO3Fe3FeOCOCH3COOHH2O+放冷放冷Fe(OH)3T.S 紫堇色配位化合物紫堇色配位化合物 FeCl3T.S 堿性或中性溶液 赭色赭色C O OH2. 2. 苯甲酸苯甲酸堿式苯甲堿式苯甲酸鐵鹽酸鐵鹽3 3、雙水楊酯、雙水楊酯雙水楊酯雙水楊酯NaOHNaOH水解水解水楊酸鈉水楊酸鈉顯水楊酸鹽的鑒別反應顯水楊酸鹽的鑒別反應三氯化鐵呈色三氯化鐵呈色加稀鹽酸加稀鹽酸白色白色溶于醋酸銨溶于醋酸銨S.TS.TSO2COOHN(CH2CH2

12、CH2)2NaOH水稀釋水稀釋pH56FeCl3 T.S1D米黃色米黃色3. 3. 丙磺舒丙磺舒4. 4. 氯貝丁酯氯貝丁酯ClO CCH3CH3COOC2H5KOH鹽酸羥胺鹽酸羥胺稀稀HClHClFeCl3 TS呈紫色呈紫色異 羥 肟 酸異 羥 肟 酸鹽鹽異 羥 肟 酸異 羥 肟 酸鐵鐵n二、重氮化二、重氮化- -偶合反應偶合反應 H+ NaNO2 TSRN2+Cl-萘酚 OH 橙紅色橙紅色COONaNH3OH 對氨基水楊酸鈉對氨基水楊酸鈉COOCOOCH3NHCOCH3 貝諾酯貝諾酯 H+ 同上三、水解反應三、水解反應OCOCH3COOHNa2CO3OHCOONaCH3COONaCO2H2

13、SO4OHCOOHCH3COOH+ 白色沉淀白色沉淀 醋酸氣味醋酸氣味1. 阿司匹林阿司匹林四四. 分解產物的反應分解產物的反應SO2COOHN(CH2CH2CH2)2NaOH熔融熔融Na2SO3HNO3氧化氧化Na2SO4顯硫酸鹽反應顯硫酸鹽反應n六、紫外吸收光譜法六、紫外吸收光譜法n七、紅外吸收光譜法七、紅外吸收光譜法一、阿司匹林中的特殊雜質檢查一、阿司匹林中的特殊雜質檢查1、合成工藝、合成工藝H+OH苯酚苯酚ONaCO2ONaCOONaCOOHOH 水楊酸水楊酸OCOCH3醋酐醋酸苯酯醋酸苯酯COOHOH(CH3CH2)2O+乙?；疌OOHOCOCH3CH3COOH+O HOHCOO水楊

14、酸苯酯水楊酸苯酯O HOCOCH3COO乙酰水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯2 2、溶液的澄清度檢查、溶液的澄清度檢查 檢查碳酸鈉檢查碳酸鈉試液中不溶物試液中不溶物 苯酚苯酚 醋酸苯酯醋酸苯酯 水楊酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯溶溶l阿司匹林阿司匹林Na2CO3 不溶不溶Na2CO3雜質雜質溶液應澄清溶液應澄清3 3、水楊酸、水楊酸 游離水楊酸是阿司匹林中的特殊雜質游離水楊酸是阿司匹林中的特殊雜質 v來源來源生產中乙酰化不完全生產中乙?；煌耆?貯存中水解產物貯存中水解產物ChP2015采用采用HPLC法控制法控制SA的限量的限量n供試品溶液（臨用新制）供試品溶液（臨用新制）n溶劑用溶劑

15、用1%冰醋酸甲醇溶液冰醋酸甲醇溶液n流動相：乙腈流動相：乙腈-四氫呋喃四氫呋喃-冰醋酸冰醋酸-水（水（20：5：5：70）n按外標法計算，不得過按外標法計算，不得過0.1%n含量測定方法含量測定方法原料生產原料生產貯存貯存制劑生產制劑生產貯存貯存引入雜質引入雜質原料標準原料標準引入雜質引入雜質制劑標準制劑標準原料原料 0.1% 0.1%片劑片劑 0.3 0.3腸溶片腸溶片 1.5 1.5栓劑栓劑 3.0 3.0有關物質：乙酰水楊酸酐，乙酰有關物質：乙酰水楊酸酐，乙酰水楊酰水楊酸，水楊酰水楊酸水楊酰水楊酸，水楊酰水楊酸梯度HPLC法A 乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70)B 乙腈06

