1、1.1 dna重組技術重組技術的基本工具的基本工具問題引領問題引領1、基因工程的定義、基因工程的定義2、基因工程的三種工具名稱、基因工程的三種工具名稱3、限制酶的來源、種類、作用、結果、限制酶的來源、種類、作用、結果4、dna連接酶的種類、作用連接酶的種類、作用5、質粒的特點、標記基因的作用、質粒的特點、標記基因的作用6、載體必備的、載體必備的5個條件、種類個條件、種類基因工程的概念基因工程的概念基因工程的別名基因工程的別名操作環境操作環境操作對象操作對象操作水平操作水平原理原理目的目的dnadna重組技術重組技術生物體外生物體外基因基因dnadna分子水平分子水平人類需要的生物類型和生物產品

2、人類需要的生物類型和生物產品基因重組基因重組基因工程概念的分析基因工程概念的分析 dnadna重組技術重組技術的基本工具的基本工具“分子手術刀分子手術刀”-“分子縫合針分子縫合針”-“分子運輸車分子運輸車”-限制性核酸內切酶限制性核酸內切酶dnadna連接酶連接酶載體載體一、限制性核酸內切酶一、限制性核酸內切酶“分子手術刀分子手術刀” 1 1、來源：、來源： 主要是原核生物（約主要是原核生物（約300300種）種） 2 2、種類：、種類： 3 3、作用：、作用： 4 4、結果：、結果：約約40004000種種識別雙鏈識別雙鏈dnadna分子的某種分子的某種特定的核特定的核苷酸序列苷酸序列，并且

3、使每一條鏈中，并且使每一條鏈中特定特定部位部位的兩個核苷酸之間的的兩個核苷酸之間的磷酸二酯磷酸二酯鍵鍵斷開。斷開。形成兩種末端形成兩種末端黏性末端黏性末端平末端平末端1 1、ecoriecori只能識別只能識別gaattcgaattc的核苷酸序列且的核苷酸序列且 只能從只能從g g和和a a之間切開，畫出切割結果：之間切開，畫出切割結果：2 2、smaismai只能識別只能識別cccgggcccggg的核苷酸序列且只的核苷酸序列且只 能從能從c c和和g g之間切開之間切開, ,畫出切割后的結果：畫出切割后的結果： gaattccttaagecoricccggggggcccsmai練習：練習：

4、3 3、課本、課本p6p6的的“模擬制作模擬制作”4 4、p7“p7“思考與探究思考與探究”第第1 1題題1 1、種類：、種類：2 2、作用部位：、作用部位：e ecoli dnacoli dna連接酶連接酶t t4 4 dna dna連接酶連接酶磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵 二、二、 dnadna連接酶連接酶“分子縫合針分子縫合針”（黏性末端）（黏性末端）（黏性末端和平末端）（黏性末端和平末端）gaattccttaagecori練習：練習：gaattccttaagecori( )( )三、三、載體載體“分子運輸車分子運輸車”1 1、載體的作用、載體的作用將將 轉移到受體細胞中去。轉移到受體細胞中去。

5、目的基因目的基因2 2、常用的載體、常用的載體 質粒、質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒噬菌體的衍生物、動植物病毒3 3、作為載體必須具備的、作為載體必須具備的5 5個條件個條件練習：練習：1 1、畫出一個載體模式圖、畫出一個載體模式圖2 2、p7“p7“思考與探究思考與探究”的第的第2-42-4題題1 1、關于限制酶的說法中，正確的是、關于限制酶的說法中，正確的是a a、限制酶是一種酶，只識別、限制酶是一種酶，只識別gaattcgaattc堿堿 基序列基序列b b、ecoriecori切割的是切割的是g ga a之間的氫鍵之間的氫鍵c c限制酶一般不切割自身的限制酶一般不切割自身的dnadna

6、分分 子，只切割外源子，只切割外源dnadnad d限制酶只存在于原核生物中限制酶只存在于原核生物中課堂鞏固c2 2、基因工程的載體，必須具備的條件及、基因工程的載體，必須具備的條件及 理由是理由是( )( )a a、能夠在宿主細胞中穩定地保存下來并、能夠在宿主細胞中穩定地保存下來并 大量復制，以便提供大量的目的基因大量復制，以便提供大量的目的基因b b、具有多個限制酶切點，以便于目的基、具有多個限制酶切點，以便于目的基 因的表達因的表達c c具有某些標記基因，以便為目的基因具有某些標記基因，以便為目的基因 的表達提供條件的表達提供條件d d、能夠在宿主細胞中復制并穩定保存，、能夠在宿主細胞中復制并穩定保存， 以便于進行篩選以便于進行篩選a3 3、質粒是基因工程最常見的載體，它的、質粒是基因工程最常見的載體，它的 主要特點是主要特點是( )( )能