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文檔簡介

名詞解釋1.細胞的全能性:指植物體的任何一個有完整細胞核的活細胞都具有該植物的全套遺傳基因和產生完整植株的潛在能力。2.分化:指細胞、組織、器官或整株植物從分生組織或幼小狀態發育為成熟狀態的過程,并在生理、形態上發生的變化。其最大的特征是失去分裂能力。3.脫分化:植物離休的器官、組織、細胞在人工培養基上,經過多次細胞分裂而失去原來的分化狀態,形成無結構的愈傷組織或細胞團的過程,使其回復到胚性細胞的狀態。其特征是已失去分裂能力的細胞重新獲得了分裂能力。4.再分化:指由脫分化的細胞再度分化成另一種或幾種類型的細胞、組織、器官,甚至最終再生成完整的植株的過程。5.試管苗:指在無菌離體條件下,對植物組織、細胞、器官進行組培所獲得的的再生植株。6.根芽激素理論:根和芽的分化由生長素和細胞分裂素的比率所決定,這一比率高時促進生根,比率低時促進莖芽的分化,比率適中時,組織則傾向于以一種無結構的方式生長。通過改變培養基中這兩類生長調節物質的相對濃度可以控制器官的分化。7.污染:批在組培過程中,由于真菌、幼苗等微生物的侵染,在培養容器內滋生大量的菌斑,使試管苗不能生長和發育的現象。8.褐變:指在組培過程中,培養材料向培養基中釋放褐色物質,致使培養基逐漸變成褐色,培養材料也隨之慢慢變褐而死亡的現象。9.玻璃化現象:指試管苗因生理失調而引起的嫩莖、葉片出現半透明狀和水漬狀的現象。10.無菌操作:亦稱接種。指將經過表面滅菌后的植物材料在無菌環境中切碎或分離出器官、組織或細胞轉移到無菌培養基上的過程。由于整個過程均在無菌條件下進行,所以將這個過程稱為無菌操作。11.植物組織培養:指在無菌條件下,將離體的植物器官(如葉、花、未成熟的果實、種子)、組織(如形成層、花藥組織、胚乳)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、細胞或原生質體,培養在人工配制的培養基上,給予適宜的培養條件,使其長成完整的植株或生產具有經濟價值的其他產品。這是廣義的植物組織培養概念,而狹義的植物組織培養是指以植物各部分離體組織或愈傷組織為外植體的離體無菌培養。12.培養基:培養基是提供植物或其他生物生長發育所需各種養分的介質。13.胚狀體:亦稱體細胞胚。指在組培過程中,由植物體細胞所形成的類似于合子胚的結構。它具有根、莖結構,能夠一次性形成再生植株。其與正常的受精卵發育方式相似,在形成過程中也要經過原胚、球形胚、心形胚等階段。14.外植體:由活體植物上切取下來,用以進行離體培養的那部分組織或器官。15.愈傷組織:原指植物在受傷后傷口表面形成的一團無序生長的薄壁細胞,在組織培養中,是指在人工培養基上由外植體長出來的一團無序生長的薄壁細胞。其特點是:細胞分裂快,結構疏松,缺少結構組織,顏色淺而透明。16.初代培養:是指在組培過程中,最初建立的外植體無菌培養階段。即無菌接種完成后,送入培養室的外植體在適宜的光、溫、氣等條件下被誘導成無菌短枝(或稱莖梢)、不定芽(叢生芽)、胚狀體或原球莖等中間繁殖體的過程。17.中間繁殖體:通過初代培養所獲得的不定芽、無菌莖梢、胚狀體或原球莖等無菌材料。18.繼代培養:中間繁殖體由于數量有限,所以需要將他們切割、分離后轉移到新的培養基中培養增殖的過程。19.繁殖系數:指單位植物種苗的收獲量與接種量之比。20.原球莖:亦稱綠色小球。多指蘭科植物的莖尖經組培,形成一個扁形球狀物,,其基部生有假根。它們在形態上與種子萌發時由胚形成的原球莖相似。