維生素類藥物的質(zhì)量檢測第三節(jié)概述維生素：

是維持人體正常代謝機(jī)能所必需的微量營養(yǎng)活性物質(zhì)。

人體不能自行合成維生素。

如果人體缺少某種維生素，就會(huì)引起維生素缺乏癥，而影響人體的正常生理機(jī)能。

例如:VitA

缺乏—夜盲癥

VitB1缺乏—腳氣病

VitA、D2、D3、E、K1

等脂溶性水溶性

VitB族(B1、B2、B6、B12)

VitC、葉酸、煙酸、煙酰胺

一個(gè)共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)己烯-H維生素A醇-COCH3維生素A醋酸酯-COC15H31維生素A棕櫚酸酯R:一、維生素A

CH3CH3CH2ORCH3CH3CH3具有一個(gè)共軛多烯側(cè)鏈的環(huán)己烯結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

具有UV吸收

存在多種立體異構(gòu)化合物（一）結(jié)構(gòu)與性狀

二、維生素B1及其片劑、注射劑的質(zhì)量檢測●溶解性：在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚中不溶。●酸堿性：噻唑環(huán)上季銨氮顯堿性，與鹽酸成鹽。●還原性：噻唑環(huán)開環(huán)被氧化成具有熒光的硫色素。（二）鑒別

維生素B1：硫色素反應(yīng)●方法：取本品約5mg，加氫氧化鈉試液2.5ml溶解后，加鐵氰化鉀試液0.5ml與正丁醇5ml，強(qiáng)力振搖2分鐘，放置使分層，上面的醇層顯強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光；加酸使成酸性，熒光即消失；再加堿使成堿性，熒光又顯出。二、維生素B1及其片劑、注射劑的質(zhì)量檢測（三）檢查

維生素B1：硝酸鹽

●供試品溶液：靛胭脂試液

●檢查方法：標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)照法

●結(jié)果判斷：依法制成的供試品與標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉀溶液0.50ml用同法制成的対照液相比，不得更淺（0.25%）。●解析：硝酸鹽是維生素B1的合成原料，易在生產(chǎn)過程中引入，在體內(nèi)被還原為亞硝酸鹽，累積可致癌、致畸，嚴(yán)重危害健康。檢查原理為硝酸鹽可與藍(lán)色的靛胭脂試液反應(yīng)生成無色物質(zhì)，顏色變淺。二、維生素B1及其片劑、注射劑的質(zhì)量檢測（三）檢查

維生素B1：總氯量●方法：取本品約0.2g，精密稱定，加水20ml溶解后，加稀醋酸2ml與溴酚藍(lán)指示液8~10滴，用硝酸銀滴定液（0.1mol/L）滴定至顯藍(lán)紫色。每1ml硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于3.54mg的氯（Cl）。按干燥品計(jì)算，含總氯量應(yīng)為20.6%~21.2%。●解析：本品為鹽酸鹽，需要控制所含氯離子總量，即總氯量。氯離子作為一種信號(hào)雜質(zhì)，含量若超過限度，標(biāo)志著生產(chǎn)工藝流程中出現(xiàn)問題。檢查方法為銀量法，以硝酸銀為滴定液，溴酚藍(lán)為指示劑，當(dāng)反應(yīng)到達(dá)終點(diǎn)時(shí)，指示劑吸附生成的氯化銀沉淀而顯藍(lán)紫色。二、維生素B1及其片劑、注射劑的質(zhì)量檢測（四）含量測定

維生素B1：

非水滴定法●方法：取本品約0.12g，精密稱定，加冰醋酸20ml微熱使溶解，放冷，加醋酐30ml，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于16.86mg的C12H17ClN4OS·HCl。●公式：

●解析：維生素B1分子中含有兩個(gè)堿性的伯胺和季銨基團(tuán)，可用非水堿量法測定含量，本品與高氯酸的摩爾比為1∶2。為了排除鹽酸對(duì)非水堿量法的干擾，本品采用了加醋酐的高氯酸電位滴定法，并用空白試驗(yàn)校正誤差。二、維生素B1及其片劑、注射劑的質(zhì)量檢測（四）含量測定

