1、結核病患者外周血淋巴細胞亞群檢測及臨床應用專家共識(2020 )要點結核病(TB )是嚴重威脅人類健康的呼吸道傳染病。TB發生、發展及轉 歸取決于入侵結核分枝桿菌(MTB )的數量、毒力及機體免疫抵抗力。因 此，對TB患者免疫狀況的評估和了解其臨床免疫學特征是近年來硏究的 熱點之一。通過流式細胞術(FCM )分析患者外周血淋巴細胞亞群是目前 臨床評估免疫功能的方法之一，有助于了解患者當前的免疫狀態、免疫功 能和免疫平衡,為臨床制定免疫干預措施、觀察療效及判斷預后等方面提 供實驗室檢測依據。該項目在免疫性疾病、血液病、腫瘤和艾滋病等臨床 應用廣泛，但在TB臨床的應用較有限，認識不足。淋巴細胞亞群

2、分析涉 及多個指標，各指標之間關系復雜，如何正確解讀、客觀分析、科學判斷 結果，指導TB臨床診斷和治療，對于TB防控具有現實意義。臨床常用的淋巴細胞亞群分析項目目前，臨床常規分析的人類外周血淋巴細胞亞群根據其細胞表面或細胞內 獨特的分化抗原(CD )的表達可分為：T淋巴細胞(CD3+)、B淋巴細胞 (CD19+ )和自然殺傷(NK)細胞 CD3-CD16+CD56+)。、檢測原理 應用各種熒光染料標記的單克隆抗體分別結合待檢測血液標本中各類淋 巴細胞膜表面或胞內獨特的CD,然后通過流式細胞儀將染色后的血液細胞 制成單細胞懸液，用一定壓力將待檢測樣品壓入流式細胞儀流動室，待測細 胞在鞘液的包被下

3、單行排列，依次通過流式照射室檢測區域。二、檢測方法1. 淋巴細胞亞群相對計數法：2. 淋巴細胞亞群絕對計數法：三、檢測報告內容應用FCM常規分析下列淋巴細胞亞群：T細胞（CD3 +、CD4+、CD8 +、 DPT、DNT和NKT）、NK細胞和B細胞后，建議報告各個細胞亞群細胞 的相對計數（百分比）和絕對計數。四、檢測注意事項1. 流式檢測儀器及抗體試劑的質量保證：2. 標本采集：3. 審核內容:4. 報告結果的參考值范圍：淋巴細胞亞群分析在TB患者臨床診療中的應用、評估TB患者的免疫狀況下列TB患者有必要進行淋巴細胞亞群分析，以輔助臨床客觀評價患者免 疫狀況，合理制定治療方案，適時進行免疫干預

4、，調節患者的免疫功能，促 進患者早日康復。1 .老年TB患者：建議在老年TB患者中進行淋巴細胞亞群分析以了解其 免疫狀況，更好地應對和控制TB。2. 活動性AB患者：建議病情嚴重的活動性TB患者進行淋巴細胞亞群 分析，以判斷是否需進行免疫干預。3. 糖尿病并發活動性肺結核患者：建議糖尿病并發活動性TB患者進行 淋巴細胞亞群分析。4. HIV與MTB雙重感染者：建議HIV與MTB雙重感染者進行淋巴胞亞 群分析，以了解患者的免疫狀況和監測治療效果。5. 其他:二、監測肺結核患者的治療效果建議上述活動性TB患者治療前、后進行淋巴細胞亞群分析，以作為制定 免疫治療方案的實驗依據和監測療效的指標。三、T

5、B患者進行外周血淋巴細胞亞群檢測的指征鑒于以上觀點，建議活動性TB患者在治療前后進行外周血淋巴細胞亞群 檢測的指征為：(1 )老年活動性TB患者;(2)復治、久治不愈的TB 患者；(3)病變范圍廣泛的、病情嚴重的TB患者;(4)并發反復感染、 嚴重感染，尤其并發HIV感染的TB患者；(5)并發糖尿病的活動性TB患 者；(6)并發腫瘤、貧血、低蛋白血癥的活動性TB患者;(7)有免疫缺陷 病家族史、長期使用免疫抑制劑的活動性TB患者。TB患者淋巴細胞亞群檢測結果的判讀及其臨床意義1. 總T淋巴細胞(CD3+) : T淋巴細胞參與機體細胞免疫應答，夕卜周血CD3+百分t匕或絕對計數值低于參考范圍，說

6、明T淋巴細胞數可能減少， 提示可能存在免疫功能低下。活動性TB患者CD3+T細胞的百分比和絕 對計數值可能沒有明顯變化，也可能降低，而且病情越嚴重，下降越明顯； 如低蛋白血癥、貧血、并發糖尿病、耐多藥或病變廣泛的TB患者，其外 周血CD3+T細胞數明顯降低；60歲TB患者的CD3+T細胞百分比或 絕對計數可能明顯低于60歲的患者。CD3+T細胞的百分比或絕對計數 值明顯下降，說明患者出現明顯的免疫抑制。2. 輔助性/誘導性T淋巴細胞(CD3 + CD4+CD8-):活動性TB患者 CD4+T細胞百分比或絕對計數可能低于健康人，病情越嚴重，下降越明 顯如低蛋白血癥、貧血、并發糖尿病、耐多藥或病變

