1、表皮生長因子類藥物近期研究概況及展望1 表皮生長因子作用及特點表皮生長因子系列主要包括表皮生長因子 （EGF、胰島素生長因子（IGF-1 ）、 堿性纖維原細胞生長因子（bFGF、酸性纖維原細胞生長因子（aFGFo其有滋潤 皮膚，消除皺紋，修復創傷，預防色斑等作用，另外對于人體骨骼系統、血液、 呼吸、分泌、生殖、免疫和神經系統均都有很好的調節作用。但表皮生長因子作為蛋白質多肽類藥物， 存在分子量大， 難以透過皮膚角質 層，穩定性差，半衰期短，對溫度、PH等外界環境敏感等缺點。2 表皮生長因子類國內外研究概況2.1 國內市售生長因子類產品概況目前，國內市售的生長因子及其衍生物劑型均為外用制劑， 包

2、括溶液劑、 凍 干粉、凝膠劑、滴眼液等。具體如下注射用鼠神經生長因子、凍干鼠表皮生長因 子、重組人表皮生長因子衍生物滴眼液、 重組人表皮生長因子凝膠、 重組人表皮 生長因子滴眼液、 重組牛堿性成纖維細胞生長因子凝膠、 外用重組人堿性成纖維 細胞生長因子、 外用重組人表皮生長因子衍生物、 外用重組人表皮生長因子、 外 用重組牛堿性成纖維細胞生長因子、重組牛堿性成纖維細胞生長因子眼用凝膠、 重組牛堿性成纖維細胞生長因子外用溶液、 重組牛堿性成纖維細胞生長因子滴眼 液、外用重組牛堿性成纖維細胞生長因子 （融合蛋白 ）、外用凍干重組人酸性成纖 維細胞生長因子等。2.2 表皮生長因子傳統劑型研制及應用概

3、況由上海大江集團股份有限公司制藥公司于 2002 年研制了外用凍干重組人表 皮生長因子，并申報國家一類新藥。 2003 年由上海信誼藥業有限公司研制出了 重組人表皮生長因子噴霧劑的制備方法。 2009 年由河北東方康星生物制藥有限 公司研制了外用凍干鼠皮生長因子。 2009年由第四軍醫大學研制出了一種多肽、 蛋白類藥物口腔黏膜吸收劑型的組方及制備方法。 有關生長因子溶液劑、 乳膏劑、 凝膠劑臨床應用及其與其他藥物連用治療皮膚創傷等報道較多， 暫不詳述。中國 人民解放軍軍事醫學科學院陸兵選取重組人表皮生長因子為模型藥物， 研究了其 穩定性，并將其分別制備成親水性凝膠劑及 W/0型乳膏劑，工藝簡單

4、，質量可靠， 使用方便。此外重組人表皮生長因子滴眼液也有見報道。2.3 在表皮生長因子新劑型應用研究概況2.3.1 脂質體、醇質體脂質體作為蛋白質類藥物載體的研究報道較多。 2009 年中國科學院上海藥 物研究所研制出了皮膚用表皮生長因子納米脂質載體制劑， 該制劑與皮膚有良好 的相容性，提高了表皮生長因子的穩定性。 2010 年由孫民富將表皮細胞生長因 子EGF及透皮短肽融合蛋白包合起來，制成了一種能用于防治糖尿病足壞疽的脂 質體，既保護了生長因子的活性，又增強了對皮膚的滲透力。 2012 年溫州醫學 院浙江格魯斯特生物科技有限公司采用薄膜分散 -凍干再水化法將 FGF-10 包裹 起來，增加

5、了蛋白的穩定性及其對皮膚的滲透力，并將其用于脫發疾病的治療。 北京協和醫學院的馮蘇云等將微針技術與乙醇脂質體結合應用于重組人酸性成 纖維細胞生長因子的透皮吸收研究中， 結果發現微針技術與乙醇脂質體結合能夠 取得較高的重組人酸性成纖維細胞生長因子透皮效果。2.3.2 微球 國內外許多報道都選擇將生長因子類藥物進行微囊化來提高生長因子的穩定性。制備方法有復乳液中干燥法如 VEGF聚乳酸-聚乙醇胺、IGF/PLGA等等， 但存在包封率不高， 具有突釋效應等特點； 另外有采用乳化交聯法的如廣東藥學 院石靖圓采用乳化交聯法制備空白明膠微球， 再通過反復振搖離心方法制備出了 轉化生長因子明膠微球， 體外初

