通關(guān)卷36基因工程（必備知識(shí)填空+優(yōu)選試題精練）考點(diǎn)01重組DNA技術(shù)的基本工具地城地城知識(shí)填空考點(diǎn)必背知識(shí)鞏固基礎(chǔ)落實(shí)建議用時(shí)：5分鐘1．切割DNA分子的工具是限制性內(nèi)切核酸酶，簡稱限制酶，這類酶主要是從原核生物中分離純化出來的。它們能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，產(chǎn)生黏性末端或平末端兩種形式的末端。（P71）2．DNA連接酶分為兩類，一類是E.coliDNA連接酶，另一類是T4DNA連接酶。后者既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端，又可以“縫合”雙鏈DNA片段的平末端，但連接平末端的效率相對(duì)較低。（P72）3．質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子。（P72）4．在基因工程操作中，真正被用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的。這些質(zhì)粒上常有特殊的標(biāo)記基因，如四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因等，便于重組DNA分子的篩選。（P72）5．在基因工程中使用的載體除質(zhì)粒外，還有噬菌體、動(dòng)植物病毒等。它們的來源不同，在大小、結(jié)構(gòu)、復(fù)制方式以及可以插入外源DNA片段的大小上也有很大差別。（P73）6．載體必須具備的條件：①能在受體細(xì)胞中保存下來并能自我復(fù)制；②具有1個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，以便與外源基因連接。③具有標(biāo)記基因。（P72）7．DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精，利用這一原理，可以初步分離DNA與蛋白質(zhì)。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。（P74“探究·實(shí)踐”）地城地城試題精練考點(diǎn)鞏固題組突破分值：50分建議用時(shí)：25分鐘1．“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本過程是：裂解→分離→沉淀→鑒定。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．裂解：使細(xì)胞破裂釋放出DNA等物質(zhì)B．分離：可去除混合物中的多糖、蛋白質(zhì)等C．沉淀：可反復(fù)多次以提高DNA的純度D．鑒定：加入二苯胺試劑后即呈現(xiàn)藍(lán)色2．限制性內(nèi)切酶EcoRI識(shí)別并切割雙鏈DNA，用EcoRI完全酶切果蠅基因組DNA，理論上得到DNA片段的平均長度（堿基對(duì)）約為（

）A．6 B．250 C．4000 D．240003．粗提取DNA時(shí)，向雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水并攪拌，過濾后所得濾液進(jìn)行下列處理后再進(jìn)行過濾，在得到的濾液中加入特定試劑后容易提取出DNA相對(duì)含量較高的白色絲狀物的處理方式是（

）A．加入適量的木瓜蛋白酶B．37～40℃的水浴箱中保溫10～15分鐘C．加入與濾液體積相等的、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精D．加入NaCl調(diào)節(jié)濃度至2mol/L→過濾→調(diào)節(jié)濾液中NaCl濃度至0．14mol/L4．將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長激素的基因后，重新置入大腸桿菌的細(xì)胞內(nèi)，通過發(fā)酵就能大量生產(chǎn)人生長激素。下列敘述正確的是A．發(fā)酵產(chǎn)生的生長激素屬于大腸桿菌的初級(jí)代謝產(chǎn)物B．大腸桿菌獲得的能產(chǎn)生人生長激素的變異可以遺傳C．大腸桿菌質(zhì)粒標(biāo)記基因中腺嘌呤與尿嘧啶含量相等D．生長激素基因在轉(zhuǎn)錄時(shí)需要解旋酶和DNA連接酶5．下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述,錯(cuò)誤的是A．酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水C．向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?可見玻璃棒上有白色絮狀物D．DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán)6．關(guān)于物質(zhì)提取、分離或鑒定的高中生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，敘述錯(cuò)誤的是（）A．研磨肝臟以破碎細(xì)胞用于獲取含過氧化氫酶的粗提液B．利用不同物質(zhì)在酒精溶液中溶解性的差異粗提DNAC．依據(jù)吸收光譜的差異對(duì)光合色素進(jìn)行紙層析分離D．利用與雙縮脲試劑發(fā)生顏色變化的反應(yīng)來鑒定蛋白質(zhì)二、綜合題7．某病毒對(duì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重。我國學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測(cè)該病毒，其主要技術(shù)路線如圖所示。回答下列問題：(1)與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前，已免疫的脾細(xì)胞（含漿細(xì)胞）（填“需要”或“不需要”）通過原代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量；添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合，該過程中PEG對(duì)細(xì)胞膜的作用是。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基），該培養(yǎng)基對(duì)和生長具有抑制作用。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交，其目的是。(4)構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是。8．斑馬魚的酶D由17號(hào)染色體上的D基因編碼。具有純合突變基因(dd)的斑馬魚胚胎會(huì)發(fā)出紅色熒光。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將綠色熒光蛋白(G)基因整合到斑馬魚17號(hào)染色體上，帶有G基因的胚胎能夠發(fā)出綠色熒光。未整合G基因的染色體的對(duì)應(yīng)位點(diǎn)表示為g。用個(gè)體M和N進(jìn)行如下雜交實(shí)驗(yàn)（1）在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)中，將G基因與質(zhì)粒重組，需要的兩類酶是和。將重組質(zhì)粒顯微注射到斑馬魚中，整合到染色體上的G基因后，使胚胎發(fā)出綠色熒光。（2）根據(jù)上述雜交實(shí)驗(yàn)推測(cè)①親代M的基因型是(選填選項(xiàng)前的符號(hào))。a.DDgg

