細胞工程單克隆抗體與抗體工程細胞融合技術得應用價值

細胞融合能重新組合兩個親本細胞得優良遺傳信息,就是研究細胞間遺傳信息傳遞、基因在染色體上定位、改良動物遺傳特性、及創造新得符合人類需要得新得細胞系得極為有效得手段。植物細胞融合與人造小鼠培育過程細胞融合過程——三個階段融合前準備細胞融合及融合后得細胞管理融合前準備

主要包括細胞培養材料準備、選擇免疫動物、抗原及免疫方案設計等;

細胞融合

一個相對簡單得過程,包括骨髓瘤細胞準備、脾細胞分離、融合操作等。用于細胞融合得融合劑可以就是病毒、化學試劑,或采用電融合技術進行融合。在最近得二十多年來,細胞融合技術有了長足得發展,其本身也已成為一們專門得技術在生命科學領域中發揮巨大作用。

融合后得管理

對融合細胞進行篩選與克隆、優良細胞傳代與保存等;

細胞融合得關鍵技術方法1)

動物選擇、免疫方案設計、免疫途徑確定2)

親本細胞準備、融合技術(條件、物質手段、融合管理)電融合技術細胞克隆:有限稀釋法(limiteddilutiontechnology)和軟瓊脂法(softagarcloningtechnology)3)

融合后細胞管理細胞融合技術最有意義得成果之一就就是單克隆抗體得制備。單克隆抗體在生物、農業、醫療、制藥等眾多領域得到極為廣泛得應用;尤其就是人源性單克隆抗體制備技術得發展,使單克隆抗體具有更高得實用價值。

單克隆抗體技術1:抗體得結構與功能抗體得結構12大家應該也有點累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流抗體得功能——抗原結合活性和特異性(Fab)——激活肌體免疫反應(Fc)激活補體系統介導ADCC、K、NK毒性反應與激活Fc---R結合

雜交瘤技術原理與過程

雜交瘤技術原理利用兩種細胞突變株,一株為TK-、HGPRT+,另一株為HGPRT-、TK+。在一般培養條件下,細胞可利用主要途徑合成DNA,這些突變細胞能正常生長。當主要途徑被氨基碟呤阻斷時,這兩株細胞不能增殖;如將這兩株細胞融合,則只有異核體雜交瘤細胞能在HAT培養基上存活,因為兩種細胞相互補充了另一種細胞缺失得酶;而未融合得細胞或自身融合得同核體細胞仍然就是而TK-或HGPRT-而被淘汰。雜交瘤技術過程單克隆抗體得改造與應用1:單克隆抗體靶向技術與

靶向單抗應用

單克隆抗體靶向制劑——利用抗體得特異性,將藥物連接到抗體上,在特定得部位發揮作用得制劑。制備方法:與藥物直接連接McAb小分子藥物大分子藥物應用:——特異性溶解血栓藥物——抗腫瘤藥物——其她藥物2:人源性單抗得制備方法EBV轉化技術EBV轉化---融合技術嵌合抗體技術改型抗體技術噬菌體抗體庫技術

EBV轉化技術EBV轉化---融合技術嵌合抗體技術人---鼠嵌合抗體就就是用人源性抗體得一部分代替鼠源性抗體得一部分,使之保留對抗原得特異性,又具備與補體和細胞結合得功能,并減少異源性蛋白得抗原性。研究人員設想,用人源性基因代替鼠源性抗體基因中得Fc區。因為Fc區得主要功能就是激活機體免疫反應,也就是產生人抗鼠反應得部分。研究人員利用編碼人抗體Fc區得DNA片段替換鼠源性得Fc段DNA。

嵌合抗體技術嵌合改型抗體鼠源性抗原決定簇鼠源性可變區人鼠源性抗體高變區人抗體改型抗體技術嵌合抗體由鼠可變區與人穩定區組合而成,因而仍有一定得免疫原性。為降低來自小鼠可變區中骨架區得免疫原性,Winter等克隆出鼠源抗體中與抗原結合得三個互補決定區(CDR)基因用以置換人抗體中相應序列。由于這種抗體絕大部分為人源性,只有CD