6、步釋放結果顯示該微球具有緩釋效果。 但此種方 法對于水相和油相的黏度要求較高； 還有采用乳化冷凝法， 該法制備的緩釋微球 雖然包封率高，但是載藥量低，并具有一定的突釋效應。此外還有乳化分散法， 冷凍噴霧干燥法等等制備方法。復合微球的出現，有效抑制了普通微球的突釋， 所采用的方法包括在微球的表面再包裹上PLGA殼聚糖等保護材料等，都取得了良好的緩釋效果；另有將經過PEG修飾的水凝膠包封在生長因子緩釋微球表面， 同時采用交聯劑抑制水凝膠的降解，也取得了良好的緩釋效果。2.3.3 納米粒與微球相比， 納米粒物理穩定性更好， 且生物利用度更高， 靶向性更好的優 點。Chung等開發了用于運載VEGF的

7、經肝素修飾的PLGA納米粒，37天之內未發 生突釋，且靶向性良好。Tse ng等將生物素酰化的EGF(Begf)/明膠緩釋納米粒與 FITC標記的中性亂敗訴結合形成了殼-核樣的結構，驗證發現該結構靶向性較強。 由于殼聚糖具有獨特的生理和化學活性，可以保護DNA在體內不被降解，因此尹 登科等嘗試采用殼聚糖為載體， 制備了殼聚糖載基因納米粒， 結果發現該納米粒 能夠有效地轉入成纖維細胞中， 分泌的成堿性纖維細胞生長因子能促進纖維細胞 的增值。2.3.4 凝膠劑水凝膠劑經皮給藥系統的優勢是制備工藝簡單， 載藥量高，能保持皮膚水花， 促進藥物的經皮吸收。 水凝膠應用與皮膚局部的研究較多， 但關于蛋白質

8、類藥物 的應用報道尚不多見。 2011 年由中國科學院大連化學物理研究所研制出了一種 具有攜氧、抑菌材料并含有人體表皮生長因子的外用凝膠制劑。2.4 經皮給藥新技術在表皮生長因子中應用研究概況經皮給藥新技術包括微針技術、 滲透促進劑、離子導入、電致孔、超聲促滲、 光機械波、磁導入等。2.4.1 微針技術Martanto 等用微針對胰島素經皮給藥進行了體內研究 , 用微針組成的微針 陣列處理大鼠皮膚 , 在微針刺入的同時涂抹胰島素溶液于微針處理過的皮膚處 , 結果表明微針增加了胰島素的經皮滲透率 , 且快速穩定地降低了大鼠的血糖水平。 他們還通過組織切片比較了空心微針在插入皮膚后移除微針和不移除

9、微針兩種 方式對藥液滲透率的影響， 結果發現微針移除后藥物滲透速率顯著高于微針停留 在皮膚時的滲透速率。2.4.2 離子導入離子導入是應用適當的電流促進藥物分子經皮吸收的物理促滲方法， 該方法 在多肽類蛋白質藥物的經皮吸收中也有廣泛的應用。國際上離子導入在胰島素、 降血鈣蘇、 促黃體激素釋放激素、 精氨酸抗利尿激素等多肽蛋白質類藥物中應用 均有報道。2.4.3 微針與離子導入復合Che m等用離子導入法協同微針技術顯著提高了胰島素的經皮給藥滲透速率， 胰島素的皮膚透過率比單獨使用離子導入高 713.3 倍。韓曉等采用環形排布的 微針，以持續時間5ms電壓120v的電脈沖作用于皮膚，造成水性孔道