b.Ddgg②子代中只發(fā)綠色熒光的胚胎基因型包括(選填選項(xiàng)前的符號(hào))。a.DDGG

b.DDGg

c.DdGG

d.DdGg（3）雜交后，出現(xiàn)·綠熒光(既有紅色又有綠色熒光)胚胎的原因是親代(填“M”或“N”)的初級(jí)精(卵)母細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中，同源染色體的發(fā)生。了交換，導(dǎo)致染色體上的基因重組。通過記錄子代中紅綠熒光胚胎數(shù)量與胚胎總數(shù)，可計(jì)算得到該親本產(chǎn)生的重組配子占其全部配子的比例，算式為。考點(diǎn)02基因工程的基本操作程序地城地城知識(shí)填空考點(diǎn)必背知識(shí)鞏固基礎(chǔ)落實(shí)建議用時(shí)：10分鐘1．培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉主要需要四個(gè)步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。（P76）2．PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。它是一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)。（P77）3．PCR技術(shù)可以分為變性、復(fù)性和延伸三步。（如下圖）（P78）4．PCR反應(yīng)過程可以在PCR擴(kuò)增儀（PCR儀）中自動(dòng)完成，完成以后，常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物。（P79）5．基因表達(dá)載體要包括以下四個(gè)基本的結(jié)構(gòu)：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。（P80）6．構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。（P80）7．啟動(dòng)子位于目的基因的上游，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。（P80）8．標(biāo)記基因的作用：鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。（或供重組DNA的鑒定和選擇）。9．熟悉基因表達(dá)載體構(gòu)建的過程。10．花粉管通道法有多種操作方式。例如，可以用微量注射器將含目的基因的DNA溶液直接注入子房中；可以在植物受粉后的一定時(shí)間內(nèi)，剪去柱頭，將DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入胚囊。除此之外，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法還有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。（P81）11．轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。（P81“資料卡”）12．檢查轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否培育成功，首先是分子水平的檢測(cè)，包括通過PCR等技術(shù)檢測(cè)棉花的染色體DNA上是否插入了Bt基因或檢測(cè)Bt基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；從轉(zhuǎn)基因棉花中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交，檢測(cè)Bt基因是否翻譯成Bt抗蟲蛋白等。其次，還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。例如，通過采摘抗蟲棉的葉片飼喂棉鈴蟲來確定Bt基因是否賦予了棉花抗蟲特性以及抗性的程度。（P82）13．培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的四個(gè)步驟，其實(shí)就反映了基因工程的基本操作程序。（P82）14．在獲得轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的過程中，還可以通過構(gòu)建基因文庫來獲取目的基因。（P82）15．將目的基因?qū)雱?dòng)物受精卵最常用的一種方法是利用顯微注射將目的基因注入動(dòng)物的受精卵中，這個(gè)受精卵將發(fā)育成為具有新性狀的動(dòng)物。在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。（P82）地城地城試題精練考點(diǎn)鞏固題組突破分值：50分建議用時(shí)：25分鐘1．用氨芐青霉素抗性基因（AmpR）、四環(huán)素抗性基因（TetR）作為標(biāo)記基因構(gòu)建的質(zhì)粒如圖所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的質(zhì)粒，構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組質(zhì)粒），并轉(zhuǎn)化到受體菌中。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A．若用HindⅢ酶切，目的基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物可能不同B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四環(huán)素）培養(yǎng)基中的菌落，不一定含有目的基因C．若用SphⅠ酶切，可通過DNA凝膠電泳技術(shù)鑒定重組質(zhì)粒構(gòu)建成功與否D．若用SphⅠ酶切，攜帶目的基因的受體菌在含Amp（氨芐青霉素）和Tet的培養(yǎng)基中能形成菌落2．某研究小組利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將綠色熒光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如圖甲所示。實(shí)驗(yàn)得到能正常表達(dá)兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，交配以期獲得Gata3-GFP基因純合子小鼠。為了鑒定交配獲得的4只新生小鼠的基因型，設(shè)計(jì)了引物1和引物2用于PCR擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖乙所示。

