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文檔簡介
習題:
一、名詞說明
1.臨床檢驗生物化學(ClinicalBiochemistry)
2.組合試驗(pro)
二、問答題
1.試述臨床檢驗生物化學的探討領域。
2.試述臨床檢驗生物化學在醫學中的地位與應用。
3.簡述臨床檢驗生物化學的進展與發展趨勢。
第一章緒論答案
一、名詞說明
1.臨床檢驗生物化學(ClinicalBiochemistry):臨床檢驗生物化學是在人
體正常生物化學基礎上,探討病理狀態下生物化學變更,找尋這些變
更的特征性標記并建立牢靠好用檢測方法,通過對這些特征性標記物
的檢測,為健康評估、疾病預防、診斷、治療、病情和預后推斷等供
應生物化學信息和決策依據的一門學科C
2.組合試驗(pro):在循證檢驗醫學基礎上,將某些疾病或器官系統功能
的有關檢驗項目,進行科學合理的組合,以便獲得更全面完整的病理
生物化學信息的方法。如了解肝臟功能的組合試驗。
二、問答題
1.試述臨床檢驗生物化學的探討領域。
臨床檢驗生物化學的學科領域主要包括以下三方面:1,揭示有關疾病
的病理生物化學變更,從本質上闡明疾病發生、發展、轉歸的生物化學機
制,為疾病的預防、診斷、療效與預后評估,供應理論基礎。2.在上述
探討基礎上,找尋具有疾病特異性的生物化學標記物,并建立特異度、靈敏
度高,簡便而高性價比的檢測方法,從而在臨床開展有關項目的檢測,供應
反映這些標記物變更的客觀數據。3,將檢測項目的數據,轉化為預防、
診斷和療效與預后評價信息。
2.試述臨床檢驗生物化學在醫學中的地位與應用。
在醫學中,臨床生物化學是闡明疾病發生、發展與轉歸的分子機制,從
本質上相識病變精確部位與詳細環節,為找尋有效的預防和治療靶點,疾病
的診斷與病情和預后推斷,供應理論基礎的一門重要病理學學科。
其在醫學中的應用主要包括:1.揭示疾病發生的分子機制。2.通過對
有關疾病生物化學變更的特征性生物標記檢測方法的建立和實施,為推斷有
無與何種疾病供應客觀依據。而動態視察這些標記物的變更,可對病情發
展、轉歸、預后與治療方案的制定和效果推斷,供應依據。3.臨床檢驗生
物化學技術,涵蓋了當前醫學探討中常用的主要方法技術。因此,也是醫學
特殊是臨床醫學各個領域探討的一門共同性工具學科。
3.簡述臨床檢驗生物化學的進展與發展趨勢。
①分子診斷學快速發展,代表了的發展方向;②深化找尋高診斷特異性
和靈敏性的新生物化學標記,提高診斷性能;③檢測技術和方法的更新
完善,更加與時、精確地供應檢驗結果;④全程質量管理;⑤以循證檢
驗醫學為基礎,科學評價有關檢測項目的診斷性能,合理有效地開展臨床生
物化學檢驗。
一、單項選擇題(A型題)
1.轉氨酶的輔酶是
A.磷酸叱哆醛
B.NADPH
C.NADH
D.FAD
E.FMN
2.SI制中酶活性單位為
A.U/L
B.Katai
C.g/L
D.ml/L
E.pmol
3.酶的活性國際單位(U)是指
A.在25C。與其他最適條件下,每分鐘催化Imol底物反應所需的酶
量
B.在特定的條件下,每分鐘催化1klmol底物發生反應所需的酶量
C.在37C。條件下,每分鐘催化Immol底物發生反應所需的酶量
D.在規定條件下,每秒鐘催化Imol底物反應所需的酶量
E.在最適條件下,每小時催化Imol底物發生反應所需的酶量
4.目前我國臨床試驗室測定酶活性濃度舉薦溫度為
A.(25±0.1)C°
B.(37±0.5)C°
C.(37±0.3)C°
D.(37±0.1)C°
E.(37±1)C°
5.下列哪種酶是血漿特異酶
A.淀粉酶
B.凝血酶原
C.堿性磷酸酶
D.酸性磷酸酶
E.脂肪酶
6.卜列哪一種酶只位十細胞漿
A.酸性磷酸酶
B.谷氨酸脫氫酶
C.乳酸脫氫酶
D.天冬氨酸脫氫酶
E.異檸檬酸脫氫酶
7.在正常妊娠過程中血清酶增高最明顯的是
A.LD
B.ALP
C.CK
D.AMY
E.LPS
8.下列哪一種輔因子的生成可通過測定340nm處吸光度的降低數來表示
A.FADH2
B.NAD+
C.NADH
D.FMN
E.NADPH
9.血清保存在室溫活性會上升的酶是
A.LD
B.ALP
C.ACP
D.ALT
E.AST
10.ALT在人體各組織中含量最多的是
A.腎臟
B.心臟
C.骨骼肌
D.紅細胞
E.肝臟
11.變更連續監測法測酶活性濃度的常數K值大小最便利的途徑為
A.變更酶反應溫度
B.變更監測時間長短
C.變更底物濃度
D.變更標本稀釋度
E.變更酶反應的pH值
12.酶促反應進程曲線通常可用于確定
A.酶反應線性范圍
B.相宜的pH
C.相宜的酶量范圍
D.反應線性期的時間范圍
E.底物的濃度
13.目前國內外應用連續監測法測定血清ALT所選測定波長為
A.280nm
B.340nm
C.405nm
D.450nm
E.560nm
14.進行酶活性濃度測定時,常舉薦加入磷酸此哆醛的酶是
A.ALP
B.ALT
C.CK
D.LD
E.AMY
15.連續監測法測定ALT所用基質通常是
A.丙氨酸-a酮戊二酸
B.丙酮酸-谷氨酸
C.門冬氨酸-a酮戊二酸
D.草酰乙酸?谷氨酸
E.谷胱甘肽?氨基酸
16.顯示“膽酶分別”前兆的疾病是
A.急性心肌梗死
B.肝癌
C.脂肪肝
D.肝壞死
E.膽石癥
17.LD催化乳酸生成丙酮酸的反應較適當的pH是
A.10.5
B.9.0
C.7.6
D.7.0
E.4.6
18.乳酸脫氫酶一般形成的同工酶的種類有
A2種
?
