1、復方匙羹藤膠囊中黃酮含量測定    陳有根朱家谷李慧胡芳 提要以蘆丁為對照品，用比色法測定了復方匙羹藤膠囊中山楂黃酮的含量。方法簡便，重現性好，可用于復方匙羹藤膠囊的質量控制。 關鍵詞復方匙羹藤膠囊；黃酮；含量測定 Determination of Flavone in Compound Gymnema Sylvestre Capsules Chen Yougen, Zhu Jagu, Li Hui, et al Jiangxi University of TCM, Nanchang 330006 AbstractThis paper estabilsh

2、ed a colorimetric method to determin flavone in Compound Gymnema Sylvestre Capsules. Rutine served as control substance. This method is simple, reliable and can be used to control the quality of Compound Gymnema Sylvestre Capsules. Key wordsCompound Gymnema Sylvestre Capsules;Determination;Flavone 復

3、方匙羹藤膠囊(以下簡稱復方SGT)是由匙羹藤、山楂等組成。具有明顯對抗小鼠四氧嘧啶所致高血糖的作用及降低飼喂性高血脂大鼠血液中總膽固醇和甘油三脂的作用1。山楂是該制劑中降血脂主要組成之一。資料表明，山楂藥材的降血脂成分為總黃酮類2。本文以蘆丁為對照品，用比色法測定了復方SGT中黃酮的含量，為該制劑的產品質量控制提供了簡便、準確的方法。 1材料、試劑及儀器 本實驗所用復方SGT及其缺山楂陰性對照品(以下簡稱陰性對照品)均由本課題組研制。蘆丁對照品購于中國藥品生物制品檢定所，為定量用對照品；其他化學試劑均為AR級。比色儀為美國產品BECKMAN DU-650。 2黃酮類定性檢查 分別取復方SGT

4、1 g，陰性對照品1 g，2份，加30%稀醇5 ml，其中1份陰性對照品中加蘆丁對照品5 mg，于水浴上加熱溶解，濾過，取續濾液1 ml，分別加鎂粉少許，再滴加濃鹽酸2滴，觀察反應現象。結果表明：復方SGT和陰性加蘆丁溶液加入鎂粉和鹽酸后，有氣泡產生，同時溶液由淡黃色變為淡紅色；陰性對照液僅有氣泡產生，溶液顏色不變，顯示陰性對照液無黃酮類化合物存在。 3方法學研究 3.1對照品溶液的配制：精密稱取在120減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20 mg，置100 ml量瓶中加60%的乙醇80 ml，置水浴上微熱溶解，放冷，加60%的乙醇至刻度，搖勻。精密吸取25 ml，置50ml量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度

5、，搖勻，得蘆丁對照品溶液(0.1 mg/ml)。 3.2復方SGT及陰性對照品溶液的配制：分別取復方SGT和陰性對照品膠囊內容物10 g，加30%乙醇，水浴上溶解，冷卻后定容為100 ml，即得樣品與陰性對照液。 3.3測定用波長的選擇：分別取蘆丁對照品溶液及陰性對照品溶液5 ml，置10 ml量瓶中，加5%亞硝酸鈉溶液0.3 ml，搖勻，放置6 min，加10%硝酸鋁溶液0.3 ml，搖勻，放置6 min，加4%氫氧化鈉溶液4 ml，再加蒸餾水至刻度，搖勻，放置15 min。先將蘆丁對照品溶液置比色皿中，在波長400600 nm間測定吸收譜，確定最大吸收波長為504 nm。然后再將陰性對照液

6、置比色皿中，同樣在波長400600 nm間測定吸收譜，結果表明陰性對照液在475600 nm間無干擾吸收。因此確定選擇504 nm為測定波長。 3.4標準曲線的繪制：精密吸取蘆丁對照品液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml，分別置10 ml量瓶中，加30%乙醇使成5 ml，再按3.3項“加5%亞硝酸鈉放置15 min”顯色，然后在504 nm處測定各溶液吸收度。按濃度與吸收度相關關系求出相關系數并計算回歸方程得： C=10.95 A+1.024×10-2，相關系數為=0.9997 ( n=5)。顯示本品在0.010.05 mg間線性良好。 3.5穩定性試驗：取蘆丁對照

7、品溶液4.0 ml，置10 ml量瓶中，按3.4項中“加30%乙醇加蒸餾水至刻度，搖勻”，于504 nm處測定吸收度，然后每隔5 min處測定吸收度，觀察其吸收度變化情況。結果見表1，結果表明，最佳測定時間為顯色后520 min。 表1穩定性試驗結果 測定項 0 min 5 min 10 min 15 min 20 min 25 min 30 min 吸收度 0.0918 0.0887 0.0882 0.0872 0.0863 0.0845 0.0823 3.6精密度試驗：照3.5項操作，取蘆丁對照液4 ml，5份，顯色后放置15 min，測定吸收度，計算得 RSD=0.67% ( n=5)。

8、 4樣品含量測定 照3.1樣品溶液的配制，得樣品液5份。照3.4顯色、測定吸收度，經計算得復方SGT中黃酮平均含量為23.56 mg/g。見表2。 5加樣回收試驗 取復方SGT膠囊內容物0.5 g，5份，分別加入蘆丁對照品1 mg，按3.1樣品溶液的配制方法制得樣品溶液10 ml，依3.4法測定，得平均回收率98.01%， RSD=1.41% ( n=5)。見表3。 表2復方SGT黃酮含量測定結果 樣品號 含量 (mg/g) RSD (%) 1 23.26 2 23.75 3 23.45 23.56 2.08 4 23.64 5 23.70 表3加樣回收實驗結果 序號 樣品折算 含量(mg)

9、加入對照 品量(mg) 測得量 (mg) 回收率 (%) (%) RSD (%) 1 1.230 1.042 2.239 96.83 2 1.178 1.129 2.288 98.31 3 1.283 0.979 2.265 100.31 98.01 1.41 4 1.304 1.105 2.377 97.10 5 1.149 1.113 2.234 97.48 6小結 由于復方SGT中匙羹藤中有效成分為匙羹藤皂甙，而目前又沒有該皂甙的化學對照品，因此，我們選擇復方中山楂黃酮含量為限制復方SGT的質量指標。 關于山楂黃酮含量測定方法，我們查閱了許多有關資料，各資料均以蘆丁或槲皮素為對照品，用比

10、色法進行含量測定，且顯色方法一致，但選定的測定波長卻有差異，有的為500 nm3，有的為510 nm2，加之復方SGT是我們首創的制劑，為此，我們測定了蘆丁對照品顯色后在400600 nm范圍內的吸收譜，并以最大吸收波長504 nm為測定用波長。同時，由于顯色后，穩定性較差，我們對測定時間進行了方法學研究，選定樣品吸收度的最佳測定時間為顯色后520 min。 定性試驗和吸收譜均顯示：陰性樣品對復方SGT中山楂黃酮含量測定無干擾。本研究為復方SGT的質量標準的制定提供了理論依據。      江西省青年基金資助課題 作者簡介：陳有根：男，1965年生，講師，碩士 作者單位：陳有根朱家谷李慧江西中醫學院 胡芳