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文檔簡介
臨床檢驗微生物學復習綱要
緒論
復習提要
一、微生物的定義
微生物是存在于自然界的一大群體形微
小、結構簡單、肉眼直接看不見的微小生
物,必須借助顯微鏡放大數百倍、幾千倍
甚至數萬倍后才能觀察到。
二、微生物的種類
按大小、結構、組成不同等,可將微生物
分為三大類:
1.非細胞型微生物無典型的細胞結構,
無產生能量的酶系統,只能在活細胞中生
長繁殖。核酸類型為DNA或RNA,兩者
不同時存在。如病毒。
2.原核細胞型微生物原始核呈環狀裸
DNA團塊結構,無核膜、核仁,細胞器
很不完善,只有核糖體。如細菌、支原
體、立克次體、衣原體、螺旋體和放線
困O
3.真核細胞型微生物細胞核分化程度
高,有核膜和核仁,細胞器完整。如真
困O
三、醫學微生物學的定義
醫學微生物學是一門基礎醫學課程,主要
研究與醫學有關的致病性和條件致病性微
生物的生物學特性、致病和免疫機制,以
及特異性診斷、防治措施,以控制和消滅
感染性疾病和與之有關的免疫損傷等疾
病,達到保障和提高人類健康水平的目
的。
醫學微生物學今后研究的重點應加強微生
物基因組學和蛋白質組學的研究,闡明病
原微生物與宿主之間的相互關系,特別是
致病機制和免疫機制,研制安全、有效的
預防性和治療性疫苗,創建特異、敏感、
快速、簡便的診斷方法,深入研究微生物
的耐藥機制,探討防止和逆轉耐藥性措
施,開發新型抗感染藥物,控制醫院感
染。
2樓
第一篇細菌學
第1章細菌的形態
與結構
復習提要
一、細菌的大小與
形態
1.細菌的測量單位
細菌是一種單細胞
原核細胞型微生
物,需放大一千倍
左右才能看到。細
菌的測量單位是微
米(pm)o
2.細菌的形態細
菌按其外形,主要
有三大類:球菌、
桿菌和螺形菌。球
菌具有不同的排列
方式,可分為雙球
菌、鏈球菌、葡萄
球菌等,這對球菌
的鑒定有重要意
義。桿菌有粗大、
細小、棒狀、分枝
和鏈狀之分。螺形
菌分為弧菌和螺
困O
細菌的形態可受培
養時間、培養基成
分、溫度、pH等因
素影響。
二、細菌的基本結
構
基本結構是指每種
細菌都具有的結
構,由外向內依此
為細胞壁、細胞
膜、細胞質和核
質。
(一)細胞壁
1.肽聚糖的結構
肽聚糖
(peptidoglycan)又
稱為粘肽
(mucopeptide)、糖
肽(glycopeptide)或
胞壁質(murein),
是細菌細胞壁中的
主要組分,為原核
細胞所特有。革蘭
陽性(G+)菌的肽
聚糖由聚糖骨架、
四肽側鏈和五肽交
聯橋三部分組成,
革蘭陰性(G—)菌
的肽聚糖僅由多糖
骨架、四肽側鏈兩
部分組成。
2.G+菌和G—菌
細胞壁的結構和醫
學意義G+菌細胞
壁由肽聚糖和穿插
其間的磷壁酸
(teichoicacid)組
成,特點是肽聚糖
含量高、層數多、
結構致密,具有高
機械強度的三維立
體空間結構。磷壁
酸有膜磷壁酸與壁
磷壁酸兩種,是G
十菌細胞壁內特有
的成分。
G一菌細胞壁特點
是肽聚糖含量少
(1?2層),結構疏
松,在肽聚糖之外
具有外膜。外膜由
內向外依次為脂蛋
白、脂質雙層、脂
多糖
(lipopolysaccharide
,LPS)o脂多糖由
脂質A(lipidA)、
核心多糖(core
polysaccharide)和特
異多糖(specific
polysaccharide)所構
成。脂質雙層的結
構類似細胞膜,其
上鑲嵌有孔蛋白
(porin),參與菌體
內外物質交換。
3.細胞壁的功能
細胞壁堅韌而富有
彈性,主要功能是
維持菌體固有形
態,并保護細菌抵
抗低滲環境。G+
菌的磷壁酸是重要
表面抗原,與血清
型分類有關,有助
于維持菌體內離子
平衡。膜磷壁酸與
細菌粘附宿主細胞
有關。G一菌的外
膜可阻止一些抗菌
藥物的進入,成為
細菌耐藥的機制之
一oG—菌的脂多
糖是G—菌的內毒
素(endotoxin),與
細菌致病性有關。
可見,由于G+菌
與G—菌細胞壁結
構顯著不同,導致
兩類細菌在染色
性、抗原性、致病
性、對藥物的敏感
性等方面有很大差
異。
4.細菌L型肽聚
糖是G—菌和G+
菌共有的成分。凡
是能破壞肽聚糖的
結構或抑制其合成
的物質,都能使細
胞壁出現缺陷,甚
至沒有細胞壁,從
而導致細菌在一般
滲透壓環境中死
亡。由于人和動物
細胞無細胞壁,也
無肽聚糖結構,故
細菌細胞壁成為抗
菌藥物的重要作用
靶位。
在高滲環境下,細
胞壁缺陷的細菌仍
可存活而成為細菌
L型(bacterialL
form)o
溶菌酶、青霉素是
細菌L型的最常用
人工誘導劑。細菌
L型因缺乏完整的
細胞壁呈現高度多
形性,均為革蘭染
色陰性,在高滲、
低瓊脂、含血清的
培養基中能緩慢生
長,形成“油煎
蛋”狀細小菌落。
細菌L型可以返
祖,與許多慢性反
復發作的感染有
關,在臨床上可引
起尿路感染、骨髓
炎、心內膜炎等。
(二)細胞質內的重
要結構及意義
1.核糖體是合成
蛋白質的場所。細
菌核糖體為70S,由
50S和30S兩個亞基
組成,與真核生物
的核糖體(80S)不
同。有些抗生素能
與細菌50s或30S亞
基結合,干擾其蛋
白質合成,從而殺
死細菌,但通常不
會損害人體細胞。
2.質粒(plasmid)
為染色體外的遺傳
物質,為閉合環狀
的雙鏈DNA,控制
細菌某些特定的遺
傳性狀。
三、細菌的特殊結
構
特殊結構僅某些細