B3種
?
c4種
?
D5種
?
E6種
?
19.骨折時血清LD同工酶上升最高的是
A.LDI
B.LD2
C.LD3
D.LD4
E.LD5
20.CK含量最多的人體組織是
A.肝臟
B.肌肉
C.肺
D.腎臟
E.心臟
21.急性心肌梗死時,最先增高的酶是
A.ALT
B.LD
C.CK
D.AST
E.a-HBD
22.在測定肌酸激酶試劑中含有疏基化合物,如N-乙酰半胱氨酸,目的
是
A.使酶分子有別構效應
B.穩定酶活性中心的二硫鍵
C.除去腺昔激酶(AK)的影響
D.筑基化合物是肌酸激酶底物之一
E.除去肌酸激酶抑制劑
23.對乙醇中毒最敏感的血清酶是
A.GGT
B.ALP
C.CK
D.LD
E.ALT
24.與心臟是否受損關系不大的血清酶是
A.AST
B.a-HBD
C.CK
D.LD
E.ALP
25.ACP含量最多的人體組織是
A.肝臟
B.骨骼
C.紅細胞
D.血小板
E.前列腺
26.為防止紅細胞對ACP測定的干擾,常加入下列何種抑制劑以提高檢測
的特異性
A.苯丙氨酸
B.L-酒石酸
C.尿酸
D.EDTA
E.L-半胱氨酸
27.在堿性溶液中進行醋酸纖維薄膜電泳時,最接近正極(移動最快)的
ALP同工酶是
A.肝ALP
B.骨ALP
C.腸ALP
D.胎盤ALP
E.腎ALP
28.同時測定下列哪種血清酶有助于鑒別ALP上升的來源
A.ACP
B.GGT
C.LD
D.CK
E.AST
29.在骨骼和肝臟疾病的診斷中最重要的酶是
A.LD
B.CK
C.ALP
D.ACP
E.AMY
30.人血清中的淀粉酶是
A.a淀粉酶
B.p淀粉酶
C.丫淀粉酶
D.A+B
E.A+C
31.用于協助診斷有機磷中毒的酶是
A.AMY
B.ACP
C.LPL
D.ChE
E.ALP
32.臨床上常用來分析同工酶的方法
A.電泳法
B.層析法
C.沉淀法
D.熱失活分析法
E.蛋白酶水解法
33.患者,男,32歲,飲酒飽餐后上腹部劇痛6小時,伴大汗,頻吐。
查體:面色蒼白,血壓9.3/6.7kPa(70/50mmHg),心率132次/分,左上
腹肌驚慌,壓痛與反跳痛,腹部移動性濁音陽性,血淀粉酶740U/L;正
常上限為220U/L)o該患者首先考慮的診斷為
A.急性膽囊炎
B.肝性黃疸
C.急性胰腺炎
D.溶血性黃疸
E.膽石癥
二、多項選擇題(B型題)
A.a-HBDB.LDC.ASTD.CKE.ACP
1.對前列腺癌診斷價值最大的血漿酶是()。
2.急性心肌梗死時,最先復原正常的血漿酶是()。
A.AST和ALTB.ALP和CKC.LPS和AMS
D.AST和AMSE.CK和CK-MB
3.多用于胰腺炎診斷的酶是()。
4.多用于肝臟疾患診斷的酶是()。
5.多用于急性心肌梗死診斷的酶是()c
6.多用于骨骼疾患診斷的酶是()。
三、多項選擇題(X型題)
1.影響血清酶變異的生理因素有
A.性別
B.年齡
C.進食
D.運動
E.以上都不是
2.下列酶中具有酶原形式的酶有
A.胃蛋白酶
B.胰蛋白酶
C.ALT
D.ALP
E.糜蛋白酶
3.下列對酶活性濃度測定描述正確的是
A.可測定產物生成量
B.可測定底物消耗量
C.與底物濃度無關
D.需最適溫度
E.需最適酸堿度
4.臨床上應用酶檢測診斷疾病時,一般考慮下列哪些因素
A.組織與血清酶活性比值在100倍以上
B.組織損傷后,酶能較快地釋放到血液中
C.要有合適的生物半壽期
D.同工酶有確定組織分布特異性
E.酶的組織分布廣
5.肌酸激酶存在于
A.心肌
B.骨骼肌
C.腦組織
D.紅細胞
E.肝
6.標本溶血對測定結果有影響的血清酶是
A.CK
B.LD
C.ALT
D.AST
E.GGT
7.CK的變異體主要是指
A.巨CK1
B.CK-MB
C.CK-MM
D.巨CK2
E.CK-BB
8.ACP與ALP作用類似,主要區分在于
A.最適pH不同
B.組織來源不同
C.所作用的底物種類相近.