10、以增強 皮膚對胰島素的透過性。實驗證明，未經任何處理的皮膚胰島素完全無法透過，而以微針為電極的電穿孔裝置比單純使用微針能更有效地提高胰島素的透皮效 果。2.4.4 微針與超聲波導入復合Che m等研究如何改善大分子藥物皮膚透過率和透過速率，采用低頻中孔微 針對鈣黃綠素和牛血清白蛋白進行經皮給藥， 實驗表明微針穿刺與低頻超聲聯合 使用使藥物累積透過量最大化，高于單獨使用低頻超聲給藥或微針穿刺給藥。 3 表皮生長因子類藥物經皮給藥研究展望生長因子類藥物穩定性差， 半衰期短， 分子量大不易透過皮膚角質層。 針對 以上問題，結合國內外研究現狀，現提出以下幾種制劑方向：3.1 醇質體水凝膠劑含醇脂質體

11、, 又稱乙醇脂質體 ,是近年來頗受藥學和皮膚領域關注的新型的 柔性脂質體。乙醇脂質體與普通脂質體的主要區別在于乙醇包含在脂質體囊泡中 沒有膽固醇的成分。 乙醇脂質體除了具有一般脂質體可生物降解 ,無毒性, 不產生 皮膚刺激性的優點外 , 還具有以下功能 : 可以與生物的細胞膜融合 , 將包裹的內 容物傳遞進入細胞膜內；易于變形從而穿透皮膚屏障的各種孔隙，如穿透角質 層間的磷脂層以及毛囊皮脂腺等 ; 乙醇脂質體是一個兩性離子型表面活性劑 , 具有親油親水性 , 可以有效地包封各種化合物 ( 脂溶性、水溶性分子包括蛋白質多 肽類分子 ) 滲透到達皮膚深層。醇質體外觀性質為澄清、有乳光的黃色或乳白色

12、溶液 , 臨床上不便于直接用 于局部透皮給藥的治療 , 而且容易發生藥物的滲漏、聚集、融合等變化。而凝膠 劑和水凝膠貼片就是一個新趨勢 , 此類制劑作為一種生物粘附制劑 , 具有載藥量 大、無刺激、無致敏 , 生物相容性好 , 近年來逐漸成為臨床外用制劑的發展方向。 國外有將醇質體與凝膠、水凝膠帖片等劑型結合 , 或者與促滲劑、電致孔、微針 等新型透皮給藥技術聯合使用 , 以提高經皮給藥效率。國內也有類似報道，如閆 菁華將甘草次酸醇質體制備成水凝膠貼劑 , 與其空白醇質體加甘草次酸水凝膠貼 劑 , 甘草次酸水凝膠貼劑 , 甘草次酸醇水 (32%)溶液水凝膠貼劑進行體外透皮比較 結果表明甘草次酸

13、醇質體凝膠貼劑與其他組相比不僅能顯著增加甘草次酸的透 皮速率, 且增加了皮膚的累計透過量 ,達到緩釋效果。其他如中藥苦參方、酮洛芬、 槲皮素、鹽酸青藤堿醇質體凝膠制劑的制備研究均有報道。因此，為增加生長因子類藥物的經皮滲透性和穩定性并且方便給藥， 降低刺 激性，考慮可以將生長因子類藥物制成醇質體凝膠制劑。3.2 傳遞體凝膠Cevc 首次制備了柔性納米脂質體 （ 傳遞體 ） 克服了皮膚屏障。傳遞體是一 種自聚集泡囊，其主要組成成分為磷脂和表面活性劑 （ 如膽酸鈉，去氧膽酸鈉 等 ） ，通過其自身高度的變形性， 在非閉合給藥的情況下以皮膚自身存在的水和 梯度為驅動力， 能夠高效的通過比其自身小數倍的孔徑， 水溶性、 脂溶性的大分 子和小分子以傳遞體作為載體能夠順利的穿過皮膚，到達體內循環，發揮藥效。孔婷婷等采用超聲法和微射流法制備出了胰島素傳遞體， 并進行了性能比較， 發現兩者方法制得的傳遞體包封率相近，穩定性、變形性、透皮性均良好。舒泰 神北京生物制藥股份有限公司發明了一種神經生長因子組合物，其中，a-亞麻酸與微乳傳遞體發揮協同作用，大大提