1、分析總結耐萬古霉素金黃色葡萄球菌生物學特性改變與細菌鑒定    【摘要】 目的：探討耐萬古霉素金黃色葡萄球菌的生物學特征改變對細菌鑒定的影響。方法：使用萬古霉素體外誘導將一株異質性萬古霉素耐藥金黃色葡萄球菌（h-VRSA）誘導為耐萬古霉素金黃色葡萄球菌（VRSA），觀察金黃色葡萄球菌耐萬古霉素后生物學特征及變化規律。結果：金黃色葡萄球菌耐藥后色素、溶血環消失，菌落變小，導致手工法和儀器法細菌鑒定錯誤，對PCR檢測鑒定沒有影響。結論：金黃色葡萄球菌對萬古霉素耐藥后，生物學發生變化，容易導致細菌鑒定結果錯誤，應引起臨床重視。【關鍵詞】 耐萬古霉素；金黃色葡萄

2、球菌；生物學特征；細菌檢測金黃色葡萄球菌是社區獲得性肺炎的常見病菌，2002年首次報道耐萬古霉素葡萄球菌，2004年JAMA在職報道毅力患者體內分離出該病菌，臨床常用的檢測及藥敏試驗未能檢測出耐萬古霉素金黃色葡萄球菌1，我院采用萬古霉素體外誘導方法將1株，異質性萬古霉素耐藥金黃色葡萄球菌（h-VRSA）誘導為耐萬古霉素金黃色葡萄球菌（VRSA），觀察其生物學特點，現報告如下：1資料和方法1.1一般資料 標準金黃色葡萄球菌（ATCC 29216）和異質性萬古霉素耐藥金黃色葡萄球菌分離菌株10833來源于我院檢驗科，血漿凝固酶（+），觸媒（+），GPI編碼：76134056712。1.2方法卵磷脂

3、吐溫80瓊脂，微量生化反應管，萬古霉素紙片，鹽酸萬古霉素、MH瓊脂、肉湯、GPI鑒定卡，聚合酶鏈反應（PCR）試劑、PCR擴增儀、ZF紫外分析儀。按照10827篩選方法操作，確認為h-VRSA，將該菌株接種于萬古霉素選擇性培養基內，誘導出VRSA，并接種于血瓊脂平板、兔血漿、MH肉湯，觀察菌落形態、溶血環及色素，應用手工法、儀器法、PCR法測定金黃色葡萄球菌基因序列2，采用菌譜分析法，檢測對萬古霉素的敏感性。1.3 統計學處理 應用SPSS130軟件進行統計學處理，計數資料以表示，計量資料以(?x±s)表示，組內和組間比較分別采用t檢驗和x2檢驗。P<005為差異有統計學意義。

4、2結果2.1 VRSA菌群特點與標準金黃色葡萄球菌比較見表1表1 VRSA菌群特點與標準金黃色葡萄球菌比較生物學形態 標準金黃色葡萄球菌 VRSA菌落形態及大小 均勻 大小不均溶血環 清晰、寬大 窄小、無色素 淡黃 灰白凝固酶 陽性 陰性金黃色葡萄球菌耐藥后色素、溶血環消失，菌落變小，凝固酶陰性。2.2VRSA實驗室檢測分析見表2表2VRSA實驗室檢測分析鑒定方法 標準金黃色葡萄球菌 VRSA手工法 金葡菌 溶血葡萄球菌儀器法 金葡菌 溶血葡萄球菌PCR 金葡菌 金葡菌實驗室常用細菌鑒定方法將其鑒定為溶血葡萄球菌或者模仿葡萄球菌，PCR檢測方法能正確鑒定VRSA誘導菌。2.3 VRSA藥敏試驗

5、結果紙片法和儀器法對于h-VRSA和VRSA均能檢測到，微量肉湯對VRSA能檢測到，對h-VRSA容易漏診。3討論萬古霉素通過與肽聚糖前體D-D丙氨酸-丙氨酸結合，組織轉糖基和轉肽作用，抑制細胞壁的合成，發揮殺菌作用，其耐藥機制尚未明了，有資料報名，金黃色葡萄球菌對萬古霉素的耐藥機制不是單一的。細胞壁增厚是其主要耐藥機制，增厚的細胞壁通過阻塞、親密誘捕引起耐藥，萬古霉素與丙氨酸殘基結合，阻塞其網狀結構3，阻止萬古霉素向細胞質膜滲透，同時細胞壁上增多的肽聚糖單體與萬古霉素結合，大部分藥物結合在細胞壁上，不能到達細胞質膜。金葡菌分泌一種肽，可以通過信息傳導途徑把耐藥質粒轉移到金葡菌體內。本次實驗表

6、明，VRSA生物學特性改變主要是細菌菌落變小，色素消失，溶血環消失，凝固酶轉陰，細菌菌落變小，提示耐藥菌培養時間延長。VRSA生物學特征改變，對細菌鑒定結果也產生影響，手工法和儀器法錯誤鑒定為溶血葡萄球菌和模仿葡萄球菌，在采用PCR技術檢測VRSA的nuc基因4，特異性表達于金黃色葡萄球菌，可應用于VRSA和h-VRSA的鑒定，這說明耐藥菌生物學特征改變導致儀器法和手工法檢測錯誤，金黃色葡萄球菌對萬古霉素耐藥后，生物學發生變化，容易導致細菌鑒定結果錯誤，應引起臨床重視。參考文獻1 馬筱玲，王敬華，李華，等異質性萬古霉素耐藥葡萄球菌分離及生物學特性觀察J中華微生物學和免疫學雜志，2009，24(

7、7)：5835862 馬筱玲萬古霉素敏感性減低的金黃色葡萄球菌J中華檢驗醫學雜志，2009，27(9)：6206223 Weigel LM ，Clewell DB，Gill SR，et a1Genetic analysis of a highLevel vancomycinresistant isolate ofStaphylococcus aureusJScience，2008，302(28)：1569-15714 吳本權，唐英春，張扣興，等萬古霉素異質性耐藥葡萄球菌的分離及其藥物敏感性分析J.中國抗生素雜志，2009，27(2)：116120    你可能感興趣的畢業論文    · 中學新課程改革中生物學實驗的特殊性及作用· 生物學核心概念及其教育價值和教學理解