1、實驗一藥酶誘導劑及抑制劑對戊巴比妥鈉催眠作用的影響【目的】以戊巴比妥鈉催眠時間作為肝藥酶體活性指標， 觀察苯巴比妥及氯霉素對戊巴比妥 鈉 催眠作用的影響，從而了解它們對肝藥酶的誘導及抑制作用?！驹怼勘桨捅韧诪楦嗡幟刚T導劑， 可誘導肝藥酶活性，使戊巴比妥鈉在肝微粒體的氧化代 謝 加速，藥物濃度降低，表現為戊巴比妥鈉藥理作用減弱，即催眠潛伏期延長，睡眠持 續時間 縮短。而氯霉素那么為肝藥酶抑制劑，能抑制肝藥酶活性，導致戊巴比妥鈉藥理作用增強，即催眠潛伏期縮短，睡眠持續時間延長?！緞游铩啃“资?8 只， 1822g【藥品】生理鹽水、 0.75% 苯巴比妥鈉溶液、 0.5% 氯霉素溶液、 0.5%

2、戊巴比妥鈉溶液【器材】天平、鼠籠、秒表、注射器1 ml X 4、5號針頭X 4【方法與步驟 】一、藥酶誘導劑對藥物作用的影響1、取小鼠 4 只，隨機分為甲、乙兩組。甲組小鼠腹腔注射 0.75% 苯巴比妥鈉溶液0.1 ml/10g ，乙組小鼠腹腔注射生理鹽水 0.1 ml/10g ，每天 1 次，共 2 天。2、 于第三天，給各小鼠腹腔注射 0.5%戊巴比妥鈉溶液 0.1 ml/10g ，觀察給藥后小 鼠 的反響。記錄給藥時間、翻正反射消失和恢復的時間，計算戊巴比妥鈉催眠潛伏期及 睡眠持 續時間。二、藥酶抑制劑對藥物作用的影響1、取小鼠 4 只，隨機分為甲、乙兩組。甲組小鼠腹腔注射 0.5%氯霉

3、素溶液 0.1 ml/10g ； 乙組小鼠腹腔注射生理鹽水 0.1 ml/10g 。2、 30 分鐘后，給各小鼠腹腔注射 0.5%戊巴比妥鈉溶液 0.1 ml/10g ，觀察給藥后小 鼠 的反響。記錄給藥時間、 翻正反射消失和恢復的時間，計算戊巴比妥鈉催眠潛伏期及 睡眠 持續時間?！窘y計與處理 】以全班結果睡眠持續時間，分作分組 t 檢驗，檢驗用藥組與對照組有無顯著性 差 異。參見“數理統計在藥理學實驗中的應用 【本卷須知 】反射醒。1、催眠潛伏期為開始給藥到動物翻正反射消失的間隔時間，睡眠持續時間為翻正 消失至恢復的間隔時間。2、本實驗過程中，室溫不宜低于 20 C ，否那么戊巴比妥鈉代謝減

4、慢，使動物不易蘇3、氯霉素溶液有結晶析出時可在水浴中加熱溶解。4、吸取氯霉素溶液的注射器應預先枯燥，否那么易結晶堵塞針頭?！舅伎碱} 】1、何謂肝藥酶誘導劑與抑制劑？2、試從理論上解釋苯巴比妥及氯霉素對戊巴比妥鈉睡眠時間的影響。實驗二 家兔血漿中水酸鈉 濃度測定和 藥代動力學參數測定 【實驗目的】1. 以水酸鈉為例了解血漿藥物濃度隨時間變化的時量關系。2. 了解藥代動力學參數的臨床意義?！緦嶒灢牧稀?. 動物：家兔 1 只，雌雄不限，體重 2.5+0.5 kg。2. 器材：試管 5 支、離心管 3 支、試管架、小玻棒、 l0ml 吸管、注射器 1 ml、5ml 、l0ml 、手術器械、動脈插管、

