實驗八大分子物質(zhì)的水解及營養(yǎng)元素對微生物生長的影響實驗目的

1.通過了解不同細菌對不同的生物大分子及含氮化合物的分解利用情況，認識微生物代謝類型多樣性。2.了解營養(yǎng)元素對微生物生長發(fā)育的影響。3.學習平板接種法及穿刺接種法。

微生物對大分子的淀粉、蛋白質(zhì)和脂肪不能直接利用，必須靠產(chǎn)生的胞外酶將大分子物質(zhì)分解為小分子有機物才能被微生物吸收利用。如淀粉酶水解淀粉為小分子的糊精、雙糖和單糖；脂肪酶水解脂肪為甘油和脂肪酸；蛋白酶水解蛋白質(zhì)為氨基酸等。實驗原理

淀粉水解實驗卵磷脂水解實驗

不同微生物分解利用生物大分子能力各有不同。只有能夠產(chǎn)生并分泌胞外酶的微生物才能利用大分子有機物。實驗原理（續(xù)）

不同細菌對不同含氮化合物的分解利用能力、代謝途徑、代謝產(chǎn)物等不完全相同。有些細菌分解色氨酸產(chǎn)生吲哚

分解含硫氨基酸產(chǎn)生硫化氫

分解氨基酸產(chǎn)氨

微生物對含氮化合物的分解利用的生化反應是菌種鑒定的重要依據(jù)。硫化氫產(chǎn)生實驗

氧化苯丙氨酸為苯丙酮酸實驗原理（續(xù)）

微生物的生長發(fā)育需要一定的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件，只有全面滿足以上要求時，微生物才能進行正常的生命活動。影響微生物生長、繁殖的主要營養(yǎng)元素主要包括碳、氫、氧、氮、磷、硫等，個別微生物還需要某些維生素和微量元素。

本實驗通過將黑曲霉接種于缺乏不同營養(yǎng)元素的培養(yǎng)基中，觀察它的生長情況，確知幾種營養(yǎng)元素對微生物生長的作用。實驗材料1.菌種：大腸桿菌（Escherichiacoli)

普通變形桿菌（Proteusvulgaris)

枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)

假單胞菌（Pseudomonassp.）

黑曲霉(Aspergillusniger)2.培養(yǎng)基：淀粉培養(yǎng)基細菌培養(yǎng)基產(chǎn)H2S半固體穿刺培養(yǎng)基

淀粉水解實驗37℃倒置培養(yǎng)2天淀粉培養(yǎng)基

四種細菌平板點接種卵磷脂的水解2ml3~5ml注意：充分混勻

卵磷脂也稱磷脂酰膽堿，系統(tǒng)名稱1，2－二酰基－sn－甘油－3－磷酸膽堿。在蛋黃和大豆中含量特別豐富。吸管37℃倒置培養(yǎng)2天硫化氫產(chǎn)生實驗蛋白胨10g牛肉膏3g酵母浸膏3gNaCl5g硫酸亞鐵0.2g硫代硫酸鈉0.3g瓊脂12g蒸餾水1000mlpH7.2~7.4H2S+Fe2+=FeS含硫氨基酸：

胱氨酸半胱氨酸甲硫氨酸產(chǎn)硫化氫穿刺培養(yǎng)基穿刺接種37℃培養(yǎng)2天普通變形桿菌穿刺接種

用接種針下段挑取菌種（針必須挺直），自半固體培養(yǎng)基的中心垂直刺入半固體培養(yǎng)基中，直至接近試管底部，但不要穿透，然后沿原穿刺線將針退出，塞上試管塞，燒灼接種針。不同營養(yǎng)元素對微生物生長的影響培養(yǎng)基成分完全缺碳缺氮缺磷

蔗糖6ml0

6ml

6mlNH4NO33ml3ml

0

3mlKH2PO41ml1ml

1ml

0混合液1ml1ml

1ml

1ml蒸餾水4ml10ml

7ml

5ml15mlAspergillusniger室溫靜置培養(yǎng)一周后觀察菌膜C-N-P-實驗材料分配情況四種細菌兩組一套黑曲霉一組一套淀粉培養(yǎng)基平板一人一個雞蛋1個LB培養(yǎng)基100ml0.85%生理鹽水10ml產(chǎn)硫化氫固體穿刺培養(yǎng)基一組3支蔗糖兩組一瓶NH4NO3

一組一管（10ml)KH2PO4

兩組一管(10ml)混合液兩組一管(10ml)蒸餾水