D.緩沖液種類不同
E.穩定性不同
9.連續監測法進行酶學測定中常見的干擾因素有
A.樣本本身含有其他酶和物質干擾
B.工具酶中混有其他酶的污染
C.非酶反應的干擾
D.分析容器的污染與沉淀形成
E.運用雙試劑
10.下列代謝物與其酶法測定所用試劑的組合,正確的是
A.尿酸?尿酸酶-過氧化氫酶
B.葡萄糖?葡萄糖氧化酶-葡萄糖-6磷酸脫氫酶
C.尿素-尿素酶-谷氨酸脫氫酶
D.甘油三酯-脂蛋白脂肪酶-甘油激酶
E.膽固醇-膽固醇氧化酶-過氧化物酶
11.下列血清酶與其測定所用試劑的組合,正確的是
A.ATP-GGT、
B.alanine-ALT
C.NAD-LD
D.p-nitrophenylphosphate-ALP
E.ADP-CK
12.堿性磷酸酶活性上升可見于
A.變形性骨炎
B.骨腫瘤
C.惡性貧血
D.甲狀腺功能低下
E.梗阻性黃疸
13.G6PD可用于測定
A.葡萄糖
B.淀粉酶
C.脂肪酶
D.乳酸脫氫酶
E.肌酸激酶
四、名詞說明
1.酶2.血漿固有酶3.酶的半壽期4.連續監測法
5.工具酶6.酶活性IU定義7.同工酶8.底物啟動模式
五、問答題
1.依據米-曼式方程計算,當[s]=3Km時,其反應速度V為多大
2.簡述正常血漿中的酶動態特點與影響酶濃度的因素
3.簡述病理性血漿中酶濃度異樣的機制
4.簡述酶濃度的測定方法。
5.簡述酶偶聯反應法的原理。
6.簡述臨床同工酶的分析方法。
7.簡述體液中酶濃度測定的主要影響因素與限制
8.臨床酶學測定之前,標本的采集、處理與貯存有何留意點
9.簡述自動生化分析儀進行臨床酶學測定肘系數K值的計算與應用。
10.簡述ALT測定與其臨床意義。
U.簡述CK與其同工酶測定的臨床意義。
12.試述血清ACP活性測定的臨床意義。
13.試述血清淀粉酶測定有何臨床意義
其次章生物化學檢驗中的診斷酶學參考答案
一、單項選擇題(A型題)
1.A2.B3.B4.D5.B6.C
7.B8.C9.B10.E
11.D12.D13.B14.B15.A16.D1
7.B18.D19.E20.B
21.C22.B23.A24.E25.E26.B27.A
28.B29.C30.A
31.D32.A33.C
二、多項選擇題(B型題)
1.E2.D3.C4.A5.E6.B
三、多項選擇題(X型題)
1.ABCD2.ABE3.ABDE4.ABCD
5.ABC6.ABCD
7.AD8.ABDE9.ABCD10.ACDE
11.BCDE12.ABE
13.AE
四、名詞說明
1.酶是一種由活細胞產生,具有高度專一性、高度催化活性的物質,又稱
為生物催化劑,主要是蛋白質。
2.血漿固有酶指屬血漿蛋白的固有成分,在血漿中發揮特定催化作用的一
類酶,也稱血漿特異酶。
3.酶失活至原來活性一半時所需時間稱為酶的半壽期(t”2)o半壽期可
用來代表酶從血中清除的快慢。
4.連續監測法是指每隔確定時間(2-60s),連續多次測定酶反應過程中
某一反應產物或底物量隨時間變更的數據,求出酶反應初速度,間接計算酶
活性濃度的方法。
5.在酶學分析中,作為試劑用于測定化合物濃度或酶活性濃度的酶稱為工
具酶。
6.酶活性IU定義為:在特定條件下,1min能轉化1mmol底物的酶
1
量,即1IU=1mmol.mino目前國內外大多數臨床試驗室常省略國際二
字,即將IU簡寫為Uo
7.同一種屬中由不同基因或等位基因所編碼的多肽鏈單體、純聚體或雜化
體,具有相同的催化作用,但其分子構成、空間構象、理化性質、生物學性
質以與器官分布或細胞內定位不同的一組酶稱為同工酶。
8.底物啟動模式是指樣品先與缺乏某種底物的試劑工預孵育確定時間后,再
加入含這種底物的試劑2,啟動樣品中的待測酶的酶促反應。
五、問答題
1.V=Vm[s]/(Km+[s])=Vm*3Km/(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm,即
VA/m=0.75o
2.正常血漿中酶的動態變更特點:①正常血漿酶依據酶的來源與其在血漿
中發揮催化功能的狀況,可將血漿酶分成血漿特異酶和非血漿特異酶兩大
類,非血漿特異酶可進一步分為外分泌酶、細胞內酶和其他酶。②一般認
為,血液中酶的清除方式與其他血漿蛋白質類似,但是詳細清除途徑尚未完
全明白。血漿酶主要在血管內失活或分解,尿液則是小分子酶排出的途徑。
影響酶濃度的因素包括影響正常血漿酶含量的自身因素和生物學因
素,前者主要有細胞內外酶濃度的差異、酶的相對分子量、酶的組織分布、
酶在細胞內的定位和存在形式、酶的半壽期等;后者主要是性別、年齡、食
與藥物、運動、妊娠與分娩、體位變更、晝夜變更與家庭因素等。
3.血漿酶的病理性變更主要包括酶合成異樣、酶釋放增加、酶清除異樣
等。酶合成異樣包括合成削減和合成增多。酶從病變(或損傷)細胞中釋放
增加是疾病時大多數血清酶增高的主要機制。炎癥、缺血、壞死、創傷和腫
瘤等是細胞釋放大分子酶蛋白的重要緣由。此外,血液含抑制物、代謝紊
亂、藥物、遺傳性酶缺陷等緣由也可致酶活性下降。
4.酶濃度測定方法分為確定定量法和相對定量法兩大類。確定定量法是
干脆測定酶蛋白量或酶摩爾濃度。相對定量法是依據酶的催化活性或酶促反
應速度來間接測定酶濃度的方法。目前臨床上所用的方法多屬相對定量法。
5.在酶活性測定時,假如底物或產物不能干脆測定或難于精確測定,可采
