1、第十四章 蛋白質的生物合成一：填空題 1.蛋白質的生物合成是以_作為模板，_作為運輸氨基酸的工具，_作為合成的場所。 2.細胞內多肽鏈合成的方向是從_端到_端，而閱讀mRNA的方向是從_端到_端。 3.核糖體上能夠結合tRNA的部位有_部位、_部位和_部位。 4.ORF是指_，已發現最小的ORF只編碼_個氨基酸。 5.蛋白質的生物合成通常以_作為起始密碼子，有時也以_作為起始密碼子，以_、_和_作為終止密碼子。-端富含_堿基的序列，它可以和16SrRNA的3-端的_序列互補配對，而幫助起始密碼子的識別。 7.含硒半胱氨酸的密碼子是_。 8.原核生物蛋白質合成的起始因子(IF)有_種，延伸因子(

2、EF)有_種，終止釋放因子(RF)有_種；而真核生物細胞質蛋白質合成的延伸因子通常有_種，真菌有_種，終止釋放因子有_種。 9.密碼子的第2個核苷酸如果是嘧啶核苷酸，那么該密碼子所決定氨基酸通常是_。 10.原核生物蛋白質合成中第一個被參入的氨基酸是_。 11.真核生物細胞質蛋白質合成對起始密碼子的識別主要通過_機制進行。 12.無細胞翻譯系統翻譯出來的多肽鏈通常比在完整的細胞中翻譯的產物要長，這是因為_。 13.蛋白質的半壽期通常與_端的氨基酸性質有關。 14.tmRNA是指_。 15.同工受體tRNA是指_。 16.瘋牛病的致病因子是一種_。 17.已發現體內大多數蛋白質正確的構象的形成需

3、要_的幫助，某些蛋白質的折疊還需要_和_酶的催化。 18.SRP是指_，它是一種由_和_組成的超分子體系，它的功能是_。 19.蛋白質定位于溶酶體的信號是_。 20.分子伴侶通常具有_酶的活性。 21.某些蛋白質基因的編碼鏈上并無終止密碼子，但可以通過Pre-mRNA的_和_兩種后加工方式引入終止密碼子。 22.蛋白質內含子通常具有_酶的活性。 23.已有充分的證據表明大腸桿菌的轉肽酶由其核糖體的_承擔。 24.決定蛋白質進入過氧化物酶體的信號肽是_。 25.噬菌體基因60在翻譯的過程中經歷_過程。 26.某一tRNA的反密碼子是GGC，它可識別的密碼子為_和_。 27.mRNA上編碼區內密碼

4、子的突變可造成致死作用，但生物體可通過tRNA反密碼子的突變而得以成活。這種tRNA的突變又稱為 _，而這種tRNA稱為_。 28.以(UAG)n作為模板在無細胞翻譯系統中進行翻譯可得到_種多肽。 29.環狀RNA不能有效地作為真核翻譯系統的模板是因為_。 30.常見的無細胞翻譯系統有_、_、_和_等。二：是非題 1. 氨酰-tRNA合成酶可通過其催化的逆反應對誤載的氨基酸進行校對。 2. 在蛋白質生物合成中，所有的氨酰-tRNA都是首先進入核糖體的A部位。 3. 由于遺傳密碼的通用性，所以真核細胞的mRNA可在原核翻譯系統中得到正常的翻譯。 4. 核糖體蛋白不僅僅參與蛋白質的生物合成。 5.

5、 在翻譯起始階段，由完整的核糖體與mRNA的5-端結合，從而開始蛋白質的合成。 6. 所有的氨酰-tRNA的合成都需要相應的氨酰-tRNA合成酶的催化。 7. EF-Tu的GTPase活性越高，翻譯的速度就越快，但翻譯的忠實性就越低。 8. fMet-與Met-的合成由同一種氨酰-tRNA合成酶催化。 9. 對于某一種氨酰-tRNA合成酶來說，在它的催化下，被識別的氨基酸隨機的與其相應的tRNA的3-端CCA的3-OH或5-OH形成酯鍵。 10. tRNA的個性即是其特有的三葉草結構。 11. 含硒半胱氨酰-tRNA是由游離的含硒半胱氨酸與合成而來。 12. 含硒半胱氨酸的參入需要一種新的延伸

