,邱群鳳,尿液檢驗,2016Mar.,龍巖市第一醫院,1.尿液理學檢查 2.尿蛋白定性檢3.尿本周蛋白定性檢查 4.尿糖定性檢查,尿液形成過程示意圖, 容器1、 一般檢查：清潔干燥2、 細菌培養：有蓋無菌大試管3、 24小時尿：清潔干燥的大口瓶 常規檢查可隨時留取，但晨尿較濃縮、偏酸性，病理成分多且完整，可提高檢查的陽性率。 尿液保存1、 冷藏2、 立即送檢，夏季1h，冬季 2500 ml/24h 少尿： 400 ml/24h 無尿：1.020，隨機尿1.0031.030 新生兒：1.0021.004 臨床意義：反映腎小管的濃縮稀釋功能,【注意事項】 1尿比重計通過校正后才能使用。 2尿液要求新鮮；尿液過少不足以浮起比重計時。 3因低溫所致的尿酸或其他鹽類沉淀可水浴(37)使其溶解，待尿液溫度降至比重計所標定的溫度時即可測定。 4尿液面應消除泡沫；比重計浮標要垂直懸浮于尿液中；讀取比密值要準確。 5校正結果 要進行蛋白尿、糖尿和溫度的校正。 6每次測定完畢都需用純凈水沖洗比重計，若有蛋白質及鹽類物質沉積時，需用清潔液洗凈后使用。,【原理】 pH廣泛試紙是多種指示劑混合的試帶,靈敏度約為pH1.0,顯色范圍為棕紅至深黑色,試帶蘸取尿液后即可顯色,然后與標準色板比較即可測得尿液pH近似值,四、尿酸堿度pH試紙法測定,【操作】 1.取試紙 2.浸尿 3.讀取結果 4.報告方式, 參考值 新鮮晨尿pH值在5.56.5,平均值6.0 新鮮隨機尿pH值在4.58.0 久置可變堿性 臨床意義,【注意事項】1.試帶 應避光,密封與干燥保存,遠離酸性和堿性物質,以防失效2.標本 應新鮮,放置過久會因揮發性酸喪失或細菌繁殖而使pH增高,標本不能使用防腐劑,否則可能會影響檢測結果3.比色時間 應在規定的時間內比色,第二節 尿蛋白定性檢查,【原理】 生物堿試劑磺基水楊酸，在酸性條件下，其磺酸根陰離子與蛋白質氨基酸陽離子結合，形成不溶性蛋白鹽沉淀。,磺基水楊酸法,【操作】 1.調pH : 使尿液PH值在56 2.加尿液: 取2支試管,加入1ml尿液 3.加試劑: 第一支試管加試劑2滴,輕混 勻,另 一支試管不加做對照 4.判斷結果: 1min內觀察結果,1, 優點: 簡便快速，靈敏度高0.05-0.1g/L； 缺點: 與清/球/本周蛋白反應；假陽性。干化學法的參考方法，NCCLS推薦的 確證實驗。,【評價】, 尿液中蛋白質含量150mg/24h 尿中蛋白質濃度100mg/L 蛋白定性為陽性，即蛋白尿。,1.蛋白尿 (proteinuria, PRO),【干擾因素】,【注意事項】1 .標本:尿液明顯混濁，先離心或過濾。 患者應用大劑量青霉素鉀鹽、慶大霉素、磺胺、含 碘造影劑時，應告知結果可能產生假陽性。 正確采集中段尿，避免混有生殖系統分泌物。 2. 調pH 本法在尿液偏堿或偏酸時（pH9 ，pH3）可呈 假陰性，檢測前先測試尿pH(56).3掌握好結果判斷時間,對于微弱陽性的判斷，可選用黑色襯紙作背景，以提高分辨力。,第三節 尿本周蛋白定性檢查,一、凝溶法,【原理】 本周蛋白在pH4.90.1條件下，加熱至 4060時可發生凝固，溫度升至90100時沉淀消失，當溫度降低恢復至4060時又可重新凝固。,【操作】（詳見實驗課本 P90 ） 1標本處理 2加入試劑 3觀察結果 4驗證結果,【注意事項】 1收集已診斷輕鏈疾病患者的尿液做此試驗。尿液新鮮，減少清蛋白、球蛋白分解變性產生的干擾。混濁尿液須先離心取上清液。 2嚴格控制或調節pH，凝溶法最適pH為4.55.5。 3煮沸過濾時，動作迅速，保持高溫，不要振蕩，防止BJP夾雜于其他沉淀蛋白中被過濾除掉而造成假陰性。過濾用漏斗、濾紙、試管等用品，需保持高溫狀態，以避免溫度降低使BJP凝固。 4凝溶法特異性高，操作繁瑣、費時，靈敏度低（0.32.0）g/L。 5.操作時一定注意安全!,二、對-甲苯磺酸法,【原理】 對-甲苯磺酸能沉淀相對分子質量較小的本周蛋白，而對相對分子質量較大的清蛋白和球蛋白不起反應。,【操作】 1.加尿液: 取2支試管，分別加尿液1ml 2.加試劑: 測定管加0.5ml試劑,對照管加 0.5ml冰醋酸,輕混勻靜置5min 3.觀察結果: 陽性:測定管渾濁加重或有沉淀,對照管清晰透明或輕度渾濁 陰性:測定管清晰透明或與對照管相似,【注意事項】 1收集已診斷輕鏈疾病患者的尿液做此試驗。尿液應新鮮，混濁尿液須先行離心取上清液。服用利福平類抗結核藥物患者可能出現周蛋白假陽性。 2尿液中其他球蛋白5.0g/L可出現假陽性，需進行驗證。如果尿液中本周蛋白含量低，則需先對尿液進行濃縮。,第四節 尿葡萄糖班氏法定性檢查,【原理】Cu2+-Cu+藍色 黃色至磚紅色.,簡易步驟:班氏試劑1ml(煮沸不變色)+尿4滴煮沸1-2min 冷卻后觀察.,堿性條件+葡萄糖,操作：ml班氏試劑，加熱試管底部，煮沸，觀察，再加尿液2滴，繼續煮沸min，冷卻后觀察結果。 結果判斷：1.藍色不變 : - 2.藍中略帶綠無沉淀 : +/-3.綠色有少許黃綠色沉淀 : + 4.較多黃綠色沉淀 : +5.土黃色渾濁,大量沉淀 : + 6.大量紅棕/磚紅色沉淀 : +,【干擾因素】,【評價】,缺乏特異性,靈敏度低,【注意事項】1、試劑與尿液的比例為101。2、煮混時應不時搖動試管以防爆沸噴出，試管口朝向無人處。3、檢驗糖尿病患者尿液中葡萄糖，空腹或餐后2h留取尿標本。4、大量銨鹽，易致假陰性，應預先加堿煮沸去氨后再檢驗。5、蛋白0.5g/L,易致假陰性，加熱乙酸法去蛋白取濾液檢驗。6、VitC,青/鏈霉素,頭孢菌素,異煙肼,水楊酸鹽