云南省曲靖市麒麟區二中2025年高三下學期最后一次模擬考試試卷生物試題注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．某同學觀察果蠅細胞中的染色體組成時，觀察到一個正在分裂的細胞中，共有8條染色體，4種不同的形態。下列說法正確的是（）A．若細胞內存在同源染色體，則該果蠅可能是雄性B．若細胞內存在染色單體，則該細胞可能正在發生基因重組C．若細胞正處于分裂后期，則該細胞中不含有Y染色體D．若細胞內DNA分子數染色體數=1∶1，則該細胞產生的子細胞大小不等2．科學家發現生物體中的多種物質在實施其功能時，總是具有與其功能相適應的結構下列有關敘述正確的是（）A．真核細胞中具有維持細胞形態，保持細胞內部結構有序性的細胞骨架，該骨架由蛋白質和纖維素組成B．沃森和克里克通過觀察威爾金斯等科學家提供的DNA衍射圖譜，推算出了DNA的雙螺旋結構C．DNA分子結構的基本骨架是DNA分子外側交替排列的核糖和磷酸D．細胞膜具有一定的流動性，膜上的磷脂雙分子層和貫穿于其中的蛋白質構成了細胞膜的基本骨架3．下列關于生命活動調節的敘述，正確的有①嚴重腹瀉后只需補充水分就能維持細胞外液正常的滲透壓②刺激支配肌肉的神經，引起該肌肉收縮的過程屬于非條件反射③垂體功能受損的幼犬會出現抗寒能力減弱等現象④突觸后膜上的受體與相應神經遞質結合后，就會引起突觸后膜的電位變化為外負內正⑤在草原上快速奔跑的狼體內，興奮以局部電流的形式在神經纖維上雙向傳導⑥抗生素消滅病菌的過程體現了人體的免疫防衛功能⑦記憶細胞受到同種抗原再次刺激后，細胞周期變短⑧2、4-D、苯乙酸均為生長素類似物A．一項 B．兩項 C．三項 D．四項4．下列關于生態系統穩定性的敘述，錯誤的是（）A．生態系統的自我調節能力是生態系統具有穩定性的基礎B．人類需求較大的生態系統應實施相應的物質和能量輸入C．北極苔原生態系統的抵抗力穩定性弱但恢復力穩定性強D．生物多樣性具有維持生態系統穩定性的間接價值5．細胞通過分裂來增加數量，不同分裂方式的過程中細胞進行的生理活動有所不同。下列與細胞分裂有關的敘述，錯誤的是（）A．動物細胞有絲分裂間期需要完成DNA和中心體的復制B．減數分裂維持了生物親子代體細胞中染色體數目的恒定C．同源染色體的聯會和分離，只發生在減數分裂過程中D．有絲分裂保持了細胞在親子代之間的遺傳性狀的穩定性6．用紙片擴散法測定某病原菌對各種抗生素敏感性的實驗，是在某病原菌均勻分布的平板上，鋪設含有不同種抗生素的紙片后進行培養。圖示為培養的結果，其中抑菌圈是在紙片周圍出現的透明區域。下列分析正確的是A．在圖示固體培養基上可用平板劃線法或涂布法接種病原菌B．未出現抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發生抗性變異C．形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對藥物較敏感D．不同抗生素在平板上的擴散速度不同會對實驗結果造成影響二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）茶樹葉片的顏色與基因型之間的對應關系如下表。請回答下列問題。表現型黃綠葉濃綠葉黃葉淡綠葉基因型A_B_（A和B同時存在）A_bb（A存在，B不存在）aaB_（A不存在，B存在）aabb（A、B均不存在）（1）已知決定茶樹葉片顏色的兩對等位基因遵循基因的自由組合定律，基因的自由組合定律適用于_______________生物，其實質是__________________________________________。（2）黃綠葉茶樹的基因型有______________種，其中基因型為_______________的植株與淡綠色植株雜交，F1將出現4種表現型，比例為_______________，這種雜交方式在遺傳學上稱為______________。