納酶偶聯法測定,即在反應體系中加入一個或幾個工具酶,將待測酶生成的
某一產物轉化為新的可干脆測定的產物,當加入酶的反應速度與待測酶反應
速度達到平衡時,指示酶的反應速度即代表待測酶的活性。
6.臨床同工酶的分析方法有電泳法、免疫分析法、色譜法、動力學分析
法、蛋白酶水解法。
7.體液中酶濃度測定時,要限制的主要影響因素包括標本與標本采集和處
理因素、試劑與方法學因素、儀器與操作因素,以與最適測定條件選擇與條
件的優化。
8.測定酶濃度的樣原來自不同的組織和器官,但以血清和血漿最為常用,
特殊是血清,既可避開抗凝劑的影響,又可防止抗凝時因振搖所致的溶血。
臨床酶學測定之前,標本的采集、處理與貯存應留意:防止溶血、合理運
用抗凝劑、相宜的溫度、削減副反應干擾。此外,采集各種體液樣本的器皿
質地和干凈度,采血部位,以與血清中過量的膽紅素、脂質,樣品制備過程
中的振搖等,均影響酶活性測定。
9.用自動生物化學分析儀測定酶活性,通常采納公式進行計算。當條件固
定時,理論K值為常數。由于儀器等諸多因素的影響,在臨床實際工
作中,均需用校準物定期檢查和校正實際測定K值。
10.轉氨酶的測定方法有很多種,以往多用比色法如賴氏法(Reitman-
Frankel)、金氏法(King)和改良穆氏法(Mohun),其中以賴氏法
最常用,由于此法操作簡便、經濟,一些小型試驗室仍在運用。目前,國內
外試驗室多采納IFCC舉薦的連續監測方法對ALT進行測定。
ALT主要用于肝臟疾病的診斷。由于肝細抱中ALT濃度比血液高約
7000倍,只要有1/1000肝細胞中的ALT進入血液就足以使血中ALT上升1
倍,故此酶是反映肝損傷的一個很靈敏指標°但應特殊留意的是,重癥
肝炎時由于大量肝細胞壞死,血中ALT可僅輕度增高,臨終時常明顯下
降,但膽紅素卻進行性上升,出現所謂“酶膽分別”現象,常是肝壞死的
前兆。
11.CK的測定方法有比色法、紫外分光光度法和熒光法等。由于以磷酸肌
酸為底物的逆向反應速度為正向反應速度的6倍,所以采納逆向反應進行測
定較為普與。如肌酸顯色法和酶偶聯法,其中后者最常用,為國內外測定
CK的參考方法。CK同工酶多用電泳和免疫抑制法測定,但兩法均會受溶
血和巨CK的干擾,免疫抑制法還會受到CK-BB的干擾。因此現在舉薦用免
疫化學方法干脆測定CK-MBmass,可不受溶血和巨CK的干擾。CK同工
酶亞型(CK-MM亞型和CK-MB亞型)多用瓊脂糖凝膠高壓電泳和等
電聚焦電泳等。
CK與其同工酶和亞型是目前臨床上測定次數最多的酶,主要用于心
肌、骨骼肌和腦疾患的診斷和鑒別診斷與預后推斷。
12.ACP的測定多是利用磷酸苯二鈉法和磷酸對硝基酚法等在酸性條件下
測定ACPo國外多舉薦運用磷酸百里酚配為底物的比色法,因為前列腺
ACP對此底物親合力高,測定結果基本能反映ACP含量凹凸。不同方法參
考值也不同。此外還可通過用L-酒石酸這類抑制劑鑒別和估量PAP活
性。由于ACP不穩定,酶活性測定困難,目前已發展一些免疫學方法特異
而靈敏地測定ACP特殊是PAPo
總ACP上升可作為前列腺癌、骨疾病或網狀內皮系統疾病的診斷指標。
13.臨床上測定血液AMY主要用于診斷急性胰腺炎,常在腹痛后2~3h
起先上升(也有延至12h后上升者).多在12~24h達峰值,2~5d復
原正常。峰值一般為4ULN?6ULN,最高可達40倍。此值愈高,急性
胰腺炎的可能性就愈大,但凹凸和疾病預后關系不大,但若持續性上升
達數周,常提示胰腺炎有反復,或有并發癥發生。尿AMY約于發病后12?
24h起先上升,下降也比血液AMY慢,因此在急性胰腺炎后期測定尿
AMY更有價值。
唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY也可上升,但臨床表現迥異,且主
要為S-AMY上升,有別于胰腺炎以P-AMY上升為主。
其次章生物化學檢驗中的診斷酶學參考答案
一、單項選擇題(A型題)
1.A2.B3.B4.D5.B6.C
7.B8.C9.B10.E
11.D12.D13.B14.B15.A16.D1
7.B18.D19.E20.B
21.C22.B23.A24.E25.E26.B27.A
28.B29.C30.A
31.D32.A33.C
二、多項選擇題(B型題)
1.E2.D3.C4.A5.E6.B
三、多項選擇題(X型題)
1.ABCD2.ABE3.ABDE4.ABCD
5.ABC6.ABCD
7.AD8.ABDE9.ABCD10.ACDE
11.BCDE12.ABE
13.AE
四、名詞說明
1.酶是一種由活細胞產生,具有高度專一性、高度催化活性的物質,又稱
為生物催化劑,主要是蛋白質。
2.血漿固有酶指屬血漿蛋白的固有成分,在血漿中發揮特定催化作用的一
類酶,也稱血漿特異酶。
3.酶失活至原來活性一半時所需時間稱為酶的半壽期(tV2)o半壽期可
用來代表酶從血中清除的快慢。
4.連續監測法是指每隔確定時間(2-60s),連續多次測定酶反應過程中
某一反應產物或底物量隨時間變更的數據,求出酶反應初速度,間接計算酶
活性濃度的方法。
5.在酶學分析中,作為試劑用于測定化合物濃度或酶活性濃度的酶稱為工
具酶。
6.酶活性IU定義為:在特定條件下,1min能轉化1mmol底物的酶
1
量,即1IU=1mmol.mino目前國內外大多數臨床試驗室常省略國際二
