藥物分析,第六章 芳酸類非甾體抗炎藥物的分析,Company Logo,,第六章 芳酸類非甾體抗炎藥物的分析,非甾體抗炎藥（Nosteroidal Antiinflammatory Drugs，NSAIDs）是一類不含有甾體骨架的抗炎藥，多數具有芳酸基本結構。本章主要講芳酸類NSAIDs，同時講一下尼美利舒和對乙酰氨基酚。,Company Logo,,第一節 典型芳酸類非甾體抗炎藥物的結構與性質,一、典型藥物與結構特點,Company Logo,,第一節: 結構與性質,酸性,酸性,光譜特性,Company Logo,,第一節: 結構與性質,酸性,酸性,光譜特性,基團特性,Company Logo,,第一節: 結構與性質,酸性,Company Logo,,第一節: 結構與性質,酸性,光譜特性,Company Logo,,第一節: 結構與性質,水解,光譜特性,Company Logo,,第一節: 結構與性質,其它非甾體類抗炎藥,水解,光譜特性,Company Logo,,第二節: 鑒別試驗,依據藥物理化性質，可展開一系列鑒別方法,一、與三氯化鐵反應顯色,阿司匹林：紫堇色雙水楊酯：紫色二氟尼柳：深紫色均通過產生水楊酸與三氯化鐵反應顯色,水楊醛反應,Company Logo,,第二節: 鑒別試驗,對乙酰胺基酚與三氯化鐵顯藍紫色,顯玫瑰紅色,顯淡紫色,酚羥基反應,Company Logo,,第二節: 鑒別試驗,二、縮合反應顯色,二苯甲酮結構,Company Logo,,第二節: 鑒別試驗,三、重氮化-偶合反應對乙酰氨基酚具有伯氨基，在酸性條件下反應可生成對氨基酚，再與亞硝酸鈉進行重氮化反應，之后再與堿性-萘酚偶合生成紅色偶氮化合物。,水解反應產生芳伯胺,芳伯胺重氮化,偶合反應,Company Logo,,第二節 鑒 別,重氮化-偶合反應,貝諾酯,橙紅色,Company Logo,,(三)氧化反應,第二節 鑒 別,甲芬那酸H2SO4深藍色,隨即變為棕綠色,(四)水解反應,阿司匹林,白色水楊酸,Company Logo,,第二節: 鑒別試驗,六、特征元素反應：分子中含有氯、硫等元素可以轉化為氯化物或硫化物進而進行鑒別。七、光譜法1、UV2、IR,Company Logo,,第二節 鑒 別,(七) IR：阿司匹林,-COOH-OH,-COOH,Ph-C,鄰位取代Ph,Company Logo,,第二節 鑒 別,N-HO-H,N-H,Ph:C=C,芳胺,酚,Company Logo,,第二節: 鑒別試驗,八、色譜法,供試品保留時間,對照品保留時間,Company Logo,,第三節: 特殊雜質及其檢查法,一、阿司匹林和雙水楊酯,生產工藝,ASA,副產物,水楊酸,雙水楊酯,Company Logo,,第三節: 特殊雜質及其檢查法,HPLC法,淡黃、紅棕、深棕色,Company Logo,,第三節: 特殊雜質及其檢查法,其它有關物質,醋酸苯酯,水楊酸苯酯,乙酰水楊酸苯酯,HPLC法,Company Logo,,二、甲芬那酸中2,3二甲基苯胺的檢查,第三節: 特殊雜質及其檢查法,甲芬那酸,GC法,Company Logo,,第三節: 特殊雜質及其檢查法,三、二氟尼柳中有關物質的檢查,TLC,HPLC,所謂物質A和物質B的檢查是采用自身對照法進行檢查的,相同藥物,不同濃度,相互比較,主點限量,Company Logo,,第六章 芳酸類非甾體抗炎藥物的分析,萘普生的有關物質檢查,色譜條件,雜質限量,Company Logo,,二、對乙酰氨基酚中氨基酚和對氯苯乙酰胺,第三節: 特殊雜質及其檢查法,HPLC,Company Logo,,第四節 含量測定,一、酸堿滴定法(Acid-base titration method),苯甲酸pKa 4.20水楊酸pKa 2.98酸性較強,羧酸鄰位-OH，吸電子基團，使酸性增加；分子內氫鍵，更增加了其極性,直接滴定,Aspirin、丙磺舒(Ch.P. BP. JP等) 苯甲酸(Ch.P等)均采用本法,Company Logo,,第四節 含量測定,1.