16、0min，A 10020% B 080%供試品，對照液，靈敏度試驗液，水楊酸二二. . 對氨基水楊酸鈉中的雜質檢查對氨基水楊酸鈉中的雜質檢查 1.1.雜質來源雜質來源: :未反應完全的原料間氨基酚未反應完全的原料間氨基酚 遇熱受潮生成間氨基酚遇熱受潮生成間氨基酚, ,再再 被氧化成二苯醌型化合物被氧化成二苯醌型化合物N H2O HC O O N aH2O-CO2O醌類醌類NH2OH間氨基酚間氨基酚原理原理:方法方法1：對氨基水楊酸鈉對氨基水楊酸鈉乙醚不溶乙醚不溶間氨基酚間氨基酚乙醚溶解乙醚溶解分離分離判斷：判斷：VHCl 0.3ml方法方法 雙相滴定法雙相滴定法:Ch.P2005 HPLC法：

17、法：USP（29） 乙醚提取乙醚提取H2O兩相兩相HCl(0.02mol/L)滴定滴定充分振搖充分振搖甲基橙甲基橙1D乙醚相乙醚相水相水相滴定前滴定前NH2OH甲基橙（甲基橙（pH3.04.4） 紅紅 黃黃 滴定中滴定中NH2OH+HClNH2.HClOH滴定終點滴定終點微過量微過量HCl酸性：黃酸性：黃 紅紅ChP2015采用采用HPLC法測定有關物質法測定有關物質n特雜：間氨基酚特雜：間氨基酚 外標法外標法 0.25%n單雜：對照主峰面積的單雜：對照主峰面積的0.1%n總雜：對照主峰面積的總雜：對照主峰面積的1.0%n流動相：甲醇流動相：甲醇-10%四丁基氫氧化銨溶四丁基氫氧化銨溶液液-0

18、.05mol/L磷酸氫二鈉磷酸氫二鈉-0.05mol/L磷酸二氫鈉磷酸二氫鈉(200:19:400:400)nC18柱，檢測波長：柱，檢測波長：265nm三三. 貝諾酯中的特殊雜質檢查貝諾酯中的特殊雜質檢查n1.對氨基酚對氨基酚n與堿性亞硝酸鐵氰化鈉反應呈藍綠色，與堿性亞硝酸鐵氰化鈉反應呈藍綠色，貝諾酯無此反應，控制對氨基酚的量貝諾酯無此反應，控制對氨基酚的量（不得顯藍綠色）（不得顯藍綠色）n2.游離水楊酸游離水楊酸n3.有關物質有關物質nHPLC法（與含量測定相同條件）法（與含量測定相同條件）v檢查方法：以原料為例檢查方法：以原料為例用對照法，用二個鈉氏比色管用對照法，用二個鈉氏比色管 30

19、顯色顯色樣品液：樣品液：0.1g乙醇乙醇1ml50ml稀硫酸鐵銨稀硫酸鐵銨1ml水至水至水至水至對照液：對照液：SA對照品對照品0.1g冰醋酸冰醋酸1ml1000ml精取精取1ml同上同上？四四. . 甲芬那酸中特殊雜質的檢查甲芬那酸中特殊雜質的檢查銅鹽銅鹽: :銅作為合成的催化劑銅作為合成的催化劑原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 Cu1.572ppmCu1.572ppm（Ch.P 2010Ch.P 2010）2.2,3-2.2,3-二甲基苯胺二甲基苯胺 GCGC法測定法測定2. 2. 有關物質有關物質HPLCHPLC法法 （Ch.P 2010Ch.P 2010）不加校正因子的主成分自身對

20、照法：單雜，總雜。不加校正因子的主成分自身對照法：單雜，總雜。五五. . 氯貝丁酯氯貝丁酯1. 對氯酚對氯酚起始原料起始原料分解產物分解產物GCGC法：限度法：限度 0.0025% 0.0025% Ch.P2010Ch.P2010GCGC法：限度法：限度 0.003% 0.003% USP(29)USP(29)2. 2. 揮發性雜質揮發性雜質GCGC法：各雜質峰面積總和法：各雜質峰面積總和總峰面積的總峰面積的0.5%0.5%第四節第四節 含量測定含量測定一、酸堿滴定法一、酸堿滴定法( (一一) ) 直接滴定法：以直接滴定法：以ASAASA為例為例1. 1. 原理原理+COOHOCOCH3NaO

21、HOCOCH3COONa+H2O2、方法、方法本品適量中性乙醇酚酞溶解NaOHNaOH滴定液（滴定液（0.10.1mol/L)mol/L)滴定滴定？空白試驗？空白試驗？中性乙醇：中性乙醇： 增加增加ASAASA的溶解性。的溶解性。 防止防止ASAASA水解。水解。 消除乙醇中酸的影響。消除乙醇中酸的影響。3 、討論、討論 已 事 先 將 溶 劑 的 酸 性 物 質 中 和 ，已 事 先 將 溶 劑 的 酸 性 物 質 中 和 ，Ch.P2010Ch.P2010不要求做空白試驗。不要求做空白試驗。 供試品含水楊酸超過規定限度時，不供試品含水楊酸超過規定限度時，不宜用直接滴定法。易受降解產物水楊宜