21.懸浮培養:亦稱植物細胞懸浮培養。指使細胞團在液體培養基中進行培養的一種方法。通常可分為成批培養和連續培養兩種類型。22.后生遺傳變異:亦稱馴化現象。指細胞在發育、分化過程中,對基因表達的調控上所發生的變化,其不涉及基因結構的變化。后生遺傳變異在取消誘發條件后,還能通過細胞分裂在一定時間內繼續存在。在一般情況下,它不通通過再生過程遺傳給植株,因而這種變異無法繼續表現在再生植株的二次組培中。23.嵌合體:亦稱異源嵌鑲體。植物體的突變往往只影響分生組織的一部分,使突變的組織呈扇狀或層狀。用這種分生組織所繁殖的植物,因同時具有兩個或多個遺傳性狀不同的組織,而表現出不同的性狀和特點的現象。24.原生質體融合25.早熟萌發26.單倍體植株27.外植體28.愈傷組織培養:29.玻璃化現象30.體細胞胚31.無病毒苗32.植板率33.cDNA檢測法選擇題1.一植株下列(B)部位病毒的含量最低。A葉片細胞B莖尖生長點細胞C莖節細胞D葉柄細胞2.對于不易生根,較難形成完整植株的植物來說,最好的脫毒方法是(C)。A莖尖脫毒B愈傷組織脫毒C微尖嫁接脫毒D花藥脫毒3.培養基的pH一般是(C)。A4.8~5.0B5.0~5.6C5.8~6.0D6.0~7.04.下列不屬于生長素類的植物激素是(A)。AKtBIAACNAADIBA5.1962年,Murashige和Skoog為培養煙草花葉細胞設計了(B)培養基,其特點是無機鹽濃度較高。AWhiteBMSCN6DMiller6.第一次提出植物細胞具有全能性的理論概念的科學家是(B)。AMorelBHaberlandtCSchleidenDWhite7.下列不屬于大量元素的鹽是(C)。ANH4NO3BKNO3CZnSO4·7H2ODMgSO4·7H2O8.在組織培養中,IAA、ZT和GA必須用(B)法滅菌A高壓滅菌B過濾滅菌C干燥滅菌D照射滅菌9.要配置母液濃度為0.1mg/ml的IBA500ml,需要IBA(B)mg。A20B50C100D100010.下列不屬于微量元素的鹽是(A)ACaCL2·2H2OBZnSO4·7H2OCH3BO3DCuSO4·5H2O11.對于不易生根,較難形成完整植株的植物來說,最好的脫毒方法是(C)。A.莖尖脫毒B.愈傷組織脫毒C.微尖嫁接脫毒D.花藥脫毒12.禾本科植物的花粉培養一般采用下列哪種培養基(B)。A.B5B.N6C.HD.尼許13.培養基的pH一般是(C)。A.4.8~5.0B.5.0~5.6C.5.8~6.0D.6.0~7.014.下列不屬于生長素類的植物激素是(A)。A.KtB.IAAC.NAAD.IBA15.1962年,Murashige和Skoog為培養煙草花葉細胞設計了(B)培養基,其特點是無機鹽濃度較高。A.WhiteB.MSC.N6D.Miller16.第一次提出植物細胞具有全能性的理論概念的科學家是(B)。A.MorelB.HaberlandtC.SchleidenD.White17.花藥培養中,大多數植物適宜的花粉發育時期是(B)。A.四分孢子期B.單核后邊期C.雙核期D.三核期18.能打破種子休眠,促進種子、塊莖、鱗莖等提前萌發的激素是(A)。A.GAB.IAA;C.NAAD.ZT19.在成批培養過程中,細胞數目呈(C)曲線變化。A.Y型B.X型C.S型D.Z型20.要配置母液濃度為0.1mg/ml的IBA500ml,需要IBA(B)mg。A.20B.50C.100D.100021.第一次提出植物細胞具有全能性的理論概念的科學家是_________:AMorel;BHaberland;CSchleiden;DWhite22.