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進出口紡織品生物安全檢驗方法第10部分：乙型溶血性鏈球菌10XPCR緩沖液(5,10)dNTP混合液(10mmol/L)(5.11)上游引物(10μmol/L(5.12)下游引物(10μmol/L)(5.12)探針(10pmol/L)(5,12)agDNA聚合酶CSU/pL)(5,13)生：上、下游引物終濃度為04pmol/L探針終濃度為0.4應符合SN/T4656.8的規定。SN/T4656.10—2(規范性)培養基和試劑A.1培養基制備及質量保證按SN/T1538.1和SN/T1538.2制備培養基并進行性能測試，如使用等效商品化脫水合成培養基，使用前對其進行驗收并按其說明書使用。A.2改良胰蛋白胨大豆肉湯(mTSB)A.2.1胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)胰蛋白胨大豆蛋白胨氯化鈉磷酸氫二鉀(無水)葡萄糖蒸餾水將A.2.1.1中各成分融于燕餾水中，加熱溶解，調節pH至7.3±0.2,121℃高壓滅菌15min。備用。A.2.2抗生素溶液A.2.2.1多黏菌素溶液稱取10mg多黏菌素B置于10mL滅菌蒸餾水中，振搖混勻，充分溶解后過濾除菌。A.2.2.2萘啶酮酸鈉溶液稱取10mg茶啶酮酸置于10mL.0.05mol/L.氫氧化鈉溶液中，振搖混勻，充分溶解后過濾除菌。A.2.3完全培養基胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)多黏菌素溶液萘啶酮酸鈉溶液無菌條件下，將A.2.3.1中各成分進行混合，充分混勻，分裝備用。A.3哥倫比亞CNA血瓊脂胰酪蛋白胨動物組織蛋白消化液醉母提取物牛肉提取物氧化鈉多黏菌素茶啶酸蒸餾水將A.3.1中各成分溶于蒸餾水中，加熱溶解，調節pH至7.3±0.2.121℃高壓滅菌15min。待冷卻至50℃左右時加50mL無菌脫纖維綿羊血，搖勻后傾倒于平板上A.4哥倫比亞血瓊脂A.4.1基礎培養基動物組織酶解物氯化鈉蒸餾水將基礎培養基成分溶解于燕餾水中，加熱溶解，121℃高壓滅菌15min.A.4.2無菌脫纖維綿羊血無菌操作條件下，將綿羊血加入盛有滅菌玻璃珠的容器中，振搖10min,靜置后除去附有血纖維的玻璃珠即可。A.4.3完全培養基基礎培養基無菌脫纖維綿羊血當基礎培養基的溫度為45℃左右時，無菌加入綿羊血，混勻。調節pH至7.2±0.2。傾注15mL于無菌平皿中，靜置至培養基凝固。使用前需預先干燥平板。預先制備的平板未干燥時在室溫放置不應超過4h,或在4℃冷藏不應超過7d。A.5胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)胰蛋白胨大豆蛋白胨氧化鈉磷酸氫二鉀(無水)葡萄糖蒸餾水將A.6.1中各成分溶于燕餾水中，加熱溶解，調節pH至7.3±0.2.121℃高壓滅菌15min,分裝備用。A.6革蘭氏染色液A.6.1結品紫染色液結晶紫草酸銨水溶液(10g/L)將結品紫溶于乙醇[c(CH?OH)-95%]中，然后與草酸銨水溶液混合。A.6.2革蘭氏碘液碘片碘化鉀蒸餾水將碘和碘化鉀先進行混合，加入蒸餾水少許。

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