菌具有,主要包括
莢膜(capsule)、鞭
毛(flagellum)、菌
毛(pilus)和芽胞
(spore)o
1.莢膜某些細菌
分泌的包繞在細胞
壁外的一層粘液性
物質。具有抗原
性,為分型和鑒定
細菌的依據。莢膜
有抗吞噬作用,與
細菌的致病性有
關。如化膿性球菌
常有莢膜。
2.鞭毛多數桿
菌、所有螺形菌在
菌體上附著的細長
并呈波狀彎曲的絲
狀物。鞭毛是細菌
的運動器官,有利
于細菌主動地趨向
高濃度營養物質和
逃避有害環境,可
用以鑒定細菌。有
些細菌,如霍亂弧
菌、幽門螺桿菌、
空腸彎曲菌的鞭:毛
與致病性有關。
3.菌毛存在于許
多G一菌、少數G
十菌菌體表面的比
鞭毛更細、更短而
直硬的絲狀物,在
電子顯微鏡下才能
看見。菌毛可分為
普通菌毛(common
pilus)和性菌毛(sex
pilus),前者具有粘
附能力,與細菌致
病力有關;后者可
傳遞遺傳物質(質粒
或核質DNA片段
等),與細菌的毒力
或耐藥性轉移等有
關。
4.芽胞又稱內芽
月包(endospore),是
某些細菌在一定環
境條件下,細胞
質、核質逐漸脫水
濃縮,在菌體內形
成的一^個圓形或卵
圓形小體。芽胞對
熱、干燥、化學消
毒劑、輻射等抵抗
力極強,故以殺滅
芽胞作為判斷滅菌
效果的指標。芽胞
的形狀、大小、位
置等可用于鑒別細
菌。芽胞是細菌的
休眠狀態,在適宜
條件下可發芽轉化
為繁殖體(vegetative
form),繼而產生毒
素而致病。芽胞不
是細菌的繁殖方
式o
四、細菌形態與結
構的檢查法
包括不染色標本檢
查法和染色標本檢
查法,后者包括單
染色法、鑒別染色
法和特殊染色法。
1.革蘭染色法的步
驟、結果和醫學意
義革蘭染色法
(Gramstain)是最
常用最重要的染色
法,其步驟是:在
細菌涂片固定后,
先用結晶紫初染、
蘆戈碘液媒染,然
后用95%乙醇脫
色,最后用稀釋復
紅或沙黃復染。菌
體染成紫色者為革
蘭陽性菌,染成紅
色者為革蘭陰性
菌。革蘭染色法在
鑒別細菌、選擇抗
菌藥物、了解細菌
致病性等方面具有
極其重要的意義。
3樓
第2章細菌的生理
復習提要
一、細菌的營養與生長繁殖
(一)細菌生長繁殖的基本條件
營養物質、能量和適宜的環境是細菌
生長繁殖的必備條件。
1.營養物質提供必要的原料和能量。
根據細菌所利用的能源和碳源不同,
將其分為兩大營養類型:自養菌
(autotroph)和異養菌(heterotroph)。
所有的病原菌都是異養菌。
2.酸堿度每種細菌都有一個可生長的
pH范圍和最適生長pH。多數病原菌
最適pH為7.2?7.6。
3.溫度各類細菌對溫度的要求不一,
籍此分為嗜冷菌(psychrophile)>嗜溫
菌(mesophile)和嗜熱菌
病原菌最適生長溫度
(thermophile)o
為37℃o
4.氣體病原菌所需氣體是氧和CO2。
一般細菌在代謝過程中自身產生的
CO2即可滿足。有些細菌如腦膜炎球
菌、淋球菌和布魯菌等,在初代分離
培養時需提供5?10%的CO2才能生
長。
根據細菌對氧氣的需要分為四類:專
性需氧菌(obligateaerobe)、微需氧菌
(microaerophilicbacterium)、兼,性厭
氧菌(facultativeanaerobe)和專性厭氧
菌(obligateanaerobe)。大多數病原菌
屬于兼性厭氧菌。專性厭氧菌在有氧
環境下不能生長,可能由于缺乏氧化
還原電勢高的呼吸酶和分解有毒氧基
團的酶。
(二)細菌生長繁殖方式
以二分裂方式(binaryfission)進行無
性繁殖。細菌分裂數量倍增所需要的
時間稱為代時(generationtime),多
數細菌為20?30分鐘。
將一定數量的細菌接種于適宜的液體
培養基中培養時,細菌群體生長繁殖
可分為四期,即生長曲線:growth
curve):遲緩期(lagphase)、對數期
(logphase)、/急定期(stationaryphase)
和衰亡期(declinephase)。其中,對
數期細菌的生物學特性較典型,對外
界環境因素的作用敏感。因此,研究
細菌的形態染色、生化反應、藥物敏
感試驗等應選用該期的細菌。
二、細菌的分解和合成代謝
1.細菌生化反應的概念各種細菌所
具有的酶不完全相同,對營養物質的
分解能力不一致,因而其代謝產物有
差異。檢測細菌對各種基質的代謝作
用及代謝產物,借以區別和鑒定細菌
的生化試驗,稱為細菌的生化反應。
細菌的生化反應對菌體形態、革蘭染
色反應和菌落特征相同和相似的細菌
的鑒定尤為重要。
實驗室常用的細菌生化反應有:糖發
酵試驗、VP試驗、甲基紅試驗、枸橡
酸鹽利用試驗、呻味試驗、硫化氫試
驗、尿素酶試驗。其中叫味(I)、甲
基紅(M)、VP(V)、枸檬酸鹽利用
(C)四種試驗常用于鑒定腸道桿菌。
現代臨床細菌學已普遍采用微量、快
速和全自動的生化鑒定方法。
2.與醫學有關的合成代謝產物細菌
利用分解代謝中的產物、能量和輔
酶,不斷合成菌體自身成分,如細胞
壁、蛋白質、核酸等,同時還合成一
些在醫學上具有重要意義的代謝產
物,其中,毒素、侵襲性酶與細菌致
病性有關;色素、細菌素與鑒別細菌
有關;抗生素和細菌素能抑制和殺滅
其他微生物。
熱原質(pyrogen)是細菌細胞壁的脂
多糖,注入人體或動物體內能引起發
熱反應。因此,在制備和使用注射藥
品過程中應嚴格遵守無菌操作,防止
細菌污染。
三、細菌的人工培養
1.培養基的概念培養基(culture