下列培養基中_______無機鹽的濃度最低。AMS培養基;BB5培養基;CWhite培養基;N6培養基23.高溫易被破壞分解的植物激素是_________。AIAA;BGA;CNAA;DZt24.細胞懸浮成批培養過程中,細胞的生長,大致經歷________四個時期。A對數生長期;B停止期;C延緩期;D減慢期25.下列不屬于活性炭在組織培養中作用的是_______。A吸附有毒物質;B減少褐變,防止玻璃化;C創造黑暗環境,增加培養基的通透性,利于根的生長;D增加培養基中的養分;26.下列不屬于細胞分裂素類的植物激素是_________。A6-BA;BNAA;CZt;DKt27.下列不屬于大量元素的鹽是_________。ANH4NO3;BKNO3;CZnSO4.7H2O;DMgSO4.7H2O28培養室里的濕度一般保持在_________A30~40%;B50~60%;C70~80%;D80~90%29.吲哚乙酸(IAA)需要用_________法滅菌。A灼燒滅菌;B干熱滅菌;C過濾滅菌D高壓濕熱滅菌30.適宜的花粉發育時期:________。A單核早期;B雙核期;C三核期;D單核中、晚期31.下列不屬于生長素類的植物激素是________。AKt;BIAA;CNAA;D6-BA32.影響培養基凝固程度因素有________。A瓊脂的質量好壞;B高壓滅菌的時間;C高壓滅菌的溫度;D培養基的PH33.從單個細胞或一塊外植體形成典型的愈傷組織,大致經歷________三個時期。A誘導期;B潛伏期;C分化期;D分裂期多項選擇題1.響培養基凝固程度因素有(ABCD)。A.瓊脂的質量好壞B.高壓滅菌的時間C.高壓滅菌的溫度D.培養基的PH2.活性炭在組織培養中的作用有(ABC)。A.吸附有毒物質B.減少褐變,防止玻璃化;C.創造黑暗環境,增加培養基的通透性,利于根的生長;D.增加培養基中的養分;3.下列具有細胞全能性的細胞是:(ABCD)。A.成熟的老細胞B.幼嫩的組織細胞C.愈傷組織細胞D.番茄的受精合子4.下面屬于處于愈傷組織分裂期的特征是(ABCD)。A.細胞分裂加快B.正在分裂的細胞體積小,內無大液泡C.細胞的核和核仁增至最大D.細胞中RNA的含量減少,而DNA含量保持不變5.組織培養按培養方式可分為(AC)。A.固體培養B.葉培養C.液體培養D.生根培養6.由植物器官分離單細胞的方法有(AB)A.機械分離法B.酶解法C.離心法D.振蕩法7.影響褐變的主要因素有(ABCD)。A.基因型B.外植體的生理狀況C.培養基的成分D.材料轉移時間8.最常用的植物病毒鑒定方法有(ABCD)。A.抗血清鑒定法B.分子生物學鑒定法C.指示植物法D.直接鑒定法9.根據培養基作用不同,培養基可分為下列哪幾種(BCD)。A.基本培養基B.誘導培養基C.增殖培養基D.生根培養基10.外植體的選擇原則主要從以下哪些方面考慮?(ABCD)A.植物的基因型B.生理狀態C.取材季節D.取材部位11.活性炭在組織培養中的作用有(ABC)。A.吸附有毒物質B.減少褐變,防止玻璃化;C.創造黑暗環境,增加培養基的通透性,利于根的生長;D.增加培養基中的養分;12.幼胚培養時,其發育過程有(ABC)三種方式。A.胚性發育B.早熟萌發C.產生愈傷組織D.器官發生13.組織培養按培養方式可分為(AC)。A.固體培養B.葉培養C.液體培養D.生根培養14.由植物器官分離單細胞的方法有(AB)A.機械分離法B.酶解法C.離心法D.振蕩法15.影響褐變的主要因素有(ABCD)。A.基因型B.