22、用直接滴定法。易受降解產物水楊酸及醋酸的干擾。酸及醋酸的干擾。應用：苯甲酸、丙磺舒、二氟尼柳、應用：苯甲酸、丙磺舒、二氟尼柳、甲酚那酸、雙水楊酯、布洛芬。甲酚那酸、雙水楊酯、布洛芬。 酚酞酚酞 pH 8.3 10.0 ( 無無 紅紅 ) n( (二二) ) 水解后剩余滴定法（水解后剩余滴定法（USP32)USP32)原理原理: : 以以ASAASA為例為例+ 2NaOHOHCOONa+ NaACOCOCH3COOH2NaOH+H2SO4Na2SO4+2H2Omol比？比？方法方法樣品定量過量NaOH(0.5mol/L)10酚酞H2SO4(0.25mol/L)滴定空白試驗空白試驗?含量含量% ?

23、討論討論 需做空白試驗校正需做空白試驗校正NaOH吸收CO2Na2CO3用用H H2 2SOSO4 4回滴消耗的酸量減少回滴消耗的酸量減少, , 影響試驗結果。影響試驗結果。含量含量CO2H2SO4（V0 ）空白：CO2水解H2SO4（VS）樣品：含量含量%=（V0 VS ）FT W100%Mol比：比：ASA NaOH H2SO4=1 2 1BTBTNaOHSOH5 .02125.01142(三三)、兩步滴定法、兩步滴定法以以ASAASA片為例，采用先中和后水解回滴兩步滴定法。片為例，采用先中和后水解回滴兩步滴定法。片劑片劑輔料穩定劑：酒石酸或枸櫞酸輔料穩定劑：酒石酸或枸櫞酸生產中水解產物：

24、水楊酸、醋酸生產中水解產物：水楊酸、醋酸第一步：中和第一步：中和 原理：原理：中和分解產物中和分解產物OCOCH3COOHOHCOOHCOONaOHNaOH+ H2OCH3COOHCH3COONaNaOH+ H2O中和穩定劑中和穩定劑OHCHCHCOOHOHCOOHOHCHCHCOONaOHCOONa2NaOH+ 2H2O酒石酸酒石酸自身成鹽自身成鹽OCOCH3COOHOCOCH3COONa+NaOH+ H2O操作：操作：取取10片片稱重稱重( ) 研細研細 片粉片粉w(相當于相當于ASA 0.3g ) 中性乙醇中性乙醇酚酞酚酞NaOH (0.1mol/L) 滴定滴定粉紅色粉紅色 30不褪色不

25、褪色W第二步：水解與第二步：水解與H2SO4回滴回滴原理：原理：+ NaOHOHCOONa+ NaACOCOCH3COONa2NaOH+H2SO4Na2SO4+2H2Omol比？比？操作操作中和液中和液NaOH（0.1mol/L)定量過量定量過量回流回流 H2SO4(0.05mol/L)酚酞酚酞 紅紅無無空白試驗空白試驗?mol比：比：ASA：ASA（Na）：）：H2SO4：NaOH=1：1：0.5：1T=？M=180.02%100%0標示量）（標示量WwFTVV已知已知: : 1010片重片重5.48645.4864g g空白消耗硫酸空白消耗硫酸:32.50:32.50ml ml 樣品消耗硫

26、酸樣品消耗硫酸:16.98:16.98mlml阿司匹林片阿司匹林片:0.3:0.3g gW=0.5346 g W=0.5346 g 約相當于約相當于ASA 0.3gASA 0.3g氯貝丁酯采用水解后剩余滴定法氯貝丁酯采用水解后剩余滴定法n自編題內容（四）、（四）、 雙相滴定法雙相滴定法以苯甲酸鈉為例以苯甲酸鈉為例 Ch.P 2005Ch.P 2005原理：利用溶解度的差異原理：利用溶解度的差異苯甲酸鈉苯甲酸鈉水水 有有苯甲酸苯甲酸水水 有有HCl 滴定滴定水相水相乙醚相乙醚相滴定中：滴定中：C O O N a+HClC O O H終點：微過量終點：微過量HCl 黃黃橙紅橙紅C O O Na滴定前：滴定前：甲基橙（pH3.04.4） 紅 黃Ch.P 2015 采用非水溶液滴定法采用非水溶液滴定法n利用苯甲酸鈉的弱堿性利用苯甲酸鈉的弱堿性n溶劑：冰醋酸溶劑：冰醋酸n指示劑指示劑:結晶紫結晶紫n滴定液：高氯酸滴定液：高氯酸二、二、UV法法1、直接、直接UV法法 二氟尼柳膠囊二氟尼柳膠囊UV對照品法對照品法丙