7、廣泛的TB患者CD4+T 細胞絕對計數明顯降低；此夕卜，60歲TB患者的CD4+T細胞百分比或 絕對計數可能明顯低于60歲的患者。CD4+T細胞百分比或絕對計數明 顯下降，表明CD4+T細胞功能缺失,將削弱機體抗MTB的保護性防御 機制,是TB患者免疫狀態惡化的一種表現形式。潛伏性結核感染者若出 現外周血CD4+T細胞耗竭，就易導致MTB再活化。3. 細胞毒/抑制性T淋巴細胞(CD3+CD8 + CD4-) : CD8+T細胞絕對計 數明顯下降，表明機體調動CD8+T細胞直接殺滅胞內外MTB而導致 CD8+T細胞大量消耗，是TB患者免疫狀態惡化的一種表現形式。若發 病早期不及時對患者進行治療和

8、免疫干預,可能導致CD8+T細胞計數不 斷下降，從而導致病情加重或呈慢性感染。CD8+T細胞絕對計數增高可 能是患者MTB負荷高所致，可能預示患者對化療反應遲緩。4. CD4+/CD8 + t匕值： 若CD4+/CD8+比值低于健康人，表明CD4+T 細胞較CD8+T細胞下降明顯；病情嚴重的患者CD4+/CD8+比值可能高 于病情較輕的患者，可能是因為CD8+T細胞較CD4+T細胞下降明顯所 致。5. 雙陽性T淋巴細胞（DPT細胞，CD3+CD4+CD8+）:肺結核患者外周 血DPT細胞具有抗結核免疫力，活動性TB患者DPT細胞百分比可能正 常、增高或減少，其絕對計數可能明顯降低，提示抗結核免

9、疫力下降，其 變化的臨床意義尚需進一步探討。6. 雙陰性T淋巴細胞（DMT細胞，CD3 + CD4-CD8-）:活動性TB患者 DNT細胞百分比和絕對計數可能減少，病情越嚴重，下降越明顯，可能是 因為機體通過DNT數量下降使機體免疫抑制功能降低，以提高MTB清除 能力；60歲TB患者的DNT細胞絕對計數可能明顯低于60歲的患者。7. NKT細胞（CD3+CD56+CD16+ ）:原發性肺結核NKT細胞數一般 無明顯變化，其他類型的活動性TB尤其是血行播散性肺結核患者NKT細 胞百分比或絕對計數明顯增高，糖尿病并發TB患者的NKT細胞百分比或 絕對計數明顯高于沒有糖尿病的TB患者，這可能是由于體

10、內MTB含量 高、分布廣泛，誘導機體產生NKT細胞抗結核。但隨著病情加重NKT細 胞會逐漸減少。8. NK細胞(CD3-CD56+CD16+):原發性S市結核NK細胞百分比和絕對 計數一般無明顯變化，其他類型的活動性TB患者NK細胞絕對計數可能 明顯減少,其自然殺傷功能也可能明顯降低;而且病情越嚴重，下降越明顯； 復治肺結核患者的NK細胞絕對計數明顯低于初治肺結核患者；血行播散 曲市結核及肺外結核患者NK細胞百分比或絕對計數降低的發生率和降低 程度均明顯高于單純肺結核患者。9. B淋巴細胞(CD3-CD19+):活動性TB患者病情嚴重時(如并發糖尿病、 貧血、低蛋白血癥或病變廣泛的患者)B淋巴

11、細胞百分比和絕對計數均明顯 下降，而且隨著患者年齡增長而逐漸降低，尤其是60歲以上的患者下降 明顯。對TB患者淋巴細胞亞群檢測與分析的建議和展望1. 合理選擇淋巴細胞亞群檢測與分析的方法：只分析各淋巴細胞亞群的 百分比不能客觀、準確地反映TB患者的免疫功能狀況，建議同時檢測與 分析淋巴細胞亞群的相對計數和絕對計數。2. TB患者進行淋巴細胞亞群檢測的建議：建議活動性TB患者尤其是存 在下列情況的患者應進行淋巴細胞亞群分析：(1 )并發反復感染、嚴重 感染及多種病原體與特殊病原體感染者，尤其是并發HIV感染的患者;(2) 常規抗結核治療效果不佳的患者，除了考慮耐藥等原因外還應考慮是否存 在宿主免疫功能受損；(3)并發嚴重的過敏性疾病或自身免疫性疾病的患 者，可能存在免疫自穩和耐受功能受損；(4)并發血液系統腫瘤或者其他 腫瘤及實體