（3）現以濃綠葉茶樹與黃葉茶樹為親本進行雜交，若親本的基因型為______________，只有2種表現型，比例為_____________________________。（4）茶樹的葉片形狀受一對等位基因控制，有圓形（RR）、橢圓（Rr）和長形（rr）三類。茶樹的葉形、葉色等性狀會影響茶葉的制作與品質。能否利用茶樹甲（圓形、濃綠葉）、乙（長形、黃葉）兩個雜合子為親本，培育出橢圓形、淡綠葉的茶樹?______________。若能，請寫出親本的基因型______________。8．（10分）1903年，美國遺傳學家薩頓用蝗蟲（染色體為2n=24，約有17000多個基因）細胞作材料，通過顯微鏡技術研究精子、卵細胞的形成過程和受精作用過程中染色體的行為，請回答：（1）薩頓提出“基因在染色體上”假說的理由是_________________，也有人提出“染色體在基因上”，請結合所學知識寫出“染色體在基因上”假說不成立的依據__________________________________（答出兩點即可）。（2）已知蝗蟲體色的黑色由隱性基因控制，但不知道控制黑色性狀的基因是位于常染色體還是X染色體上。現欲通過調査方法初步確定基因在染色體上的位置。①方案：尋找種群中足夠數量的黑色蝗蟲個體進行調査，統計__________。②請寫出預測結果及結論______________________________。9．（10分）蜘蛛絲是自然界中機械性能最好的天然蛋白纖維，其強度高于制作防彈衣的凱夫拉纖維，有廣泛的應用前景，但如何大量獲取蜘蛛絲纖維的問題一直未解決。近期，中國科學家利用基因工程技術成功的在家蠶絲腺細胞中大量表達蜘蛛絲蛋白。（1）在轉基因過程中，若利用圖所示質粒構建基因表達載體，需要用_____________酶來切割目的基因，該切割方法的優點是_____________________________________________(答出一點即可)。（2）為獲取大量的蜘蛛絲基因，常采用_______________技術對該基因進行擴增。擴增蜘蛛絲基因前，需根據目的基因的核苷酸序列設計__________種引物。進行擴增時需先加熱至90～95℃，加入引物后冷卻至55~60℃，以上調控溫度操作的目的是____________________。（3）載體中的啟動子是____________酶的識別結合位點，以便于驅動遺傳信息的表達過程；而載體本身的擴增，需借助于載體上的_________________；載體上的標記基因的作用是_____________________________。（4）研究人員發現若將蛛絲蛋白31號位的色氨酸替換為酪氨酸，蛛絲韌性可提高50％，這項成果用到的生物工程技術為____________________________。10．（10分）HIV通過識別T細胞表面特有的蛋白質來侵染T細胞。2018年11月，有學者宣布，一對經過基因編輯的嬰兒在中國健康誕生，這對嬰兒的一個基因被切除，使其出生后即能抵抗HIV，其使用的是CRISPRCas9基因編輯技術。下圖為Cas9蛋白依據sgRNA片段切割DNA示意圖(不同的sgRNA可以識別不同的DNA序列)。請回答下列問題：（1）DNA重組技術主要用到的工具酶包括DNA連接酶和限制酶，圖中充當限制酶的物質是_______________。（2）Cas9sgRNA復合體能夠精準識別某核苷酸序列的原因可能是______________________________。（3）經基因編輯過的嬰兒出生后能夠免遭HIV侵染的直接原因是______________________________。（4）在獲得轉基因動物時一般對受精卵進行操作，通過顯微注射技術將含有目的基因的表達載體直接注入，目的基因進入受體細胞并表達的過程稱為______________________________。