6、因子。 13. 泛素是一種熱激蛋白(HSP)。 14. 氨酰-tRNA進入A部位之前，與EF-Tu結合的GTP必須水解。 15. 從DNA分子的三聯體密碼可以毫不懷疑地推斷出某一多肽的氨基酸序列，但從氨基酸序列并不能準確地推導出相應基因的核苷酸序列。 16. 已發現許多蛋白質的三維結構不是由其一級結構決定的，而是由分子伴侶決定的。 17. 多肽鏈的折疊發生在蛋白質合成結束以后才開始。 18. 在線粒體內的翻譯系統中，第一個被參入的氨基酸也都是甲酰甲硫氨酸。 19. 蛋白質翻譯一般以AUG作為起始密碼子，有時也以GUG為起始密碼子，但以GUG為起始密碼子，則第一個被參入的氨基酸為Val。 20.

7、 大腸桿菌丙氨酰-tRNA的合成并不需要具有完整的三葉草結構。 21. 與核糖體蛋白相比，rRNA僅僅作為核糖體的結構骨架，在蛋白質合成中沒有什么直接的作用。 22. 甲硫氨酸能夠刺激蛋白質的生物合成。 23. 絕大多數含硒蛋白是氧化還原酶。 24. 人工合成多肽的方向也是從N端到C端。 25. 在大腸桿菌里表達人組蛋白，可直接從人基因組中獲取目的基因。 26. 細胞內的tRNA只參與蛋白質的合成。三：單選題 1. 預測一下哪一種氨酰-tRNA合成酶不需要有校對的功能。 2. 預測一下哪一種蛋白質的半壽期最長。 3. 某一種tRNA的反密碼子為5IUC3，它識別的密碼子序列是 4. 根據擺動學

8、說，當一個tRNA分子上的反密碼子的第一個堿基為次黃嘌呤時，它可以和mRNA密碼子的第三位的幾種堿基配對？ 5. 如果遺傳密碼是四聯體密碼而不是三聯體，而且tRNA反密碼子前兩個核苷酸處于擺動的位置，那么蛋白質正常合成大概需要多少種tRNA？ 6. 以下蛋白質除了哪一種以外不屬于G蛋白家族？ 7. 以下哪一種抑制劑只能抑制真核生物細胞質的蛋白質合成？ 8. 既能抑制原核又能抑制真核細胞及其細胞器蛋白質合成的抑制劑是 9. 白喉毒素能夠抑制真核生物細胞質的蛋白質合成，是因為它抑制了蛋白質合成的哪一個階段？ 10. 一個N端氨基酸為丙氨酸的20肽，其開放的閱讀框架至少應該由多少個核苷酸殘基組成？

9、11. 真核細胞的蛋白質可經歷泛酰化修飾，被修飾的氨基酸殘基是 12. 使用(GUA)n作為模板在無細胞翻譯系統中進行翻譯，可得到幾種多肽？ 13. 在蛋白質分子中下面所列舉的氨基酸哪一種最不容易突變？ 14. 大腸桿菌素Col能夠抑制原核細胞的蛋白質合成，其抑制的機理是-端的一段核苷酸序列-端的一段核苷酸序列-端的一段核苷酸序列-端的一段核苷酸序列 15. 以下哪一種蛋白質因子在GTP的存在下，至少可以局部地保護防止核酸酶對它的降解？ 16. 以下哪一種氨基酸發生的取代突變最容易出現表現型的改變？Pro 17. 新合成的分泌蛋白和細胞膜蛋白需要經歷哪一種形式的翻譯后加工？ C.在離開高爾基體

10、之前填加磷酸多萜醇 D.粗面內質網中分泌結合蛋白(BiP) 18. 一個突變細胞系的甘露糖-6-磷酸的受體基因缺失，預測該細胞系將發生： 19. 美國洛克菲勒大學的Blobel因提出什么學說而獲得1999年的諾貝爾醫學生理學獎？四：問答題 1.什么是無細胞翻譯系統？經常被使用的無細胞翻譯系統有那些？一個無細胞翻譯系統中需要那些成分才能滿足翻譯條件？ 2.大腸桿菌某一多肽基因的編碼鏈的序列是：5ACAATGTATGGTAGTTCATTATCCCGGGCGCAAATAACAAACCCGGGTTTC3<br>寫出該基因的無意義鏈的序列以及它編碼的mRNA的序列。<br>預測它

