ICS11.220DB13B41河北省地方標準DB13/T1482—2011病死動物產品鑒別技術規范河北省質量技術監督局發布DB13/T1482—2011前言本標準按照GB/T1.1—2009給出的規則起草。本標準由唐山市質量技術監督局提出。本標準起草單位：唐山市動物衛生監督所。本標準主要起草人：張紹軍、王誠、劉潤東、張玉新、李杏媛、張建軍、孫敬軍、賈久滿、范煒、回新彩、賈浩程、張立良、張國清、丁紅田、邵力、王建紅、朱利華、李敬陽、李靜、高振永。IDB13/T1482—2011病死動物產品鑒別技術規范1范圍本標準規定了鑒別病死動物產品的感官檢查、快速檢測、實驗室檢驗、特殊檢驗、檢查結果判定等。本標準適用于動物衛生監督管理過程中對病死動物產品的鑒別。2規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB16548病害動物和病害動物產品生物安全處理規程《中華人民共和國動物防疫法》（中華人民共和國第十屆全國人民代表大會常務委員會第二十九次會議通過，2008年1月1日起施行）下列術語和定義適用于本標準。指豬、牛、羊及家禽等動物病死前急宰，或者死后冷宰的胴體或分割成塊的肉品及其內臟器官。指對患病的豬、牛、羊及家禽等動物，在瀕死期或臨近瀕死期為避免其自然死亡而進行的緊急宰殺。指對病死的豬、牛、羊及家禽等動物肉尸所施行的宰殺、解體。指瀕死期或死亡的動物體內血液循環不良或不循環，血液因重力作用向臥地一側沉積，形成的特有指動物死后血液循環停止，血液因重力作用向臥地一側沉積，透過皮膚呈現出來的暗紅色、暗紫色、1DB13/T1482—2011黑紫色斑痕。4樣品選擇病死動物產品鑒別樣品應選擇未經浸泡、熟制及化學藥品處理的豬、牛、羊及家禽等動物胴體、分割肉品、內臟器官及頭等。5感官檢查5.1胴體檢查a)宰殺刀口切面平整不外翻。b)刀口周圍組織無血液浸潤。c)一側性血液沉積。d)出現尸斑。e)淋巴結腫大，切面紫紅色、暗紅色或黑紅色。5.2肉品檢查a)肌肉暗紅色或黑紅色。b)肌肉切面暗紅色或黑紅色血液浸潤。C)肌肉切面滲出暗紅色或黑紅色血珠。5.3內臟檢查5.3.1胃腸a)彌漫性潮紅、暗紅色、紫紅色或藍紫色。b)彌漫性腫脹。c)彌漫性點狀或斑塊狀出血。d)黏膜糜爛、潰瘍或穿孔。e)黏膜下水腫、血腫。2DB13/T1482—2011e)刀刮切面時附著粥樣脾髓。5.3.3心臟a)心外膜點狀或條狀出血。b)心肌呈灰紅色似水煮，質地柔軟。c)虎斑心。d)心肌斑塊狀出血。e)菜花樣贅生物。f)寄生蟲。5.3.4肝臟a)腫大，腹側緣變鈍。b)質地變脆。c)固有色澤（牛羊棕黃色、豬紅褐色）改變，呈黃褐色、灰黃色、淡黃色、灰白色。d)彌漫性壞死。5.3.5肺臟a)皮膚紫紅色、暗黑色、鐵青色。b)冠、髯紫紅色、青紫色、紫黑色。c)眼部污穢不潔，眼球下陷。d)肛門松弛，淤血、出血。e)一側性血液沉積。3DB13/T1482—20116.1濾紙條血液浸潤法操作方法及結果判定見附錄A中A.1.1。操作方法及結果判定見附錄A中A.1.2。6.2愈創木脂酊反應法6.3過氧化物酶快速法操作方法及結果判定見附錄A中A.1.3。7實驗室檢驗7.1過氧化物酶反應法操作方法及結果判定見附錄A中A.2.1。7.2硫酸銅肉湯反應法操作方法及結果判定見附錄A中A.2.2。7.3微生物毒素呈色反應法操作方法及結果判定見附錄A中A.2.3。8特殊檢驗病死動物產品需要作動物疫病診斷的，應當向具有資質的動物疫病檢驗機構送檢，其中口蹄疫、高致病性禽流感的檢驗須向區域性（省級）專業實驗室或國家參考實驗室送檢。