medium)是由人工方法配制而成的,
專供微生物生長繁殖所需的混合營養
物制品。培養基的制備原則是:充足
的營養物質,合適的pH,滅菌后方可
使用。
培養基按營養組成和用途,分為基礎
培養基(basicmedium)、增菌培養基
(enrichmentmedium)、鑒另U培養基
(differentialmedium)、選擇培養基
(selectivemedium)和厭氧培養基
(anaerobicmedium)等;按物理性狀
分為液體培養基、半固體培養基和固
體培養基三大類。
2.細菌在培養基中的生長表現大多
數細菌在液體培養基生長繁殖后呈均
勻混濁狀態;少數出現沉淀和形成菌
膜。
無鞭毛的細菌在半固體培養基中僅沿
穿刺線生長,有的鞭毛細菌可沿穿刺
線生長并向四周游動擴散,所以半固
體培養基可用作檢查細菌有無鞭毛和
動力。
在固體培養基上,單個細菌分裂繁殖
后形成肉眼可見的細菌集團,稱為菌
落(colony),菌落的特征有助于鑒別
細菌。將單菌落移種到另一培養基
中,生長出來的細菌均為純種,成為
純培養(pureculture)。故固體培養基
可用作純種的分離。
3.人工培養細菌在醫學中的應用①
感染性疾病的病原學診斷。由細菌引
起的感染性疾病,最確切最可靠的診
斷依據是,從病人材料中把病原菌分
離培養出來,并鑒定其菌屬、種和
型。藥物敏感試驗能指導臨床選用抗
菌藥物;②細菌學研究;③生物制品
的制備,制備疫苗、類毒素、抗毒素
等用于防治,制備菌液、抗血清等用
于診斷。
4樓
第3章消毒與滅菌
復習提要
一、概述
從預防感染出發,醫務工作者必須建
立“處處有菌”和無菌觀念,嚴格執
行無菌操作,這就要求必須對所用的
物品(如注射器、手術器械、手術衣
等)、工作環境(如手術室、產房等)
和人體體表進行消毒或滅菌,以確保
所用的物品和工作環境的無菌或處于
無菌狀態。為防止疾病的傳播,對傳
染病患者的排泄物和實驗廢棄的培養
物亦須進行滅菌或消毒處理。
消毒(disinfection)是指殺滅物體上病
原微生物,并不一定能殺死含芽胞的
細菌或非病原微生物。
滅菌(sterilization)是指殺滅物體上所
有的微生物。應以殺滅芽胞為標準。
無菌(asepsis)是指物品中沒有活的微
生物存在。防止細菌進入人體或其他
物品的操作技術,稱為無菌操作。
防腐(antisepsis)是指防止或抑制體外
微生物的生長繁殖,細菌一般不會死
亡。
二、物理消毒滅菌法
(一)熱力滅菌法
這是最常用、最經濟、最有效的方
法,其殺菌機制主要是,使菌體蛋白
質(酶)變性和凝固,失去生物活性而
死亡。主要包括:
1.干熱滅菌法①焚燒:適用于廢棄物
品和死于傳染病的人或動物尸體;②
燒灼:適用于接種環、試管口等的滅
菌;③干烤:適用于玻璃器皿等的滅
困O
2.濕熱滅菌法①巴氏消毒法
(pasteurization):71.7°C15?30秒,
用于牛奶和酒類等不耐高溫物品的消
毒;②煮沸法:100°C5min,常用于飲
水、食具、刀剪、注射器等消毒;③
流通蒸氣消毒法:100℃水蒸氣15?30
min;④間歇滅菌法(fractional
sterilization):100°C水蒸氣15?30
min,取出后放37°C培養過夜,連續
3d,達到滅菌目的,用于不耐高溫的
含糖、牛奶或血清等培養基滅菌;⑤
高壓蒸氣滅菌法(autoclaving):在
1.05kg/cm2蒸氣壓下,水蒸氣溫度
達到121.3℃,維持15?30min。這
是最有效和最常用的滅菌方法,常用
于一般培養基、生理鹽水、手術敷料
等耐高溫、耐濕物品的滅菌。
(二)紫外線
波長200?300nm的紫外線具有殺菌
作用。紫外線主要干擾DNA的復制與
轉錄,導致細菌變異或死亡。紫外線
穿透力較弱,主要用于手術室、傳染
病房、嬰兒室、細菌實驗室等的空氣
消毒,或不耐熱物品的表面消毒。
(三)濾過除菌法
濾菌器含有微細小孔,只允許液體或
氣體通過,而大于孔徑的細菌等顆粒
不能通過。濾過除菌法(filtration)主
要用于不耐高溫滅菌的血清、抗毒
素、抗生素,以及空氣等的除菌。
三、化學消毒滅菌法
1.常用化學消毒劑的種類和消毒濃度
具有殺菌作用的化學藥物稱為化學消
毒劑(antiseptics)。消毒劑一般對病
原微生物和人體都有毒性,因此只能
用于人體體表(皮膚及粘膜傷口)、醫
療器械、排泄物及周圍環境的消毒。
根據消毒劑的殺菌機制不同,主要分
為:①使菌體蛋白質變性或凝固,例
如酚類(高濃度)、醇類、重金屬鹽類
(高濃度)、酸堿類;②干擾細菌的酶
系統,例如氧化劑、重金屬鹽類(低濃
度);③損傷細菌細胞膜的通透性,例
如酚類(低濃度)、表面活性劑。
絕大多數消毒劑在高濃度時殺菌作用
大,當降至一定濃度時只有抑菌作
用。
5樓
第4章噬菌體
復習提要
一、噬菌體的生物學特性
1.噬菌體的概念、形態和
化學組成噬菌體
(bacteriophage,phage)是感
染細菌、真菌、放線菌或螺
旋體等微生物的病毒。噬菌
體個體微小,可通過細菌濾
器,多為蝌蚪形。噬菌體沒
有完整的細胞結構,主要由
蛋白質構成的衣殼和包含于
其中的核酸組成。噬菌體的
核酸為或蛋白
DNARNAO
質起保護核酸的作用,并決
定噬菌體外形和表面特征。
噬菌體只能在活的易感細胞
內復制增殖,有嚴格的宿主
特異性。
二、毒性噬菌體和溫和噬菌
體
1.概念噬菌體侵入宿主菌
后有兩種結局:一是能在宿
