1、3、基因操作的工具、基因操作的工具（1）基因的剪刀）基因的剪刀 。分布分布： 。作用特點作用特點： ，即識別特定核苷酸序，即識別特定核苷酸序列，切割特定切點。列，切割特定切點。結果結果： （堿基互補配對）（堿基互補配對）（2）基因的針線）基因的針線 。連接的部位連接的部位： （梯子的扶手），（梯子的扶手），不是氫鍵（梯子的踏板）。不是氫鍵（梯子的踏板）。結果結果： 。限制性內切酶限制性內切酶主要在微生物中主要在微生物中特異性特異性產生黏性末端產生黏性末端DNA連接酶連接酶磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵兩個相同的黏性末端的連接兩個相同的黏性末端的連接3、基因操作的工具、基因操作的工具（3）基因的運載工具）

2、基因的運載工具 。作用作用： 。具備的條件具備的條件：能在：能在 內復制并穩定地保存；內復制并穩定地保存；具有具有 ；具有某些；具有某些 基因。基因。種類種類： 、 和和 。質粒的特點質粒的特點：質粒是基因工程中最常用的：質粒是基因工程中最常用的 ；最常用的質粒是最常用的質粒是 的質粒；存在于許多細菌的質粒；存在于許多細菌及酵母菌等生物中；質粒的存在對宿主細胞及酵母菌等生物中；質粒的存在對宿主細胞 ；質粒的復制只能在質粒的復制只能在 內完成；細胞染色體外能內完成；細胞染色體外能自主復制的小型自主復制的小型 。運載體運載體將外源基因送入受體細胞將外源基因送入受體細胞宿主細胞宿主細胞多個限制酶切點

3、多個限制酶切點標記標記質粒質粒噬菌體噬菌體動植物病毒動植物病毒運載體運載體大腸桿菌大腸桿菌無影響無影響宿主細胞宿主細胞環狀環狀DNA分子分子例例1 1：實施基因工程第一步的一種方法是把所需的基因實施基因工程第一步的一種方法是把所需的基因從供體細胞內分離出來，這要利用限制性內切酶。一種從供體細胞內分離出來，這要利用限制性內切酶。一種限制性內切酶能識別限制性內切酶能識別DNA分子中的分子中的GAATTC順序，切點順序，切點在在G和和A之間，這是應用了酶的（之間，這是應用了酶的（ ）A、高效性、高效性B、專一性、專一性C、多樣性、多樣性D、催化活性受外界條件影響、催化活性受外界條件影響B例例2 2：

4、下列黏性末端屬于同一種限制酶切割而成的是下列黏性末端屬于同一種限制酶切割而成的是（ ）A、B、C、D、B4、基因操作的基本步驟、基因操作的基本步驟（1） （人們所需要的的基因）。（人們所需要的的基因）。提取途徑有兩條提取途徑有兩條：一條是從一條是從 ；另一種是另一種是 。人工合成方法人工合成方法有有 （利用（利用mRNA）；）；根據根據 推測出核苷酸序列，推測出核苷酸序列，通過化學方法合成通過化學方法合成 。（2） （以質粒為運載體）。（以質粒為運載體）。步驟步驟：用一定的：用一定的 切割質粒；用切割質粒；用 切割目的基因；加入切割目的基因；加入 ；質粒和目的基因結合成質粒和目的基因結合成 分

5、子。分子。結果結果：可能有三種情況：目的基因與目的基因結合；質：可能有三種情況：目的基因與目的基因結合；質粒與質粒結合；目的基因與質粒結合。粒與質粒結合；目的基因與質粒結合。提取目的基因提取目的基因供體細胞的供體細胞的DNA中直接分離基因中直接分離基因人工合成基因人工合成基因反轉錄法反轉錄法蛋白質中氨基酸的序列蛋白質中氨基酸的序列DNA目的基因與運載體結合目的基因與運載體結合限制酶限制酶同一種限制酶同一種限制酶DNA連接酶連接酶重組重組DNA4、基因操作的基本步驟、基因操作的基本步驟（3） 。導入方法導入方法： 。導入過程導入過程： 。（4）目的基因的表達與檢測）目的基因的表達與檢測檢測檢測：

6、根據受體細胞中是否具有：根據受體細胞中是否具有 ，判斷目的基因導入與否。判斷目的基因導入與否。如大腸桿菌質粒中含抗青霉素基因，把某種生物放入帶如大腸桿菌質粒中含抗青霉素基因，把某種生物放入帶有青霉素的培養基中培養，若有抗性，說明導入成功；有青霉素的培養基中培養，若有抗性，說明導入成功；若無抗性，說明導入失敗。若無抗性，說明導入失敗。表達表達：受體細胞表現出：受體細胞表現出 ，如棉花抗，如棉花抗蟲性狀的表現。蟲性狀的表現。將目的基因導入受體細胞將目的基因導入受體細胞借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑運載體為質粒，受體細胞為細菌運載體為質粒，受體細胞為細菌標記基因標記基因特定

