學必求其心得，業必貴于專精學必求其心得，業必貴于專精學必求其心得，業必貴于專精分子生物學技術練習1．PCR利用了DNA的哪種特性原理，來控制DNA的解聚與結合?（）A．特異性B．穩定性C．熱變性D．多樣性2．（2011·山東聊城高二檢測）在實驗室內模擬生物體內的DNA復制，需要哪些條件？（）①酶②游離的脫氧核苷酸③ATP④DNA分子⑤引物⑥tRNA⑦適宜的溫度⑧適宜的酸堿度A．①②③④⑤⑥B．②③④⑤⑥⑦C．②③④⑤⑦⑧D．①②④⑤⑦⑧3．DNA擴增過程中,DNA片段經若干次擴增，與其數目的理論值變化相符的圖是（)。4．（2011·安徽宿州高二檢測)下列關于PCR操作過程的敘述中，錯誤的是（）。A．PCR反應中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行高壓滅菌B．PCR所用的緩沖液和酶應分裝成小份,并在－20℃儲存C．PCR所用的緩沖液和酶從冰箱拿出之后，迅速融化D．在微量離心管中添加反應成分時，每吸取一種試劑后,移液器上的吸液槍頭都必須更換5．當引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結合后，DNA聚合酶就能開始延伸DNA子鏈,則延伸的方向是（).A．從5′端延伸DNA子鏈B．DNA的合成方向總是從5′端向3′端延伸C．子鏈延伸的方向是5′→3′或3′→5′D．DNA的合成方向總是從3′端向5′端延伸6．如下圖為DNA變性和復性示意圖,下列相關說法正確的是（）。A．向右的過程為加熱（80～100℃）變性的過程B．向左的過程是DNA雙鏈迅速致冷復性C．變性與在生物體內解旋過程的條件、實質都相同D．圖中DNA片段共有4個游離的磷酸基、4個3′端7．在PCR的實驗操作中，下列說法正確的是(）。①在微量離心管中添加各種試劑時，只需要一個槍頭②離心管的蓋子一定要蓋嚴③用手指輕彈離心管壁④離心的目的是使反應液集中在離心管的底部A．①②③B．①②④C．②③④D．①③④8．復性溫度是影響PCR特異性的較重要因素。變性后溫度快速冷卻至40～60℃，可使引物和模板發生結合。PCR的結果可不考慮原來解旋開的兩個DNA模板鏈的重新結合，原因不包括（）。A．模板DNA比引物復雜得多B．引物和模板之間的碰撞結合機會遠遠高于模板互補鏈之間的碰撞C．加入引物的量足夠多而模板鏈數量少D．模板鏈加熱解旋已經變性不可能再次結合9．(原創）DNA檢測技術可應用于親子鑒定、遺傳病檢測等領域。DNA檢測離不開對樣品DNA的PCR擴增。不同的樣品DNA的擴增過程或條件不同的是（）。A．引物B．DNA聚合酶C．四種脫氧核苷酸D．預變性的溫度10．（2011·江蘇高考節選）請回答基因工程方面的有關問題。（1）利用PCR技術擴增目的基因，其原理與細胞內DNA復制類似(如下圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段,它是子鏈合成延伸的基礎。①從理論上推測，第四輪循環產物中含有引物A的DNA片段所占的比例為______。②在第______輪循環產物中開始出現兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。(2）設計引物是PCR技術關鍵步驟之一。某同學設計的兩組引物(只標注了部分堿基序列)都不合理（如下圖）,請分別說明理由。①第1組:__________________________________________________________________;②第2組：__________________________________________________________________。（3）PCR反應體系中含有熱穩定DNA聚合酶，下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因為___________________________________________________________。

參考答案1．答案：C2．答案：D解析：在實驗室內模擬DNA復制時，需要DNA聚合酶催化合成DNA子鏈；四種脫氧核苷酸為合成子鏈的原料；DNA母鏈為DNA復制的模板；還需要引物、較高的溫度、適宜的酸堿度等。3．答案：C解析：PCR反應中DNA的擴增數目和生物體內的DNA復制是類似的，即1個DNA分子復制一次,產生2個DNA分子，復制2次，產生4個DNA分子，呈指數擴增,開始有一個DNA分子為模板，經過n次復制后得到的DNA分子的數量為2n,與曲線C相符合。4．答案：C解析：為了防止外源DNA等因素的污染，PCR反應中所用的微量離心管、槍頭、緩沖液及蒸餾水等，在使用前要進行高壓滅菌；還要將所用的緩沖液和酶分裝成小份；并且使用一次性吸液槍頭，則A、B、D項都正確。在使用前，將PCR所需試劑從冰箱內拿出來,放在冰塊上緩慢融化，則C項錯誤。5．答案：B解析：本題考查聚合酶鏈式反應擴增DNA片段的有關知識，同時考查學生對PCR原理的理解。PCR擴增的過程中子鏈延伸的方向是由DNA聚合酶決定的，由于DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈，而不能從頭開始，因此DNA的合成方向總是從5′端向3′端延伸。6．答案：A7．答案：C解析：在微量離心管中添加反應成分時，每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭都必須更換,以確保實驗的準確性；蓋嚴離心管口的蓋子，防止實驗中外源DNA污染；用手指輕輕彈擊管的側壁,使反應液混合均勻；離心的目的是使反應液集中在離心管的底部,提高反應效率。8．答案:D9．答案:A解析：不同的樣品DNA有不同的核苷酸序列，由于引物能與模板DNA(樣品DNA)通過堿基互補配對結合，因此不同樣品DNA所需的引物有不同的核苷酸序列。10．答案：解析：（1）①第四輪循環,共得到16個DNA分子，其中只有1個DNA分子不含引物A,所以含引物A的DNA片段占15/16.②分析可看出從第三輪循環產物中開始出現兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段，長度可為DNA總長度減去引物A，或者為DNA總長度減去引物B.（2）第1組引物Ⅰ和引物Ⅱ會發生堿基互補配對,第2組中引物Ⅰ自身折疊會發生堿基互補配對.（3)DN