主菌細胞內復制增殖,產生
許多子代噬菌體,并最終裂
解細菌,這類噬菌體稱為毒
性噬菌體(virulentphage);
二是噬菌體基因與宿主菌染
色體基因組整合,且隨細菌
DNA復制而復制,隨細菌
分裂而傳代,不引起細菌裂
解,不產生子代噬菌體,這
類噬菌體稱為溫和噬菌體
(temperatephage)或溶原性
噬菌體
(lysogenicphage)o
2.與細菌遺傳物質轉移的
關系整合在細菌染色體上
的噬菌體基因組稱為前噬菌
體(prophage)。帶有前噬菌
體的細菌稱為溶原性細菌
(lysogenicbacterium)。
毒性噬菌體只有溶菌性周
期,而溫和噬菌體有溶菌性
周期和溶原性周期。具有產
生成熟噬菌體顆粒和溶解宿
主菌的潛在能力,稱為溶原
性(lysogeny)。因此,溫和
噬菌體可有三種存在狀態:
①游離的具有感染性的噬菌
體顆粒;②宿主菌胞質內噬
菌體核酸;③前噬菌體。
通過溫和噬菌體介導的細菌
基因轉移稱為轉導
(transduction)。某些前噬
菌體可導致宿主菌基因型和
性狀發生改變,稱為溶原性
轉換(lysogenicconversion)。
噬菌體是分子生物學研究中
的重要載體。
6樓
第5章細菌的遺傳與變異
復習提要
一、細菌變異的現象
遺傳和變異是生物界的普遍現象。遺
傳使生物得以保存種屬,使其性狀保
持相對穩定。變異則是生物進化的源
泉,細菌為適應新的環境可在形態、
結構、致病性、抗原性和毒力等方面
發生變異,以求生存與發展。掌握細
菌遺傳變異規律,在疾病的診斷、治
療與預防中具有重要意義。
二、遺傳變異的物質基礎
細菌的基因組是指細菌染色體和染色
體以外遺傳物質所攜帶基因的總稱。
染色體外的遺傳物質是指質粒DNA
和轉位因子等。
1.染色體細菌染色體是單一的環狀
雙螺旋DNA長鏈,有4000個以上基
因。革蘭陽性菌的染色體連接在中介
體上,革蘭陰性菌的染色體連接在細
胞膜上。細菌染色體缺乏組蛋白,亦
無核膜包圍。
2.質粒質粒(plasmid)是染色體外
的遺傳物質,為環狀閉合的雙螺旋
DNA分子。其主要特性有:①編碼
很多重要的生物學性狀,如F質粒
(fertilityplasmid)編碼性菌毛,R質
粒(resistanceplasmid)編碼細菌對抗
菌藥物或重金屬鹽類的耐藥性;②具
有自我復制能力;③不是細菌生命活
動所必需,可自行丟失;④質粒可在
細菌間轉移,攜帶的性狀也隨之轉
移;⑤一個細菌可帶有一種或幾種質
粒。
3.轉位因子轉位因子又稱為“跳躍
基因”,是存在于細菌染色體或質粒
上的一段特異性DNA片段,它可在
質粒之間或質粒與染色體之間隨機轉
移,從而影響插入點附近基因的表
達,亦可引入新的基因。轉位因子主
要有三類:
①插入序歹(insertionsequence,IS):
是最小的轉位因子,可能是原核細胞
正常代謝的調節開關之一。
②轉座子(transposon,Tn):長度不
超過2kb,不能獨立復制,必須依附
在染色體或質粒上與之同時復制。在
結構上分為二個部分:一個中心序列
和二個末端反向重復序列,后者與插
入有關。中心序列帶有遺傳信息,如
常帶有一種或多種耐藥基因、毒素基
因及其他結構基因等。
③轉座噬菌體或前噬菌體:是一些具
有轉座功能的溶原性噬菌體,當整合
到細菌染色體上,能改變溶原性細菌
的某些生物學性狀,并在細菌基因轉
移過程中起載體作用。
三、細菌變異的機制
(一)基因突變
突變(mutation)是細菌基因的結構發
生突然而穩定的改變,導致細菌性狀
的遺傳性變異。突變是隨機的,不定
向的。如耐藥性變異中,抗生素只是
起選擇作用,除去敏感菌留下耐藥
菌,不是起誘導作用。
(二)基因的轉移和重組
基因轉移(genetransfer)是指外源性
遺傳物質由供體菌轉入受體菌細胞內
的過程,轉移的基因與受體菌DNA
整合在一起,使受體菌獲得供體菌某
些特性,稱為重組(recombination)。
細菌的基因轉移與重組主要有四種方
式:
1.轉化(transformation)是指受體菌
直接攝取供體菌游離的DNA片段,
獲得新的性狀。
2.接合(conjugation)是指細菌通過
性菌毛相互連接溝通,將遺傳物質
(主要是質粒DNA)從供體菌轉移給
受體菌。能通過接合方式轉移的質粒
稱為接合性質粒,不能通過性菌毛在
細菌間轉移的質粒稱為非接合性質
粒。帶有F質粒的細菌有性菌毛,為
雄菌(F+菌),無性菌毛的無F質粒
的細菌為雌菌(F—菌),F+菌可將
F質粒轉移給F—菌,使之成為F+
困O
3.轉導(transduction)是以溫和噬菌
體為載體,將供體菌的一段DNA轉
移到受體菌內,使后者獲得新的性
狀。根據轉導基因片段的范圍,可分
為普遍性轉導(generalized
transduction)和局限性轉導(restricted
transduction)o前者所轉導的DNA可
以是供體菌染色體上的任何部分,發
生在裂解期;后者只限于供體菌染色
體上的特定的基因,發生在溶原期。
4.溶原性轉換(lysogenicconversion)
是侵入細菌的噬菌體DNA與細菌的
染色體發生重組,導致細菌的基因型
的改變,獲得新的性狀。
四、細菌耐藥性
1.細菌耐藥性的概念細菌耐藥性分
為固有耐藥(intrinsicresistance)和獲得
性耐藥(acquiredresistance),前者是指
代代相傳的天然耐藥性,后者是指對
原來敏感的抗菌藥物產生了抵抗力。