直接滴定法,乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶 液中滴定過程易水解,中性乙醇：對指示劑(酚酞)而言為中性， 可消除滴定誤差,pKa 36 的藥物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定 pKa 69 的藥物要用非水溶液滴定法若SA不合格，不宜采用本法,Company Logo,,第四節 含量測定,本品在甲醇、乙醇及水中極微溶或者幾乎不溶，在丙酮中微溶。所以CHP使用定量過量的氫氧化鈉滴定液溶解后，再用鹽酸滴定液回滴剩余的氫氧化鈉。,烯醇式結構:酸性,為什么氫氧化鈉能溶解之？,Company Logo,,第四節 含量測定,2.水解后剩余滴定法(Residual titration after hydrolysis),取本品約1.5g，精密稱定，準確加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，緩緩煮沸10min，放冷，以酚酞為指示劑，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并將滴定結果用空白試驗校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相當于45.04mg的C9H9O4,USP32-NF27,Company Logo,,第四節 含量測定,滴定度,滴定度濃度,待測物反應系數,滴定液物反應系數,滴定液物摩而質量,空白反應體積,樣品測定消耗體積,樣品稱重量,Company Logo,,第四節 含量測定,3.兩步滴定法(Two-step titration),Aspirin片,枸櫞酸Citric acid,酒石酸Trataric acid,水解產物水楊酸SAHAc,第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc第二步：水解后剩余滴定,Company Logo,,第四節 含量測定,取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于阿司匹林0.3g)，置錐形瓶中，加中性乙醇(對酚酞指示劑顯中性)20ml，振搖使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)至顯粉紅色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加熱15min，并時時振搖，迅速放冷至室溫，用H2SO4液(0.05mol/L)滴定，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml的NaOH液(0.1mol/L)相當于18.02mg的C9H8O4,Company Logo,,第四節 含量測定,空白消耗,樣測消耗,校正因數,滴定度,片劑規格,Company Logo,,第四節 含量測定,二、非水溶液滴定法,吡羅昔康,Company Logo,,第四節 含量測定,四、UV,1.直接UV法,2.離子交換-UV法,氯貝丁酯在226nm的波長處有最大吸收，但對氯酚等有關物質亦有吸收，干擾UV法的測定。根據氯貝丁酯為酯結構，不能發生電離，而有關物質可發生酸性解離的性質差異，采用陰離子交換色譜分離后，采用UV法測定。,Company Logo,,第四節 含量測定,3.CPC-UV法(Column Partition Chromatography),利用固定相酸堿性的不同進行分離利用藥物和固定相起化學反應而進行分離利用生成離子對進行層析分離單純靠選擇流動相進行分離,擔體：硅藻土(Celite 545)固定相：一定pH的緩沖水溶液流動相：與水不相混溶的有機溶劑(洗脫前必須先用水飽和),Company Logo,,第四節 含量測定,b.ASA測定,供試液制備洗脫 5,25mlCHCl3 相繼洗脫，棄去CHCl3洗脫 10ml冰HAc-CHCl3(150)*；85ml冰HAc-CHCl3(1100)，并稀釋至100ml,測定：280nm 空白：CHCl3,NaHCO3使ASA和SA成鹽保留于柱上 用CHCl3洗脫的目的：去除中性或堿性雜質冰HAc酸化的目的：使ASA游