下列敘述正確的是（）A．Gata3基因的啟動(dòng)子無法控制GFP基因的表達(dá)B．翻譯時(shí)先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白C．2號(hào)條帶的小鼠是野生型，4號(hào)條帶的小鼠是Gata3-GFP基因純合子D．若用引物1和引物3進(jìn)行PCR，能更好地區(qū)分雜合子和純合子3．某同學(xué)擬用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA連接酶為工具，將目的基因（兩端含相應(yīng)限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)）和質(zhì)粒進(jìn)行切割、連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。限制酶的切割位點(diǎn)如圖所示。

下列重組表達(dá)載體構(gòu)建方案合理且效率最高的是（

）A．質(zhì)粒和目的基因都用酶3切割，用E.coliDNA連接酶連接B．質(zhì)粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4DNA連接酶連接C．質(zhì)粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4DNA連接酶連接D．質(zhì)粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coliDNA連接酶連接4．某實(shí)驗(yàn)利用PCR技術(shù)獲取目的基因，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示除目的基因條帶（引物與模板完全配對(duì)）外，還有2條非特異條帶（引物和模板不完全配對(duì)）。為了減少反應(yīng)非特異條帶的產(chǎn)生，以下措施中有效的是（

）A．增加模板DNA的量 B．延長熱變性的時(shí)間C．延長延伸的時(shí)間 D．提高復(fù)性的溫度5．我國考古學(xué)家利用現(xiàn)代人的DNA序列設(shè)計(jì)并合成了一種類似磁鐵的“引子”，成功將極其微量的古人類DNA從提取自土壤沉積物中的多種生物的DNA中識(shí)別并分離出來，用于研究人類起源及進(jìn)化。下列說法正確的是（

）A．“引子”的徹底水解產(chǎn)物有兩種B．設(shè)計(jì)“引子”的DNA序列信息只能來自核DNAC．設(shè)計(jì)“引子”前不需要知道古人類的DNA序列D．土壤沉積物中的古人類雙鏈DNA可直接與“引子”結(jié)合從而被識(shí)別6．關(guān)于高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本原理，敘述不正確的是A．噬菌體須在活菌中增殖培養(yǎng)是因其缺乏獨(dú)立的代謝系統(tǒng)B．提取組織DNA是利用不同化合物在溶劑中溶解度的差異C．成熟植物細(xì)胞在高滲溶液中發(fā)生質(zhì)壁分離是因?yàn)榧?xì)胞壁具有選擇透（過）性D．PCR呈指數(shù)擴(kuò)增DNA片段是因?yàn)樯弦惠喎磻?yīng)產(chǎn)物可作為下一輪反應(yīng)模板二、綜合題7．科研人員構(gòu)建了可表達(dá)J-V5融合蛋白的重組質(zhì)粒并進(jìn)行了檢測(cè)，該質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如圖甲所示，其中V5編碼序列表達(dá)標(biāo)簽短肽V5。