（5）操作后的受精卵需要先在發育培養液中繼續培養以檢查______________________________。其培養液必須添加血清等天然成分，后經早期胚胎培養一段時間后，再經胚胎移植到雌性動物體內發育。移植胚胎能在受體內存活的原因是_____________________________________________反應。（6）基因編輯技術有著廣泛的應用前景，如果將西紅柿細胞中與乙烯合成的相關基因編輯切除，則這種西紅柿的果實將______________________________，從而獲得耐儲存的西紅柿新品種。11．（15分）圖甲為某魚塘能量流動圖（c、d、f為不同魚種，能量單位是J·m-2·a-1）。圖乙為某同學探究溫度對該魚塘小魚種群密度增長影響的實驗結果。據圖回答：（1）第一營養級到第二營養級的能量傳遞效率是__________________（保留一位小數）。（2）由圖乙可知，在30℃時，小魚種群數量呈“___________”型增長，第15天左右達到____________。實驗結果表明_____________是獲得較大種群數量的良好溫度。（3）如果市場行情有較大變化，中魚d經濟價值劇增，若要使魚塘獲得較大的經濟價值，其措施是_________________________________________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

分析題文：一個正在分裂的果蠅細胞中，共有8條染色體，呈現4種不同的形態，說明該細胞含有2個染色體組，一個染色體組中含有4條染色體，可能處于有絲分裂前期、中期、末期、減數第一次分裂或減數第二次分裂后期。【詳解】A、果蠅體細胞的染色體組成2n=8條，其中1對是性染色體（XX是同型，XY是異型）。題中可知，細胞中有8條，4種形態，若細胞中有同源染色體，可能處于減數第一次分裂或有絲分裂，則3對常染色體是同型，性染色體也是同型的，則一定是雌性果蠅，A錯誤；B、若細胞中有姐妹染色體單體，則可能處于減數第一次分裂或有絲分裂前、中期（減數第次分裂前、中期染色體為4條，不合題意），其中處于減數第一次分裂中、后期的細胞可能發生基因重組，B正確；C、細胞正處于后期，若是減數第一次分裂后期，必為雌果蠅，無Y染色體，若是減數第二次分裂后期，則可能是雌性或雄性，可能含有Y染色體（有絲分裂后期染色體為16條，不合題意），C錯誤；D、DNA∶染色體數目=1∶1，只可能處于減數第二次分裂后期，子細胞可能大小不等（次級卵母細胞），D錯誤。故選B。本題考查細胞的有絲分裂和減數分裂，要求考生識記細胞有絲分裂和減數分裂不同時期的特點，掌握有絲分裂和減數分裂過程中染色體行為和數目變化規律，能結合所學的知識準確判斷各選項。2、B【解析】

細胞膜的基本骨架是磷脂雙分子層，氨基酸、核苷酸、葡萄糖等是以碳鏈骨架組成的小分子，因此蛋白質、核酸、多糖是以碳鏈為骨架；細胞骨架是由蛋白纖維組成網格狀結構，具有維持細胞形態、保持細胞內部結構的有序性，進行物質和能量交換及信息傳遞具有重要功能。【詳解】A、真核細胞內部的蛋白纖維構成細胞骨架，具有維持細胞形態、保持內部結構的有序性的功能，A錯誤；B、沃森和克里克依據威爾金斯和富蘭克林提供的DNA衍射圖譜及有關數據，推算出DNA分子呈螺旋結構，B正確；C、DNA分子結構的基本骨架是DNA分子外側交替排列的脫氧核糖和磷酸，C錯誤；D、細胞膜的基本骨架是磷脂雙分子層，D錯誤。故選B。本題考查細胞膜的結構和DNA分子的結構特點，意在考查學生的記憶和理解能力，難度不大。3、B【解析】