多重耐藥性(mudtidrugresistance)是指
細菌同時對多種作用機制不同(或結
構完全各異)的抗菌藥物具有耐性。
2.耐藥性產生的生化機制①滅活作
用:是細菌產生耐藥性的最重要方
式。細菌被誘導產生滅活酶,通過修
飾或水解作用破壞抗生素,使之轉化
成為無活性的衍生物;②靶位改變:
通過產生誘導酶對抗生素的作用靶位
進行化學修飾,或通過基因突變造成
靶位變異,使抗菌藥物不能與靶位結
合,失去殺菌作用;③藥物累積不
足:通過減少藥物吸收或增加藥物排
出,使菌體內的抗生素濃度明顯降
低,不足以殺死細菌。
3.耐藥性產生的分子機制①基因突
變:由突變產生的耐藥性一般只對一
種或兩種相類似的藥物耐藥,且比較
穩定,突變頻率較低。
②R質粒轉移:細菌的耐藥性質粒(R
質粒)是由兩部分組成:耐藥傳遞因
子(RTF)和耐藥決定因子(r決定因
子),前者可編碼性菌毛和通過接合
轉移,后者編碼對抗菌藥物的耐藥
性。R決定因子上可有多個攜帶耐藥
基因的轉座子,是造成多重耐藥性的
原因。R質粒主要通過接合方式在細
菌間轉移,從而造成耐藥性的廣泛傳
播。
③轉座子轉移:當轉座子插入某一基
因時,一方面可引起插入基因失活產
生基因突變,另一方面可因帶入耐藥
基因,使細菌產生耐藥性。轉座子不
需要核甘酸堿基對同源才能插入;宿
主范圍很廣,可在G+菌和G—菌之
間轉移;轉座子的插入序列中堿基序
列可重新組合,使耐藥基因擴大,細
菌的耐藥水平提鬲;轉座方式使耐藥
基因增多。因此,轉座子與多重耐藥
菌株的產生和擴散有關。
4.對付細菌耐藥性的措施對臨床分
離的致病菌,原則上應先做細菌藥敏
試驗,再合理選擇用藥,避免濫用抗
生素。做好消毒與隔離,防止耐藥菌
株的產生和擴散。尋找新型抗感染藥
物和新的抗感染方法,提高宿主免疫
力。
五微生物基因組學
微生物基因組學(Genomics)是指利用
全基因組DNA序列,研究微生物基
因及其功能的學科。獲得微生物的全
基因組序列有助于了解病原微生物的
致病機制及其與宿主的相互關系;尋
找更靈敏及特異的微生物分子標記,
作為診斷、分型等依據;促進抗微生
物新藥的開發和新疫苗的發展;為人
類認識遺傳疾病的機制提供參考。
7樓
第6章細菌的感染和免疫
復習提要
一.正常菌群、條件致病菌、微生態
失調、醫院感染的概念
1.正常菌群是指正常人的體表以及
與外界相通的腔道粘膜表面存在的微
生物,在機體免疫功能正常時,這些
微生物對宿主無害,故稱正常菌群
(normalflora)或正常微生物群(normal
microbiotia)o正常菌群對構成微生態
平衡(eubiosis)起重要作用,其生理
意義有:抵抗病原菌的生物拮抗作
用;產生維生素,起到營養作用;促
進宿主免疫系統成熟,有免疫作用;
還有抗衰老作用等。
2.條件致病菌正常菌群與宿主間的
微生態平衡在某些情況下可被打破,
出現微生態失調而導致疾病,此時,
原來在正常情況下不致病的正常菌群
就轉化成條件致病菌(conditioned
pathogen)或機會致病菌(opportunistic
pathogen)。
3.微生態失調正常微生物群之間、
正常微生物群與其宿主之間的微生態
平衡,在外環境影響下,由生理性組
合轉變為病理性組合的狀態,稱為微
生態失調(dysbiosis)。從生態學上,
可將微生態失調分為菌群失調、定位
轉移和宿主轉換。
①菌群失調(dysbacteriosis):是指在
宿主某一微生境內正常菌群中細菌的
種類和數量發生較大幅度變化而超出
正常范圍的狀態,主要是量的變化。
嚴重的菌群失調可使宿主發生一系列
臨床癥狀,稱為菌群失調癥。
菌群失調可分為I、n、in度失調,
其中in度失調亦稱為二重感染
(superinfection),即在抗菌藥物治療
原感染性疾病過程中,造成體內菌群
失調而產生的一種新感染。原因是長
期或大量應用抗菌藥物后,敏感菌群
大部分被抑制,原來占少數的耐藥菌
趁機大量繁殖而占絕對優勢,并可能
轉移到非正常寄居部位,引起疾病。
引起二重感染主要以金黃色葡萄球
菌、革蘭陰性桿菌和白假絲酵母菌為
多見。臨床表現為假膜性腸炎、肺
炎、鵝口瘡、尿路感染或敗血癥等。
②定位轉移(translocation):又稱易
位,是指正常菌群由原籍生境轉移到
外籍生境或本來無菌生存的位置上的
一種現象。正常微生物群在其固有生
境內通常是不致病的,只有轉移到外
籍生境才能致病。
影響微生態失調的因素很多,但對宿
主,主要是解剖結構和免疫功能異常
的影響;對正常微生物群,抗生素的
干擾作用是巨大的。
4.醫院感染(nosocomialinfection)又
稱醫院獲得性感染(hospitalacquired
infection),主要指人們(重點是住院
病人)在醫院接受診斷、治療、護理及
其他醫療保健過程中,或在醫院逗留
期間獲得的感染。
根據感染來源的不同,醫院感染分
為:①交叉感染(crossinfection),由
醫院內病人或醫務人員直接或間接傳
播引起的感染;②內源性感染
(endogenousinfection),或稱自身感
染,由病人體內正常菌群引起的感
染;③醫源性感染(iatrogenic
infection),即在診斷、治療和預防過
程中,因所用器械消毒不嚴而引起的
感染。引起醫院感染的病原體具有廣
泛性、多樣性(大多為條件致病菌)、
耐藥性和適應性等特點。
二、細菌的致病機制
1.細菌致病性的構成因素細菌能引