(1)與圖甲中啟動(dòng)子結(jié)合的酶是。除圖甲中標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外，作為載體，質(zhì)粒還需具備的結(jié)構(gòu)有（答出2個(gè)結(jié)構(gòu)即可）。(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒后，為了確定J基因連接到質(zhì)粒中且插入方向正確，需進(jìn)行PCR檢測(cè)，若僅用一對(duì)引物，應(yīng)選擇圖甲中的引物。已知J基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈位于b鏈，由此可知引物F1與圖甲中J基因的（填“a鏈”或“b鏈”）相應(yīng)部分的序列相同。(3)重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞內(nèi)正確表達(dá)后，用抗J蛋白抗體和抗V5抗體分別檢測(cè)相應(yīng)蛋白是否表達(dá)以及表達(dá)水平，結(jié)果如圖乙所示。其中，出現(xiàn)條帶1證明細(xì)胞內(nèi)表達(dá)了，條帶2所檢出的蛋白（填“是”或“不是”）由重組質(zhì)粒上的J基因表達(dá)的。三、實(shí)驗(yàn)題8．種子大小是作物重要的產(chǎn)量性狀。研究者對(duì)野生型擬南芥（2n=10）進(jìn)行誘變篩選到一株種子增大的突變體。通過遺傳分析和測(cè)序，發(fā)現(xiàn)野生型DAI基因發(fā)生一個(gè)堿基G到A的替換，突變后的基因?yàn)殡[性基因，據(jù)此推測(cè)突變體的表型與其有關(guān)，開展相關(guān)實(shí)驗(yàn)。回答下列問題：(1)擬采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將野生型DAI基因轉(zhuǎn)入突變體植株，若突變體表型確由該突變?cè)斐桑瑒t轉(zhuǎn)基因植株的種子大小應(yīng)與植株的種子大小相近。(2)用PCR反應(yīng)擴(kuò)增DAI基因，用限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)PCR產(chǎn)物和進(jìn)行切割，用DNA連接酶將兩者連接。為確保插入的DAI基因可以正常表達(dá)，其上下游序列需具備。(3)轉(zhuǎn)化后，T-DNA（其內(nèi)部基因在減數(shù)分裂時(shí)不發(fā)生交換）可在基因組單一位點(diǎn)插入也可以同時(shí)插入多個(gè)位點(diǎn)。在插入片段均遵循基因分離及自由組合定律的前提下，選出單一位點(diǎn)插入的植株，并進(jìn)一步獲得目的基因穩(wěn)定遺傳的植株（如圖），用于后續(xù)驗(yàn)證突變基因與表型的關(guān)系。

①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化T0代植株并自交，將T1代種子播種在選擇培養(yǎng)基上，能夠萌發(fā)并生長的陽性個(gè)體即表示其基因組中插入了。②T1代陽性植株自交所得的T2代種子按單株收種并播種于選擇培養(yǎng)基，選擇陽性率約%的培養(yǎng)基中幼苗繼續(xù)培養(yǎng)。③將②中選出的T2代陽性植株（填“自交”、“與野生型雜交”或“與突變體雜交”）所得的T3代種子按單株收種并播種于選擇培養(yǎng)基，陽性率達(dá)到%的培養(yǎng)基中的幼苗即為目標(biāo)轉(zhuǎn)基因植株。為便于在后續(xù)研究中檢測(cè)該突變，研究者利用PCR擴(kuò)增野生型和突變型基因片段，再使用限制性核酸內(nèi)切酶X切割產(chǎn)物，通過核酸電泳即可進(jìn)行突變檢測(cè)，相關(guān)信息見下，在電泳圖中將酶切結(jié)果對(duì)應(yīng)位置的條帶涂黑。考點(diǎn)03基因工程的應(yīng)用地城地城知識(shí)填空考點(diǎn)必背知識(shí)鞏固基礎(chǔ)落實(shí)建議用時(shí)：10分鐘1．科學(xué)家將藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件重組在一起，通過顯微注射的方法導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中，由這個(gè)受精卵發(fā)育成的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在進(jìn)入泌乳期后，可以通過分泌乳汁來生產(chǎn)所需要的藥物，這稱為乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器。（P90）2．用基因工程的方法，使外源基因得到高效表達(dá)的菌類一般稱為基因工程菌。（P91“相關(guān)信息”）3．目前，科學(xué)家正嘗試?yán)没蚬こ碳夹g(shù)對(duì)豬的器官進(jìn)行改造，采用的方法是在器官供體的基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達(dá)，或設(shè)法除去抗原決定基因，然后再結(jié)合克隆技術(shù)，培育出不會(huì)引起免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。（P91）地城地城試題精練考點(diǎn)鞏固題組突破分值：50分建議用時(shí)：25分鐘1．鹽堿脅迫下植物應(yīng)激反應(yīng)產(chǎn)生的H2O2對(duì)細(xì)胞有毒害作用。禾本科農(nóng)作物AT1蛋白通過調(diào)節(jié)細(xì)胞膜上PIP2s蛋白磷酸化水平，影響H2O2的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）

