1、液。分別在以上色譜條件下進行測定 , 得芍藥苷加 樣回收率平均值為 98. 1%, RSD 為 0. 9%; 阿魏酸 加樣回收率平均值為 99. 1%, RSD 為 1. 6%。本文應用高效液相色譜法同時測定芍藥苷和阿 魏酸 , 提取方法簡單 , 分析速度快 , 線性范圍廣 , 分析 精度好 , 回收率高 , 具有良好的靈敏度和重現性 , 可 用于八珍益母顆粒的質量控制。參考文獻 1 中國藥典 . 一部 . 1995. 367. 2 王寶. 中成藥質量標準與標準物質 研究 . 北京 :中國醫藥 科技出版社 , 1994. 59.3 梁 宏 , 王春芳 . 高效 液相色譜 法測 定八珍 丸中芍

2、藥苷的 含量 . 藥物分析雜志 , 1999, 19(1 :44.4 李 俊 , 胡志厚 , 劉良初 , 等 . 高效液相色譜法測定八珍制 劑中的芍藥甙 . 中國藥學雜志 , 1991, 26(5 :289.責任編輯 李 禾 黃芩苷對糖尿病患者紅細胞醛糖還原酶活性及腎小球濾過率的影響劉長山 , 馬麗麗 , 李 萍(山東省濰坊市人民醫院 , 山東 濰坊 261041糖尿病的主要危險是糖尿病慢性 并發癥 (dia -betic chronic complications, DCC 的發生 , 這些并發 癥常累及視網膜、 神經、 腎臟、 心臟等 , 是糖 尿病致 死、 致殘的主要原因。大量動物及人類

3、的研究證明 , DCC 的發生、 發展與多元醇通路的代謝密切相關 , 該通路的關鍵酶 醛糖還原酶 (aldose reductase, AR 在高糖條件下將葡萄糖轉化為大量不易透過細 胞膜的山梨醇 , 引起細胞的滲透性損傷 , 是 DCC 發 生的重要原因 , 使用醛糖 還原酶抑制 劑 (aldose re -ductase inhibitors, ARIs 引 起 了 廣泛 的 重 視1, 2。作者在以前的基礎研究中發現中藥黃芩的有效成分 黃芩苷不僅具有體內外抑制 AR 活性作用 , 而且對實 驗 糖 尿動 物 的多 種 并發 癥具 有 明 顯的 防 治 效 果 35, 本文在此基礎上觀察了

4、黃芩苷對糖尿病患 者紅細胞 AR 活性及早期糖尿病腎臟病變的主要指 標 腎小球濾過率 (GFR 的影響。 1 對象與方法1. 1 病例選擇 選擇 GFR 升高的 I 型或 II 型糖尿 病患者 35例 , 為我院住院及門診病人 , 糖尿病診斷 符合 ADA(1997 標準。 35例患者隨機分為對照組 和治療組。對照組治療措施包括 :糖尿病教育 , 飲食 控制 , 按標準體重計算 , 總熱量每日 104. 6kJ #kg -1, 每日蛋白質 0. 60. 8g #kg -1, 控制血糖應 用胰島 素或口服降糖藥物糖適平 ; 治療組在上述治療基礎收稿日期 2000-08-16上加黃芩 苷治療。其中

5、 , 對照 組 17例 (男 9, 女 8例 , 年齡 2168歲 (40. 7? 16. 9 歲 , 平均病程 (6. 8? 7. 3 年。治療組 18例 (男 9, 女 9例 年齡 1966歲 (35. 7? 14. 5 歲 , 平均病程 (6. 9? 7. 6 年 , 兩組年 齡、 性別構成、 體重指數及每日攝取熱量經統計學處 理 (t 檢驗 無差異。正常對照組 :健康人 16例 (男 10, 女 6例 , 年齡 2060歲 (39. 7? 10. 9 歲 , 無心、 肝、 腎疾病及高血壓、 糖尿病等。 1. 2 觀察方法 兩組糖尿病患者 , 晨起空腹肘靜脈 采血測定血糖及紅細胞 AR,

6、 同時測定 GFR, 然后 , 對照組維持原常規治療不變 , 治療組加服黃芩苷每 次 600mg , 每日 3次 (黃芩苷為上海中藥一廠生產 粉劑 , 裝膠囊服用 , 治療期間除降糖藥物 , 未用其他 藥物。療程 4周 , 治療結束后重復上述項目檢測。 1. 3 檢測項目與方法 紅細胞 AR 測定采用作者 設計的熒光法 6。 AR 活性測定的反應體系包括以 下成分 (最終濃度 :67mmol #L -1的鈉 -鉀磷酸緩沖 液 (pH 7. 0 , 0. 2mol #L -1的硫酸銨 , 0. 1mmol #L -1的 NADPH, 10mmol #L -1的 DL -甘油醛和紅細胞溶 血液 1

7、0L l, 總體積 1. 0ml 。空白管以雙蒸水代替 DL -甘油醛。在 37e 水浴反應 5min 后加 0. 3mol #L -1的 NaOH 2m l 終止反應。用日立 850型熒光分光光度計 在 367/455nm 條件下 測定相 對熒 光強 度 , 再從事先繪制的 NADP 熒光測定工作曲線上讀 出 NADP 含量。 1單位 (U 酶活性表示 1min 內 1L mol NADPH 被氧化的酶量 , 每份標本的 AR 活性#2001年 9月中 國 中 藥 雜 志C hina Journal of Chinese Materia MedicaVol. 26, No. 9Sep. ,