維生素B1片：UV-Vis法●公式：●方法：取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于維生素B125mg），置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）約70ml，振搖15分鐘使維生素B1溶解，用上述溶劑稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置另一100ml量瓶中，再加上述溶劑稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在246nm的波長處測定吸光度。按C12H17ClN4OS?HCl的吸收系數(shù)（）為421計(jì)算，即得。

●解析：A為吸光度；為百分吸收系數(shù)；l

為液面厚度，1cm；m總為20片藥的平均片重，g；m供為供試品的重量，g。二、維生素B1及其片劑、注射劑的質(zhì)量檢測（四）含量測定

維生素B1注射液：

UV-Vis法●公式：●方法：精密量取本品適量（約相當(dāng)于維生素B150mg），置200ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在246nm的波長處測定吸光度。按C12H17ClN4OS?HCl的吸收系數(shù)（）為421計(jì)算，即得。

●解析：

A為吸光度；為百分吸收系數(shù)；l

為液面厚度，1cm。二、維生素B1及其片劑、注射劑的質(zhì)量檢測（一）結(jié)構(gòu)與性狀

●溶解性：在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。●烯二醇基：具有還原性和酸性。●內(nèi)酯基：水解開環(huán)，進(jìn)一步脫羧生成糠醛。●手性C原子：光學(xué)活性異構(gòu)體，具有旋光性。三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（二）鑒別

維生素C：氧化還原反應(yīng)（硝酸銀反應(yīng)、二氯靛酚反應(yīng)）●方法：取本品0.2g，加水10ml溶解后，分成二等份，在一份中加硝酸銀試液0.5ml，即生成銀的黑色沉淀；在另一份中，加二氯靛酚鈉試液1～2滴，試液的顏色即消失。三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（二）鑒別

維生素C：氧化還原反應(yīng)（硝酸銀反應(yīng)、二氯靛酚反應(yīng)）●解析：維生素C的連二烯醇（烯二醇基）具有極強(qiáng)的還原性，可以失去醇羥基上的H，與氧化劑硝酸銀試液（或堿性酒石酸銅等）發(fā)生氧化還原反應(yīng)，生成黑色銀單質(zhì)沉淀；與藍(lán)色二氯靛酚試液反應(yīng)，使藍(lán)色消失。三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（二）鑒別

維生素C：IR法●方法：本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜一致。三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（二）鑒別

維生素C注射液：氧化還原反應(yīng)（亞甲藍(lán)）

●方法：取本品，用水稀釋制成1ml中含維生素C10mg的溶液，取4ml，加0.1mol/L鹽酸溶液4ml，混勻，加0.05%亞甲藍(lán)乙醇溶液4滴，置40℃水浴中加熱，3分鐘內(nèi)溶液應(yīng)由深藍(lán)色變?yōu)闇\藍(lán)色或完全褪色。

●解析：本品利用維生素C的還原性，與氧化劑亞甲藍(lán)發(fā)生氧化還原反應(yīng)，使深藍(lán)色的亞甲藍(lán)試液變?yōu)闇\藍(lán)色或完全褪色。三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（三）檢查

維生素C：溶液的澄清度與顏色

●方法：取本品3.0g，加水15ml，振搖使溶解，溶液應(yīng)澄清無色；如顯色，將溶液經(jīng)4號(hào)垂熔玻璃漏斗濾過，取濾液，照紫外?可見分光光度法，在420nm的波長處測定吸光度，不得超過0.03。

●解析：此項(xiàng)檢查的是有色聚合物。維生素C的水溶液不穩(wěn)定，在高于或低于pH5～6時(shí)，易受空氣、光線和溫度的影響，分子中的內(nèi)酯環(huán)經(jīng)水解、脫羧、脫水生成糠醛，糠醛進(jìn)一步聚合而呈黃色。采用UV-Vis法，測定420nm波長處的吸光度，利用對(duì)比法來控制黃色雜質(zhì)的限量。三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（三）檢查

