1、實驗二實驗二 凝集反應凝集反應凝集反應（agglutination)沉淀反應(precipitation)補體結合實驗中和實驗免 疫 酶 標 技 術 ( e g . ELISA)免疫熒光技術放射免疫技術發光免疫技術經典反應經典反應現代反應現代反應抗原抗體反應類型抗原抗體反應類型抗原或抗體的檢測方法抗原或抗體的檢測方法反應類型反應類型抗原類型及例子抗原類型及例子凝集反應凝集反應顆粒性顆粒性Ag， 如細菌、如細菌、RBC、表面結合可、表面結合可溶性溶性Ag的乳膠顆粒等的乳膠顆粒等沉淀反應沉淀反應可溶性可溶性Ag， 如血清中免疫球蛋白、補體、如血清中免疫球蛋白、補體、FP、HbsAg等等補體結合補體

2、結合實驗實驗有補體參與，有補體參與，SRBC和其溶血素組成指示和其溶血素組成指示系統系統中和實驗中和實驗特殊作用的特殊作用的Ag，如病毒、毒素、激素、酶，如病毒、毒素、激素、酶n1.1 1.1 經典的血清學反應經典的血清學反應1.2 1.2 現代的抗原抗體反應：現代的抗原抗體反應： 現代抗原抗體反應用標記技術代替傳統的肉眼可現代抗原抗體反應用標記技術代替傳統的肉眼可見反應，其特異性、敏感性均增加，且可以定性、見反應，其特異性、敏感性均增加，且可以定性、定量甚至定位；缺點是需特殊精密檢測儀定量甚至定位；缺點是需特殊精密檢測儀。 名稱名稱標記物標記物 檢測儀器檢測儀器缺點缺點免疫酶標技術免疫酶標技

3、術 酶酶酶標儀酶標儀 免疫熒光技術免疫熒光技術 熒光熒光熒光顯微鏡或流熒光顯微鏡或流式細胞儀式細胞儀 放射免疫技術放射免疫技術 同位素同位素 液閃儀液閃儀放射性污染，放射性污染，有半衰期有半衰期發光免疫技術發光免疫技術 發光劑發光劑 發光現微測定儀發光現微測定儀 凝集反應的定義及基本類型凝集反應的定義及基本類型 1直接凝集試驗 顆粒性Ag與相應Ab的反應 玻片法：如血型的鑒定、細菌菌種的鑒定 試管法：肥達氏反應 2間接凝集試驗 （可溶性Ag+載體=致敏顆粒）與相應Ab的反應 3間接凝集抑制試驗 可溶性Ag與相應Ab作用后，再與致敏顆粒反應 4. 反相間接凝集試驗 （可溶性Ab+載體=致敏顆粒)

4、與相應Ag的反應 試管凝集反應示意圖試管凝集反應示意圖肥達氏反應-用已知傷寒菌的H(鞭毛)和O(菌體)以及甲型(A)與乙型(B)副傷寒沙門氏菌的標準液與病人血清做凝集試驗，用于傷寒副傷寒的輔助診斷或用于流行病學調查的免疫凝集實驗。 人的紅細胞表面有20幾種血型抗原系統ABO血型系統是第一個被描述的紅細胞血型系統，由Landsteiner于1901年提出：血型ABABO紅細胞上的凝集原（抗原）ABA和B無抗原血型鑒定的原理血型鑒定的原理根據紅細胞上所含抗原種類將人類血型分為如下血型：ABO血型系統中有兩種抗原，分別稱為A抗原和B抗原，均存在于紅細胞膜的外表面。1. 抗原本質：血型抗原是鑲嵌于紅細

5、胞膜上的糖蛋白與糖脂，ABO抗原特異性是在H抗原基礎上形成的2. 抗體本質： 血漿中存在兩種相應的抗體即抗A抗體和抗B抗體血型ABABO紅細胞上的凝集原（抗原）ABA和B無抗原血清中的凝集素（抗體）抗B抗A無抗體抗A和抗B ABO血型系統的抗體為天然抗體天然抗體，主要為IgM，不能通過胎盤。1. 如果交叉配血試驗的兩側都沒有凝集反應，為配血相合， 可以進行輸血；2. 如果主側有凝集反應，則為配血不合，不能輸血；3. 如果主側不引起凝集反應，而次側有凝集反應，只能在應急情況下輸血，輸血時不宜太快太多（300ml），并密切觀察，如發生輸血反應，應立即停止輸注。 載玻片 1塊/每人 *用完各自用水沖

6、洗凈置消毒缸三棱針 1根/每人 用后棄垃圾斗棉簽 根/每人（先取再取1) 用后棄垃圾斗牙簽 1根/每人（兩端使用） 用后棄垃圾斗碘伏生理鹽水試管試管架標記筆實驗材料實驗材料操作步驟操作步驟 i 取血：搓揉左手無名指的指腹碘伏消毒用三棱針刺1-2滴血將無名指的指腹封住盛有鹽水的試管管口，用傾倒法將血滴洗入鹽水中并混勻形成1%的血球懸液。 ii 鑒定：取潔凈玻片一塊，用標記筆在中央劃線分區，標明“A”、“B”區在“A”、“B”區分別滴加抗A、抗B血清各1滴用毛細吸管吸取待檢的血球懸液滴入抗A、抗B血清中，用牙簽兩端分別拌勻將玻片平持手中，前后左右轉動使之充分混勻，室溫放置10-15分鐘后觀察結果。

7、 注意事項注意事項 取血時，注意無菌操作，避免HBsAg的交叉污染（*HBsAg攜帶者）； 刺血時，盡可能一次性成功，用力適當，讓血自然流出或搓揉后流出為佳，勿強行擠壓。 鑒定時，滴1滴抗血清及血球懸液即可，多則兩邊易混；牙簽兩頭不可混用； O型血無凝集現象，無須反復檢測。 血型血型抗抗B血清血清抗抗A血清血清O_A_+B +_AB+結果判斷結果判斷 ABO血型的遺傳規律血型的遺傳規律 ？父母血型分別為？父母血型分別為A型、型、B型，他們型，他們子女的血型可能是何種？子女的血型可能是何種？父母分別為？父母分別為A型和型和O型，子女有無型，子女有無可能是可能是B型型 思考思考三、E-花結形成實驗 原理原理 人的外周血T淋巴細胞上特有能與綿羊紅細胞結合的受體，稱E受體；在一定實驗條件下，綿羊紅細胞與該受體結合形成以T細胞為中心，四周繞以綿羊紅細胞的玫瑰花團，故稱E花結實驗。 E受體與CD2分子、LFA-2（淋巴細胞功能相關抗原）為同一物質。 花結花結分類：分類：Ea-RFC