5、動脈夾、721 分光光度計、離心機3. 試劑和藥品： 25%氨基甲酸乙酯、 10%及 0.02% 水酸鈉溶液、 10%三氯 醋酸溶液、 10% 三氯化鐵溶液?！緦嶒灢襟E】1. 實驗準備：取離心管3支及試管5支，編號備用，麻醉烏拉坦4ml/Kg , 13號離心管及 4、 5 號試管中分別參加 1 0%三氯醋酸 7ml2. 手術：頸動脈取血 2ml, 放入 1 號離心管3. 給藥：耳緣靜脈注入 1 0%水酸鈉，150mg/Kg ，取血 5,35min 分別取血 2ml 放入 2、 3 號離心管，4、5 試管分別參加蒸餾水及0.02% 水酸鈉 2ml4. 離心：2000r/分，5min，取上清液6m

6、l，參加10%三氯化鐵12滴，比色5min 后，波長510nm，計算結果?！颈揪眄氈?. 注意頸總動脈插管術。2 .取血時，要先用0.1%肝素潤濕注射器和針頭，取血后用肝素封管，防止 血液 凝固，每次取出血第 1ml棄去不用，再吸取 2ml置于離心管3. 給藥時間及給藥后取血時間要記清。4. 取上清夜時，要先將上清液倒入編號相對應的試管中，再吸取所需的ml數，以免吸入沉淀影響比色，注意吸管要對號使用。5. 計算Vd, CL時注意單位換算。實驗結果】管號光密度X水酸鈉濃度丫g/100ml標準管5號X0.02給藥后5min 2號X 1C 1給藥后35min 3號X 2C 2計算：1、半衰期t 1

7、/2 K=y/xC1=kx1,C2=kx2 單位 :g/100ml t 0.301t 1/2=單位： min log C1 log C2 / t注:k為去除速率常數，y為0.02g/100m1,x為標準管即5號管的光密度值C1, C2分別為給藥后 5、35分鐘取血時的血藥濃度； t為兩次取血的時間差2、表觀分布容積Vd :C0=C1 X lg -1 0.301 X t 1/t 1/2單位： g/100mlVd=D°/C。單位：L/Kg 注：Do為用藥初始劑量150mg/Kg , t1為用藥后到第一次取血的時 間間隔3、去除率CL:CL=0.693/t 1/2 X Vd 單位： ml/

8、min.Kg 實驗三氨茶堿的血藥濃度測定及藥動學研究實驗目的】掌握血清中氨茶堿血藥濃度的紫外測定法，掌握血清中茶堿提取法，驗證氨茶堿的動力學模型，掌握二房室動力學模型的參數計算方法。用有機溶劑將血清 中的氨茶堿提出，用紫外測定法根據標準曲線測出氨茶堿濃度，用殘差法運用計算機進行數據處理、曲線描繪及參數計算，從而驗證氨茶堿動力學模型，使大家 對藥動學研究有一初步的了解。實驗原理】1. 氨茶堿為臨床常用平喘藥，由茶堿與乙二胺縮合而成。在酸性條件下,可用有機溶劑從血清中提取出茶堿 ,再用堿液將茶堿從有機溶劑中提出。測 量入274和入298處的吸光度A274為茶堿和本底，即溶劑、血清的吸 光度，A29

9、8為本底的吸光度， AA= A274-A298。2. 氨茶堿經靜脈進入血液，隨血液循環進行組織分布，到達平衡后轉入消除相。 時量曲線呈二房室動力學模型。3. 房室模型是抽象的數學模型， 它的劃分與解剖學部位或生理學功能無關 藥 物轉運速率相同或相近的部位可劃分為同一房室。房室模型可以分為一 室模型、 二室模型、 多室模型。大多數藥物在體的轉運和分布符合二室 模型。 即藥物靜脈 注射入血后，首先快速進入血流量大的組織，如心、 肝、腎、肺、腦等，然后緩 慢地向血流量小的組織，如脂肪組織、靜止的 肌肉組織等轉移?！緦嶒灢牧稀?、動物家兔 1 只，雌雄不限，體重 2.5+0.5 kg2、藥品 氨茶堿標