11、能編碼多少個氨基酸。<br>標出該基因上對紫外線高敏感位點。<br>如果使用PCR擴增該基因，需要合成兩段作為引物，請寫出核苷酸序列。 3.一段人工合成的多聚核苷酸的堿基序列是AUAUAUAUAUAU，將此多聚核苷酸作為模板在大腸桿菌無細胞翻譯系統中進行翻譯，你預期會產生什么樣的多肽？如果將該模板放在從動物細胞線粒體制備出的無細胞翻譯系統中進行翻譯，得到的產物是 -Met-Tyr-Met-Tyr-Met-Tyr-，那么，線粒體與大腸桿菌的密碼子有什么差別？能夠抑制真核細胞的蛋白質合成，但不抑制原核細胞的蛋白質合成？相反人工合成的SD序列能夠抑制原核細胞的蛋白質合 成，但

12、不抑制真核細胞的蛋白質合成？ 5.嘌呤霉素和紅霉素都能夠抑制原核細胞的蛋白質合成，從而抑制細菌的生長，但嘌呤霉素抑制的效果明顯低于同劑量的紅霉素，試解釋這種現象。 6.盡管蛋白質的水解在熱力學上是有利的，但是由泛素介導的蛋白質選擇性降解卻需要消耗ATP。試解釋ATP對于這種形式的降解為什么是必需的。 7.簡述原核細胞與真核細胞(細胞質)的蛋白質生物合成的主要區別。如果要在原核細胞中高效表達真核細胞的基因，需要注意什么？ 8.什么是跳躍翻譯(Jump translation)和翻譯水平的內含子？如何確定一個蛋白質基因在翻譯中經歷了跳躍？ 9.什么是蛋白質內含子？如何證明某一種蛋白質在后加工反應中

13、經歷了剪接？ 10.在來源于大腸桿菌的無細胞翻譯系統之中，使用AUGUUUUUUUUUUUU作為模板，指導fMet-phe-phe-phe-phe的合成，在farsomycin存在下，該模板只能指導fMet-phe合成，試問：<br>(1)farsomycin抑制多肽鏈合成的哪一步？<br>(2)無抑制劑條件下得到的寡肽和有抑制劑條件下得到的二肽，哪一個在反應的最后是與tRNA相結合的，為什么？<br>(3)有那些抑制劑與farsomycin作用方式相似？ 11.使用等摩爾的ADP和UDP在多聚核苷酸磷酸化酶的作用下，得到的隨機共聚物作為mRNA，放入無細胞

14、翻譯系統中進行翻譯，會有那些氨基酸被參入？各種氨基酸的比率是多少？ 12.假如你純化得到一種新的蛋白質因子，但不知道它在細胞中的功能，你將采取什么樣的方法進行研究？ 13.請設計一個含有原核細胞必需的翻譯控制位點的編碼八肽Lys-Pro-Ala-Gly-Thr-Glu-Asn-Ser序列的mRNA。接觸過的大腸桿菌細胞中，分離得到一種能夠校正琥珀型突變的。你相信它的說法嗎？試解釋。的活性，這種抑制會有什么樣的生理功能？ 16.在大腸桿菌細胞中從mRNA和游離的氨基酸開始翻譯1分子76肽需要徹底氧化分解多少分子的葡萄糖以提供所需要的ATP？如果在厭氧細菌內合成同樣的多肽，則至少需要消耗多少分子的葡萄糖？噬菌體的突變體中，通過蛋白質指紋分析得到一變異的9肽，其氨基酸序列是Cys-Glu-Thr-Met-Ser-His-Ser-Tyr-Arg，而野生型噬菌體相當于這種9肽的肽段序列是Cys-Glu-Asp-His-Val-Pro-Gln-Tyr-Arg。試問這種突變是怎樣產生的？盡可能寫出指導以上這兩種多肽的mRNA的核苷酸序列。估計以上肽段在蛋白質中可能的功能。 18.在使用多聚核苷酸磷酸化酶(PNPase)催化形成的混合的共聚物體外翻譯實驗中，4/5C1/5A或4/5