外植體的生理狀況C.培養基的成分D.材料轉移時間16.常用的植物脫毒方法有(ABCD)A.莖尖培養脫毒B.愈傷組織培養脫毒C.微尖嫁接脫毒D.花藥培養脫毒17.單倍體植株染色體加倍的方法有(ABCD)。A.自然加倍法B.秋水仙素法C.組織創傷法D.氟樂靈法18.最常用的植物病毒鑒定方法有(ABCD)。A.抗血清鑒定法B.分子生物學鑒定法C.指示植物法D.直接鑒定法19.根據培養基作用不同,培養基可分為下列哪幾種(BCD)。A.基本培養基B.誘導培養基C.增殖培養基D.生根培養基20.外植體的選擇原則主要從以下哪些方面考慮?(ABCD)A.植物的基因型B.生理狀態C.取材季節D.取材部位填空題1.在通過微莖尖培養脫毒時,外植體的大小應以成苗率和脫毒率綜合確定,一般以_________mm、帶________個葉原基為好。0.3~0.5,1~32.去除植物病毒的主要方法是_______________和____________兩種方法,當把二者結合起來脫毒效果最好。莖尖培養脫毒,熱處理脫毒3.花藥培養是____________培養,花粉培養屬于________培養,但二者的培養目的一樣,都是利用了花粉粒染色體數目的___________,最后發育成__________。器官,細胞,單倍性,單倍體,4.要配制培養基成分為MS+IAA1.0+6-BA2.0的培養基2L需要吸取母液濃度均為0.1mg/ml的IAA__________ml,6-BA___________ml。20,405.比值的高低決定了外植體的發育方向,比值低時促進芽的生長,這時細胞分裂素占主導地位;比值高促進根的生長,這時生長素占主導地位。細胞分裂素,生長素6.在組織培養中,不耐熱的物質用___________滅菌,而培養基常用_____________滅菌。過濾法,濕熱法7.組織培養中有三大不易解決的問題是_______、_______與__________。污染、褐變、玻璃化8.組織培養中培養室的溫度一般控制在__________,濕度一般控制在___________。25℃±2℃,70%~80%9.植物組織培養根據培養方式可分為_____________和_____________。固體培養,液體培養10.烘箱用于干燥玻璃器皿的溫度可以設在_________的范圍內,用于高溫干燥滅菌則需在____________的溫度下1-3小時;用于烘干植物材料的溫度是______________。100-130℃,160-180℃,80℃11.植物胚胎培養包括幼_________、_________、_________、_________以及子房培養。胚培養、成熟胚培養、胚珠培養、胚乳培養12.一粒成熟的種子含有一個________,構成胚的所有細胞幾乎都處于__________的狀態和旺盛的細胞_______能力,這些細胞叫胚性細胞,或叫分生性細胞或未分化細胞。其特征是具有_________。胚,未分化,分裂,分裂能力13.一個已分化的細胞或組織若要表現其全能性,一般要經歷兩個過程:________和_________。脫分化,再分化14.中間繁殖體由于數量有限,所以需要將他們切割、分離后轉移到新的培養基中培養增殖,這個過程就稱為繼代培養。繼代培養是繼__________之后的連續數代的擴繁培養過程,旨在繁殖__________的無根苗,最后能達到邊繁殖邊生根的目的。初代培養,相當數量15.根據培養物的進程和培養基的作用不同,培養基可分為誘導(啟動)培養基、_________________及________________________。