1、 實(shí)驗(yàn)一 神經(jīng)干動(dòng)作電位坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的記錄、觀察一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)習(xí)電生理實(shí)驗(yàn)方法。2. 觀察蛙坐骨神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位的波形，并了解其產(chǎn)生的基本原理。二、實(shí)驗(yàn)原理神經(jīng)干在受到有效刺激后，可以產(chǎn)生動(dòng)作電位，標(biāo)志著神經(jīng)發(fā)生興奮。如果在神經(jīng)干另一端引導(dǎo)傳來(lái)的興奮沖動(dòng)，可以引導(dǎo)出雙相的動(dòng)作電位，如果在兩個(gè)引導(dǎo)電極之間將神經(jīng)麻醉或損壞，則引導(dǎo)出的動(dòng)作電位即為單相動(dòng)作電位。神經(jīng)細(xì)胞的動(dòng)作電位是以“全或無(wú)"方式產(chǎn)生的。坐骨神經(jīng)干是以由很多不同類型的神經(jīng)纖維組成的，所以，神經(jīng)干的動(dòng)作電位是復(fù)合動(dòng)作電位。復(fù)合動(dòng)作電位的幅值在一定刺激強(qiáng)度下是隨刺激強(qiáng)度的變化而變化的三、實(shí)驗(yàn)

2、材料（1） 動(dòng)物蟾蜍（2） 器械常用手術(shù)器械、蛙板、毀髓針、玻璃解剖針、神經(jīng)屏蔽盒、大頭針、任氏液、燒杯、培養(yǎng)皿。RM6240B生理信號(hào)記錄儀。四、實(shí)驗(yàn)步驟1、連接實(shí)驗(yàn)裝置：按下圖所示連接屏蔽盒與微機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)。地0123456刺激通道2通道12、雙毀髓：左手握蟾蜍，背部向上。用食指按壓其頭部前端，拇指壓住軀干的背部，使頭向前俯；右手持毀髓針，由兩眼之間中線向后方劃觸，觸及兩耳后腺之間的凹陷處即是枕骨大孔的位置。將毀髓針由凹陷處垂直刺入枕骨大孔，然后針尖向前刺入顱腔，在顱腔內(nèi)攪動(dòng)，以毀腦組織。再將毀髓針退至枕骨大孔，針尖轉(zhuǎn)向后方，與脊柱平行刺入椎管，以搗毀脊髓。脊髓徹底搗毀時(shí)，可看到

3、蟾蜍后肢突然蹬直，然后癱軟，此時(shí)的動(dòng)物為雙毀髓動(dòng)物。3、剝制后肢標(biāo)本：左手持手術(shù)鑷提起兩前肢之間背部的皮膚，右手持手術(shù)剪橫向剪斷皮膚，然后往后肢方向撕剝皮膚。剪開(kāi)腹壁肌肉，用手術(shù)鑷提起內(nèi)臟，翻向頭部，在看清支配后肢的脊神經(jīng)發(fā)出部位后，于其前方剪斷脊柱。4、分離兩后肢：將去皮的后肢腹面向上置于解剖盤上，右手持金冠剪縱向剪開(kāi)脊柱，再剪開(kāi)恥骨聯(lián)合，使兩后肢完全分離。 5、剝離蟾蜍一側(cè)后肢的坐骨神經(jīng)。坐骨神經(jīng)下行至腘窩處分為兩支：內(nèi)側(cè)為脛神經(jīng)，走行表淺；外側(cè)為腓神經(jīng)。沿脛、腓神經(jīng)走向分離至踝部，盡量將神經(jīng)干標(biāo)本剝離長(zhǎng)一些，要求上自脊神經(jīng)發(fā)出部位，下沿腓神經(jīng)與脛神經(jīng)一直分離到踝關(guān)節(jié)附近，剪斷側(cè)支。將神經(jīng)

4、干周圍的組織盡量剔除干凈(剝離時(shí)切勿損傷神經(jīng)干)結(jié)扎坐骨神經(jīng)干的脊柱端及脛、腓神經(jīng)的足端，游離神經(jīng)干。然后將坐骨神經(jīng)干標(biāo)本置于盛有任氏液的培養(yǎng)皿中，穩(wěn)定興奮性5 min。 6、 動(dòng)作電位的引導(dǎo) 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)?zāi)K：“實(shí)驗(yàn)” 肌肉神經(jīng)神經(jīng)干動(dòng)作電位 彈出刺激器對(duì)話框，并處于示波狀態(tài) 在刺激器對(duì)話框中選擇同步觸發(fā)。點(diǎn)擊“開(kāi)始刺激”鍵 ，屏幕上出現(xiàn)一屏“動(dòng)作電位”波形，以后每點(diǎn)擊“開(kāi)始刺激”鍵一次，波形即刷新一次。根據(jù)波形幅度可調(diào)節(jié)位于屏幕上顯示通道右側(cè)的靈敏度。參數(shù)調(diào)節(jié)后，應(yīng)再次點(diǎn)擊“開(kāi)始刺激”鍵，以刷新波形。可用“PgUp”與“PgDn”翻頁(yè)查找波形。選擇理想的波形用“保存當(dāng)前畫面”命令將其保存為正式

5、文件。當(dāng)然也可用保存命令將全部臨時(shí)文件保存為正式文件。測(cè)量坐骨神經(jīng)干的閾強(qiáng)度、最適刺激強(qiáng)度：調(diào)整刺激強(qiáng)度從0V遞增，測(cè)量復(fù)合動(dòng)作電位幅度，求得閾強(qiáng)度、最適刺激強(qiáng)度。在最適刺激強(qiáng)度下，觀察動(dòng)作電位形狀，測(cè)量其時(shí)程及幅度（正向波及負(fù)向波幅度）。.2 神經(jīng)損傷對(duì)復(fù)合動(dòng)作電位的影響在記錄電極間用鑷子夾傷神經(jīng)干，記錄動(dòng)作電位。觀察復(fù)合動(dòng)作電位有何變化。五、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：（1）制作標(biāo)本過(guò)程中應(yīng)盡量減少對(duì)神經(jīng)的牽拉；（2）要經(jīng)常保持標(biāo)本濕潤(rùn)；（3）神經(jīng)干應(yīng)與每個(gè)使用的電極密切接觸。并且扎主神經(jīng)的細(xì)線應(yīng)該盡量避免與測(cè)量區(qū)接觸，以防由于濕潤(rùn)導(dǎo)電而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后神經(jīng)屏蔽盒應(yīng)洗凈、擦干；六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)這是剛產(chǎn)生興奮時(shí)的波形（2）增大刺激強(qiáng)度后，獲得最適刺激強(qiáng)度為0.735v。七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析本次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，神經(jīng)的分離是最關(guān)鍵的一步，必須保持其組織