7、的性狀特定的性狀例例3 3：下列關于基因工程的敘述，正確的是（下列關于基因工程的敘述，正確的是（ ）A、重組、重組DNA技術所用的工具本科是限制酶、連接酶和技術所用的工具本科是限制酶、連接酶和運載體運載體B、所有限制酶都只能識別同一種按規定排列的核苷酸、所有限制酶都只能識別同一種按規定排列的核苷酸序列序列C、選用細菌作為重組質粒的受體細胞是因為細胞繁殖、選用細菌作為重組質粒的受體細胞是因為細胞繁殖快快D、只要目的基因進入了受體細胞就能成功地實現表達、只要目的基因進入了受體細胞就能成功地實現表達C例例4 4：以下說法正確的是（以下說法正確的是（ ）A、所有的限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列、所

8、有的限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列B、質粒是基因工程中唯一的運載體、質粒是基因工程中唯一的運載體C、運載體必須具備的條件之一是具有多個限制酶切點，、運載體必須具備的條件之一是具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接以便與外源基因連接D、基因治療主要是對有缺陷的細胞進行修復、基因治療主要是對有缺陷的細胞進行修復C例例5 5：上海醫學遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶白蛋上海醫學遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶白蛋白的轉基因牛，他們還研究出一種可大大提高基因表達白的轉基因牛，他們還研究出一種可大大提高基因表達水平的新方法，使轉基因動物乳汁中藥物蛋白含量提高水平的新方法，使轉基因動物乳汁中藥物蛋白含量提

9、高30多倍，轉基因動物是指（多倍，轉基因動物是指（ ）A、提供基因的動物、提供基因的動物B、基因組中增加了外源基因的動物、基因組中增加了外源基因的動物C、能產生白蛋白的動物、能產生白蛋白的動物D、能表達基因信息的動物、能表達基因信息的動物B例例6 6：基因工程是在基因工程是在DNA分子水平上進行設計施工的，分子水平上進行設計施工的，在基因操作的基本步驟中，不進行堿基互補配對的步驟在基因操作的基本步驟中，不進行堿基互補配對的步驟是（是（ ）A、人工合成基因、人工合成基因B、目的基因與運載體結合、目的基因與運載體結合C、將目的基因導入受體細胞、將目的基因導入受體細胞D、目的基因的檢測和表達、目的基

10、因的檢測和表達C3、基因操作的工具、基因操作的工具（1）基因的剪刀）基因的剪刀 。分布分布： 。作用特點作用特點： ，即識別特定核苷酸序，即識別特定核苷酸序列，切割特定切點。列，切割特定切點。結果結果： （堿基互補配對）（堿基互補配對）（2）基因的針線）基因的針線 。連接的部位連接的部位： （梯子的扶手），（梯子的扶手），不是氫鍵（梯子的踏板）。不是氫鍵（梯子的踏板）。結果結果： 。限制性內切酶限制性內切酶主要在微生物中主要在微生物中特異性特異性產生黏性末端產生黏性末端DNA連接酶連接酶磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵兩個相同的黏性末端的連接兩個相同的黏性末端的連接4、基因操作的基本步驟、基因操作的基本步

11、驟（3） 。導入方法導入方法： 。導入過程導入過程： 。（4）目的基因的表達與檢測）目的基因的表達與檢測檢測檢測：根據受體細胞中是否具有：根據受體細胞中是否具有 ，判斷目的基因導入與否。判斷目的基因導入與否。如大腸桿菌質粒中含抗青霉素基因，把某種生物放入帶如大腸桿菌質粒中含抗青霉素基因，把某種生物放入帶有青霉素的培養基中培養，若有抗性，說明導入成功；有青霉素的培養基中培養，若有抗性，說明導入成功；若無抗性，說明導入失敗。若無抗性，說明導入失敗。表達表達：受體細胞表現出：受體細胞表現出 ，如棉花抗，如棉花抗蟲性狀的表現。蟲性狀的表現。將目的基因導入受體細胞將目的基因導入受體細胞借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑運載體為質粒，受體細胞為細菌運載體為質粒，受體細胞為細菌標記基因標記基因特定的性狀特定的性狀例例4 4：以下說法正確的是（以下說法正確的是（ ）A、所