A．細(xì)胞膜上PIP2s蛋白高磷酸化水平是其提高H2O2外排能力所必需的B．PIP2s蛋白磷酸化被抑制，促進(jìn)H2O2外排，從而減輕其對(duì)細(xì)胞的毒害C．敲除AT1基因或降低其表達(dá)可提高禾本科農(nóng)作物的耐鹽堿能力D．從特殊物種中發(fā)掘逆境脅迫相關(guān)基因是改良農(nóng)作物抗逆性的有效途徑2．下圖是剔除轉(zhuǎn)基因植物中標(biāo)記基因的一種策略，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．分別帶有目的基因和標(biāo)記基因的兩個(gè)質(zhì)粒，都帶有T-DNA序列B．該方法建立在高轉(zhuǎn)化頻率基礎(chǔ)上，標(biāo)記基因和目的基因須轉(zhuǎn)到不同染色體上C．若要獲得除標(biāo)記基因的植株，轉(zhuǎn)化植株必須經(jīng)過有性繁殖階段遺傳重組D．獲得的無篩選標(biāo)記轉(zhuǎn)基因植株發(fā)生了染色體結(jié)構(gòu)變異3．在天花病毒的第四代疫苗研究中，可利用天花病毒蛋白的亞單位（在感染和致病過程中起重要作用的成分）制作疫苗。注射該疫苗可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生識(shí)別天花病毒的抗體。下列分析錯(cuò)誤的是（

）A．可通過基因工程途徑生產(chǎn)這種疫苗B．天花病毒蛋白的亞單位是該病毒的遺傳物質(zhì)C．該方法制備的疫苗不會(huì)在機(jī)體內(nèi)增殖D．天花病毒蛋白的亞單位是疫苗中的抗原物質(zhì)4．將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長激素的基因后，重新置入大腸桿菌的細(xì)胞內(nèi)，通過發(fā)酵就能大量生產(chǎn)人生長激素。下列敘述正確的是A．發(fā)酵產(chǎn)生的生長激素屬于大腸桿菌的初級(jí)代謝產(chǎn)物B．大腸桿菌獲得的能產(chǎn)生人生長激素的變異可以遺傳C．大腸桿菌質(zhì)粒標(biāo)記基因中腺嘌呤與尿嘧啶含量相等D．生長激素基因在轉(zhuǎn)錄時(shí)需要解旋酶和DNA連接酶5．北極比目魚中有抗凍基因，其編號(hào)的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越多，越強(qiáng)，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是（

）A．過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目錄基因組測(cè)序B．多個(gè)抗凍基因編碼去依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C．過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D．應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)6．生物工程包含多項(xiàng)分支技術(shù)，就其產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用而言，生物工程的基本原理是A．必須改造相關(guān)生物的基因 B．以糖類物質(zhì)作為主要原料C．以活細(xì)胞作為生物反應(yīng)器 D．以原生物體的代謝物為產(chǎn)品二、綜合題7．基因遞送是植物遺傳改良的重要技術(shù)之一，我國多個(gè)實(shí)驗(yàn)室合作開發(fā)了一種新型基因遞送系統(tǒng)（切—浸—生芽Cut-Dip-Budding，簡稱CDB法）。圖1與圖2分別是利用常規(guī)轉(zhuǎn)化法和CDB法在某植物中遞送基因的示意圖。