增殖(擴繁)培養基,壯苗生根培養基。16.根據其營養水平不同,分為___________和___________。基本培養基,完全培養基17.外植體的消毒原則是既要_________離體材料表面的全部微生物,又不_____________植物材料。殺死,損傷或只輕微損18.胚胎培養是將植物的和母體分離,培養在已知化學成分的培養基上,胚胎培養包括、、、以及和培養。19.細胞平板培養法一般包括、、、、和五個步驟。20.無病毒原種苗只是脫除了原母株上的特定病毒,并末增加,因而在自然條件下易變而喪失其利用價值,同時受自然條件影響,無病毒原種易。正確保存無病毒原種苗的方法有和兩種。21.花粉植株的形成有兩條途徑:一是劃分形成,再分化誘導成苗,二是花粉分化成而直接成苗。22.植物組織培養的發展過程大致可分為三個階段:⑴階段(初至30年代中)⑵階段(30年代末至年代中)⑶階段(年代至現在)23請寫出下列響應的名稱或代號A.維生素CB.NAAC.6-BAD.吲哚-3-丁酸E.水解酪蛋白F.CMG.IAAH.維生素B1I.維生素CJ.NAAK.6-BA24.愈傷組織的形成一般要經過、、三個時期。25.FDA染色法是常用且比較理想的檢測原生質體活性的方法,FDA本為熒光極性,可自由透過原生質體質膜,在原生質體內易受的分解,而產生熒光的,它不能自由進出原生質體的質膜,所以在熒光顯微鏡下可觀察到的原生質體,表明是有活力的原生質體,的原生質體,則是無活力的原生質體。26.在花藥培養中花粉粒經或途徑形成孢子體(植株)。27.在細胞培養中,目前常用酶和酶從植物不同組織中直接制備單細胞,然后再通過培養、培養或培養方法,即可獲單細胞系。28.植物脫毒一般包括、、、四種途徑,其中脫毒效果最好的是。29.胚乳再生植物根據細胞核變化與分化器官的表現可分為和兩類。30.植物組織培養按培養的方式分為_______培養和_______培養。31.植物組織培養的應用有:______、____、、______、、等。32.花粉細胞通過和途徑形成再生植株33.在組織培養中,不耐熱的物質用__________法滅菌,而培養基常用__________法滅菌。34.6-BA/NAA的高低決定了外植體的發育方向,比值_________促進根的生長,這時__________占主導地位;比值________促進芽的生長,這時__________占主導地位。35.在通過微莖尖培養脫毒時,外植體的大小應以成苗率和脫毒率綜合確定,一般以________mm、帶________個葉原基為好。36.一個已停止分裂的成熟細胞轉變為_________狀態,并形成__________的現象稱為"脫分化"。37.植物組織培養按培養對象分為_______、_________、_________、__________、等幾種類型。判斷題1.滅菌是指用物理或化學的方法,殺死物體表面和孔隙內的一切微生物或生物體,即把所有有生命的物質全部殺死。(√)2.消毒是殺死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再發生危害作用。(√)3.草莓一般利用花藥培養進行脫毒。(√)4.禾本科植物和蕓薹科植物的花粉培養的最適時期是單核晚期。(×)5.在小麥胚培養過程中,小麥胚的褐色面向上。(√)6.由性細胞發育而成的胚叫做合子胚,而由體細胞發育而成的胚叫做胚狀體。(√)7.一個已分化的細胞若要表現其全能性,首先要經歷脫分化過程。(√)8.由胚乳培養獲得的三倍體植株,也一定要進行染色體倍數的檢查。(√)9.