10、準液3、試劑0.1mol/L HCl0.1mol/L NaOH 異丙醇：氯仿抽提液 5:95 。4、儀器754 型紫外分光光度計 液體渦旋混和器 數學坐標紙一 半對數坐標紙 一?！緦嶒灧椒ā? 動物實驗局部1.1 取健康家兔 1 只，稱重，將家兔置于兔臺。1.2 在家兔一耳緣注射部位去毛、 熱敷和消毒，待血管擴后， 以左手 拇指與食指 壓住靜脈耳根端，使靜脈充盈，給藥前用 12 號針頭自 耳靜脈取血 1-1.5ml ， 7 號針頭平行刺入靜脈，抽動針管，見有回血 即可推注。對其靜脈注射氨茶 堿 15mg/kg 。1.3 另一耳用銳利刀片切割取血。 分別在給氨茶堿后 5、10、20、 30、60

11、、 120 、 180 、 300 、 420min 取血。1.4 別離血清， 各管均取血清 0.5ml 于 15ml 試管中，加 0.1mol/L 鹽酸 0.2ml 、 抽提液 5ml，振搖混合， 2500r/min離心 10min。2 血藥濃度測定紫外分光光度法2.1 吸取下層氯仿液 4ml 置另一試管中，參加 0.1mol/L NaOH 溶液 4ml， 振搖混 勻， 2500r/min 離心 10min 。2.2吸取上層堿液，以O.1mol/L NaOH溶液4ml作參比，振搖混勻，2500r/min 離心10min。測定其在 入274和入298處的吸收度A274和A298 ，計算 A。3

12、制作茶堿標準曲線： 取5支試管，依次參加茶堿標準液20、40、60、80、100 U , 各參加 0.1mol/L NaOH 溶液 4ml，終濃度依次為 0.5、1.0、1.5、2.0、 2.5 Mg/ml，測定各管的A274和A298，計算 A。以茶堿濃度為橫坐標，A為縱坐標描點 繪圖，用Excel軟件求直線回歸方程，即為茶堿標準曲線的直線方程圖示。4. 將測得血清樣品的A代入標準曲線的方程，求得相應的C，C X 10即為茶堿的血藥濃度。以時間為橫坐標，濃度對數為縱坐標，用CAPP 軟件描點做圖，判斷氨茶堿在體代謝的房室模型。時間min 5C ( M/ml )血藥濃度M/ml 1020306

13、0120240480【本卷須知】1. 紫外分光光度計使用前需預熱30min并激發氫燈。2. 振搖混勻藥液時防止濺出并準確加樣。3. 樣品離心前需配平。4. 測量時假設更換波長，必須重新調節0和100%?！居懻摗?. 氨茶堿的時量曲線呈幾房室模型？為什么？2. 為何要測兩個波長下茶堿的吸光度并取其差值？3. 試述藥動學參數 V1、Vd、t1/2 a t1/2 休 K10、K12、K21、Cl、AUC 的含 義。實驗四 體液 pH 對水酸鈉排泄的影響實驗目的】1學習尿液中水酸的檢測方法，掌握體液 pH 對藥物排泄的影響及其臨床意 義。2 熟悉大鼠代謝籠的使用，穩固大鼠的各種給藥方法?！緦嶒炘怼克?/p>

14、酸鈉經腎臟排泄物為水酸，尿液 pH 對水酸排泄影響非常大，當尿 液呈酸 性時僅排泄 5%而尿液呈堿性時那么排泄大約85% 。尿液中的水酸遇到三氯化鐵后可生成紫色絡合物， 根據反響后溶液 紫色深淺 可以定性分析水酸鈉排泄量的多少?！緦嶒灢牧稀?. 動物 大白鼠，雌雄不限，200300g。2器材 大白鼠代謝籠兩個，天平一個，棉手套一只，大鼠灌胃器兩個，5毫升注射器兩個，6號針頭兩個，30ml量筒1個，50ml注射器2 個。3 .藥品 5% 碳酸氫鈉溶液， 15% 氯化氨溶液，單盲法配制并編號 為 A、B， 2%水酸鈉溶液， 1 %三氯化鐵溶液， 5%葡萄糖生理鹽水， 蒸餾水，苦味酸， 1% 速尿。