回答下列問題。(1)圖1中，從外植體轉(zhuǎn)變成愈傷組織的過程屬于；從愈傷組織到幼苗的培養(yǎng)過程需要的激素有生長素和，該過程還需要光照，其作用是。(2)圖1中的愈傷組織，若不經(jīng)過共培養(yǎng)環(huán)節(jié)，直接誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的植株可以保持植株A的。圖1中，含有外源基因的轉(zhuǎn)化植株A若用于生產(chǎn)種子，其包裝需標(biāo)注。(3)圖1與圖2中，農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞時(shí)，可將外源基因遞送到植物細(xì)胞中的原因是。(4)已知某酶（PDS）缺失會(huì)導(dǎo)致植株白化。某團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因編輯載體（含有綠色熒光蛋白標(biāo)記基因），利用圖2中的CDB法將該重組載體導(dǎo)入植株B，長出毛狀根，成功獲得轉(zhuǎn)化植株B．據(jù)此分析，從毛狀根中獲得陽性毛狀根段的方法是，圖2中，鑒定導(dǎo)入幼苗中的基因編輯載體是否成功發(fā)揮作用的方法是，依據(jù)是。(5)與常規(guī)轉(zhuǎn)化法相比，采用CDB法進(jìn)行基因遞送的優(yōu)點(diǎn)是（答出2點(diǎn)即可）。8．7S球蛋白是大豆最主要的過敏原蛋白，三種大豆脂氧酶Lox-1，2，3是大豆產(chǎn)生腥臭味的原因。大豆食品深加工過程中需要去除7S球蛋白和三種脂氧酶。科研人員為獲得7S球蛋白與三種脂氧酶同時(shí)缺失的大豆新品種，將7S球蛋白缺失的大豆植株與脂氧酶完全缺失的植株雜交，獲得F1種子。F1植株自交得到F2種子。對(duì)F1種子和F2種子的7S球蛋白和脂氧酶進(jìn)行蛋白質(zhì)電泳檢測(cè)，不同表現(xiàn)型的電泳條帶示意如下圖。