1、大量出汗時，血液主要丟失水分和一部分無機鹽；通常采用喝水和補充無機鹽的方法，來補充血液中丟失的這些成分；嚴重腹瀉時，人體主要丟失水分，以及一部分無機鹽和葡萄糖等一樣物質；通常采用喝水、適量補充無機鹽以及靜脈滴注（或口服）葡萄糖溶液等方法來補充血液中丟失的這些成分。2、人工合成的對植物的生長發育有調節作用的化學物質稱為植物生長調節劑，植物生長調節劑具有容易合成原料廣泛，效果穩定等優點。植物體內具有生長素效應的物質，除IAA外，還有苯乙酸、吲哚丁酸等。【詳解】①嚴重腹瀉后，機體會丟失鹽分，若只補充水分，不能維持細胞外液正常的滲透壓，①錯誤；②刺激支配肌肉的神經，引起該肌肉收縮的過程未經過完整的反射弧，不屬于非條件反射，②錯誤；③垂體功能受損的幼犬，體內會缺乏促甲狀腺激素，導致甲狀腺激素分泌減少，使得代謝減弱，故會出現抗寒能力減弱等現象，③正確；④突觸后膜上的受體與相應神經遞質結合后，不一定就會引起突觸后膜的電位變化為外負內正，這由神經遞質的種類決定，④錯誤；⑤興奮在體內沿著反射弧單向傳遞，故在草原上快速奔跑的狼體內，興奮以局部電流的形式在神經纖維上單向傳導，⑤錯誤；⑥抗生素不是人體免疫系統的產物，故抗生素消滅病菌的過程不能體現人體的免疫防衛功能，⑥錯誤；⑦記憶細胞受到同種抗原再次刺激后，能迅速增殖分化為漿細胞，產生大量的抗體，故細胞周期變短，⑦正確；⑧2、4-D屬于人工合成的生長調節劑，苯乙酸是植物合成的有生長素效應的物質，⑧錯誤。故選B。4、C【解析】

生態系統具有保持或恢復自身結構和功能相對穩定的能力叫生態系統的穩定性，生態系統之所以能維持相對穩定，是由于生態系統具有自我調節能力，生態系統自我調節能力的基礎是負反饋調節。生態系統內、部結構與功能的協調，能提高生態系統穩定性，生態系統中的組成成分越多，食物網越復雜，其自我調節能力就越強，抵抗力穩定性就越強。【詳解】A、生態系統具有自我調節能力是生態系統穩定性的基礎，A正確；B、對人類利用強度較大的生態系統，應實施相應的物質和能量的投入，如養魚場要向魚塘中大量投放魚食，保證了生態系統內部結構與功能的協調，提高生態系統穩定性，同時獲得較高的漁業產量，B正確；C、北極苔原生態系統的抵抗力穩定性弱，在遭到破壞后恢復慢，恢復力穩定性也弱，C錯誤；D、生物多樣性對維持生態系統穩定性具有重要作用，體現了其間接價值，D正確。故選C。5、B【解析】

真核細胞的分裂方式包括有絲分裂、無絲分裂和減數分裂，有絲分裂形成的是體細胞和原始的性腺細胞，減數分裂形成的是生殖細胞。減數第一次分裂過程中同源染色體聯會、形成四分體、分離，減數第二次分裂過程中姐妹染色單體分離，形成的生殖細胞中染色體數是體細胞的一半。減數分裂和受精作用能夠維持每種生物前后代體細胞中染色體數目的恒定，對于生物的遺傳和變異，都是十分重要的。【詳解】A、DNA復制發生在細胞分裂的間期，中心體存在于動物細胞和低等植物細胞中，與細胞的有絲分裂有關，在分裂的間期復制形成兩個中心體，A正確；B、減數分裂形成的子細胞中染色體數是體細胞的一半，受精作用使染色體數恢復到和體細胞相同，所以減數分裂和受精作用維持了生物前后代體細胞中染色體數目的恒定，B錯誤；C、正常情況下，同源染色體的聯會和分離，只發生在減數第一次分裂過程中，C正確；D、有絲分裂過程中，親代細胞的染色體經復制后，精確地平均分配到兩個子細胞中，保持了親、子代細胞遺傳性狀的穩定性，D正確。故選B。6、D【解析】

紙片擴散法是藥敏試驗一種常用的方法，它將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上，紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后便不斷向紙片周圍區域擴散，形成遞減的梯度濃度，在紙片周圍抑菌濃度范圍內的細菌生長被抑制，形成透明的抑菌圈，據此答題。【詳解】A、在圖示固體培養基上用稀釋涂布平板法進行接種病原菌，A錯誤；B、病原菌發生抗性變異在接觸之前，B錯誤；C、微生物對藥物較敏感形成的抑菌圈應較大，C錯誤；D、紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后便不斷向紙片周圍區域擴散，不同抗生素在平板上的擴散速度不同會對實驗結果造成影響，D正確。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、有性生殖的真核生物非同源染色體上的非等位基因隨非同源染色體的自由組合而組合4AaBb1：1：1：1測交Aabb×aaBB或AAbb×aaBb1：1能RRAabb×rraaBb【解析】