字,即將IU簡寫為Uo
7.同一種屬中由不同基因或等位基因所編碼的多肽鏈單體、純聚體或雜化
體,具有相同的催化作用,但其分子構成、空間構象、理化性質、生物學性
質以與器官分布或細胞內定位不同的一組酶稱為同工酶。
8.底物啟動模式是指樣品先與缺乏某種底物的試劑1預孵育確定時間后,再
加入含這種底物的試劑2,啟動樣品中的待測酶的酶促反應。
五、問答題
1.V=Vm[s]/(Km+[s])=Vm*3Km/(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm,即
V/Vm=0.75°
2.正常血漿中酶的動態變更特點:①正常血漿酶依據酶的來源與其在血漿
中發揮催化功能的狀況,可將血漿酶分成血漿特異酶和非血漿特異酶兩大
類.非血漿特異酶可進一步分為外分泌酶、細胞內酶和其他酶。②一般認
為,血液中酶的清除方式與其他血漿蛋白質類似,但是詳細清除途徑尚未完
全明白。血漿酶主要在血管內失活或分解,尿液則是小分子酶排出的途徑。
影響酶濃度的因素包括影響正常血漿酶含量的自身因素和生物學因
素,前者主要有細胞內外酶濃度的差異、酶的相對分子量、酶的組織分布、
酶在細胞內的定位和存在形式、酶的半壽期等;后者主要是性別、年齡、食
與藥物、運動、妊娠與分娩、體位變更、晝夜變更與家庭因素等。
3.血漿酶的病理性變更主要包括酶合成異樣、酶釋放增加、酶清除異樣
等。酶合成異樣包括合成削減和合成增多。酶從病變(或損傷)細胞中釋放
增加是疾病時大多數血清酶增高的主要機制。炎癥、缺血、壞死、創傷和腫
瘤等是細胞釋放大分子酶蛋白的重要緣由。此外,血液含抑制物、代謝紊
亂、藥物、遺傳性酶缺陷等緣由也可致酶活性下降。
4.酶濃度測定方法分為確定定量法和相對定量法兩大類。確定定量法是
干脆測定酶蛋白量或酶摩爾濃度。相對定量法是依據酶的催化活性或酶促反
應速度來間接測定酶濃度的方法。目前臨床上所用的方法多屬相對定量法。
5.在酶活性測定時,假如底物或產物不能干脆測定或難于精確測定,可采
納酶偶聯法測定,即在反應體系中加入一個或幾個工具酶,將待測酶生成的
某一產物轉化為新的可干脆測定的產物,當加入酶的反應速度與待測酶反應
速度達到平衡時,指示酶的反應速度即代表待測酶的活性。
6.臨床同工酶的分析方法有電泳法、免疫分析法、色譜法、動力學分析
法、蛋白酶水解法O
7.體液中酶濃度測定時,要限制的主要影響因素包括標本與標本采集和處
理因素、試劑與方法學因素、儀器與操作因素,以與最適測定條件選擇與條
件的優化。
8.測定酶濃度的樣原來自不同的組織和器官,但以血清和血漿最為常用,
特殊是血清,既可避開抗凝劑的影響,又可防止抗凝時因振搖所致的溶血。
臨床酶學測定之前,標本的采集、處理與貯存應留意:防止溶血、合理運
用抗凝劑、相宜的溫度、削減副反應干擾。此外,采集各種體液樣本的器皿
質地和干凈度,采血部位,以與血清中過量的膽紅素、脂質,樣品制備過程
中的振搖等,均影響酶活性測定。
9.用自動生物化學分析儀測定酶活性,通常采納公式進行計算。當條件固
定時,理論K值為常數。由于儀器等諸多因素的影響,在臨床實際工
作中,均需用校準物定期檢查和校正實際測定K值。
10.轉氨酶的測定方法有很多種,以往多用比色法如賴氏法(Reitman-
Frankel)、金氏法(King)和改良穆氏法(Mohun),其中以賴氏法
最常用,由于此法操作簡便、經濟,一些小型試驗室仍在運用。目前,國內
外試驗室多采納IFCC舉薦的連續監測方法對ALT進行測定。
ALT主要用于肝臟疾病的診斷。由于肝細抱中ALT濃度比血液高約
7000倍,只要有1/1000肝細胞中的ALT進入血液就足以使血中ALT上升1
倍,故此酶是反映肝損傷的一個很靈敏指標c但應特殊留意的是,重癥
肝炎時由于大量肝細胞壞死,血中ALT可僅輕度增高,臨終時常明顯下
降,但膽紅素卻進行性上升,出現所謂“酶膽分別”現象,常是肝壞死的
前兆。
11.CK的測定方法有比色法、紫外分光光度法和熒光法等。由于以磷酸肌
酸為底物的逆向反應速度為正向反應速度的6倍,所以采納逆向反應進行測
定較為普與。如肌酸顯色法和酶偶聯法,其中后者最常用,為國內外測定
CK的參考方法。CK同工酶多用電泳和免疫抑制法測定,但兩法均會受溶
血和巨CK的干擾,免疫抑制法還會受到CK-BB的干擾。因此現在舉薦用免
疫化學方法干脆測定CK-MBmass,可不受溶血和巨CK的干擾。CK同工
酶亞型(CK-MM亞型和CK-MB亞型)多用瓊脂糖凝膠高壓電泳和等
電聚焦電泳等。
CK與其同工酶和亞型是目前臨床上測定次數最多的酶,主要用于心
肌、骨骼肌和腦疾患的診斷和鑒別診斷與預后推斷。
12.ACP的測定多是利用磷酸苯二鈉法和磷酸對硝基酚法等在酸性條件下
測定ACPo國外多舉薦運用磷酸百里酚酸為底物的比色法,因為前列腺
ACP對此底物親合力高,測定結果基本能反映ACP含量凹凸。不同方法參
考值也不同。此外還可通過用L-酒石酸這類抑制劑鑒別和估量PAP活
性。由于ACP不穩定,酶活性測定困難,目前已發展一些免疫學方法特異
而靈敏地測定ACP特殊是PAP。
總ACP上升可作為前列腺癌、骨疾病或網狀內皮系統疾病的診斷指標。
13.臨床上測定血液AMY主要用于診斷急性胰腺炎,常在腹痛后2~3h
起先上升(也有延至12h后上升者),多在12~24h達峰值,2~5d復