注：圖中黑色條帶為抗原一抗體雜交帶，表示相應(yīng)蛋白質(zhì)的存在。M泳道條帶為相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)蛋白所在位置，F(xiàn)1種子泳道的條帶待填寫。根據(jù)電泳檢測(cè)的結(jié)果，對(duì)F2種子表現(xiàn)型進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)如下表。F2種子表現(xiàn)型粒數(shù)7S球蛋白野生型1247S球蛋白缺失型377脂氧酶Lox-1，2，3野生型282①94②94Lox-1，2，3全缺失型31回答下列問題：(1)7S球蛋白缺失型屬于（填“顯性”或“隱性”）性狀。(2)表中①②的表現(xiàn)型分別是、。脂氧酶Lox—1，2，3分別由三對(duì)等位基因控制，在脂氧酶是否缺失的性狀上，F(xiàn)2種子表現(xiàn)型只有四種，原因是。(3)在答題卡對(duì)應(yīng)的圖中畫出F1種子表現(xiàn)型的電泳條帶。(4)已知Lox基因和7S球蛋白基因獨(dú)立遺傳。圖中第泳道的種子表現(xiàn)型為7S球蛋白與三種脂氧酶同時(shí)缺失型，這些種子在F2中的比例是。利用這些種子選擇并獲得穩(wěn)定遺傳種子的方法是。(5)為提高大豆品質(zhì)，利用基因工程方法提出一個(gè)消除野生型大豆7S球蛋白過敏原的設(shè)想。考點(diǎn)04蛋白質(zhì)工程的原理和應(yīng)用地城地城知識(shí)填空考點(diǎn)必背知識(shí)鞏固基礎(chǔ)落實(shí)建議用時(shí)：10分鐘1．蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求。（P93）2．基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)，這些天然蛋白質(zhì)是生物在長期進(jìn)化過程中形成的，它們的結(jié)構(gòu)和功能符合特定物種生存的需要，卻不一定完全符合人類生產(chǎn)和生活的需要。（P93）3．蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)（如下圖）。（P94）地城地城試題精練考點(diǎn)鞏固題組突破分值：50分建議用時(shí)：25分鐘1．如圖是蛋白質(zhì)工程中改造目的基因的一種技術(shù)路線。S1核酸酶可以去除雙鏈DNA突出的單鏈區(qū)；外切核酸酶Ⅲ只能從DNA雙鏈的3'末端逐個(gè)水解單核苷酸，可以產(chǎn)生不同長度的5'突出末端。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A．步驟一需使用兩種限制酶切割目的基因片段B．步驟二、三分別使用了S1核酸酶、外切核酸酶ⅢC．步驟四宜選用T4DNA連接酶處理DNA片段D．質(zhì)粒載體2中目的基因片段N的長度有多種2．在2020年12月的國際蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)競(jìng)賽（CASP）上，新一代AlphaFold人工智能系統(tǒng)，基于氨基酸序列，精確地預(yù)測(cè)了蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)。其準(zhǔn)確性可以與使用冷凍電子顯微鏡、X射線晶體學(xué)等實(shí)驗(yàn)技術(shù)解析的空間結(jié)構(gòu)相媲美。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的多樣性與氨基酸結(jié)構(gòu)的多樣性有關(guān)B．每一種蛋白質(zhì)都有其獨(dú)特的空間結(jié)構(gòu)，是表現(xiàn)其生物學(xué)活性所必需的C．此系統(tǒng)或?qū)?yīng)用于蛋白質(zhì)工程，以創(chuàng)造更符合人類需求的蛋白質(zhì)D．蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)并不穩(wěn)定，一旦發(fā)生不可逆的改變，便會(huì)失去生物學(xué)活性3．天然人白細(xì)胞介素-2（IL-2）是一種由133個(gè)氨基酸殘基組成的多肽，該多肽含有3個(gè)半胱氨酸，其中一個(gè)半胱氨酸（Cvs125）殘基以游離方式存在，另兩個(gè)（Cys58和Cys105）縮合成活性所必需的二硫鍵，人們利用定位誘變技術(shù)將基因中編碼Cvs125的堿基TGT轉(zhuǎn)換成TCT或GCA，使Cvs125轉(zhuǎn)換成絲氨酸或丙氨酸，不僅避免了錯(cuò)誤配對(duì)發(fā)生，而且產(chǎn)生的新IL-2的生物活性不受影響，其熱穩(wěn)定性也得到了明顯的改善。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．天然的IL-2是由白細(xì)胞分泌的具有免疫能力的抗體B．人工改造合成新IL-2，屬于蛋白質(zhì)工程C．可通過直接改造IL-2的氨基酸成為新IL-2從而改善其穩(wěn)定性D．利用定位誘變后的基因表達(dá)新IL-2的過程不遵循中心法則4．蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．通過蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)的性狀不可以遺傳B．蛋白質(zhì)工程和基因工程都需要構(gòu)建基因表達(dá)載體C．蛋白質(zhì)工程需要限制酶、DNA連接酶和載體等工具D．蛋白質(zhì)工程經(jīng)常要建立蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)的三維模型5．蛋白質(zhì)工程的最終目的是（

）A．分析蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)B．改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì)，滿足人類的需求C．獲取編碼蛋白質(zhì)的基因序列信息D．研究蛋白質(zhì)的氨基酸組成6．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的敘述錯(cuò)誤的是（

）A．蛋白質(zhì)工程本質(zhì)是對(duì)蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，但被改造的蛋白質(zhì)分子還是無法遺傳B．蛋白質(zhì)工程與DNA分子重組技術(shù)是分不開的，要用到限制酶和DNA連接酶C．蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì)是根據(jù)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，創(chuàng)造新基因或者改造老基因，是基因工程的發(fā)展與延續(xù)D．蛋白質(zhì)工程可按照人的意愿生產(chǎn)出自然界中不存在的蛋白質(zhì)7．蛋白質(zhì)工程為改造蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能提供了新的途徑。下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程及其應(yīng)用的敘述錯(cuò)誤的是（

）A．蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì)是通過改變氨基酸的結(jié)構(gòu)改變蛋白質(zhì)的功能B．蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系為基礎(chǔ)C．蛋白質(zhì)工程可對(duì)藥用蛋白進(jìn)行改造，使其更好地用于人類疾病的治療D．當(dāng)前限制蛋白質(zhì)工程發(fā)展的關(guān)鍵因素是對(duì)蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)的認(rèn)知不足8．T4溶菌酶在高溫時(shí)易失去活性。