一般來說,光照強度較強,幼苗容易徒長,而光照強度較弱幼苗生長的粗壯。(×)10.經過花藥培養所獲得的植株都是單倍體。(×)11.幼年細胞和組織比成年細胞和組織誘導愈傷組織容易。(√)12.一般的說,PH值高于6.5時,培養基全變硬;低于5時,瓊脂不能很好地凝固。(√)13.在配制6-BA母液時,要先加少量的1mol的HCl溶解,再加蒸餾水定容。(√)14.無病毒苗指一點病毒也沒有的苗。(×)15.通過子房的培養,即可能等到單倍體植株,有能得到二倍體植株。(√)16.用于外植體、手、超凈臺等的表面消毒酒精濃度越大,消毒效果越好越好。(×)17.1/2MS培養基的所有成分都是MS培養基用量的一半。(×)18.利用蘆薈的吸芽和側芽進行組織培養時,采集外植體是最好用手掰,而不用刀割。(√)19.組織培養中,一般木本植物比草本植物易發生褐變。(√)20.誘發融合產生的一定是異核體。(×)21.植物病毒遺傳信息大多數都是DNA。(×)22.禾本科植物和蕓薹科植物的花粉培養的最適時期是單核早期。(√)23.在葉片培養時,葉組織上表皮朝上接種在培養基上有利于愈傷組織的生長和分化。(√)24.幼胚培養需要的培養基比成熟胚簡單。(×)25.由性細胞發育而成的胚叫做胚狀體,而由體細胞發育而成的胚叫做合子胚。26.在配制培養基時,加入瓊脂的作用是豐富培養基的營養成分。(×)27.培養是指把接種后的培養材料放在培養室里,使之生長脫分化形成愈傷組織或進一步分化成再生植株的過程。(√)28.用10倍的大量母液配制10L培養基,其用量為100ml。29.在細胞的成批培養整個過程中,一般要先后經過對數生長期、延遲期、減慢期、靜止期這四個階段。30.在誘導器官分化培養中,愈傷組織能否變綠是芽分化的前提。31.一般來說,幼年植株的花藥反應能力較好。32.一般來說,在配制生根培養的培養基是,應降低無機鹽濃度,增大蔗糖濃度,有利幼苗發根。33.經高壓高溫滅菌后,培養基的PH值會下降0.5個單位左右。34.植物材料不斷地進行離體繁殖時,有些培養物的嫩莖、葉片往往會呈半透明水跡狀,這種現象通常稱為玻璃化現象。玻璃化苗一般增殖容易,生根也較普通苗容易。35.“KT/IAA的比值高時,利于根分化,比值低時,利于芽分化,比值適中時,產生愈傷組織。”此為激素控制理論。激素控制理論最早是由Steward提出的。36.山梨醇、甘露醇是我們常用的滲透壓穩定劑,且易被吸收,可促進細胞增殖和生長。37.花粉在單核靠邊期時最易做花粉培養,因為此時期的花粉對離體培養的刺激最敏感。38.外植體中已分化的活細胞,在外源激素的誘導下通過脫分化后形成愈傷組織,這一過程被大致劃分為三個時期(誘導期、形成期和分裂期)。39.幼年細胞和組織比成年細胞和組織誘導愈傷組織容易。40.一般的說,PH值高于6.5時,培養基全變硬;低于5時,瓊脂不能很好地凝固。41.在配制6-BA母液時,要先加少量的1mol的HCl溶解,再加蒸餾水定容。42.未成熟胚較小、較嫩、顏色淺,易培養;成熟胚較大、較硬、顏色較深,不易培養。43.環境的相對濕度可以影響培養基的水分蒸發,一般要求80%-90%的相對濕度。44.經過花藥培養所獲得的植株都是單倍體。45.壓高溫滅菌后,培養基的PH值會下降0.5-1個單位左右。46.細胞分裂素的濃度過低,易導致玻璃化現象。47.在植物幼胚培養中,我們選用的蔗糖濃度為4%,因為這樣的蔗糖濃度已足夠幼胚的生長發育所需。48.升汞(氯化汞)是我們常用的外植體表面消毒劑濃度為0.1-1%,消毒時間為2-10分鐘。49.