原正常。峰值一般為4ULN?6ULN,最高可達40倍。此值愈高,急性
胰腺炎的可能性就愈大,但凹凸和疾病預后關系不大,但若持續性上升
達數周,常提示胰腺炎有反復,或有并發癥發生。尿AMY約于發病后12~
24h起先上升,下降也比血液AMY慢,因此在急性胰腺炎后期測定尿
AMY更有價值。
唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY也可上升,但臨床表現迥異,且主
要為S-AMY上升,有別于胰腺炎以P-AMY上升為主。
第三章血漿蛋白質與含氮化合物的生物化學檢驗
一、單項選擇題
1.下列物質屬于含氮化合物的是:()
A.蛋白質
B.氨基酸
C.喋吟核昔酸
D.喀嚏核甘酸
E.以上都是
2.臨床上血清總蛋白的首選最便利、最好用的常規方法是:()
A.凱氏定氮法
B.雙縮胭法
C.酚試劑法
D.紫外分光光度法
E.染料結合法
3.正常血清蛋白電泳上顯示的寬丫區帶主要成分是:()
A.轉鐵蛋白
B.結合珠蛋白
C.免疫球蛋白
D.血色素結合蛋白
E.銅藍蛋白
4.下列血漿蛋白質中哪些不屬于運輸載體類:()
A.血漿脂蛋白
B.轉鐵蛋白
C.銅藍蛋白
D.結合珠蛋白
E.aI-抗胰蛋白酶
5.下列關于清蛋白說法錯誤的是:()
A,由肝實質細胞合成
B.血漿中含量最多的蛋白質
C.維持血漿膠體滲透壓的主要蛋白
D.在血漿中的半壽期10d
E.唯——種不含糖的血漿蛋白質
6.臨床上檢測血清蛋白的最常用方法是:()
A.漠甲酚綠法
B.電泳法
C.免疫擴散法
D,免疫比濁法
E.電化學測定法
7.下列關于a抗胰蛋白酶說法,錯誤的是:()
A.分子量約為52kD
B.發揮作用時與pH凹凸無關
C.醋酸纖維素薄膜電泳中位于a】區帶
D.主要由肝細胞合成
E.人血漿中主要的絲氨酸蛋白酶的抑制劑
8.關于co-巨球蛋白,下列說法錯誤的是:()
A.屬于急性時相反應蛋白
B.血漿中分子量最大的糖蛋白
C.低清蛋白血癥a2-MG含量可顯著增高
D.嚴峻的急性胰腺炎時a2-MG含量降低
E.檢測方法主要是免疫比濁法
9.銅藍蛋白的功能不包括:()
A.血漿銅的轉運
B.具有鐵氧化酶作用
C.抗氧化作用
D,可將大部分Fe廠運輸到骨髓,用于Hb合成
E.銅的無毒性代謝庫
10.下列關于C-反應蛋白說法錯誤的是:()
A.在鈣離子缺乏狀況下,可結合磷酸膽堿,卵磷脂和核酸
B.屬于典型的急性時相反應蛋白
C.血漿中CRP濃度在急性心肌梗死、創傷、感染、炎癥、外科手術、
腫癌浸潤時快速顯著地增高
D.在鈣離子存在下,CRP可結合多種細菌、真菌與原蟲等體內的多
糖物質
E.電泳遷移率易受如鈣離子與緩沖液的成分的影響
11.下列哪些蛋白屬于負性時相反應蛋白?()
A.AAT
B.AAG
C.Alb
D.Cp
E.CRP
12.現已闡明腎小管細胞膜上有4種與氨基酸汲取有關的載體,下面哪
種不是?()
A,中性氨基酸載體
B.酸性氨基酸載體
C.堿性氨基酸載體
D.丙氨酸載體
E.甘氨酸載體
13.苯丙酮酸尿癥是由于下列何種酶的缺乏所致?()
A.酪氨酸羥化酶
B.苯丙氨酸羥化酶
C.多巴脫竣酶
D.酪氨酸酶
E.酪氨酸轉氨酶
14.關于苯丙酮酸尿癥,下列說法不正確的是:()
A.因患兒尿液中徘出大量苯丙酮酸等代謝產物而得名
B.緣由是苯丙氨酸羥化酶先天性缺乏
C.患兒還表現有毛發和皮膚色素較正常人略淺
D,可賜予高苯丙氨酸與酪氨酸膳食進行治療
E.患兒存在智力缺陷,其嚴峻程度與血苯丙氨酸上升的水平和持續時
間有關
15.白化病是由于下列何種酶的缺乏所致?()
A.酪氨酸酶
B.酪氨酸羥化酶
C.苯丙氨酸羥化酶
D.色氨酸加氧酶
E.酪氨酸轉氨酶
16.下列尿黑酸尿癥.說法錯誤的是:()
A.尿黑酸還原酶缺陷可弓I起該病
B.因尿放置后變黑色,因此常會引起留意而被發覺
C.目前本癥沒有滿足的治療方法
D,服用維生素C可能會削減尿黑酸在體液中含量和在組織中沉積
E.診斷本病的方法是尿黑酸的還原試驗
17.關于胱硫酸邛-合酶缺失所致的同型胱氨酸尿癥,下列說法錯誤
的是:()
A.胱硫酸邛-合酶缺失所致的是同型胱氨酸尿癥是最常見的緣由
B,血漿同型胱氨酸達到可檢測水平,Met水平上升
C.N5甲基四氫葉酸或其轉甲基酶的缺失導致的同型胱氨酸尿癥較
罕見
D.胱硫酸-0-合酶完全缺失的可用低Met飲食并補充胱氨酸治療
E.新生兒就會出現癥狀,因此適合進行新生兒篩選試驗
18.關于核甘酸代謝,下列說法錯誤的是:()
A.喋吟核甘酸最常見的代謝紊亂是高尿酸血癥
B.喀嚏核甘酸從頭合成途徑中的酶缺陷可引起乳清酸尿癥
C.喋吟和喀嚏核苗酸的合成均包括從頭合成和補救合成途徑
D.瞟吟核甘酸從頭合成途徑是先合成喋吟環再與磷酸核糖相連而成
E.人體因缺乏尿酸酶喋吟核甘酸的最終分解產物是尿酸
19.關于尿酸生成過多的緣由,下列說法哪個不正確?()
A.葡萄糖-6-磷酸酶缺乏
B.喋吟汲取增多
C.PRPP合成酶活性減弱
D.喋吟分解過多
20.尿酸測定的參考方法是:()
A.磷鴇酸還原法
B.尿酸酶-過氧化物酶偶聯法
C.HPLC法
D.干化學法
E.尿酸酶紫外法
二、B型題(配伍題)
問題1-3
A.清蛋白B.前清蛋白C.結合珠蛋
白
D.a-酸性糖蛋白E.i-抗胰蛋白酶
1.血漿中主要的載體蛋白
2.人血漿中主要的絲氨酸蛋白酶的抑制劑