孟德爾遺傳定律的使用范圍1.真核生物的性狀遺傳。原核生物和非細胞結構的生物沒有染色體，不進行減數分裂不適用該定律。2.有性生殖過程中的性狀遺傳。只有在有性生殖過程中才發生等位基因的分離，以及非同源染色體上的非等位基因的自由組合。3.細胞核遺傳。只有真核生物的核基因隨染色體的規律性變化而呈現規律性遺傳。4.基因的分離定律適用于一對相對性狀的遺傳，只涉及一對等位基因。基因的自由組合定律適用于兩對或兩對以上相對性狀的遺傳，涉及兩對或兩對上的等位基因且他們分別位于兩對或兩對以上的同源染色體上。【詳解】（1）由分析可知，基因的自由組合定律的實質是非同源染色體上的非等位基因隨非同源染色體的自由組合而組合，該定律適用于有性生殖的真核生物。（2）黃綠葉茶樹為雙顯類型，其基因型有4種，分別為AABB、AaBB、AABb、AaBb，其中基因型為AaBb的植株與淡綠色植株（aabb）雜交，即測交，F1將出現4種表現型，比例為1∶1∶1∶1。（3）濃綠葉茶樹的基因型為A_bb，黃葉茶樹的基因型為aaB_，表現型為上述性狀的親本進行雜交，若親本的基因型為Aabb×aaBB或AAbb×aaBb，則后代只有2種表現型，比例為1∶1。（4）茶樹的葉片形狀受一對等位基因控制，表現為不完全顯性，因此有圓形（RR）、橢圓（Rr）和長形（rr）三類。現有茶樹甲（圓形、濃綠葉）基因型為RRAabb、乙（長形、黃葉）基因型為rraaBb兩個雜合子為親本，二者雜交產生的后代的基因型為RrAaBb（橢圓形黃綠葉），RrAabb（橢圓形濃綠葉）、RraaBb（橢圓形黃葉）、Rraabb（橢圓形淡綠葉），根據葉形和葉色即可選出目標類型。掌握基因自由組合定律的實質及其適用范圍是解答本題的關鍵！學會用分離定律的思路解答自由組合定律的問題是解答本題的另一關鍵。8、基因和染色體行為存在著明顯的平行關系染色體可在顯微鏡下觀察，而基因不能；基因比染色體小；控制性狀的基因的個數比染色體的數目多雌雄個體數量比若后代黑個體的雌雄數量相當，則控制黑色性狀的基因位于常染色體上；若后代黑個體的雌雄數量有明顯差異（黑色雌性數量少于黑色雄性數量），則控制黑色性狀基因位于X染色體上【解析】

1、位于常染色體上的基因控制的性狀的遺傳與性別無關，位于性染色體上的基因控制的性狀的遺傳總是與性別相關聯，即表現出伴性遺傳的特點。2、應用統計調查判斷基因位置方法：統計具該性狀的個體，觀察該性狀在雌性個體、與雄性個體中的比例，看是否具有顯著差異，如果具有顯著差異，則是伴性遺傳，伴性遺傳分為伴X顯性遺傳、伴X隱性遺傳，伴Y遺傳，若是隱性性狀雄性個體多于雌性個體，是伴X隱性遺傳，如果雌性個體多于雄性個體，是伴X顯性遺傳，如果只在雄性個體中出現，則是伴Y遺傳；如果在雌雄個體間的比例無顯著差異，則是常染色體遺傳。【詳解】（1）薩頓在觀察蝗蟲減數分裂過程中發現基因和染色體行為存在著明顯的平行關系，從而提出“基因在染色體上”的假說。因為染色體可在顯微鏡下觀察，而基因不能，故基因比染色體小，控制性狀的基因的個數比染色體的數目多，故可判斷“染色體在基因上”假說不成立。（2）已知蝗蟲體色的黑色由隱性基因控制，要判斷控制黑色性狀的基因是位于常染色體還是X染色體上。可尋找種群中足夠數量的黑色蝗蟲個體進行調査，統計雌雄個體數量比。若后代黑個體的雌雄數量相當，則控制黑色性狀的基因位于常染色體上；若后代黑個體的雌雄數量有明顯差異（黑色雌性數量少于黑色雄性數量），則控制黑色性狀基因位于X染色體上。本題的知識點是常染色體遺傳、伴X隱性遺傳的特點，通過調查統計方法確定基因的位置，旨在考查學生理解所學知識的要點，把握知識的內在聯系，并學會應用調查統計方法解決實際問題。9、XbaI和SacI防止目的基因自身環化、防止目的基因反向連接PCR2使DNA解鏈，然后使引物結合到互補DNA鏈上RNA聚合酶復制原點重組DNA的鑒別與選擇蛋白質工程【解析】