9檢查結果判定9.1感官檢查中病死動物產品基本特征符合5.1、5.2、5.3.1-5.3.6、5.4中規定項目之一的，判定為病死動物產品。9.2感官檢查中病死動物產品基本特征不典型但可疑的，判定為疑似病死動物產品。9.3疑似病死動物產品快速檢測，符合下列條件之一的，可初步判定為病死動物產品。a)7.1檢驗結果為陰性（－）的。10處理4DB13/T1482—2011AA附錄A（規范性附錄）病死動物產品檢測方法A.1快速檢測A.1.1濾紙條血液浸潤法A.1.1.1操作方法將試驗用干濾紙條裁成長5cm、寬0.5cm的濾紙條，取濾紙條一張將其一端插入被檢肉品的新切口內1cm-2cm深，經2min-3min觀察浸潤情況。A.1.1.2結果判定濾紙條被血樣液浸潤且超出插入部分2mm以上為陽性（＋）；無血樣浸潤為陰性(－)。A.1.2愈創木脂酊反應法A.1.2.1操作方法從采樣肉品切取片狀肌肉（3cm×2cm×0.5cm）一塊，新鮮切面朝上平置于培養皿中，在肉片上滴加5％愈創木脂酊5ml、3％過氧化氫溶液5-10滴。被檢肉片變為深藍色，肉片周圍溶液呈深藍色為陽性（＋）；被檢肉片不變顏色，肉片周圍溶液呈淡藍色環或無變化為陰性（－）。自采樣肉品切取片狀肌肉（3cm×2cm×0.5cm）一塊，新鮮切面朝上平置于培養皿中，在肉片上滴加1％過氧化氫溶液2滴、0.2％聯苯胺乙醇溶液5滴。被檢肉片出現藍綠色斑點為陽性（＋）；被檢肉片無斑點出現為陰性（－）。A.2.1過氧化物酶反應法A.2.1.1操作方法5DB13/T1482—2011A.2.1.1.1稱取樣品肌肉10g，研碎，置于100ml燒杯中，加入蒸餾水30ml，浸泡15min，期間振搖數次，過濾，即為10：30肉浸液，待檢。已知健康動物肉品肉浸液制作方法同被檢樣品肉浸液。A.2.1.1.2取試管3支，分別設定為試驗管、對照管Ⅰ、對照管Ⅱ：A.2.1.1.3試驗管加入被檢肉品肉浸液2毫升，對照管Ⅰ加入已知健康動物肉品肉浸液2ml，對照管Ⅱ加入蒸餾水2ml。A.2.1.1.4分別向3支試管加入0.2％聯苯胺乙醇溶液5滴，充分振蕩。A.2.1.1.5分別向3支試管加入1％過氧化氫2滴，稍加振蕩，觀察顏色變化。A.2.1.2結果判定A.2.1.2.1試管內肉浸液在0.5min-1.5min內呈藍綠色、灰綠色為陽性（＋）。A.2.1.2.2試管內肉浸液顏色變為淺灰色、灰褐色，渾濁為陰性（－）。A.2.1.2.3加入蒸餾水的試管內液體顏色不發生變化。A.2.2硫酸銅肉湯反應法A.2.2.1操作方法A.2.2.1.1稱取樣品肌肉10g，剪碎，置于100ml三角燒瓶中，加入蒸餾水30ml，攪均后加塞，置水浴中煮沸10min，趁熱過濾，即為10：30肉湯，冷卻至室溫，待檢。已知健康動物肉品肉湯制作方法同被檢樣品肉湯。A.2.2.1.3試驗管加入被檢肉品肉湯2毫升，對照管Ⅰ加入已知健康動物肉品肉湯2毫升，對照管Ⅱ加入蒸餾水2ml。加入蒸餾水的試管內液體顏色不發生變化。A.2.3.1.1無菌稱取樣品肌肉10g，剪碎；加入滅菌生理鹽水20ml，4％氫氧化鈉溶液10滴，研磨成粥狀；置于100ml三角燒瓶中，加熱至沸，冷卻，滴加5％草酸溶液5滴，過濾，即為10：20提取液，待檢。A.2.3.1.2.1試驗管加入待檢樣品提取液2ml、對照管Ⅰ加入健康動物肉品提取液2ml、對照管Ⅱ加入滅菌生理鹽水2ml；6DB13/T1482—2011A.2.3.1.2.2分別向3支試管滴加1％甲酚藍乙醇溶液1滴；A.2.3.1.2.3分別向3支試管滴加0.5％硝酸銀溶液3滴；A.2.3.1.2.4分別向3支試管滴加40％鹽酸溶液1滴；A.2.3.1.2.5將3支試管振搖混均后，分別滴加1％高錳酸鉀溶液2-3滴，振搖混均，