起感染的能力稱為致病性
(pathogenicity)。病原菌致病力的強
弱程度稱為毒力(virulence)。病原菌
侵入宿主能否致病主要取決于細菌的
毒力、侵入數量、侵入部位和機體免
疫力的強弱。
細菌毒力由侵襲力(invasiveness)和毒
素(toxin)構成。侵襲力是指病原菌突
破宿主的防御功能,在體內定植、繁
殖和擴散的能力,其物質基礎包括菌
體表面結構中的菌毛等粘附因子、莢
膜和侵襲性酶類等。
2.細菌內毒素與外毒素的區別細菌
毒素按其來源、性質和作用等不同,
可分為內毒素(endotoxin)與外毒素
(exotoxin)兩種(表6-1)。
表6」細菌內毒素與外毒素的主要區
別
區別要點
外毒素
內毒素
產生菌
存在部位
化學組成
穩定性
毒性作用
抗原性
革蘭陽性菌與部分革蘭陰性菌
多數由活菌分泌,少數菌體崩解后釋
出
8樓
蛋白質
不耐熱(60?80℃30分鐘被破壞)
強,對組織器官有選擇性毒性作用,
引起特殊的病變
強,刺激機體產生抗毒素,可被甲醛
脫毒形成類毒素
革蘭陰性菌
細菌死亡裂解后才釋放
脂多糖
耐熱(160℃2?4小時被破壞)
弱,各種細菌毒性作用大致相同
弱,刺激機體產生的中和抗體作用
弱,不被甲醛脫毒形成類毒素
外毒素大都由A、B兩個亞單位組成,
A亞單位為毒性活性蛋白,B亞單位為
結合蛋白。B亞單位與易感細胞膜上
的受體有選擇親和作用,介導A亞單
位進入靶細胞內,干擾細胞正常生理
功能,引起毒性作用。因此,毒素結
構的完整性是致病的必備條件。外毒
素對機體組織器官有選擇性,引起各
自不同的特殊病變和臨床癥狀。根據
外毒素對宿主細胞的親和性及作用方
式等,可分為神經毒素、細胞毒素、
腸毒素三大類。
外毒素中有一類具有超抗原
(superantigen)作用,主要是葡萄球菌
腸毒素、毒性休克綜合征毒素」、鏈
球菌致熱外毒素等。超抗原不需經過
抗原遞呈細胞的處理,能與MHC-E
類分子結合,直接激活T細胞增殖,
使其能釋放細胞因子(如IL-l,IL-2,
TNFoc和INFy等)。超抗原激活的T
細胞數量約為普通抗原的數千倍。超
抗原除具有毒性作用外,還與免疫抑
制和自身免疫疾病有關。
各種細菌內毒素的成分基本相同,都
是由脂質A、非特異性核心多糖和O
特異多糖三部分組成,內毒素的毒性
作用由脂質A決定。不同革蘭陰性菌
的脂質A的化學組成雖有差異,但基
本相同,故由內毒素引起的毒性作用
大致相同,主要有發熱反應、白細胞
反應、內毒素血癥與內毒素休克、
Shwartzman現象與彌散性血管內凝血
(DIC)等。
總之,所有病原菌進攻人體不外乎利
用菌體表面結構(如菌毛、莢膜)和代
謝產物(侵襲性酶類、內外毒素)使人
致病。由于細菌結構、代謝產物、生
長繁殖所需條件,以及侵入和定植部
位的不同,各種細菌的致病性有很大
的差異。
三、宿主的免疫防御機制
(一)天然免疫的構成
天然免疫(innateimmunity)主要由組
織屏障和某些免疫細胞、免疫分子等
組成。
1.屏障結構皮膚與粘膜、血-腦脊液
屏障、胎盤屏障。
2.吞噬細胞分為中性粒細胞、單核-
巨噬細月包系統(mononuclearphagocyte
system)兩大類。病原菌被吞噬細胞吞
噬后。其后果隨細菌種類、毒力和人
體免疫力不同而異,包括完全吞噬、
不完全吞噬。
3.體液因素正常體液和組織中含有
多種殺傷或抑制致病菌的物質,包括
補體、防御素、溶菌酶等。
(二)獲得性免疫(acquiredimmunity)
包括體液免疫和細胞免疫兩大類。
1.胞外菌感染的免疫首先是吞噬細
胞的吞噬和炎癥反應,隨后產生特異
性抗體,共同消滅細菌。體液免疫是
抗胞外菌感染的主要獲得性免疫,特
異抗體的作用有①IgG抗體調理細菌
促進吞噬;②抗體中和細菌外毒素;
③分泌型IgA阻擋病原菌定植;
④IgM、IgG抗體與抗原復合物可激活
補體經典途徑。
2.胞內菌感染的免疫主要是以T細
胞為主的細胞免疫。特異性細胞免疫
應答包括兩種類型:CD8CTL和
CD4Thl細胞產生的細胞因子。
四、感染的發生和發展
1.感染的來源①外源性感染:病
人、帶菌者、病畜和帶菌動物;②內
源性感染:大多為自身的條件致病
菌,少數是以潛伏于體內的病原菌。
2.傳播方式與途徑呼吸道、消化
道、創傷、接觸、節肢動物叮咬等。
3.感染的類型①不感染:機體免疫
力很強,病原菌致病力很弱或侵入數
量不足,或侵入部位不適宜;②隱性
感染:機體免疫力較強,病原菌致病
力較弱,感染對機體損害輕,不出現
明顯的臨床癥狀;③潛伏感染:機體
免疫力與病原菌致病力處于平衡狀
態,病原菌長期潛伏體內。一旦機體
免疫力下降,潛伏的病原菌大量繁殖
引起疾病;④顯性感染:機體免疫力
弱,病原菌致病力強,造成機體明顯
損傷,出現一系列臨床癥狀和體征。
按感染部位不同,顯性感染分為局部
感染和全身感染,全身感染包括:毒
困癥.、則癥.、
內毒素血癥。
帶菌狀態:帶菌者(carrier)是重要傳
染源。
9樓
第7章細菌感染的檢查方法與防治原
則
復習提要
一、細菌學診斷
(一)標本的采集
應符合以下幾個原則:①注意無菌操
作,盡量避免雜菌污染;②在患者不
同病程,根據不同病原菌在體內的分
布和排出部位,采取不同的標本;③
應在發病急性期和使用抗生素之前采
集;④盡可能采取病變明顯部位的材
料;⑤標本必須新鮮,盡快送檢;⑥
多數菌冷藏運送,少數菌需保溫;⑦
標本應做好標簽,化驗單上填寫檢驗
目的、標本種類和臨床診斷。