3.活動性潰瘍性結腸炎最牢靠的指標之一
問題4-7
A.可以防止Hb從腎臟丟失
B.可將大部分Fe"運輸到骨髓
C.銅的無毒性代謝庫
D.將Fe"還原為Fe2+
E.血漿中分子量最大的糖蛋白
4.結合珠蛋白
5.a2-巨球蛋白
6.銅藍蛋白
7.轉鐵蛋白
問題8-10
A.酪氨酸酶缺乏
B.酪氨酸轉氨酶缺乏
C.苯丙氨酸羥化酶缺乏
D.苯丙氨酸還原酶缺乏
E.延胡索酰乙酰乙酸水解酶活性降低
8.苯丙酮酸尿癥是由于
9.I型酪氨酸血癥是由于
10.II型酪氨酸血癥是由于
三、多選題(X型題)
1.醋酸纖維素薄膜電泳一般可將血清蛋白質分為哪幾條帶()
A.清蛋白
B.0(2球蛋白
C.0球蛋白
球蛋白
E.纖維蛋白原
2.下列有關前清蛋白,說法正確的是:()
A.半壽期僅1.9d
B,正性急性時相反應蛋白
C.組織修補材料和運載蛋白
D.作為養分不良的指標時,50~100mg/L為重度養分不良
E.作為腎功能不全的指標
3.下列關于清蛋白的功能,正確的是:()
A.維持血漿膠體滲透壓
B.作為血漿中主要的載體蛋白,具有結合各種配體分子的實力
C.參加凝血
D.具有緩沖酸堿維持酸堿平衡作用
E.具有養分作用
4.on-酸性糖蛋白是:()
A.血漿中含糖量最高的糖蛋白
B.血漿中酸性最強的糖蛋白
C.活動性潰瘍性結腸炎最牢靠的指標之一
D.屬于急性時相反應蛋白
E.人血漿中主要的絲氨酸蛋白酶的抑制劑
5.關于結合珠蛋白,說法正確的是:()
A.急性時相蛋白和轉運蛋白
B.在醋纖膜電泳與瓊脂糖凝膠電泳中位于Y區帶
C.運輸血管內游離的Hb到網狀內皮細胞降解
D.每分子Hp可結合2分子Hb
E.Hb-Hp的結合是可逆的
6.關于Wilson病的說法正確的是:()
A.屬于常染色體隱性遺傳病
B.又稱為肝豆狀核變性
C.一般不伴有神經系統癥狀
D.此病是進行性和致命的,應與時治療
E.銅螯合劑-青霉胺治療
7.關于Wilson病的診斷下列說法正確的是:()
A.血中銅藍蛋白下降
B.血清游離銅降低
C.血清總銅濃度降低
D.尿銅排泄增加
E.肝中銅含量上升
8.關于轉鐵蛋白說法正確的是:()
A,每分子可結合4個Fe3+
B.主要由肝細胞合成
C.正性急時相反應蛋白
D,用于貧血的鑒別診斷
E.作為養分狀態的一項指標
9.C-反應蛋白是非特異性指標,在臨床上的主要用途是:()
A,篩選器質性疾病
B.評估炎癥性疾病的活動度和療效監控
C.識別系統性紅斑狼瘡、白血病和外科手術后等并發的感染
D.監測腎移植后的排斥反應
E.作為養分狀態的一項指標
10.以下屬于急性時相反應蛋白的是:()
A.OH-抗糜蛋白酶
B.血紅素結合蛋白
C.0(2-MG
D.纖維蛋白原
E.Cp
11.以下屬于負性急性時相反應蛋白的是:()
A.AAT
B.Alb
C.C3
D.PA
E.TRF
12.屬于氨基酸代謝產物的有:()
A.酮體
B.a-酮酸
C.CO2
D.胺類
E.NH3
13.氨基酸的分析的三組檢驗方法是:()
A.總氨基酸的分析
B.篩選試驗
C.定量試驗
D,特異性試驗
E.全自動氨基酸分析儀分析法
14.氨基酸分析的篩選試驗包括:()
A.薄層層析
B.尿呈色試驗
C.Guthrie試驗
D.氣相色譜
E.HPLC
15.氨基酸分析的定量試驗包括:()
A.毛細管電泳
B.氣相色譜
C.HPLC
D.串聯質譜
E.分子遺傳學試驗
16.采納酶法測定的氨基酸有:()
A,苯丙氨酸
B.酪氨酸
C.亮氨酸
D.谷氨酰胺
E.繳氨酸
17.在酶法測定氨基酸的原理中通過檢測340nm吸光度變更來定量的氨基
酸有:()
A,苯丙氨酸
B,酪氨酸
C.谷氨酰胺
D.亮氨酸
E.異亮氨酸
18.目前國際上進行新生兒PKU篩查的常用方法有:()
A.Guthrie試驗
B,熒光光度法
C.苯丙氨酸脫氫防法
D.色譜法
E.PCR-RFLP法
19.關于Lesch-Nyhan綜合征的說法正確的是:()
A.病因是HGPRT完全缺乏
B.屬染色體X-連鎖遺傳
C.又稱自毀容貌綜合征
D.有明顯的高尿酸血癥
E.僅見男性小兒1歲內發病
20.關于痛風的敘述正確的是:()
A.屬于一組疾病
B.由遺傳性和(或)獲得性的尿酸排泄削減和(或)喋吟代謝障礙所
致
C.高尿酸血癥合并尿酸性結石也屬于痛風
D.原發性痛風患病率女性高于男性
E.可用別喋吟醇治療
四、名詞說明
1.血漿蛋白
2.急性時相反應蛋白
3.氨基酸代謝庫
4.氨基酸血癥與氨基酸尿癥
5.PKU
6.痛風
五、問答題
1.簡述血漿蛋白質的功能。
2.試述測定血清銅藍蛋白的方法與參考值和臨床意義。
3.簡述低清蛋白血癥的臨床意義。
4.簡述轉鐵蛋白的臨床意義。
5.簡述新生兒PKU的診斷方法
6.簡述高尿酸血癥的發病因素。
第三章血漿蛋白質與含氮化合物的生物化學檢驗參考答案
單選題
1E2B3C4E5D
6A7B8A9D10A
11C12D13B14D15A
16B17E18C19C20E
二、B型題(配伍題)
1A2E3D4A5E
6C7B8C9E10B
三、多選題
1ABCD2AC3ABCE4ABCD5ACD
6ABDE7ACDE8BDE9ABCD10ABDE
11BDE12ABCDE13BCD14ABC15ABCDE
16ABCDE17ACDE18ABC19ABCDE20ABE
四、名詞說明