用于愈傷組織培養的外植體,一般在0.5~1cm,因太大會增加污染機會,太小,則不便操作,生長緩慢。50.在細胞的成批培養整個過程中,一般要先后經過對數生長期、延遲期、減慢期、靜止期這四個階段。51.在實驗操作中,往往使用95%的酒精進行消毒,因為95%濃度的酒精比75%酒精的消毒效果要好。52.花粉在單核靠邊期時最易做花粉培養,因為此時期的花粉對離體培養的刺激最敏感。53.實驗證明,通過早期莖尖培養,利用頂芽、腋芽增殖,是最少發生突變的方法。簡述題1.以菊花莖段培養為例簡述無菌操作規程?(1)先用水和肥皂清洗雙手,然后穿上滅菌后的專用實驗服、帽子與鞋子,進入接種室,打開超凈工作臺的紫外燈,照射20分鐘,然后關閉紫外燈。(2)在準備室將菊花嫩莖剪成1.0~1.5cm長莖段,每段帶一芽,放入已滅菌的培養瓶中,帶入無菌超作室。用70%的酒精擦拭雙手及超凈工作臺,點燃酒精燈。把剪刀、鑷子等放入95%的酒精中,在火焰上滅菌。(3)先用70%酒精消毒30秒,倒掉酒精,再倒入0.1%的HgCl2溶液消毒5~8分鐘,無菌水沖洗3~4次。用剪刀在廣口瓶內,將莖段兩端各剪去一小段,使剩下的莖段大約為1.0cm左右。(4)打開培養基,用火焰灼燒一下培養基的瓶口和瓶蓋,用鑷子夾住莖段,插入培養基中,在灼燒一下瓶口和瓶蓋,擰好蓋子。接種過程中常用70%的酒精擦拭工作臺和雙手,用火焰灼燒手術刀和鑷子。(5)接種完畢后,整理超凈工作臺,將培養瓶放在25℃的培養室中培養,清洗所有工具。2.試管苗與野生苗生境有何差異?試管苗生境與野生苗生境的比較生境光照溫度相對濕度養分氣體菌態試管苗弱,易調控適宜且恒定高豐富光下CO2低,有害氣體量高無菌野生苗強,波動大波動性大較低,波動大較貧瘠各種氣體成分較恒定有菌3.試管苗與野生苗在形態結構及功能上的差異?試管苗與野生苗形態結構與功能上的差異葉片及其功能根系及其功能試管苗角質層薄,水孔多,氣孔的生理活性差,保水能力差;此外,葉綠體的光合性能也差。根系不發達,吸水能力差。野生苗角質層較厚,水孔少,氣孔的生理活性強;葉綠體的光合性能好。根系發達,吸水能力強。4.簡述莖尖脫毒原理?(1)利用植物細胞的全能性,在特定條件下可獲得不同的細胞、組織、器官,可能產生無病毒的細胞、組織、器官。(2)根據病毒在植物體內分布特點,一般距離植物頂端分生組織越近,病毒濃度越低。(3)根據病毒的運輸途徑,一般病毒是通過維管束和胞間連絲進行運輸的,在植物頂端分生組織維管系統尚未形成,因此莖尖病毒濃度低。(4)另外,頂端分生組織細胞生長旺盛、代謝活躍,病毒無法復制。綜上所述利用莖尖培養可達到脫毒效果。5.以矮牽牛葉片培養為例簡述組織培養的大概步驟或工序?(1)配制培養基MS+BA1+NAA0.1,并進行滅菌。(2)采集外植體:采集矮牽牛的肥厚嫩葉裝入廣口瓶中帶回實驗室。(3)外植體的滅菌和消毒:取回的外植體先用洗衣粉清洗葉表面。然后裝入廣口瓶帶入無菌超作室。用70%的酒精擦拭雙手及超凈工作臺,點燃酒精燈。把手術刀、鑷子等放入95%的酒精中,在火焰上滅菌。用70%酒精消毒30秒,倒掉酒精,再倒入0.1%的HgCl2溶液消毒5~8分鐘,無菌水沖洗3~4次。(4)接種:將滅菌后的葉片放在已滅菌的裝有無菌濾紙的培養皿中,用手術刀將葉片切成0.5cm×0.5cm的小葉片。打開培養基,用火焰灼燒一下培養基的瓶口和瓶蓋,用鑷子夾住葉片,放入培養基中,在灼燒一下瓶口和瓶蓋,擰好蓋子。接種過程中常用70%的酒精擦拭工作臺和雙手,用火焰灼燒手術刀和鑷子。(5)培養:將接種后的培養基放在培養室中,培養條件為25℃±2℃,濕度為70%~80%。