維生素C：鐵

●供試品溶液：

●對(duì)照溶液：VC+標(biāo)準(zhǔn)Fe溶液

●檢查方法：原子吸收分光光度法（AAS法）●結(jié)果判斷：照原子吸收分光光度法，在248.3nm的波長處分別測定，應(yīng)符合規(guī)定。硝酸溶液三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（三）檢查

維生素C：銅

●供試品溶液：

●對(duì)照溶液：VC+標(biāo)準(zhǔn)Cu溶液

●檢查方法：原子吸收分光光度法（AAS法）●結(jié)果判斷：照原子吸收分光光度法，在324.8nm的波長處分別測定，應(yīng)符合規(guī)定。硝酸溶液三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（四）含量測定

維生素C：碘量法●方法：取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色并在30秒鐘內(nèi)不褪，每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6。三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（四）含量測定

維生素C：碘量法想一想碘量法中加入稀醋酸、新煮沸的冷水、鹽酸分別有什么作用？●公式：三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（四）含量測定

維生素C片：碘量法●公式：

③維生素C注射液：碘量法想一想維生素C注射液含量測定中加入丙酮有什么作用？三、維生素C及其片劑、注射液的質(zhì)量檢測（一）結(jié)構(gòu)與性狀

●溶解性：在無水乙醇、丙酮、乙醚或植物油中易溶，在水中不溶。●酯鍵：酯鍵在酸性條件下水解，生成生育酚。●手性C原子：具有旋光性。四、維生素E及其軟膠囊的質(zhì)量檢測（二）鑒別

維生素E：水解后的氧化還原反應(yīng)●方法：取本品約30mg，加無水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，搖勻，在75℃加熱約15分鐘，溶液顯橙紅色。四、維生素E及其軟膠囊的質(zhì)量檢測（二）鑒別

維生素E：GC法●方法：在含量測定項(xiàng)下記錄的色譜中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。四、維生素E及其軟膠囊的質(zhì)量檢測（三）檢查

維生素E：生育酚（天然型）

●方法：取本品0.10g，加無水乙醇5ml溶解后，加二苯胺試液1滴，用硫酸鈰滴定液（0.01mol/L）滴定，消耗的硫酸鈰滴定液（0.01mol/L）不得過1.0ml。

●解析：本品在制備及貯藏過程中，引入或水解產(chǎn)生游離生育酚。利用游離生育酚具有較強(qiáng)的還原性，可被硫酸鈰定量氧化，通過限制硫酸鈰滴定液消耗的體積，控制游離生育酚的限量。四、維生素E及其軟膠囊的質(zhì)量檢測（三）檢查

維生素E：有關(guān)物質(zhì)（合成型）

●供試品溶液：

●檢查方法：GC法，不加校正因子的主成分自身對(duì)照法●結(jié)果判斷：供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，α-生育酚（雜質(zhì)Ⅰ）（相對(duì)保留時(shí)間約為0.87）的峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積（1.0%），其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的1.5倍（1.5%），各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2.5倍（2.5%）。

●對(duì)照溶液：供試品溶液自身稀釋

正己烷四、維生素E及其軟膠囊的質(zhì)量檢測（三）檢查

維生素E：殘留溶劑正己烷

●供試品溶液：

●檢查方法：GC法，毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法，外標(biāo)法計(jì)算正己烷含量●結(jié)果判斷：依法測定，正己烷的殘留量應(yīng)符合規(guī)定（天然型）。

●對(duì)照品溶液：供試品溶液自身稀釋

N,N-二甲基甲酰胺四、維生素E及其軟膠囊的質(zhì)量檢測（三）檢查

維生素E軟膠囊：比旋度

●方法：避光操作。取本品的內(nèi)容物適量（約相當(dāng)于維生素E400mg），精密稱定，照維生素E比旋度項(xiàng)下的方法測定，比旋度（按d-α-生育酚計(jì)），不得低于+24°（天然型）。

●解析：本品為單一對(duì)映體藥物，測定比旋度是為了檢查可能存在的其他對(duì)映體。測定時(shí)要求避光，防止維生素E被氧化。四、維生素E及其軟膠囊的質(zhì)量檢測（四）含量測定

維生素E：GC法