8、2001用單位 /克血紅蛋白 (U #g -1Hb 表示。GFR 采用 99m Tc -DTPA 腎動態顯 象測定 , 使用 SopatD 57型 SPECT 。 肘 靜 脈 內 /彈 丸 0式 注 射 99m Tc -DTPA , 立 即 進 行 動 態 采 集 顯 像 , 按 Gates 法 7計算 GFR 。血糖采用葡萄糖氧化酶法。1. 4統計學處理 兩樣本均數比較采用 t 檢驗 , P <0. 05為差別有顯著性。2結果2. 1正常對照組 AR, GFR 測定值 正常對 照組 AR 水平較低 , 本組 16人 , 空腹 血糖 (5. 01? 1. 38 mmol #L -1, A

9、R 活性 為 (0. 52? 0. 27 U #g -1H b 。 GFR 值為 (121. 2? 12. 8 ml #m in -1(均為 x ? s , 測定值為 95. 6146. 8ml #min -1, >150ml #min -1為升高 , <90ml #min -1為降低。2. 2黃芩苷對糖尿病患者紅細胞 AR 活性的影響 治療前兩組糖尿病患者 AR 活性相似 , 治療后治 療組顯著低于對照組 (P <0. 05 。治療前兩組血糖 相似 , 治療后均明顯低于治療前 (P <0. 05 , 兩組無 明顯差異 , 提示黃芩苷對血糖影響不大。見表 1。 表 1兩

10、組治療前后血糖、 紅細胞 AR 活性變化組別 例數 血糖 /mmol #L -1AR 活性 /U #g -1H b 對照組 17治療前 11. 21? 2. 385. 22? 3. 02治療后 7. 91? 2. 361 3. 02? 2. 121 治療組 18治療前 10. 91? 1. 365. 40? 2. 99治療后 8. 91? 1. 891 1. 22? 0. 241, 2 注 :¹與本組治療前比較 1 P <0. 05; 與對照組比較 2 P < 0. 05(表 2同 ºx ? s2. 3黃芩苷對糖尿病患者 GFR 的影響 治療前兩 組 GFR 相

11、似 , 兩組治療前后 GFR 結果見表 2, 兩組 均使 GFR 下降 (P <0. 05 , 而以治療組更為明顯 (P <0. 05 。表 2兩組治療前后 GFR 的變化 ml #min -1組別 例數 GFR對照組 17治療前 175. 4? 12. 1治療后 148. 1? 14. 21治療組 18治療前 181. 2? 13. 3治療后 122. 6? 13. 91, 23討論近年來的研究證明 , 糖代謝多元醇通路的代謝 增加是糖尿病腎臟病變的重要發病機制之一。國內 外大量研究及我們自己的實驗 15表明 , 在糖尿病 時高濃度的葡萄糖使多元醇通路代謝增加 , 導致山 梨醇大

12、量產生并在細胞內蓄積 , 產生滲透性損傷 , 造 成腎小球血管內皮細胞、 基底膜及上皮細胞結構的 破壞和功能的下降 , 最終導致腎臟病變的發生 1, 2。 因而使用 ARIs 就有可能預防、 控制糖尿病腎臟病 變的發生與發展。目前國外已合成了 4大類、 幾十 種 ARIs, 但因副作用較多 , 絕大部分尚在動物研究 和臨床試用階段。我們以前的基礎研究中發現中藥 黃芩體內外均可抑制 AR 活性 , 對實驗糖尿動物的 多種并發癥 具有明顯的防治 效果 38。本文在此 基礎上 , 觀察了黃芩苷對糖尿病患者紅細胞 AR 活 性及早期腎臟病變的主要指標 GFR 的影響 , 結 果表明 , 早期糖尿病腎病

13、患者在應用降糖藥物的基 礎上加用 4周黃芩苷治療后 , 患者 AR 活性明顯下 降 , 治療前后 GFR 這一公認的早期腎小球病變的指 標不僅治療前后改善明顯 , 而且改善程度高于單用 降糖藥物的對照組 , 提示黃芩苷對糖尿病早期腎臟 病變有一定療效。本研究的對照組治療后隨血糖降 低亦有一定程度的 AR 活性下降和 GFR 的改善 , 提 示高血糖在多元醇代謝途徑激活、 腎臟病變的發生 與發展中的始發與關鍵作用 , 因而也進一步強調了 控制血糖作為糖尿病腎臟病變基礎治療的重要性。 參考文獻 1M cAuliffe A V, Brooks B A, Fi sher E J, et al. Adm

14、inistration of Ascorbic Acid and an Aldose Reductase Inh i bitor (Tolrestat in Diabetes:Effect on U ri nary Album i n Ex creti on. Nephron, 1998, 80(3 :277.2Crabbe M J, Goode D. Aldose Reductase:A Window to the Treatment of Diabeti c Complications. Prog Retin Eye Res, 1998, 17(3 :313.3劉長山 , 朱禧星 . 7種

15、藥物對 醛糖還原 酶的抑制 作用 . 中國 中 藥雜志 , 1997, 22(6 :372.4劉長山 , 朱禧星 . 醛糖還原酶抑制 劑對糖尿 病 SD 大鼠組織 酶 活性和神經傳導速度影響 . 實用糖尿病雜志 , 1996, 4(1 :37. 5劉長山 , 陳惠黎 , 查錫良 , 等 . 黃芩 苷與黃連 素對糖尿 病 SD 大 鼠腎臟超微結構的影響 . 實用糖尿病雜志 , 1998, 6(3 :25. 6劉長山 . 紅細胞 AR 熒光測定法的建立及其 意義 . 實用糖尿 病 雜志 , 1999, 7(9 :20.7Gates G F. Glomerular Filtration Rate. Esti mation from Fraction -a