15、 【實驗方法】1. 取大白鼠兩只稱重并編號。2. 給其中一只按 0.5ml/100g 灌胃 A 藥液，給另一只以同樣劑量灌胃 B 藥液。3. 30 分鐘后給兩只大鼠灌胃5%葡萄糖生理鹽水 2ml/100g 。4. 30分鐘后，分別給兩只大鼠腹腔注射2%水酸鈉溶液 1ml/100g 及 1%速尿 0.2ml/100g 。5. 收集各鼠 30 分鐘尿液， 將收集的尿液分別用蒸餾水稀釋到 30ml， 加 1% 三氯化鐵 5ml ，比較紫色深淺。【實驗結果】表2-1體液pH值對水酸鈉排泄的影響鼠號體重g藥物尿液反響后顏色結果分析1A2B本卷須知】1.實驗步驟進行到4后，再將集尿籠插入代謝籠中，以免收集

16、尿液 前將集尿籠污染。2 .實驗用燒杯、量筒、注射器、集尿籠應清洗干凈，否那么影響反響PH，導 致實驗結果不準確?！舅伎碱}】1. 藥物的排泄途徑有哪些？影響藥物排泄的因素有哪些？2. 體液pH還對藥物的哪些體過程有影響？有何臨床意義？3. 實驗中給予碳酸氫鈉、氯化氨、葡萄糖生理鹽水、速尿等藥物的 目的各是什么？4. 根據反響后溶液紫色深淺為什么可以定性分析水酸鈉排泄量的多少？寫出水酸與三氯化鐵的反響式實驗五酚磺酞藥代動力學參數的測定【實驗目的】測定 PSP 在家兔體藥代動力學參數?！緦嶒炘怼糠踊翘? Phenolsulfonphthalein ， PSP )，又名酚紅。靜脈注射后，不 在體代

17、謝，主要經腎近曲小管分泌排泄，屬于一室模型一級動力學消除。PSP 在堿性 環境中變為紅色，可用可見分光光度計于波長 560 nm 處進行定量測定。 【實驗材料】1、動物家兔1只，2.53.0 kg，雌雄不限2 、藥品0.6%PSP溶液、 PSP標準溶液(0.5、1、2 ymol/L )、3%戊巴比妥溶 液、稀釋液( 0.9% NaCl 29 ml + 1 mol/L NaOH 1ml )3、器材兔臺、手術剪刀X 2、止血鉗X 2、眼科鑷子X 2、注射器(5 ml X 1、2 ml X 1)、抗凝試管X 5、試管架、離心機、分光光度計、比色杯(0.5ml X 5)、加液器(1 ml X 1 ,

18、250 / X 1)、燒杯、酒精棉球、干棉球、繩X 4、線【實驗步驟】1、家兔稱重，用 3戊巴比妥( 1 ml/kg )耳緣靜脈麻醉，仰臥，固 定于兔板上，切開頸部皮膚，暴露頸淺靜脈，從其下緣穿一線，備取血 時用。2 、用 1ml 枯燥注射器從頸淺靜脈取血約 1 ml ，然后由耳緣靜脈注射 0.6 PSP 溶液，按 0.4 ml/kg 給藥，注射后分別在 5、10、15、25分鐘各取血約1 ml ,置于備好的抗凝試管，離心(2000轉/分)10分鐘。3、PSP標準液的平均吸收系數K的測定：取PSP標準液0.5、1、2 pmol/L及蒸餾水各1.55 ml，再各參加1 mol/L NaOH 0.05 ml，于波長560 nm處比色，測得吸收度(A)，并計算出平均 吸收系數(K)值。4、 取血漿樣品0.1ml，放入0.5 cm的比色杯，參加稀釋液1.5 ml搖 勻(稀 釋了 16倍)，于560nm處比色，記錄其吸收度。5、PSP血漿濃度計算：APSP 血漿濃度 (mg / L ) =16 0.354 10K(PSP的分子量為354，比色時取血漿 0.1ml，稀釋了 16倍)6、藥代動力學參數計算：(1) 計算5、10、15及25分鐘時PSP的血漿濃度(Ct)(2) 以時間(t )與血漿濃