(二)病原菌的檢驗程序
1.直接涂片鏡檢凡在形態和染色性
上具有特征的病原菌,直接涂片染色
后鏡檢有助于初步診斷。
2.分離培養原為無菌部位采取的血
液、腦脊液等標本,可直接接種至營
養豐富的液體或固體培養基;從正常
菌群存在部位采取的標本,應接種至
選擇或鑒別培養基。同時要注意滿足
氣體的要求。
3.生化試驗如腸道桿菌包括多個菌
屬,可利用不同基質進行生化試驗予
以區別。
4.血清學試驗采用含有已知特異性
抗體的免疫血清與分離培養出的未知
純種細菌進行血清學試驗,可以確定
病原菌的種或型。
5.動物試驗主要用于分離、鑒定病
原菌,測定菌株產毒性等。
6.藥物敏感試驗對臨床選擇用藥有
指導意義。
7.分子生物學技術應用核酸雜交和
PCR技術檢測病原菌核酸。基因芯片
技術已成為研究開發熱點。
二、血清學診斷
用已知的細菌或其特異性抗原檢測患
者血液中有無相應特異抗體和其效價
的動態變化,可作為某些傳染病的輔
助診斷,主要適用于抗原性較強的致
病菌和病程較長的感染性疾病。
血清學診斷試驗最好取患者急性期和
恢復期雙份血清標本,當后者的抗體
效價比前者升高>4倍者方有意義。
表7」血清學試驗種類與應用
血清學試驗
舉例
凝集試驗
直接凝集試驗
乳膠凝集試驗
冷凝集試驗
沉淀試驗
對流免疫電泳
補體結合試驗
中和試驗
傷寒、副傷寒的肥達試驗,立克次體
的外斐試驗
檢查流感嗜血桿菌的抗體
支原體性原發性非典型肺炎
梅毒的VDRL、RPR試驗,白喉毒素
流行性腦膜炎
立克次體病
風濕熱(抗O試驗)
三、人工主動免疫和人工被動免疫
1.特異性免疫獲得方式①主動免
疫:通過患病、隱性感染獲得自然感
染,或給機體接種疫苗(vaccine)、類
毒素(toxoid)進行人工免疫。②被動
免疫:通過胎盤、初乳等自然免疫獲
得抗體,或是給機體注射抗毒素
(antitoxin)等進行人工免疫。
2.人工免疫的概念和臨床常用制劑
①人工主動免疫(artificialactive
immunity):是將疫苗或類毒素等抗原
物質接種人體,使機體產生特異性免
疫力的一種措施。疫苗可分為死疫
苗、減毒活疫苗、基因工程疫苗、核
酸疫苗,從功能上又可分為預防性疫
苗和治療性疫苗。免疫出現時間慢
(2?4周),維持時間長(數月?數
年),主要用于預防。
②人工被動免疫(artificialpassive
immunity):是注射含有特異性抗體的
免疫血清或細胞因子,使機體立即獲
得特異性免疫,因而作用及時,但維
持時間短,僅2?3周,主要用于治療
或緊急預防。常用的生物制品是抗毒
素、抗菌血清、胎盤球蛋白、丙種球
蛋白和細胞免疫制劑。
10樓
第8章球菌
復習提要
一>葡萄球菌屬
葡萄球菌是最常見的化膿性球菌,是
醫院感染的重要病原菌。近年來由于
廣泛應用抗生素,耐藥菌株迅速增
多,尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球
菌(methicillin-resistantS.aureus,
MRSA),它已成為醫院感染最常見的
病原菌。
(一)生物學特性
1.形態與染色球形,典型的葡萄球
菌排列呈葡萄串狀。革蘭染色陽性。
2.分類根據色素和生化反應等特
點,可分為三類:金黃色葡萄球菌
(S.aureus)、表皮葡萄球菌
(S.epidermidis)、腐生葡萄球菌
其中金黃色葡萄球
(S.sarophyticus)o
菌多為致病菌。根據有無凝固酶,葡
萄球菌也可分為凝固酶陽性菌株和凝
固酶陰性菌株兩大類。此外,噬菌體
分型可用于追蹤傳染源和研究菌型與
疾病之間的關系。
3.葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal
proteinA,SPA)能與人和動物血清
IgG的Fc段非特異結合,IgG的Fab
段與相應抗原特異性結合。采用含
SPA的葡萄球菌作為載體,結合特異
性抗體后,可開展協同凝集試驗,廣
泛用于多種微生物抗原的檢出。SPA
還具有抗吞噬、促細胞分裂等作用。
(二)致病性
1.致病因素金黃色葡萄球菌產生的
毒素和酶很多,包括:
①葡萄球菌溶素(staphylolysin):為外
毒素,對人致病的主要是a溶素,能
溶解紅細胞,損傷白細胞、成纖維細
胞和血小板等。
②殺白細胞素(leukocidin):破壞中性
粒細胞和巨噬細胞。
③腸毒素(entertoxin):約1/3臨床分
離菌株可產生腸毒素。耐熱100℃
30min,抵抗胃腸液中蛋白酶的水解。
④表皮剝脫毒素(exfoliativetoxin):
可使表皮與真皮脫離,引起燙傷樣皮
膚綜合征,多見于新生兒、幼兒和免
疫功能低下的成人。
⑤毒素休克綜合毒素-1(toxicshock
syndrometoxin1):引起發熱,增加宿
主對內毒素的敏感性,促T細胞分
裂,誘生IL-1、TNF和IFN等。
⑥凝固酶(coagulase):使人和兔血漿
凝固,是鑒別葡萄球菌有無致病性的
重要標志。凝固酶能使周圍血液或血
漿中的纖維蛋白沉積在菌體表面,阻
礙體內吞噬細胞的吞噬,保護病菌不
受血清中殺菌物質的破壞。同時,使
感染易于局限化和形成血栓,膿汁粘
稠。
2.所致疾病引起侵襲性和毒素性兩
大類疾病。
①侵襲性疾病:主要是化膿性炎癥,
包括皮膚軟組織、器官化膿性感染,
嚴重時引起敗血癥和膿毒血癥。
②毒素性疾病:(A)腸毒素引起食物
中毒,食后1?6小時出現癥狀,刺激