(6)試管苗馴化:經過增殖培養和生根培養的矮牽牛試管苗在半遮陰的自然光下鍛煉,并在培養瓶內加少量的自來水,逐漸使試管苗由無菌向有菌過度,然后進行移栽。6.生長素類在植物組培中有何主要作用?并簡述其穩定性與溶解性?作用:在組織培養中,生長素主要用于誘導愈傷組織形成,促進根的生長。此外,協助細胞分裂素促進細胞分裂和伸長。穩定性:天然的生長素熱穩定性差,高溫高壓或受光條件易被破壞。在植物體內也易受到體內酶的分解。組織培養中常用人工合成的生長素類物質。圖3-5生長素類除了IAA外,其他生長調節劑對熱和光均穩定。溶解性:生長素類多溶于酒精、丙酮等有機溶劑。配制母液時多用稀NaOH溶液助溶,然后用蒸餾水定容。生長素類常配成0.1mg/ml~0.5mg/ml的母液貯于冰箱中備用。7.細胞分裂素類在植物組培中有何主要作用?并簡述其穩定性與溶解性?作用:①抑制頂端優勢,促進側芽的生長。當組織內細胞分裂素/生長素的比值高時,誘導愈傷組織或器官分化出不定芽;②促進細胞分裂與擴大,延緩衰老;③抑制根的分化。因此,細胞分裂素多用于誘導不定芽的分化、莖、苗的增殖,而避免在生根培養時使用。③穩定性與溶解性所有細胞分裂素對光、稀酸和熱均穩定。但它的溶液在常溫中時間長了會喪失活性。能溶解于稀酸和稀堿中,所以在配制常用稀HCl助溶,然后用蒸餾水定容。在植物組培中常配制成1mg/ml,貯藏在低溫環境中。8.簡述活性炭在植物組培中的作用?加入活性炭的目的主要是利用其吸附性,減少一些有害物質的不利影響,例如能吸附一些酚類物質,可減輕組織的褐化(這在蘭花組培中效果很明顯)。其次,活性炭能使培養基變黑,有利于某些植物生根。再次,發現0.3%活性炭能降低玻璃化苗的發生率;最后還發現活性炭能恢復胡蘿卜懸浮培養細胞胚狀體的發生能力。9.滅菌與消毒有何區別?滅菌與消毒的主要區別在于前者的殺菌強烈,殺死所有活細胞;后者作用緩和,主要殺死或抑制附在植物材料表面的微生物但芽胞、厚垣孢子一般不會死亡。但滅菌與消毒是相對的,如果消毒時間過長或消毒劑濃度過高,也可殺死全部活的細胞,這時,消毒就成為滅菌了。反之,滅菌劑只能起到消毒作用。10.試管苗移栽成活率低的原因有哪些?(1)內因內因主要有植物種類與試管苗的質量。不同種類的植物,移栽成活率不同,如菊花、薰衣草試管苗對移栽的條件要求不高,容易成活;而仙客來試管苗對移栽的條件較苛刻,稍不小心,就會引起大量死亡。此外,試管苗細長、黃化、根系發育不良,移栽時極易死亡。而試管苗葉片濃綠、莖粗壯、根系發達及長勢好則容易成活。(2)外因外因主要有環境條件、管理措施及管理人員的責任心。A、環境條件不適如基質濕度過大引起爛根或水分不足使小苗萎蔫;溫度過高加上高濕則極易引起爛苗和爛根,溫度過低則使組培苗根系生長緩慢,形成僵苗,同時低溫也會直接造成幼苗死亡。此外,光照過強易引起過苗度失水而死亡等。B、管理粗放有些管理人員技術水平低、責任心不強、管理粗放,也容易降低試管苗移栽的成活率。11.試管苗馴化的目的是什么?若把試管苗直接移栽到室外,由于生存環境發生了劇烈的變化,絕大多數試管苗難以適應而死亡。馴化的目的是人為創設一種由試管苗生境逐漸向自然環境過渡的條件,促進試管苗在形態、結構、生理方面向正常苗轉化,使之更能適應外界環境,從而提高試管苗移栽的成活率。12.試管苗馴化的原則是什么?根據試管苗的特點及其生長環境與田間環境差異,馴化原則應從光、溫、氣、濕及有無菌態等環境要素考慮。前期以創設與試管苗原來生境相似的條件,后期則創設與自然

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