1、基因工程的操作步驟包括：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定。其中基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟。基因表達載體的構建：①過程：一般用同一種限制酶切割目的基因和運載體，再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子。②目的：使目的基因在受體細胞中穩定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發揮作用。③基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因。（1）啟動子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結合位點，能控制著轉錄的開始；（2）終止子在基因的尾端，它控制著轉錄的結束；（3）標記基因便于目的基因的鑒定和篩選。2、PCR擴增技術：PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：（1）模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備。（2）模板DNA與引物的退火（復性）：模板DNA經加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合。（3）引物的延伸：DNA模板--引物結合物在Taq酶的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。【詳解】（1）識圖分析可知，構建基因表達載體時，目的基因需要插入到啟動子和終止子之間，圖中啟動子和終止子之間存在XbaI和SacI的酶切位點，因此需要用XbaI和SacI限制酶切割目的基因，以產生與質粒相同的末端，相比用同一種酶進行酶切，用兩種酶切割可以防止目的基因自身環化或防止目的基因反向連接。（2）為獲取大量的蜘蛛絲基因，常采用PCR擴增技術擴增目的基因。利用PCR技術擴增蜘蛛絲基因前，需根據目的基因的核苷酸序列設計2種引物分別與2條模板鏈結合；進行PCR時需加熱至90~95℃然后冷卻至55~60℃，此操作的目的是使DNA解鏈，然后使引物結合到互補DNA鏈上。（3）基因表達載體中的啟動子能夠與RNA聚合酶識別和結合，才能驅動轉錄過程，而載體本身的擴增，需借助于載體上的復制原點進行，載體上的標記基因的作用是鑒別與篩選含有重組DNA的受體細胞。（4）研究人員發現若將蛛絲蛋白31號位的色氨酸替換為酪氨酸，蛛絲韌性可提高50％，這是對現有蛋白質進行的改造，因此利用的是蛋白質工程技術。本題考查基因工程的知識點，要求學生掌握基因工程的操作步驟，特別是把握基因表達載體的組成及其構建過程，識記啟動子和復制原點的作用，理解限制酶的選擇原則并結合圖示正確判斷需要的限制酶的種類，掌握PCR擴增技術的原理和過程，理解基因工程和蛋白質過程的區別，這是該題考查的重點。10、Cas9-sgRNA復合體sgRNA能與特定的DNA片段發生堿基互補配對T細胞表面缺少被HIV識別的蛋白質轉化受精狀況和發育能力子宮對外來胚胎基本不發生免疫排斥不能成熟【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