嘔吐中樞,癥狀以嘔吐為主;(B)毒
素休克綜合征毒素-1引起毒素休克綜
合征,多見于月經期年青女性;(C)
表皮剝脫毒素引起燙傷樣皮膚綜合征
等。
(三)致病性葡萄球菌的鑒別要點
致病性葡萄球菌產生凝固酶和耐熱核
酸酶、金黃色色素、有溶血性和發酵
甘露醇,可作為判定致病性的指標。
但凝固酶陰性葡萄球菌亦可致病,故應
結合臨床病癥。
(四)凝固酶陰性葡萄球菌
凝固酶陰性葡萄球菌(coagulase
negativeStaphylococcus,CNS)主要弓I
起泌尿道感染、細菌性心內膜炎、敗
血癥。此外,心臟起博器安裝、置換
人工瓣膜、長期腹膜透析、靜脈滴注
等亦可造成CNS的感染。
二、鏈球菌屬
(一)生物學特性
1.形態與染色球形,排列呈鏈狀。
革蘭染色陽性。
2.分類①根據溶血現象可分為三
類:甲型溶血性鏈球菌(a-hemolytic
streptococcus):菌落周圍有草綠色溶
血環,亦稱草綠色溶血型鏈球菌;乙
型溶血性鏈球菌(^-hemolytic
streptococcus),菌落周圍有完全透明
溶血環,故稱乙型溶血性鏈球菌;丙
型鏈球菌(y-hemolyticstreptococcus):
沒有溶血環,亦稱不溶血性鏈球菌。
②根據抗原結構分類:按細胞壁中多
糖抗原不同分為20個群。同群再按表
面蛋白抗原不同,分為若干型。對人
有致病性者多為A群溶血性鏈球菌。
(二)致病性
1.致病物質A群鏈球菌也稱化膿性
鏈球菌(pyogenicstreptococcus),或溶
血性鏈球菌,是人類細菌感染常見的
病原菌之一。有較強的侵襲力,產生
多種外毒素和胞外酶。致病物質主要
有:
11樓
①脂磷壁酸:具粘附作用,使該菌定
植在皮膚和呼吸道粘膜上。
②M蛋白:抗吞噬作用。
③侵襲性酶類:透明質酸酶分解細胞
間質的透明質酸;鏈激酶使血液中纖
維蛋白酶原變為纖維蛋白酶,溶解血
塊;鏈道酶降解膿汁中高度粘稠的
DNA,使膿汁稀薄,從而有利于病菌
擴散。
④溶素(streptolysin,SL):有溶解紅
細胞、破壞白細胞和血小板的作用。
根據對氧的穩定性,分為SLO和
SLS,SLO抗原性強,風濕熱患者血清
中SLO抗體顯著升高。
⑤致熱外毒素(pyogenicexotoxin):
是一種超抗原,是人類猩紅熱的主要
毒性物質。
2.所致疾病大致分為三類:①化膿
性炎癥:如淋巴管炎、淋巴結炎、蜂
窩組織炎、膿皰瘡、扁桃體炎、咽
炎、咽峽炎等。因產生透明質酸酶、
鏈激酶、鏈道酶和溶血素,故感染特
點是病灶有明顯的擴散傾向,周圍界
限不清、膿汁稀薄、帶血色;②中毒
性疾病:致熱外毒素引起的急性呼吸
道傳染病猩紅熱,表現為發熱、咽
炎、全身鮮紅色皮疹等;③變態反應
性疾病:風濕熱和急性腎小球腎炎。
(三)抗。試驗
大多數鏈球菌感染的患者,于感染后
2?3周至病愈后數月到1年內可檢出
鏈球菌溶素O(SLO)抗體。風濕熱患
者血清中SLO抗體比正常人顯著增
高。因此,測定SLO抗體含量,可作
為鏈球菌新近感染指標之一或風濕熱
及其活動性的輔助診斷。
(四)甲型溶血性鏈球菌的致病性
甲型溶血性鏈球菌是感染性心內膜炎
最常見的致病菌,也可成為腦、肝和
腹腔內感染的病原菌。變異鏈球菌與
齒禹齒關系密切。
三、肺炎鏈球菌
1.形態染色與甲型溶血性鏈球菌的區
別肺炎鏈球菌(S.pneumoniae)呈矛頭
狀,成雙排列,革蘭染色陽性。營養
要求較高。能分解菊糖,產生自溶
酶。可用膽汁溶菌試驗與甲型溶血性
鏈球菌鑒別。
2.致病物質與所致疾病在體內能形
成莢膜,有抗吞噬作用,是肺炎鏈球
菌的主要侵襲力。該菌是人體正常菌
群,當機體免疫力下降時才致病。主
要引起大葉性肺炎。
四、腦膜炎奈瑟菌
1.生物學特征腦膜炎球菌
(N.meningitidis)為腎形雙球菌,在患
者腦脊液中,常位于中性粒細胞內。
革蘭染色陰性。營養要求高,常用巧
克力(色)瓊脂平板培養,初次分離需
補充5?10%CO2,對寒冷、干燥等敏
感。能產生自溶酶。
2.主要致病物質和所致疾病莢膜具
有抗吞噬作用。借助菌毛可粘附至咽
部粘膜上皮細胞表面。死亡裂解后釋
放出內毒素,作用于小血管和毛細血
管。傳染源是病人和帶菌者,主要經
飛沫侵入人體的鼻咽部。因宿主免疫
力強弱和病菌毒力、數量等不同,所
引起流行性腦脊髓膜炎(流腦)一般表
現為3種臨床類型,即普通型、暴發
型和慢性敗血癥型。
3.微生物學檢查采取病人的腦脊
液、血液或刺破出血淤斑取其滲出
物。帶菌者檢查可取鼻咽拭。標本采
集后應注意保暖并立即送檢。接種的
培養基應預溫,培養時應補充CO2。
直接涂片鏡檢如在中性粒細胞內、夕卜
有革蘭染色陰性雙球菌,可作出初步
診斷。對流免疫電泳常用于流腦的快
速診斷。
五、淋病奈瑟菌
1.形態染色與培養淋球菌
(gonococcus)為雙球菌,兩菌接觸面
平坦,常位于中性粒細胞內。革蘭染
色陰性。培養特性與腦膜炎球菌相
似。
2.致病物質與所致疾病進入尿道
后,通過菌毛粘附到柱狀上皮細胞表
面,之后侵入細胞增殖。外膜蛋白和
IgAl蛋白酶亦可破壞宿主免疫機制。
人類是淋球菌的唯一宿主,主要通過
性接觸傳播,引起淋病,一般臨床表
現為男性前尿道炎、女性尿道炎和子
宮頸炎。
3.微生物學檢查用無菌棉拭取泌尿
生殖道膿性分泌物或宮腔口表面分泌
物,直接涂片鏡檢有診斷價值。分離
培養方
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