1.血漿蛋白質它是指血漿和組織液中蛋白質,是血漿固體成份中含
量最多、組成困難、功能廣泛的一類化合物。
2.急性時相反應蛋白在急性炎癥性疾病如手術、創傷、心、肌梗死、感
染、腫瘤等,AAT、AAG、Hp、Cp、CRP,以與a】-抗糜蛋白酶、血紅
素結合蛋白、C4、C3、纖維蛋白原等,這些血漿蛋白濃度顯著上升或上
升;而血漿PA、ALB、TRF則出現相應的低下。這些血漿蛋白質統稱為
急性時相反應蛋白,這種現象稱為急性時相反應。
3.氨基酸代謝庫食物蛋白質經過消化而被汲取的氨基酸(外源性
氨基酸)與體內組織蛋白質降解產生的氨基酸(內源性氨基酸)混在一
起,分布在體內各處,參加代謝,稱為氨基酸代謝庫。
4.氨基酸血癥與氨基酸尿癥參加氨基酸代謝的酶缺乏出現在代謝
途徑的起點時,其作用的氨基酸將在血循環中增加,成為氨基酸血
癥。這種氨基酸如從尿中排出,則稱為氨基酸尿癥。
5.PKU即苯丙酮酸尿癥,是由于苯丙氨酸羥化酶先天性缺乏所
致,屬常染色體隱性遺傳,因患兒尿液中排出大量苯丙酮酸等代謝產
物而得名。
6.痛風痛風是一組疾病,由遺傳性和(或)獲得性的尿酸排泄削減和
(或)喋吟代謝障礙,導致高尿酸血癥與尿酸鹽結晶形成和沉積,從而
引起特征性急性關節炎、痛風石、間質性腎炎,嚴峻者呈關節畸形與功
能障礙;常伴尿酸性尿路結石。僅有高尿酸血癥,即使合并尿酸性結石
也不稱之為痛風。
五、問答題
1.簡述血漿蛋白質的功能。
血漿蛋白質具有多方面的功能,可概括為:①維持血漿膠體滲透壓,這
是清蛋白的主要功能:②作為激素、維生素、脂類、代謝產物、離
子、藥物等的載體;③作為pH緩沖系統的一部分;④養分作用,修
補組織蛋白;⑤抑制組織蛋白酶;⑥一些酶在血漿中起催化作用;
⑦參加凝血與纖維蛋白溶解;⑧作為免疫球蛋白與補體等免疫分子,組
成體液免疫防衛系統。
2.試述測定血清銅藍蛋白的方法與參考值和臨床意義。
銅藍蛋白在血清中含量較低。一般采納免疫透射比濁法測定,參考值為
0.21-0.53g/Lo另外,還可采納醋酸纖維薄膜電泳法測定,其參考
值為。.4g/Lo
增高:見于結核、矽肺、甲狀腺功能亢進、惡性腫瘤(白血病等)、妊
娠、口服避孕藥等。
降低:見于嚴峻的低蛋白血癥、腎病綜合征等。對肝豆狀核變性
(Wilson)有重要的診斷價值。即患者血漿CEB含量明顯下降,而伴
有血漿可透析的銅含量增加。
3.簡述低清蛋白血癥的臨床意義。
低清蛋白血癥:既可由生理(如妊娠)或病理因素或引起,也可由于輸
液造成血液稀釋時抽血的假象所致。導致低蛋白血癥的病埋因素有:
1)清蛋白合成降低:①常見于急性或慢性肝臟疾病,但由于清蛋
白的半壽期較長,因此在部分急性肝病患者,其濃度降低可不明顯;②
蛋白質養分不良或腸道汲取不良也可造成清蛋白合成不足。
2)清蛋白的分布異樣:如門靜脈高壓時大量蛋白質尤其是清蛋白從
血管內滲漏入腹腔。肝硬化導致門脈高壓時,由于肝臟合成削減和大量
漏入腹水的雙重緣由,使血漿清蛋白顯著下降。
3)清蛋白丟失:①骨病綜合征、慢性腎小球腎炎、糖尿病、系統性
紅斑狼瘡等,清蛋白由尿中損失,有時每天尿中排出蛋白達5g以上,超
過肝的代償實力;②腸道炎癥性疾病時,可因粘膜炎癥壞死等使胃腸道蛋
白質丟失,從而引起血漿清蛋白下降;③在燒傷與滲出性皮炎,可從皮膚
丟失大量蛋白質。
4)清蛋白分解代謝增加:由組織損傷(外科手術或創傷)或炎癥(感
染性疾病)引起。
5)無清蛋白血癥:是一種罕見的遺傳疾病,屬先天性白蛋白合成
缺陷,血漿清蛋白含量常低于lg/L。但可以沒有癥狀或體征,甚至可以
沒有水腫,部分緣由可能是血管中球蛋白含量代償性上升所致。
4.簡述轉鐵蛋白的臨床意義。
(1)用于貧血的鑒別診斷。在缺鐵性的低血色素貧血中,TRF代償性
合成增加,但因血漿鐵含量低,結合鐵的TRF少,所以鐵飽和度很低
(參考范圍在30%~3896)。而再生障礙性貧血時,血漿中TRF正常或
低下,由于紅細胞對鐵的利用障礙,使鐵飽和度增高。在鐵負荷過量
時,IR卜水平正常,而飽和度可超過5。%,甚至達9。斷
(2)TRF是負性急時相反應蛋白。在炎癥、腫瘤時常隨著清蛋
白、前清蛋白同時下降。
(3)作為養分狀態的一項指標。在養分不良與慢性肝臟疾病時下
降,與清蛋白相比,體內轉鐵蛋白總量較少、生物半壽期較短,故可
與時地反映臟器蛋白的急劇變更。在高蛋白膳食治療時,血漿TRF濃度
較快上升,是推斷療效的良好指標。
5.簡述新生兒PKU的診斷方法
PKU的早期診斷對于與時終止PKU的嚴峻后果的發生是特別必要
的。Guthrie試驗、熒光光度法、苯丙氨酸脫氫酶法是目前國際上
進行新生兒PKU篩查的常用方法。Guthrie試驗是由Guthrie建
立的一種細菌抑制法,首先在PKU的篩查試驗中用來測定人血
清、尿液中苯丙氨酸。通過抑菌圈的大小來半定量樣本中的苯
丙氨酸濃度。
新生兒的篩查在歐美國家廣泛地進行,因為有3%以上的PKU病例并
不是由于PAH缺乏所致,而是由于生物蝶吟合成所需的酶缺乏所致。
評估應包括尿中生物蝶吟和新蝶吟的測定和有時可能還要測定其血
清含量。
新生兒PKU的診斷試驗通常包括用色譜法、熒光分光光度法和FeCI
3法檢測尿中苯丙酮酸。
用DNA分析技術,如PCR-ASO探針法和PCR-RFLP連鎖
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